焦旸；胡旭东；徐加英；张玉松；王利利；樊赛军
目的 构建UHRF1的真核表达载体,并验证其在乳腺癌细胞MDA-MB-231中的表达.方法 采用RTPCR方法,从乳腺癌细胞MCF-7的总cDNA中扩增出2.3kb 的 UHRF1基因的cDNA片段,经限制性内切酶Kpn I与Xho I双酶切,定向克隆到真核表达载体pcDNA3中,构建重组质粒pcDNA3(+)-UHRF1,利用限制性内切酶双酶切分析和DNA序列分析鉴定重组质粒;构建成功的重组质粒,经脂质体Lipofactamin2000介导转染MDA-MB-231细胞,G418筛选阳性克隆,以RT-PCR 和 Western blot 检测 UHRF1 的mRNA和蛋白的表达.结果 获得全长约为2.3kb的UHRF1基因片段;重组质粒经限制性内切酶Xho I和Kpn I酶切、电泳后显示2.3kb的UHRF1目的片段和5.4kb的pcDNA3载体片段,即UHRF1基因的cDNA已正确克隆到真核细胞表达载体pcDNA3中;UHRF1转染乳腺癌MDA-MB-231细胞后的RT-PCR和Western blot的结果显示:UHRF1的mRNA和蛋白水平均呈现高表达.结论 成功构建UHRF1基因的真核表达载体,为进一步研究该基因的功能奠定基础.
作者：李新莉；孟庆慧；朱然；朱巍；樊赛军 刊期： 2011年第01期
目的 研究粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)转基因小鼠经中子照后肺脏和肝脏中血管内皮细胞生长因子(VEGF)蛋白的表达变化.方法 BALB/C小鼠进行全身中子照射,吸收剂量为0.6Gy,分为未转基因组和转基因组,转基因组于照射前24 h进行hGM-CSF活体基因电转染.两组小鼠照射后1、14和28 d分批活杀,应用HE染色观察组织病理形态学变化,免疫组化法检测VEGF的蛋白表达及用Western blot研究VEGF在肺脏和肝脏中的表达变化.结果 转基因组小鼠在照后14～28 d,肺脏及肝脏病理损伤较轻,VEGF蛋白表达水平较未转基因组增高.结论 GM-CSF 基因活体转染对小鼠中子急性损伤极期和恢复期血管生成和恢复具有促进作用.
作者：王彬；杨占山；王天昶；李娜；胡莉钧；杨斌俊 刊期： 2011年第01期
目的 研究三氧化二砷(As2O3)对人肺腺癌耐顺铂细胞A549/顺铂(DDP)裸鼠移植瘤的耐药逆转作用.方法 建立人肺腺癌裸鼠移植瘤模型,观察As2O3、DDP及联合用药对体内移植瘤生长状况的影响;采用流式细胞术(FCM)测定不同用药对肿瘤细胞凋亡率变化和耐药细胞A549/DDP P-糖蛋白(P-印)表达;采用RT-PCR检测不同用药对A549/DDP移植瘤组织MRP1-mRNA和LRP-mRNA表达的变化.结果 体内裸鼠抑瘤实验显示As203有一定抑瘤作用,联合应用DDP可显著抑制肿瘤生长.FCM结果显示应用As2O3后肿瘤细胞平均凋亡率,明显高于对照组(P＜0.05)[(17.204±3.091)%vs(3.436±0.537)%],低浓度As2O3联合DDP后肿瘤细胞的凋亡率,明显高于DDP组(P＜0.05)[(14.472±3.891)%vs(5.612±1.167)%].FCM对P-gp表达检测提示As2O3对移植瘤P-gp 水平无影响.RT-PCR检测结果示含As2O3组MRP1表达明显低于不含As2O3组(P＜0.05),肺癌耐药相关蛋白(LRP)在转录水平呈现相对低表达,含As2O3组同不含As2O3组间比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 As2O3能在体内逆转A549/DDP细胞的耐药性,其机制可能是As2O3可通过下调MRP1基因表达,提高A549/DDP细胞对DDP敏感性逆转其耐药,并可能通过诱导肿瘤细胞凋亡来起作用.
作者：吴广洲；沈振亚；刘国锋；于宏基；邓文华；朱丹；郑世营 刊期： 2011年第01期
目的 通过经椎弓根截骨延长椎弓根扩大椎管,并应用螺旋CT三维重建测量各节段腰椎截骨椎弓根延长前后椎管面积,为临床进行腰椎管减压提供解剖学依据.方法 10具成人腰椎标本(L1～L5),螺旋CT分别对椎弓根截断前后的腰椎标本进行扫描,对CT重建后的图像进行测量,包括原始腰椎各节段椎管面积,椎弓根截断后椎弓根后移2、4、6 mm后的椎管面积.结果 对椎弓根截断前后椎管面积进行比较,结果显示,L1～L5椎弓根后移4、6 mm,椎弓根截断前后椎管面积对比有统计学差异(P＜0.05),L1～L3、L5节段椎弓根后移2 mm,椎弓根截断前后椎管面积对比有统计学差异(P＜0.05).结论 经椎弓根截骨椎管扩大成形术,可以明显增加腰椎管的面积,为临床进行腰椎管减压提供一种新的方法.
作者：杨惠林；朱若夫；魏旺；陈康武；杨炎；唐天驷 刊期： 2011年第01期
目的 探讨围手术期使用寒来昔布对肘关节僵硬松解术后镇痛效果及其安全性.方法 分析38例创伤后肘关节僵硬行松解术患者的临床资料,其中19例围手术期采用塞来昔布镇痛(实验组),19例术后使用双氯芬酸钠栓塞肛镇痛(对照组),比较两组患者术后静息和活动痛VAS评分、盐酸布桂嗪使用情况、肘关节活动度及并发症.结果 术后第6、8、12、24 h和2 d实验组静息痛VAS评分均小于对照组(均P＜0.05),术后24、36 h和2 d实验组活动痛VAS评分均小于对照组(均P＜0.05).实验组能推迟术后第1次肌内注射盐酸布桂嗪的时间,同时能减少其使用总量,胃肠道不适方面发生率小于对照组,且术后14 d肘关节活动度优于对照组(P＜0.05).结论 围手术期使用塞来昔布有助于减轻肘关节僵硬松解术后疼痛、减少术后麻醉镇痛剂使用量,且并发症少,有利于肘关节功能良好恢复.
作者：吴加东；刘国华；陈海娟；王玉武；吕成堂；王友华；杨惠林 刊期： 2011年第01期
目的 探讨熊果酸(UA)对人肝癌 SMMC-7721 细胞周期的影响.方法 用不同浓度的UA处理SMMC7721 细胞,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞增殖的抑制作用,流式细胞仪检测细胞周期的变化,RT-PCR检测细胞周期相关基因p21、p53及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达.结果 UA对SMMC-7721细胞生长有显著的抑制作用,且此作用呈明显的时间、剂量依赖性;UA可以诱导SMMC-7721细胞阻滞在S期,RT-PCR结果显示其能够上调p21和p53基因,下调PCNA基因.结论 UA能明显抑制SMMC-7721细胞的生长,引起细胞周期阻滞;细胞周期阻滞的发生与p21、p53、PCNA基因变化相关.
作者：虞燕霞；顾振纶；殷江临；周文轩；郭次仪；梁中琴 刊期： 2011年第01期
目的 对比常州市两次麻疹减毒活疫苗(MV)强化免疫(SIA)的效果,探讨麻疹控制措施.方法 用描述流行病学分析方法,对比常州市两次麻疹SIA效果.结果 2007年11月MV SIA后,2008年麻疹报告发病率为24.13/10万,较2007年上升91.66%;SIA后8个月麻疹发病同比平均上升118.57%;＜15岁年龄组发病构成比同比上升11.17%;SIA前后常住、流动儿童麻疹疫苗接种率差异无统计学意义(P>0.05).2009年4月开展MVSIA,SIA前麻疹发病同比平均上升221.30%;SIA后8个月麻疹发病同比平均下降88.69%,＜15岁年龄组发病构成比同比下降50.03%;SIA后流动儿童麻疹疫苗接种率明显提高(P＜0.05).结论 2007年MV SIA低覆盖是SIA后麻疹高发的主要原因,2009年开展的高质量MV SIA成功削平了麻疹发病高峰.政府参与、多部门配合是开展高质量MV SIA的基础.
作者：林琴；郝超；张建陶；姚杏娟；卞琛；韩长磊；凌良健 刊期： 2011年第01期
目的 研究小鼠脑出血(ICH)后自噬是否被激活及NF-κB信号通路对ICH诱发的自噬相关蛋白表达的影响.方法 正常昆明小鼠纹状体注射胶原酶Ⅳ建立脑出血模型,或于脑出血模型建立前5 min,侧脑室给药SN50(0.1μg/μl)或生理盐水1 μl,随机分为脑出血组、SN50处理组和生理盐水处理组,同时设立空白对照组.每组分别于脑出血1 h,6 h,24 h,48 h,7 d后(5只/时间点)断头取脑,脑出血各组取出血区及周边脑组织进行免疫印记实验检测Beclin-1、Bcl-2、LC3蛋白表达水平或激活情况,SN50处理组和生理盐水处理组各时间点取出血区及周边脑组织进行免疫印记实验检测LC3蛋白激活情况.结果 小鼠脑出血后出血区及出血周边脑组织Beclin-1蛋白表达上调、Bcl-2蛋白表达下调,以6-48 h时为显著(P＜0.05);Beclin-1/Bcl-2比值随时间变化逐渐增高,以6～48 h时为显著(P＜0.05);LC3被激活,随时间变化蛋白表达逐渐增加,48 h时达高峰,至7 d时仍较空白对照组有显著差异(P＜0.05).脑出血后,SN50处理组LC3蛋白激活高于生理盐水处理组,以6～48 h时为显著(P＜0.05).结论 脑出血后自噬被激活,这种激活的机制之一涉及到Beclin-1/Bcl-2比值的增加;NF-κB特异性抑制剂 SN50 促进了脑出血后自噬相关蛋白的上调表达.
作者：孙玉霞；包海军；刘伟丽；王涛；戴定坤；王龙；张璐；王尧琪；黄娅；秦正红；朱广友；陶陆阳 刊期： 2011年第01期
目的 探讨南美响尾蛇神经毒素(crotoxin)对吉非替尼(iressa)诱导人肺鳞癌SK-MES-1细胞凋亡及其对吉非替尼的抗肿瘤效果的影响.方法 应用MTT法和流式细胞仪annexin V-PI双标法研究crotoxin及其与iressa 联用对人肺鳞癌SK-MES-1细胞促凋亡作用.结果 Crotoxin作用浓度大于或等于25 μg/ml时对人肺鳞癌SKMES-1 细胞有明显生长抑制作用,与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05),与iressa联合作用明显高于单用crotoxin和iressa,其Q值均在0.85～1.15之间,两者呈现出相加的抗肿瘤效果.结论 Crotoxin 对人肺鳞癌SKMES-1 细胞的生长有抑制作用,并呈浓度依赖性,与iressa联合应用对人肺鳞癌SK-MES-1细胞有明显的促凋亡作用.
作者：王俊华；何靖康；秦正红；马海涛；邬珺超；韩蓉 刊期： 2011年第01期
目的 通过检测动脉粥样硬化(AS)患者血液中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)与基质金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)的基因表达水平,探讨AS发生的分子机制及预测因子.方法 AS患者120例为动脉硬化组,72例正常体检者为对照组.用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测其血液中MMP-9和TIMP-1 mRNA表达水平.结果 MMP-9和TIMP-1的RT-PCR产物序列与GenBank上人MMP-9 mRNA和TIMP-1基因片段完全一致.动脉硬化组的MMP-9基因表达水平高于对照组MMP-9基因表达水平,但差异无统计学意义(P>0.05).动脉硬化组的TIMP-1基因表达水平低于对照组TIMP-1基因表达水平,差异有统计学意义(P＜0.05).MMP-9/TIMP-1基因表达定量比值,动脉硬化组高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 AS患者TIMP-1基因表达水平的降低与MMP-9/TIMP-1基因表达定量比值升高可能是AS发生的分子机制之一,二者一起可以作为AS发生的预测因子.
作者：苏伟；高枫；龚少愚；魏慧渊；朱红俊；周春刚；陆曙 刊期： 2011年第01期
目的 观察 Sina 基因同源类似基因1(SIAH1)在大鼠脊髓损伤过程中的表达情况,分析它们与神经元存活和死亡、胶质细胞活化增殖等生物学的关系,探讨它们在脊髓损伤和修复过程中的生物学功能.方法 制作脊髓损伤模型,利用Western blot、免疫组织化学、免疫荧光技术观察SIAH1在损伤脊髓中的表达变化、组织分布与细胞定位,在此基础上探讨SIAH1在脊髓损伤后的病理生理意义.结果 Western blot结果显示SIAH1经历了在损伤后8 h、1 d和2 d的增加后开始下降,直到损伤后14 d仍没有明显上调的变化趋势.免疫组化结果显示在脊髓损伤后1 d,SIAH1的阳性信号在临近损伤中心的脊髓中明显增加,而在脊髓损伤后7 d,SIAH1阳性的细胞数明显减少.免疫荧光结果显示SIAH1与神经元、星形胶质细胞和小胶质细胞存在共定位.结论 脊髓损伤后脊髓中SIAH1的表达上调可能参与神经元的凋亡过程以及星形胶质细胞和小胶质细胞的活化的病理生理过程.
作者：陈向东；张烽；沈爱国 刊期： 2011年第01期
目的 探讨青蒿琥酯增敏对宫颈癌HeLa细胞裸鼠移植瘤凋亡的影响.方法 建立裸鼠移植瘤模型,待移植瘤体积平均增至大约(5 mm×5 mm ×5 mm),将裸鼠随机分为对照组、单药组、单照组和联合组,单药组和联合组每只裸鼠给予青蒿琥酯100 mg.kg-1.d-1,对照组和单照组每只裸鼠给予等体积生理盐水,处理7 d,第7 d给药后单照组和联合组立即给予一次性60Co γ射线10Gy照射,照后观察14 d,14 d后剥瘤,TUNEL法检测移植瘤组织中细胞的凋亡.结果 联合组裸鼠移植瘤瘤质量较单照组明显减小[(0.64±0.11)g vs (1.31±0.58)g](P＜0.05),抑瘤率达71.17%.联合组移植瘤组织中细胞凋亡数较单照组显著增大[(77.5±8.07) vs (48.80±6.71)](P＜0.05).结论 青蒿琥酯能明显增加HeLa细胞裸鼠移植瘤对射线的放射敏感性,作用机制与其增强射线诱导移植瘤组织中细胞凋亡有关.
作者：周媛媛；封阳；曹建平；张旭光；朱巍；倪倩影；耿冲；陈光烈；罗居东 刊期： 2011年第01期
目的 观察七氟烷预处理对缺氧/复氧(H/R)损伤的H9c2大鼠心肌细胞自噬相关蛋白LC3表达的影响,探讨自噬在七氟烷预处理延迟性保护中的作用.方法 H9c2心肌细胞随机分为5组:空白对照组(CON);缺氧/复氧组H/R(缺氧2 h,复氧1 h);七氟烷预处理组(SEVO)予2.5%七氟烷预处理1 h,24 h后进行H/R;3-MA+SEVO组,七氟烷预处理前15 min 在培养液内加入3-MA(10 mmol/L),24 h后进行H/R;3-MA组,即在培养液内加入3-MA(10 mmol/L),25 h后进行H/R.取复氧后心肌细胞,MTT法检测各组H9c2心肌细胞存活率,Western blot 法检测自噬相关蛋白LC3-Ⅱ的表达.结果 与CON组相比H/R组和SEVO组细胞存活率均降低(均P＜0.05);与H/R组相比SEVO组、3-MA组和3-MA+SEVO组细胞存活率均增高(均P＜0.05).Western blot结果显示,与CON组相比SEVO组、H/R组自噬蛋白LC3-Ⅱ表达均上调(均P＜0.05),与H/R组相比SEVO组LC3-Ⅱ蛋白表达均下调(均P＜0.05),而3-MA组和3-MA+SEVO组表达均显著下调(均P＜0.01).结论 七氟烷预处理对H/R损伤H9c2心肌细胞具有延迟性保护作用,自噬可能参与了七氟烷预处理的延迟性保护机制.
作者：刘琴；李凌云；乔世刚；魏兴；谢红；王琛 刊期： 2011年第01期
目的 研究17-DMAG对缺氧模拟剂氯化钴(CoCl2)诱导的人宫颈癌HeLa细胞的辐射敏感性影响.方法 首先应用不同浓度的CoCl2处理HeLa细胞24h,采用Western blot技术检测HIF-1α蛋白表达量,然后选取浓度为200μ mol/L的CoCl2对Hela细胞进行模拟缺氧处理24 h,应用不同浓度的17-DMAG预处理细胞16h后,接受2、4、6、8Gy不同剂量的射线照射,采用克隆形成实验观察细胞的存活率,应用 Western blot技术检测 HIF-1α蛋白表达.结果 在 CoCl2浓度为200μmol/L时HIF-1a蛋白表达量强;不同浓度17-DMAG处理组的HeLa细胞在不同照射剂量组间的存活率差异均有高度统计学论(均P＜0.01);17-DMAG预处理缺氧HeLa细胞后,HIF-1a蛋白表达随药物浓度增加受到显著抑制.结论 17-DMAG 预处理可增加缺氧细胞辐射敏感性,其机制可能是通过抑制HIF1a 蛋白表达而发挥作用.
作者：吴晓芬；洪承皎；张保国 刊期： 2011年第01期
目的 分析新生儿持续肺动脉高压(PPHN)的临床和死亡相关因素,以利于进一步降低PPHN的病死率.方法 分析40例PPHN患儿的临床资料.结果 40例患儿中死亡17例,病死率42.5%.羊水污染、酸中毒、肺动脉收缩压及各种并发症的发生可能是PPHN死亡的高危因素.结论 新生儿PPHN病因复杂,治疗困难,病死率高.早期诊断、及时给予恰当的治疗可改善预后.
作者：余剑；冯星；孙斌 刊期： 2011年第01期
目的 探讨CT平扫联合CT灌注成像(CTP)、CT血管造影(CTA)在早期缺血性脑血管病(CVD)中的应用价值.方法 对45例发病24 h内临床诊断为短暂性脑缺血发作(TIA)或脑梗死(CI)的CVD患者,同时行CT平扫、CTP、CTA检查,CI患者在发病后2～7d行头颅CT复查,对比头颅CT复查所见梗死区及脑灌注血流图缺血区,确定缺血半暗带,所有患者作灌注参数及CTA结果分析.结果 (1)10例,11A患者CT平扫未见异常,CTP表现为与临床症状相对应的灌注异常区达峰值时间(TTP)延长,CTA显示7例血管狭窄;(2)35例CI患者中,CT平扫见低密度灶5例,未见异常30例.发病在6 h内的22例患者中有19例存在缺血半暗带;发病6～24 h的13例患者中2例存在缺血半暗带,梗死区的脑血流量、脑血容量及半暗带区的脑血流量与对侧比较差异均有统计学意义(均P＜0.05),而半暗带区的脑血容量与对侧比较差异无统计学意义(P>0.05).本组35例CTA显示有26例患者存在颈内动脉、大脑中动脉或大脑后动脉不同程度的狭窄或完全闭塞.结论 CT平扫、CTP、CTA三项联合检查对发病24h内的CVD患者,能够鉴别TIA及CI、预测CI患者是否存在缺血半暗带、评价大血管情况,为实现溶栓的个体化治疗提供重要依据.
作者：周桂龙；姚立正；钟建国；侍海存；肖佩荣；颜利辉；王瑶；宋维根 刊期： 2011年第01期
目的 探讨腹腔镜下经腹腔内内环口缝扎法治疗小儿腹股沟斜疝的临床效果及价值.方法 分析采用腹腔镜下经腹腔内内环口缝扎法治疗143例小儿腹股沟斜疝患儿的临床资料.结果 全部患儿均手术顺利.无戳孔疝、阴囊血肿、阴囊积液和粘连性肠梗阻发生.随访10～32个月,平均20个月,术后复发1例(复发率0.7%).结论 腹腔镜下经腹腔内内环口缝扎法治疗小儿腹股沟斜疝是一种安全而有效的术式,具有损伤小、恢复快的特点,值得临床推广应用.
作者：朱晓敏；潘怡；黄益民；徐建国；石英佐；于忠勤 刊期： 2011年第01期
目的 探讨干预Notch信号骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对心肌梗死(MI)大鼠心肌的治疗性血管新生作用及其机制.方法 60只Wistar大鼠经结扎冠状动脉前降支建立MI模型后,建模2周进行相应处理后,随机分为MI模型对照组(B组)、培养液移植对照组(C组)、激活Noth信号的BMSCs移植实验组(D组)、BMSCs移植对照组(E组),每组15只;另选取10只为假手术对照组(A组).4周后观察细胞生长及增殖情况,测定缺血心肌中血管内皮细胞生长因子(VEGF)蛋白的表达及缺血区心肌毛细血管密度的改变.结果 BMSCs在梗死区中可增殖分化为内皮细胞,与A、B、C组相比,D组、E组缺血心肌中VEGF蛋白的表达增多及毛细血管密度均明显增高(P＜0.01),且D组较E组更明显(P＜0.05).结论 激活Notch信号有促进心肌梗死区BMSCs向内皮细胞分化,并通过自分泌和旁分泌的方式增加缺血心肌VEGF的表达,由此促进缺血心肌中毛细血管新生.
作者：马树人；谢雄伟 刊期： 2011年第01期
目的 探讨腔镜甲状腺切除术的临床应用前景和手术关键.方法 分析腔镜下为64例甲状腺病患进行腔镜甲状腺切除术的临床资料,其中胸乳入路33例,经颈人路手术31例.结果 33例胸乳入路患者中5例病理提示为甲状腺乳头状癌,遂再行传统甲状腺癌根治术.手术平均时间80 min,术中出血约50 ml,术后平均24～48 h拔除引流管,引流液每天约有20 ml.31例经颈入路腔镜辅助甲状腺切除术患者手术平均时间75 min,术中出血较少,引流管放置时间平均2 d.两种手术方法术后均无皮肤瘀斑,皮下积液,皮下气肿.结论 腔镜甲状腺切除术具有手术损伤小、恢复快、住院时间短,在选择手术入路时,要根据患者的具体情况决定,在美容效果上胸乳入路应该是首选的手术方式.
作者：潘峻；吴浩荣；谷春伟；陈伟；王浩炜 刊期： 2011年第01期
目的 研究纳米化紫杉醇(TAX-NLC)与电离辐射对KB细胞杀伤的联合作用.方法 利用MTT法观察TAX-NLC、电离辐射及其二者联合对KB细胞的杀伤效应.通过流式细胞仪观察TAX-NLC及电离辐射对细胞周期的影响.结果 TAX-NLC较紫杉醇(TAX)对KB细胞具有更强杀伤作用,TAX-NLC或TAX与电离辐射联合作用时,随着剂量的加大,对KB细胞的杀伤作用增强.与同等剂量的电离辐射联合作用时,同浓度的TAX-NLC也比TAX 的作用强.同样,TAX-NLC 可以影响细胞周期再分布,使G2/M期细胞比例增加,与电离辐射联合作用时,其对细胞周期的影响要强于TAX.结论 TAX-NLC 对KB细胞的杀伤作用高于TAX.TAX-NLC与电离辐射的联合效应比与TAX的联合效应要高.TAX-NLC作用机制可能是其更易通过细胞膜并在细胞中浓聚有关.
作者：刘敏；李智慧；许玉杰 刊期： 2011年第01期
苏州大学学报（医学版）杂志
主管:江苏省教育厅
主办：苏州大学
