学术投稿

miR-20b慢病毒表达载体的构建及表达

朱莎莎;朱春;余章斌;韩树萍;朱金改;彭宇竹

关键词:miR-20b, 慢病毒, P19细胞
摘要:目的 构建鼠miR-20b慢病毒表达载体,检测其在P19细胞中的过表达效果.方法 设计并合成含有miR-20b成熟序列的编码短发卡状RNA(shRNA)的双链DNA.将shRNA克隆入慢病毒载体,与Pcgvp、Rev和Vsvg包装质粒共转染HEK-293T细胞包装病毒,收取病毒上清液,纯化后感染P19细胞.荧光倒置显微镜下观察感染效率,实时定量PCR检测慢病毒感染后miR-20b的相对表达量.结果 经双酶切分析及测序验证,成功构建了miR-20b的过表达载体.慢病毒感染P19细胞的效率可达到70%以上,miR-20b表达水平明显升高.结论 成功构建了鼠miR-20b的慢病毒表达载体,包被的病毒可以在P19细胞中实现过表达效果.
江苏医药杂志相关文献
  • 轮状病毒所致轻度胃肠炎伴良性婴幼儿惊厥26例临床分析

    目的 分析轮状病毒感染所致轻度胃肠炎伴良性婴幼儿惊厥(BICE)患儿的临床特点.方法 选择轮状病毒感染所致BICE患儿26例,回顾性分析其临床资料.结果 26例中,发病季节多见于秋冬季,发病年龄1-2岁高发,惊厥多于病程的1-3 d发生,病程中可反复多次发作(1-3次),早期频繁发作多见.结论 轮状病毒所致BICE惊厥大多≤3次,预后好,但部分病例临床症状可不典型,容易误诊,需引起重视.

    作者:王静;黄杰 刊期: 2014年第02期

  • 右小腿非典型性纤维黄色瘤一例

    患者,女,23岁.因“发现右小腿渐进性增大包块半年余”入院.半年前患者发现右小腿下段前内侧一直径约1 cm的包块,无疼痛.当时未予治疗,近半年来包块逐渐增大,偶感疼痛,运动时加剧,在当地医院行病理活检示:纤维组织细胞瘤.为进一步治疗来我院就诊.查体:T36.7℃,P 86次/分,R 19次/分,BP 111/80mmHg.神志清,精神尚可.

    作者:肖海 刊期: 2014年第02期

  • 血清胃蛋白酶原检测在儿童胃病诊断中的价值

    目的 探讨血清胃蛋白酶原(PG)检测对儿童胃病诊断的临床价值.方法 选择因上消化道症状来就诊患儿120例,其中胃黏膜正常6例,胃炎72例,十二指肠球炎18例,十二指肠球部溃疡18例,胃溃疡6例.采用时间分辨荧光免疫分析法检测患儿血清PGⅠ、PGⅡ水平和PGⅠ/PGⅡ比值.结果 十二指肠球部溃疡患儿血清PGⅠ、PGⅡ水平高于胃炎、十二指肠球炎组及胃黏膜正常患儿(P<0.05);幽门螺杆菌(Hp)阳性患儿血清PGⅡ高于Hp阴性患儿[(15.82±7.78)μg/Lvs.(9.7±6.52)μg/L](P<0.05),Hp阳性患儿PGⅠ/PGⅡ低于Hp阴性患儿(8.82±4.90 vs.11.74±5.96) (P<0.05).结论 血清PG水平与儿童Hp感染及十二指肠球部溃疡有关.

    作者:林琼;王叶红;陈星涛;唐国荣;顾岚;徐惠 刊期: 2014年第02期

  • 全胸腔镜联合腹腔镜食管癌根治术的手术护理配合

    食管切除手术是目前治疗食管癌的佳方式和主要治疗手段.然而传统食管癌开放手术创伤大,围手术期死亡率和并发症发生率较高,尤其是术后肺部并发症发生率可高达30%[1].近年来,随着腔镜技术的发展和腔镜外科医师经验的积累,胸腔镜和腹腔镜联合下的食管癌根治术不断进步[2].我院对食管癌患者行全胸腔镜联合腹腔镜食管癌切除及胸、腹腔淋巴结清扫手术,取得了满意的效果,手术护理配合体会报道如下.

    作者:王俏丽 刊期: 2014年第02期

  • 肿瘤坏死因子α-308 G/A基因多态性与胃癌预后的相关性

    目的 探讨肿瘤坏死因子a(TNF-α) 308 G/A基因多态性对胃癌预后的影响.方法 采用等位基因特异引物PCR法分别检测80例胃癌患者(胃癌组)和80例非癌症患者(对照组)的TNF-α-308 G/A基因的基因型.结果 胃癌组TNF-α-308位点G和A等位基因的分布频率分别为92.2%和7.8%,与对照组的94.6%和5.4%相仿(P>0.05).TNF-α-308位点G和A等位基因的分布频率差异亦无统计学意义[OR=1.619,95%可信区间(CI):0.763-2.472,P>0.05].TNF-α-308 GA、AA基因型的胃癌患者存在组织分化差、临床分期晚的趋势.多因素Cox比例风险模型分析显示,GA、AA基因型胃癌患者的死亡风险为GG基因型的2.122倍(95%CI:1.451-3.692,P<0.01).结论 TNF-α-308 G/A基因多态性与胃癌易感性可能不相关;TNF-α-308 GA和AA基因型是胃癌患者不良预后的危险因素.

    作者:史俊;陆俊;洪岩;吴小红 刊期: 2014年第02期

  • 右美托咪定超前镇痛在下肢骨折手术患者的应用

    目的 探讨右美托咪定超前镇痛在下肢骨折手术患者应用的效果.方法 下肢骨折切开复位内固定手术患者80例,随机均分为两组:A组术前10 min泵注右美托咪定0.5μg/kg;B组泵注生理盐水2 ml作对照.手术均在罗哌卡因腰麻下完成.两组术后均使用芬太尼患者自控静脉镇痛(PCIA),比较两组镇静、镇痛效果和不良反应发生情况.结果 A组术中Ramsay镇静评级优于B组(P<0.05),术后6、12、24、36和48h的VAS疼痛评分低于B组(P<0.05).两组镇痛相关不良反应发生率相仿(12.5% vs.10.0%)(P>0.05).A组术后48 h芬太尼用量少于B组[(14.1±3.0) μg/kg vs.(15.9±3.8) μg/kg],自控镇痛泵按压次数少于B组[(5.4±5.8)次vs.(9.7±5.8)次](P<0.05).结论 右美托咪定超前镇痛能够改善术后芬太尼PCIA效果,并能减少芬太尼使用量.

    作者:赵以松;孟祥奇;喻翔卿;徐雪芬;熊远洪 刊期: 2014年第02期

  • 腔镜下甲状腺次全切除术中应用超声刀显露喉返神经的神经保护效果

    目的 观察腔镜下甲状腺次全切除术中应用超声刀显露喉返神经的神经保护效果.方法 行腔镜下甲状腺次全切除术的患者120例随机均分为两组,术中分别采用超声刀显露喉返神经(A组)和不显露喉返神经(B组),比较喉返神经损伤情况.结果 A组手术时间为(120.3±11.9)min,长于B组的(103.6±11.2) min(P<0.05).A组发生喉返神经损伤1例(1.67%),术后2个月余完全恢复.B组发生喉返神经损伤7例(11.67%),完全恢复2例,部分恢复4例,1例未恢复.A组喉返神经损伤发生率低于B组(P<0.05).结论 虽然腔镜下甲状腺次全切除术中暴露喉返神经增加手术时间,但可有效降低喉返神经损伤的发生.

    作者:洪钟;陈朝勇;何庆时 刊期: 2014年第02期

  • 利多卡因复合托烷司琼在预防丙泊酚注射痛中的作用

    目的 探讨利多卡因复合托烷司琼对全麻诱导期丙泊酚注射痛的影响.方法 全麻下行外科手术的患者80例随机均分为C组(生理盐水6 ml)、L组(利多卡因20 mg)、T组(托烷司琼5 mg)和LT组(利多卡因20 mg复合托烷司琼5 mg),后三组药物均稀释到6 ml.麻醉诱导前,前臂上止血带并注射相应药物,药物注射后30 s松开止血带,给予丙泊酚2 mg/kg,记录丙泊酚注射痛发生情况以及血流动力学变化.结果 与C组相比,其他三组注射痛的发生率和严重程度降低(P<0.05).与L组和T组相比,LT组注射痛的发生率和严重程度降低(P<0.05).四组HR和MAP的变化均无统计学差异(P>0.05).结论 利多卡因复合托烷司琼能降低丙泊酚注射痛且不影响血流动力学变化.

    作者:张斌;刘成龙 刊期: 2014年第02期

  • 心脏不停跳瓣膜置换术161例临床分析

    目的 总结浅低温心肺转流(CPB)心脏不停跳瓣膜置换术161例治疗经验.方法 手术种类:二尖瓣置换81例,主动脉瓣置换34例,主动脉瓣及二尖瓣置换40例,三尖瓣置换6例.换瓣同时行三尖瓣成形50例,心房纤颤消融35例,左房血栓清除9例,房间隔缺损或室间隔缺损修补8例,冠状动脉旁路移植4例,巨大左心房折叠19例,保留二尖瓣后瓣及瓣下结构95例,二尖瓣全瓣保留6例,主动脉根部加宽换瓣3例.结果 术后早期死亡5例(3.10%).156例痊愈出院,无一例气栓发生.结论 浅低温CPB下心脏不停跳行瓣膜置换技术对多数心脏瓣膜置换术患者是适用的.

    作者:尹俊;陈锁成;丁国文;施益军;王康荣;戎国祥 刊期: 2014年第02期

  • 60岁以上人群血脂与血压的关系

    目的 探讨60岁以上人群血脂水平与血压变化的关系.方法 选取2009年4770例60岁以上体检资料为基线数据,并随访2年;采用统一制定的体检表每年收集基本生活习惯相关信息,同时测量血压、身高、体重,并检测血糖、血脂等指标.在进行质量控制后终纳入统计分析的研究对象为2345例.结果 基线阶段总胆固醇(TC)升高及高TC者收缩压水平均高于TC正常者(P<0.05);基线及随访阶段高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)偏低患者SBP水平均低于HDL-C正常及升高者(P<0.05).将年龄作为校正因素,收缩压变化与TC变化呈正相关(r=0.042,P<0.05).结论 60岁以上人群血脂水平与血压水平存在相关关系,高脂血症可能为高血压的危险因素.

    作者:吴雁鸣;尤华;顾卫霞;叶福龙;沈冲 刊期: 2014年第02期

  • NudC对肾癌细胞迁移能力的影响

    目的 分析核迁移蛋白细胞核分离基因C(NudC)与肾癌细胞迁移活性的关系.方法 采用Transwell方法比较293和OS-RC-2两个细胞株的迁移能力;RT-PCR和Western blot方法分别检测两个细胞株中NudC mRNA和蛋白的表达差异;免疫荧光方法检测NudC蛋白在上述两个细胞株中的定位.结果 肾癌细胞株OS-RC-2的迁移能力明显高于胚肾细胞株293.在mRNA水平,人肾癌细胞株OS-RC-2中NudC表达均高于人胚肾细胞株293(2.6±0.3 vs.1.0±0.1)(P<0.05).免疫荧光结果和细胞核蛋白表达结果显示NudC蛋白在人肾癌细胞株OS-RC-2的核内表达高于人胚肾细胞株293(4.1±0.3 vs.1.0±0.2)(P<0.05).结论 NudC蛋白在肾癌细胞株核内的表达高于正常细胞株,提示NudC可能与肾癌细胞迁移活性密切相关.

    作者:唐爱国;金慧敏;陈永昌;吴燕;蒋璐;蓝婷;徐强;孙浩 刊期: 2014年第02期

  • 发酵冬虫夏草菌粉对糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡及Bcl-2、Bax表达的影响

    目的 探讨发酵冬虫夏草菌粉对糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡及B细胞淋巴瘤/白血病2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达的影响.方法 24只SD大鼠均分为糖尿病(A)组、治疗(B)组和对照(C)组,A、B组饲喂高糖高脂饲料8周并注射链脲佐菌素30 mg/kg建立糖尿病大鼠模型,C组饲喂普通饲料作对照.B组成模后予发酵冬虫夏草菌粉200mg·kg-1 ·d-1灌胃8周,A、C组予等体积无菌水灌胃.计算三组内生肌酐清除率(CCr)、24-h尿白蛋白排泄率(UAER),流式细胞术检测肾脏细胞凋亡率,免疫组化法检测肾组织BcL-2和Bax蛋白表达.结果 与C组相比,A、B组CCr降低,24-h UAER、肾脏细胞凋亡率和肾组织Bcl-2和Bax表达升高(P<0.05或P<0.01).与A组相比,B组CCr和肾小管上皮细胞Bcl-2表达升高,24-h UAER、肾脏细胞凋亡率和肾小管上皮细胞Bax表达降低(P<0.05).结论 发酵冬虫夏草菌粉能抑制糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡,与影响Bcl-2/Bax基因表达有关.

    作者:陈骅;刘占全;张海松;柳嘉 刊期: 2014年第02期

  • 363例Ⅰ类切口手术围术期预防用抗菌药物分析

    目的 分析我院Ⅰ类切口手术围术期预防使用抗菌药物情况及合理性.方法 利用处方点评中随机抽取的363例Ⅰ类切口手术围术期出院病历,分析抗菌药物预防应用情况.结果 363例中,预防使用抗菌药物237例(65.29%),抗菌药物以一、二代头孢菌素应用为主,分别占26.42%和27.64%.术前0.5-2.0 h给药92例(38.82%),总预防用药时间≤24 h者90例(37.97%),抗菌药物的用法用量符合药品说明书要求者144例(60.76%).结论 我院Ⅰ类切口手术预防用抗菌药物存在用药指征不严、给药时机不当、预防用药时间过长等不合理现象,需加强规范化管理.

    作者:沈正林;葛称;赵玉琴 刊期: 2014年第02期

  • SOCS3与妊娠期肝内胆汁淤积症

    目的 探讨细胞因子信号传导负调控因子3 (SOCS3)在妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)发病中的作用及可能的调节机制.方法 选取正常孕妇(A组,18例)、轻型ICP孕妇(B组,18例)及重型ICP孕妇(C组,19例),分离获得其胎盘来源的单核-巨噬细胞,用ELISA法检测细胞培养上清液中TNF-α、IL-10、IL-12水平,RT-PCR及Western blot法分别检测SOCS3 mRNA及蛋白水平的表达,TransAMTM核蛋白定量分析法检测NF-κB/p65的水平.结果 与A组比较,B、C组高分泌TNF-α、IL-12,低表达SOX3,NF-κB/p65的量增多(P<0.01),且C组较B组更明显(P<0.01);三组IL-10的分泌水平均较低.结论 ICP孕妇胎盘组织内以Th1型细胞因子(IL-12)占主导,而Th2型细胞因子(IL-10)的水平明显减低.妊娠期ICP患者Th1/Th2型细胞因子的失衡可能与SOCS3 和NF-κB/p65的活化调节有关.

    作者:王增芳;胡吉英;王增艳;王萍萍;鞠吉雨 刊期: 2014年第02期

  • 依托咪酯对兔定量药物脑电图δ和β2频段的影响

    目的 探讨依托咪酯对兔定量药物脑电图(QPEEG)δ和β2频段功率百分比的影响.方法 30只健康成年家兔随机均分为五组:Ⅰ组静脉注射脂肪乳1 ml/kg,LD、MD和HD组分别静脉注射依托咪酯0.25、0.50和1.00 mg/kg,NS组注射生理盐水作对照.应用数字脑电地形图仪分别记录给药前30 s,给药后30 s和1、2、3、5、10 min时兔左、右脑额、顶、枕、颞8个脑区QPEEG,采用功率谱分析给药前后δ频段和β2频段功率百分比的变化.结果 与给药前比较,给药后,Ⅰ组和NS组δ和β2频段功率百分比无明显变化(P>0.05),LD组中δ频段功率百分比在8个脑区均增加,β2频段功率百分比在8个脑区减小,但仅在部分脑区、部分时间点的变化有统计学意义;MD组和HD组中δ频段功率百分比在8个脑区增加(P<0.05或P<0.01),β2频段功率百分比在8个脑区减小(P<0.05或P<0.01).上述变化与依托咪酯的剂量有关(P<0.05或P<0.01).结论 依托咪酯呈剂量依赖性增加兔QPEEG δ频段功率百分比,降低β2频段功率百分比;这可能成为监测依托咪酯麻醉深度的指标.

    作者:李玲玲;赵健;韩平平;戴体俊;邵东华;杭黎华 刊期: 2014年第02期

  • 完全植入式静脉输液港在恶性血液病患者中的应用及护理

    化疗仍是目前治疗恶性血液病的主要方法之一,由于许多化疗药物对血管都有刺激性,外渗易致组织坏死,所以选择深静脉血管通路必不可少.目前可供患者选择的静脉通路比较多,完全植入式静脉输液港(TIVPA)因其较多的优势逐渐被患者接受.我科2012年4月以来选择TIVPA作为化疗静脉通路,通过规范化管理和专科化护理,收到良好的护理效果,报道如下.

    作者:蒋秀美 刊期: 2014年第02期

  • 不同水化方式预防心功能不全患者术后出现对比剂肾病的疗效

    目的 比较不同水化方式预防心功能不全患者冠脉介入术后出现对比剂肾病(CIN)的疗效.方法 42例冠心病伴心功能不全的患者随机分为半渗水化组和等渗水化组,分别从冠脉介入术前6h至术后6h予半渗(0.9%生理盐水和5%葡萄糖液等量混合)和等渗(0.9%生理盐水)两种方式行水化治疗,监测血清肌酐(SCr)和计算估计肾小球滤过率(eGFR).结果 两组患者术后SCr和eGFR比较无统计学差异(P>0.05).两组出现CIN的发病率比较无统计学差异(P>0.05).结论 对于心功能不全的患者,半渗与等渗盐水两种水化方式预防出现CIN的效果相当.

    作者:钱惠东;蒋文龙;郑若龙;杜燕宾 刊期: 2014年第02期

  • 颅内微小动脉瘤3D-DSA的临床应用价值

    目的 探讨颅内微小动脉瘤三维数字减影血管照影(3D-DSA)重建的临床价值.方法 回顾性分析利用3D-DSA脑血管造影确诊的13例微小动脉瘤(直径<5 mm)患者诊断及治疗资料.结果 13例中,前交通动脉动脉瘤5例,后交通动脉动脉瘤4例,颈内动脉动脉瘤1例,椎动脉动脉瘤3例.介入治疗4例,均完全闭塞;夹闭6例;3例保守治疗.无术中破裂或死亡病例.结论 对于颅内微小动脉瘤,3D-DSA能增加其检出率,对手术评估及治疗有着重要的临床意义.

    作者:苗增利;张敬;鲁晓杰;蔺玉昌;徐幸;江力;陈开来 刊期: 2014年第02期

  • 强化营养干预在2型糖尿病患者中的应用

    目的 探讨强化营养干预在2型糖尿病(T2DM)患者中的应用效果.方法 T2DM患者97例随机分为两组,干预组(48例)由营养医师对其进行为期4个月的系统营养教育;对照组(49例)不接受相关教育.比较两组相关指标的变化.结果 强化营养干预后,干预组体重、体重指数、腰围、腰臀比均较干预前下降(P<0.05);对照组干预前后体重、体重指数、腰围、腰臀比无显著变化(P>0.05).干预组蛋白质含量较干预前增高,脂肪含量和去脂体重经干预后降低(P<0.05).干预组餐后2h血糖、糖化血红蛋白、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇和尿酸水平均低于干预前(P<0.05).结论 合理的营养干预对T2DM患者血糖、血脂管理有明显效果.

    作者:卢姗;李群;曾珊;徐冬连;赵婷;蔡金鑫;陈昕林;陈宇红 刊期: 2014年第02期

  • 盆底重建术预防腹腔镜辅助阴式子宫切除术后盆腔器官脱垂的近期疗效

    目的 观察盆底重建术预防腹腔镜辅助阴式子宫切除术盆腔器官脱垂(POP)的效果.方法 行腹腔镜辅助阴式全子宫切除术的良性子宫病变患者90例随机均分为两组:对照组行常规腹腔镜辅助下阴式全子宫切除术;治疗组术中加行阴道顶端悬吊盆底重建.比较两组近期手术效果.结果 两组在手术时间、出血量、排气时间和住院时间等方面均无统计学差异,且均无并发症出现.治疗组术后阴道长于对照组(P<0.05),性生活满意度高(P<0.05),且未见阴道穹窿脱垂患者.治疗组子宫脱垂患者术后膀胱颈活动度及膀胱尿道后角均较术前改善(P<0.05).结论 盆底重建预防腹腔镜辅助阴式子宫切除术POP的近期疗效确切.

    作者:夏鸽 刊期: 2014年第02期

江苏医药杂志

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主管:江苏省卫生厅

主办:江苏省人民医院(南京医科大学第一附属医院)