学术投稿

痕量DNA荧光检测方法建立

邵强;皮川真;于翔;原国强

关键词:荧光定量法, DNA, 检测
摘要:灵敏、准确的DNA定量方法在生物学研究及应用领域中发挥着重要的作用,尤其对痕量DNA定量时.根据2005版<中国药典2005版(三部)>检测外源DNA含量采用的是Southern blotting杂交法~([1]),此法可以检出pg水平的DNA~([2]),但其是半定量的方法.荧光定量法是一种灵敏的DNA定量方法,将荧光染料与DNA结合,利用荧光分光光度计采集结合后增强的荧光信号,通过DNA标准样品计算得出样品DNA的浓度.本研究基于SYBR Green I荧光发光原理,通过对DNA抽提方法的改进来提高抽提制品时痕量DNA回收率,以建立一种痕量DNA检测方法.
中国公共卫生杂志相关文献
  • 辽宁大伙房和汤河水库底栖动物质量指数评价

    水库湿地的水生生物群落和属种变化在客观上可反映水质状况,而底栖动物作为水库必测项目,在水质生物监测中发挥着重要作用.水库大多水体较深,底栖动物群落分布相对简单~([1]),以往多采用生物多样性指数进行群落结构和水质污染评价,往往因为种群单一及分类等原因,不能准确反映水体污染程度~([2-4]).为了解决水库湿地底栖动物监测与评价中出现的上述问题,本研究分别于2009年4月、7月采集辽宁省境内大伙房水库、汤河水库底栖动物样本,采用水库湿地底栖动物质量指数(BQI)~([1])进行评价分析.结果报告如下.

    作者:孙欣;李健;孔繁学;王俊才 刊期: 2010年第03期

  • 新疆哈萨克族居民原发性高血压基因多态性

    原发性高血压(Essential hypertension,EH)为临床常见病和多发病.新疆历次高血压流行病学调查资料均显示:哈萨克族人群是高血压病的易感群体.

    作者:杨建峰;何芳 刊期: 2010年第03期

  • 细胞色素P450 2C19基因多态性研究进展

    细胞色素P4502C19(CYP2C19)是1种十分重要的药物代谢酶,主要存在于肝脏微粒体内,许多内源性底物、环境污染物以及临床上大约2%的药物均由其催化代谢~([1]).CYP2C19主要存在于肝微粒体中,位于第10号染色体上(10q 24.1~24.3).

    作者:张志贤;常福厚 刊期: 2010年第03期

  • 芜湖市中老年人群高尿酸血症影响因素分析

    目的 了解安徽省芜湖市中老年人高尿酸血症的危险因素,为采取防治措施提供科学依据.方法 采用横断面方法调查安徽省芜湖市中老年居民1 965人,采用Logistic回归分析高尿酸血症的影响因素.结果 芜湖市中老年居民高尿酸血症的校正患病率为13.9%,男女性患病率分别为18.3%,8.9%,差异有统计学意义(P=0.003).多变量Logistic逐步回归分析发现,对高尿酸血症有影响的变量有高血压、体质指数、年龄、主食摄入量和水产品摄入量(OR值分别为2.79,1.19,1.08,0.76,1.87).校正年龄、血压和性别后,超重和肥胖者患高尿酸血症的危险分别是体重正常人群的2.29倍(95CI=1.76~2.98,P<0.001)和4.56倍(95CI=3.12~6.66,P<0.001);校正年龄、性别和BMI后,高血压人群患高尿酸血症的危险是血压正常人数的1.63倍(95CI=1.21~2.21,p<0.001);同时具有肥胖和高血压的人群患高尿酸血症的可能性是体重和血压正常人群的6.52倍(95CI=3.88~10.95,P<0.001).结论 高血压、肥胖及其共同作用可能是高尿酸血症的发生重要危险因素.

    作者:文育锋;许静;叶冬青;蒋作君 刊期: 2010年第03期

  • 社区高血压患者及高危人群综合干预效果评价

    目的 探讨北京市社区高血压患者及其高危人群规范化管理及其效果.方法 以干预社区中自愿参与规范化管理的高血压患者及其高危人群作为干预对象,通过问卷调查、体格测量及血生化检查进行危险分层后,按照<中国高血压防治指南2005>进行随访和规范化管理.结果 高血压患者干预后的收缩压均值明显下降(Z=-7.624,P<0.001),舒张压均值也明显下降(Z=-6.717,P<0.001),均低于干预前;高血压患者干预后按医嘱规律服药率为68.9%,明显高于干预前的62.7%(χ~2=7.538,P=0.006);高血压患者干预后每日吸烟率明显低于干预前(χ~2=7.021,P=0.008)、饮酒率明显低于干预前(χ~2=-7.280,P=0.007),而体力活动率明显高于干预前(χ~2=8.959,P=0.003);干预后高血压患者对高血压危险因素等相关知识的知晓率明显提高;高血压高危人群的血压均值和相关知识知晓率经过干预均无明显改善.结论 干预后,社区高血压人群各项指标均有改善,规范化管理是降低高血压患者心脑血管病发病的重要措施.

    作者:谢瑾 刊期: 2010年第03期

  • 代谢综合征腰围适宜切点ROC方法预测

    目的 研究社区>20岁人群体质指数(BMI)、腰围(WC)的分布特征及其与代谢综合征的关系,探讨代谢综合征患者腰围的适宜切点.方法 于2007年1-6月调查在江苏省徐州市云龙区和泉山区3所医院参加体检的>20岁常住居民3 659人,根据中国代谢综合征诊断标准(CDS2004),应用受试者工作特征曲线(ROC),分析代谢综合征患者BMI与WC的相关关系,并以约登指数大作为腰围适宜切点.结果 代谢综合征患病率为15.2%,标化患病率为11.1%;男、女性代谢综合征患者腰围平均值分别为(85.8±9.6),(73.7±9.2)cm,BMI与WC相关性较高(r男性=0.780,r女性=0.788,P<0.05);代谢综合征的WC佳切入点男、女性分别为88.5,78.5 cm.结论 中国代谢综合征诊断标准的BMI与WC具有较好的相关性,使用ROC研究中国人群代谢综合征腰围切点与国际糖尿病联盟标准和美国代谢综合征诊断标准的腰围切点相近.

    作者:邵继红;俞黎黎;王琨;沈霞;李东野;方晓芬;金英良;徐璐 刊期: 2010年第03期

  • 广西某铅锌矿区镉暴露居民健康状况调查

    广西西南部山区某铅锌矿已有数10年的开采历史,近年该矿因资源枯竭而关闭.长期居住在原铅锌矿区周围的农村居民以自产自给稻谷和其他农作物为生.但其生活饮用水则取自矿区外未受污染的水库.

    作者:杜岩;黎美清;苏旭;葛宪民;黄家乐;苏素花 刊期: 2010年第03期

  • 锰对大鼠空间学习记忆影响

    目的 探讨锰染毒大鼠空间学习记忆变化的规律.方法 50只雄性大鼠适应性喂养1周后,随机分为5组,即生理盐水组(A组),Mn~(2+) 2.5,5,10,20 mg/kg(B、C、D、E组).腹腔注射生理盐水或MnCl_2溶液0.5 mL/d,共30 d.染毒结束后,采用Morris水迷宫试验测定大鼠潜伏期、总路程和穿台次数的变化.结果 经多组比较的单因素方差分析,潜伏期、总路程、穿台次数各组均数间差异有统计学意义(F=7.813,P=0.000;F=8.190,P=0.000;F=3.461,P=0.000);与A组比较,B、C、D和E组潜伏期延长,差异有统计学意义(P<0.05);与B组比较,D和E组潜伏期延长,差异有统计学意义(P<0.05).与A组比较,C、D和E组总路程延长,差异有统计学意义(P<0.01);与B组比较,C、D和E组总路程延长,差异有统计学意义(P<0.01).与A组比较,B、C、D、E4组穿台次数减少,差异有统计学意义(P<0.05).结论 锰染毒可以引起大鼠空间学习记忆障碍.

    作者:肖忠新;牛丕业;李慧;李变兰;张淑华;高艾;田琳 刊期: 2010年第03期

  • 高摄铝燃煤型氟中毒大鼠肝损伤干预效果分析

    贵州省属于燃煤型氟中毒地区,在氟中毒重病区不仅存在高摄氟,同时还存在高摄铝情况~([1]).高氟不仅影响骨骼系统,还会累积全身各重要器官,其中对肝脏的损伤日益成为关注的焦点.目前,临床上地氟病尚无有效治疗药物~([2]).

    作者:黄德远;王丹;张秀慧;喻茂娟;刘鲜林;常傲霜 刊期: 2010年第03期

  • 广东省O1/O139群霍乱弧菌耐药监测分析

    目的 分析广东省霍乱病例及环境来源O1/0139群霍乱弧菌对抗生素的敏感性,为霍乱防控提供依据.方法 选取2006-2008年广东省O1/O139群霍乱病例分离株38株,环境株145株,以毒素基因ctxAB的PCR检测区分产毒株与非产毒株;采用WHO推荐的改良Kirby-Bauer纸片法,分析霍乱弧菌对11种抗生素在体外的药物敏感性.结果 183株O1/O139群霍乱弧菌中,ctxAB阳性44株,ctxAB阴性139株.分离自病例的菌株和ctxAB阳性菌株中,小川型菌株只对四环素、萘啶酸和复方新诺明有一定耐药;稻叶型菌株对萘啶酸和复方新诺明100%耐药,而O139群菌株对四环素、萘啶酸和复方新诺明等多种抗生素有一定耐药;分离自环境的菌株和ctxAB阴性菌株中,小川型和稻叶型菌株对四环素、萘啶酸和复方新诺明等多种抗生素有一定耐药,而O139群则仅对萘啶酸、复方新诺明和氨苄西林有一定耐药;分离自病例的菌株和ctxAB阳性菌株以耐多药为主,耐多药率分别为78.9%和75.0%,高于分离自环境的菌株和ctrAB阴性菌株的31.7%和30.9%(P<0.01).结论 广东省O1/O139群霍乱弧菌中分离自病例的菌株和ctxAB阳性菌株耐多药率较高,应予以密切关注.

    作者:李柏生;谭海玲;王多春;邓小玲;陈经雕;柯碧霞;柯昌文 刊期: 2010年第03期

  • 色氨酸羟化酶与抑郁症及自杀行为研究进展

    研究显示,抑郁症及自杀行为的神经生物学基础主要是5-羟色胺(5-HT)系统异常~([1]).色氨酸羟化酶(TPH)是5-HT合成的关键酶,直接影响5-HT的代谢功能.而TPH基因异常可能导致TPH表达异常.提示TPH基因与5-HT系统紊乱导致抑郁症以及自杀行为密切相关.

    作者:杨艳杰;王琳;乔正学;邱晓惠;杨秀贤 刊期: 2010年第03期

  • rTgPrx蛋白滴鼻免疫小鼠抗弓形虫感染作用

    目的 观察重组弓形虫过氧化物还原蛋白(rTgPrx)滴鼻免疫小鼠诱导的免疫应答及抗弓形虫感染作用.方法 6周龄BALB/c小鼠75只,随机分为5组,实验组分别用10,20,30,40μg rTgPrx[溶于20μL磷酸盐缓冲液(PBS)中]滴鼻免疫小鼠3次,各间隔2周;对照组用等量磷酸盐缓冲液;末次免疫后14 d,用1×10~4个速殖子/只灌胃攻击全部小鼠;攻击后30 d,眼静脉丛采血,颈椎脱臼处死小鼠,ELISA检测血清IgG和肠液IgA,分离并计数肠上皮内淋巴细胞(IEL)和脾淋巴细胞,分离并计数肝、脑组织内弓形虫速殖子.结果 40 μg rTgPrx组血清IgG、IEL及脾淋巴细胞数量均高于对照组(P<0.05),40μg组肝、脑组织内虫荷(速殖子数)明显低于对照组及10,20和30μg组(P<0.05).结论 rTgPrx滴鼻免疫小鼠可诱导黏膜部位和系统免疫应答和抗弓形虫感染作用,40μg组的免疫保护作用优于其他剂量组.

    作者:王海龙;刘转转;殷国荣;孟晓丽;曹蕾;刘美娜 刊期: 2010年第03期

  • 不同社区高血压患者管理模式干预效果评价

    目的 比较社区自我管理模式与三级管理模式对高血压病人血压分级、控制率的影响,探索有效的高血压管理模式,为开展社区卫生服务提供依据.方法 采用以社区为基础的完全随机实验,将413例高血压患者,随机分为自我管理模式组(实验组)和高血压三级管理模式组(对照组),比较实验组(208名)和对照组(205名)6个月后在血压分级、血压控制率等方面的变化.结果 实验组高血压三级患者构成比从29.32%下降到17.31%,对照组从31.71%下降到23.42%,实验组下降的幅度高于对照组(P<0.05);实验组血压控制率从23.60%上升到57.20%,对照组从26.80%上升到36.60%,实验组上升的幅度高于对照组(P<0.01).结论 高血压自我管理模式较三级管理模式在控制血压方面效果更好.

    作者:李春霖;陈嫣;张东霞;张飞;张萍;郝申强;田庆丰 刊期: 2010年第03期

  • 高血压患者对SAS认知及治疗状况调查

    目的 了解高血压患者对睡眠呼吸暂停综合征(SAS)认知情况及疑似SAS高血压患者接受多导睡眠图监测(PSG)率和确诊SAS高血压患者的治疗率.方法 以解放军第94医院自2005年来516例高血压患者为研究对象,采取问诊时面对面问卷调查的方法,调查高血压患者对睡眠呼吸暂停综合征的认知及其治疗情况等相关因素.结果 516例高血压患者中认为SAS是高血压危险因素的为59例,占11.4%;高学历患者对SAS是高血压危险因子的认知率明显高于低学历患者;301例可疑存在SAS的高血压患者接受PSG检查92例,占总人数的30.6%;84例确诊为中重度SAS高血压患者有37例接受经鼻无创辅助通气或手术治疗,占总人数的44.0%.结论 高血压患者对SAS的认知率低,认知不足导致可疑存在SAS的高血压患者检出率低以及已确诊的高血压合并SAS患者有效的治疗率低.

    作者:徐劲松;袁春华;黄国明;王洪如;夏国际;宋宁燕 刊期: 2010年第03期

  • 城市农民工生命质量及影响因素分析

    目的 了解城市农民工生命质量(QOL)现状及其影响因素,为制定相应的政策和措施提供理论依据.方法 采用健康调查量表(SF-36)对贵州省贵阳市522名农民工进行QOL测定.结果 共发放调查表570份,收回558份,其中合格调查表522份,合格率为93.55%;522名农民工中男、女性分别为248和274人,平均年龄(28.43±8.06)岁;未婚、已婚和其他(离异或/和丧偶)分别为223,282,17人;小学及以下、初中、高中及以上文化程度者分别为73,255和194人;SF-36量表的分半信度和Cronbach's α系数分别为0.806 7(P<0.01)和0.777;躯体疼痛、总体健康、活力和精神维度上男性高于女性,仅总体健康维度上不同年龄、教育程度和婚姻状况间差异有统计学意义(P<0.01);多元逐步回归分析结果提示,两周患病、住处更换次数、自评健康和主观、客观支持是影响城市农民工QOL的重要因素.结论 农民工整体健康水平较差,生理、心理和社会适应等方面均不同程度地影响其QOL.

    作者:严征;彭安辉;刘丰丰;张丽荣 刊期: 2010年第03期

  • 温州市居民1997-2008年甲状腺癌患病分析

    目的 了解浙江省温州市甲状腺癌流行现状,为制定甲状腺癌控制对策提供科学依据.方法 选择浙江省温州市为调查地区,通过收集温州市主要医院的甲状腺癌发病资料,分析甲状腺癌发病特征.结果 1997-2008年,浙江省温州地区甲状腺癌粗发病率为2.78/10万.随着年龄增长,甲状腺癌发病率和死亡率有上升趋势,55岁达到高峰.放射性污染、碘摄人、感染等因素是甲状腺癌的危险因素.结论 温洲地区甲状腺恶性肿瘤发展较快,应加强对居民甲状腺癌知识的普及工作,控制影响患病的危险因素.

    作者:陈素秀;费正华;蒋亦燕 刊期: 2010年第03期

  • 痕量DNA荧光检测方法建立

    灵敏、准确的DNA定量方法在生物学研究及应用领域中发挥着重要的作用,尤其对痕量DNA定量时.根据2005版<中国药典2005版(三部)>检测外源DNA含量采用的是Southern blotting杂交法~([1]),此法可以检出pg水平的DNA~([2]),但其是半定量的方法.荧光定量法是一种灵敏的DNA定量方法,将荧光染料与DNA结合,利用荧光分光光度计采集结合后增强的荧光信号,通过DNA标准样品计算得出样品DNA的浓度.本研究基于SYBR Green I荧光发光原理,通过对DNA抽提方法的改进来提高抽提制品时痕量DNA回收率,以建立一种痕量DNA检测方法.

    作者:邵强;皮川真;于翔;原国强 刊期: 2010年第03期

  • 农村已婚妇女生殖道感染及影响因素分析

    目的 了解安徽省全椒县农村已婚妇女自觉生殖道感染(RTI)状况及其影响因素,为今后生殖道健康预防保健工作提供科学依据.方法 采用方便整群抽样方法,进行统一问卷调查.结果 共调查986人,收集有效问卷945份;51.5%的对象在近半年自觉有生殖道感染症状,在有症状者中就诊者占52.3%;在过去1年中10.7%的对象做过妇科检查,14.7%参加过当地卫生部门组织的健康讲座;自觉生殖道感染阳性症状与年龄、丈夫受教育程度、知晓生殖道感染症状、饭前洗手等个人卫生习惯均有关联(P<0.05),而与家居环境、家庭饮用水类型等无关联(P>0.05).结论 加强生殖健康知识的宣传力度、动员农村妇女及其家人积极参与是预防生殖道感染的有效措施.

    作者:丁书姝;周涛;冯丫娟;刘聚矩;张照祥;戴安萍;刘玉兰;翟金霞 刊期: 2010年第03期

  • 冠心病患者领悟社会支持与实际社会支持调查

    目的 了解冠心病患者领悟社会支持和实际社会支持情况.方法 对宁夏回族自治区3所城市10家综合性医院心内科的冠心病患者503人,采用领悟社会支持量表(PSSS)和社会支持评定量表(SSRS)进行调查.结果 冠心病患者实际社会支持总分(39.94±7.31)分、客观支持为(8.86±2.81)分、对支持的利用度为(6.87±2.04)分;均低于全国常模(均P<0.01);大部分冠心病患者实际社会支持为(69.7%),有76.0%的冠心病患者领悟社会支持系统正常,领悟社会支持和实际社会支持呈正相关.结论 冠心病患者领悟社会支持、实际社会支持程度不高,应引起重视.

    作者:尚玉秀;王学良;董桂清;丁文清;严淑珍;朱凤萍 刊期: 2010年第03期

  • 大气颗粒物对大鼠血液及内皮损伤作用

    目的 观察大气可吸入颗粒物一次气管滴注染毒后,大鼠血液炎症和内皮损伤指标的改变,探讨颗粒物所致心血管效应的生物标志.方法 将32只体重为380~470 g的雄性Wistar大鼠随机分为4组,即空白对照组、颗粒物低、中、高剂量组(0,5,15和45 mg/kg);采用气管滴注染毒,24 h后处死动物,分类计数血细胞,测定血液炎性指标白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、超敏C-反应蛋白(hs-CRP)以及内皮损伤指标一氧化氮(NO)和血管性假血友病因子(vWf)水平.结果 各染毒组大鼠血液白细胞总数明显升高,高剂量组达(7.94±1.15)×10~9/L、中性粒细胞百分比增加至(40.50±5.75)%;血清IL-6、hs-CRP水平与对照组比较明显升高(P<0.05);中、高剂量组TNF-α水平较对照组明显升高(P<0.05),各染毒组血清NO、vWf水平与对照组比较,差异无统计学意义.结论 可吸入颗粒物染毒后可引起大鼠系统炎症反应,但未见内皮损伤指标的改变.

    作者:吕鹏;宋晓明;刘红;郭新彪 刊期: 2010年第03期

中国公共卫生杂志

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主管:中华人民共和国卫生和计划生育委员会

主办:中华预防医学会