王付勇;李华强
目的 探讨p16及死亡相关蛋白激酶(DAPK)启动子在非浸润性膀胱癌患者血清中的甲基化及意义.方法 应用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测非浸润性膀胱癌患者(实验组,25例)及健康志愿者(对照组,25例)的血清游离DNA中p16及DAPK基因启动子甲基化,分析其临床意义.结果 实验组血清中的p16基因启动子甲基化率为52%(13/25),高于对照组的24%(6/25),两者比较差异有统计学意义(x2=4.160,P=0.041);实验组血清中的DAPK基因启动子甲基化率为60%(15/25),高于对照组的32%(8/25),两者比较差异有统计学意义(x2=3.945,P=0.047).p16及DAPK基因启动子甲基化与吸烟史(x2=0.187,P=0.665;x2=0.109,P=0.741)、年龄(x2=0.000,P=0.991;x2=0.038,P=0.845)、性别(x2=0.746,P=0.382;x2=1.288,P=0.256)及肿瘤级别(P=1.000;P=1.000)无明显相关.结论 p16和DAPK基因启动子甲基化与非浸润性膀胱癌关系密切.
作者:陈炳;姜应传;邬嘉波;吴海如;俞加法;张小荣 刊期: 2017年第03期
指骨骨折、关节脱位及肌腱、关节周围软组织损伤均可导致指间关节僵硬,单纯采用物理治疗或手术松解很难取得满意的效果[1].我科于2014年2月至2016年9月采用关节松解术联合中药熏洗治疗外伤性近指间关节僵硬,取得满意疗效.
作者:余湘;邢丹谋;冯伟 刊期: 2017年第03期
2013年1月至2016年6月,我们采用岛状颞浅筋膜瓣移植预构颈部扩张轴型血管皮瓣,修复面部烧伤大面积瘢痕切除后的缺损并重建面部轮廓,现报告如下.一、资料与方法1.一般资料:本组16例面部烧伤后瘢痕畸形,男11例,女5例,平均年龄30.8岁.病因包括火焰烧伤10例,化学烧伤2例,热液烫伤2例.其中12例瘢痕位于一侧面部累及2个以上美学分区(左5例,右7例),4例累及全面部.
作者:王付勇;李华强 刊期: 2017年第03期
目的 探讨DOC2/DAB2结合蛋白(DAB2IP)基因在胃癌组织的表达及其临床意义.方法 应用免疫组织化学方法检测122例胃癌组织、正常胃黏膜以及淋巴结组织中的DAB2IP蛋白表达水平.结果 DAB2IP的表达在正常黏膜组织(高表达95例)中明显高于胃癌组织(高表达33例,P=0.000)和转移淋巴结组织(高表达20例,P=0.000),其表达水平与肿瘤大小(肿瘤大小≥3cm 比<3cm低表达:66例/23例,P=0.017)、淋巴结转移(有/无淋巴结转移低表达:57例/32例,P=0.006)、肿瘤部位(远/近端胃癌低表达:59例/30例,P=0.034)、远处转移(无/有远处转移低表达:63例/26例,P=0.022)、临床分期(早/进展期胃癌低表达:9例/80例,P=0.018)以及生存时间(高/低表达平均生存时间:59.6个月/47.8个月,P=0.001)等均明显相关.结论 DAB2IP表达水平下调可能促进胃癌的发生、发展及转移并影响预后.
作者:王向阳;蔡威;王辉 刊期: 2017年第03期
目的 探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)和白细胞介素-6单克隆抗体(IL-6 mAb)对大鼠心脏移植免疫耐受的影响及机制.方法 供体SD大鼠和受体Wistar大鼠各20只随机分成4组:Ⅰ组:SD大鼠到Wistar大鼠同种异位腹腔心脏移植;Ⅱ组:受体术前连续5d和术后连续3d经颈静脉输注生理盐水,每天0.2ml;Ⅲ组:受体术前连续5d和术后连续3d经颈静脉输注MSCs,每天0.2ml(MSCs:1.0×106/0.2ml);Ⅳ组:受体术前连续5d和术后连续3d经颈静脉输注MSCs和IL-6 mAb[100μg/(kg·d)].检测供心存活时间、供体心脏病理改变,受体调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)比例,叉状头/翅膀状螺旋转录因子(FoxP3)蛋白表达率,辅助性T细胞17(Th17)比例和外周血中转化生长因子-β1(TGF-β1)、白细胞介素(IL)-10、IL-2、IL-6、IL-17的变化.结果 Ⅳ组平均存活时间[(40.800±8.815)d]较其他组[Ⅰ:(7.600±1.140)d;Ⅱ:(8.600 ±1.817)d;Ⅲ:(21.800 ±1.304)d]明显延长;CD4+CD25+Treg细胞比例[Ⅰ:(4.70±0.15)%;Ⅱ:(4.90±0.40)%;Ⅲ:(11.22±0.28)%;Ⅳ:(21.40±0.62)%]、FoxP3蛋白表达率[Ⅰ:(71.21±1.05)%;Ⅱ:(71.07±1.41)%;Ⅲ:(72.69±3.84)%;Ⅳ:(96.24±1.42)%]、IL-10[Ⅰ:(29.03±1.05)pg/ml;Ⅱ:(30.40±1.63)pg/ml;Ⅲ:(88.65±1.84)pg/ml;Ⅳ:(136.14±2.32))pg/ml]、TGF-β1[Ⅰ:(165.52±8.68)pg/ml;Ⅱ:(169.73±3.45)pg/ml;Ⅲ:(339.38±13.40)pg/ml;Ⅳ:(475.79±10.11)pg/ml]检测结果Ⅲ、Ⅳ组高于Ⅰ、Ⅱ组,Ⅳ组高于Ⅲ组;Th17细胞比例[Ⅰ:(7.18±0.48)%;Ⅱ:(6.98±0.61)%;Ⅲ:(4.16±0.23)%;Ⅳ:(1.28±0.19)%]、IL-6[Ⅰ:(70.96±1.20)pg/ml;Ⅱ:(70.06±2.10)pg/ml;Ⅲ:(42.94±2.14)pg/ml;Ⅳ:(16.57±1.05)pg/ml]、IL-2[Ⅰ:(112.94±3.52)pg/ml;Ⅱ:(111.48±2.71)pg/ml;Ⅲ:(66.96±1.04)pg/ml;Ⅳ:(33.31±1.41)pg/ml]、IL-17[Ⅰ:(96.86±1.15)pg/ml;Ⅱ:(92.72±4.91)pg/ml;Ⅲ:(49.49±1.63)pg/ml;Ⅳ:(21.22±0.82)pg/ml]检测结果:Ⅳ组和Ⅲ组明显低于Ⅰ组、Ⅱ组,Ⅳ组低于Ⅲ组.结论 MSCs联合IL-6 mAb可显著提高受体CD4+CD25+FoxP3+Treg细胞的比例、降低Th17细胞比例,下调IL-2、IL-17,上调IL-10、TGF-β1等免疫抑制因子的表达,从而达到显著延长大鼠同种心脏移植物的存活时间.
作者:章传凯;沈振亚;滕晓梅;张有斌;余云生 刊期: 2017年第03期
目的 探讨不同麻醉方式对建立大鼠重症急性胰腺炎(SAP)模型的影响.方法 健康雄性SD大鼠60只,采用随机数字表法分为两组,分别采用腹腔注射水合氯醛及气管插管吸入乙醚的方式进行麻醉,采用胰胆管逆行注射5%牛黄胆酸钠的方法建立大鼠SAP模型,观察两组大鼠的麻醉诱导时间、维持时间及苏醒时间的差异,比较两组大鼠麻醉过程中相关生理指标的差异.结果 腹腔注射组与乙醚吸入组比较,麻醉诱导时间、维持时间及苏醒时间均较长[(170±9)s,(164±7)min,(143±8)min;(9±2)s,(24±4)min,(2±1)min];血液pH值、氧分压(PO2)、呼吸频率均较低,而二氧化碳分压(PCO2)较高[pH:(7.29±0.04),PO2:(129.9±7.2)mmHg(1mmHg=0.133kPa),呼吸频率:(68±4)次/分,PCO2:(59.4±3.1)mmHg;pH:(7.52±0.04),PO2:(231.3±8.3)mmHg,呼吸频率:(81±3)次/分,PCO2:(34.3±2.5)mmHg].结论 建立大鼠SAP模型时,采用吸入麻醉的方法对大鼠相关生理指标的影响较小,可优先选择.
作者:朱洁芳;王智勇;王恒 刊期: 2017年第03期
目的 观察芍药苷对大鼠急性胰腺炎(SAP)合并肺损伤的保护作用及对核因子-κB(NF-κB)信号传导通路的影响.方法 将大鼠随机分为SAP组、假手术组和芍药苷组,每组26只.建立大鼠SAP模型,分别于建模后6、12h采用酶联免疫吸附试验法检测各组大鼠血清淀粉酶(AMY)、相关炎性因子[白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]、肺组织髓过氧化物酶(MPO)的表达水平,采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法检测肺组织NF-κB的mRNA表达水平,并比较肺组织的湿/干重比值变化及胰腺、肺的组织病理学改变.结果 SAP组和芍药苷组术后6h大鼠血AMY[(4267±1459)、(2681±822)比(1482±5240)U/L]、肺MPO[(5.47±1.28)、(4.39±0.57)比(2.17±0.37)U/g]、肺组织的湿/干重比值(5.13±0.62、4.54±0.34比4.41±0.21),显著高于假手术组,且术后12h差异更加明显.建模后12h胰腺组织病理评分[(7.44±1.57)比(11.30±2.27)分,P=0.021]、肺组织病理评分[(0.83±0.82)比(1.47±1.31)分,P=0.029]、血清TNF-α[(83.44±15.28)比(120.05±25.88)ng/L,P=0.042],IL-1β[(46.33±10.03)比(84.75±17.83)ng/L,P=0.036],IL-6[(72.77±18.51)比(92.81±19.92)ng/L,P=0.046]蛋白表达水平及NF-κB mRNA芍药苷组显著低于SAP组(P=0.002).结论 芍药苷可能通过抑制NF-κB信号通路降低相关炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α的释放,从而达到对SAP合并肺损伤的保护作用.
作者:丁月超;马超;余伟;王谦;蒙博;韩风;黄涛 刊期: 2017年第03期
目的 利用pAdEasy腺病毒载体系统构建人LIM矿化蛋白-1(LMP-1)重组腺病毒,检测其在体外培养大鼠骨髓基质干细胞(BMSCs)的促成骨作用并分析其分子机制.方法 应用聚合酶链反应(PCR)法扩增出人LMP-1全长基因,插入pShuttle-IRES-hrGFP-1中构建成腺病毒穿梭质粒pS-LMP-1-GFP,转化DH5a大肠杆菌,挑选细菌单克隆进行酶切鉴定和DNA测序;通过pS-LMP-1-GFP与质粒pAdEasy-1在BJ5183细胞中同源重组,得到携带人LMP-1基因的重组腺病毒载体(pAdLMP-1-GFP).经PacⅠ酶切暴露两侧长末端重复序列,脂质体介导线性化质粒转染AD293细胞进行包装得到重组腺病毒Ad-LMP-1-GFP.以腺病毒为载体,将 人LMP-1 基因体外转染于第3代大鼠BMSCs内,检测LMP-1基因在BMSCs的表达,分别观察转染后实验组与对照组碱性磷酸酶活性变化,Western blot检测骨钙素(OCN)和β-连环蛋白(β-catenin)的表达,评价LMP-1 基因的成骨能力及其分子机制.结果 成功获取人LMP-1基因,并包装成重组腺病毒.LMP-1基因能在BMSCs 中高效表达,转染后BMSCs的碱性磷酸酶活性增强,与对照组比较P=0.000,分别为0.096、0.116、0.118、0.119(0.110±0.011)和 0.045、0.057、0.056、0.054(0.053±0.005);骨钙素的表达显著升高,与对照组比较P=0.001,分别为0.661、0.767、0.651(0.693±0.064)和0.177、0.290、0.222(0.229±0.050);β-catenin的表达明显增强,与对照组比较P=0.002,分别为0.841、0.806、0.867(0.838±0.030)和0.185、0.236、0.266(0.229±0.040).结论 成功利用pAdEasy系统构建人LMP-1重组腺病毒载体,包装获得重组腺病毒.Ad-LMP-1-GFP转染BMSCs后,LMP-1基因能促进BMSCs向成骨细胞分化,并且可能通过β-catenin信号分子发挥作用.
作者:王秀利;崔福爱;殷力;王义生;蒋林栋;李邓 刊期: 2017年第03期
目的 观察丹参对高浓度铁离子环境下的MC3T3-E1小鼠前成骨细胞的凋亡、成骨分化、矿化能力的影响,并探讨其中的作用机制.方法 在培养基中加入200μmol/L的枸橼酸铁铵(FAC)模拟铁过载(F组),然后以75~300mg/L浓度梯度的丹参加入高铁培养液中(DF1、DF2、DF3组);茜素红染色法检测各组钙结节生成;流式细胞术检查细胞凋亡率改变;实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测各组成骨相关基因骨钙素(BGP)、Runt相关基因2(Runx2)、Ⅰ型胶原α链(COL1A) mRNA表达.用Western blot法检测磷酸化p38(p-p38)表达.结果 茜素红染色结果提示DF2组的钙结节生成率明显大于F组;在高铁培养环境中加了不同浓度丹参(DF1、DF2、DF3组)的细胞凋亡率小于高铁组(F组)[(2.68±0.60)%、(2.21±0.49)%、(1.35±0.11)%比(8.34±0.31)%,F=145.160,P=0.000];经过FQ-PCR检测,在高铁环境中加了不同浓度丹参组的BGP、Runx2、COL1A mRNA表达量均比高铁组明显增加(1.95±0.04、2.08±0.17、2.78±0.10比0.78±0.08;0.64±0.02、0.75±0.02、0.83±0.03比0.58±0.02;0.39±0.02、0.74±0.02、0.94±0.02比 0.35±0.03);p-p38蛋白的表达量高铁组低于高铁加丹参组(0.42±0.03 比0.30±0.01,F=126.370,P=0.000).结论 丹参能拮抗高浓度铁离子环境对MC3T3-E1细胞的成骨分化、矿化的抑制作用,并且减少细胞凋亡,其中的作用机制可能是丹参抑制了p38信号通路的激活.
作者:张晓;王啸;顾伯林;周湘明;杨帆;徐又佳 刊期: 2017年第03期
2008年6月至2016年1月,我们采用创面薄化联合异种脱细胞真皮基质(ADM)采用较深不愈合创面补植术治疗成人深Ⅱ度烧伤创面26例,报告如下.一、临床资料1.一般资料:本组26例,男20例,女6例,平均年龄38岁.致伤原因包括火焰烧伤18例,热液烫伤6例,电弧烧伤2例.
作者:王端祥;李华强;张青;曹建伟;王付勇;韩冬 刊期: 2017年第03期
胆囊癌是胆道系统常见的恶性肿瘤,其发现和患者就诊一般较晚,手术切除率低,疗效较差.淋巴转移是胆囊癌常见的转移方式,并且影响患者的手术方式和预后.加强对胆囊癌淋巴转移机制的基础研究,对于探索胆囊癌的治疗及改善预后具有重要意义.本文就胆囊癌淋巴转移的常见分子机制及淋巴管标志物等方面的研究进展作一综述.
作者:丛龙龙;刘德春;王林;耿智敏 刊期: 2017年第03期
目的 探讨心内直视手术对内质网应激(ERS)的影响以及不停跳心脏手术能否减轻ERS诱导的心肌炎性反应,具有更好的心肌保护效果.方法 择期行二尖瓣置换术(MVR)的风湿性心脏病40例患者,随机分为心脏不停跳组(不停跳组)和心脏停跳组(停跳组)两组,分别于体外循环(CPB)开始和CPB结束时取两组病例右心耳组织标本,检测标本葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、核因子-κB(NF-κB)p65 mRNA表达及蛋白相对含量.结果 两组组病例在CPB开始时GRP78、NF-κBp65 mRNA表达及蛋白相对量比较,差异无统计学意义(P=0.223,0.383;P=0.760、0.736);CPB结束时,对照组GRP78 mRNA及蛋白表达分别为2.31±0.44、0.096±0.024,实验组为1.56±0.29、0.061±0.021,对照组NF-κBp65 mRNA及蛋白表达分别为2.89±0.93、0.129±0.034,实验组为1.73±0.48、0.085±0.025,和CPB开始比较,两组GRP78、NF-κBp65 mRNA表达及蛋白量均明显升高(P=0.000,0.001;P=0.000,0.003;P=0.000,0.000;P=0.000,0.001),但不停跳组升高幅度较小(P=0.001,0.002;P=0.001,0.001).结论 心内直视手术能激活ERS,诱发心肌局部炎性反应;不停跳心脏手术能减轻ERS,减轻心肌的炎性反应.
作者:谢晓勇;郑宝石;何巍;罗程;黎玉贵;冯旭 刊期: 2017年第03期
髋关节发育不良(DDH)患者晚期需要全髋关节置换(THA)来恢复髋关节功能,Crowe Ⅱ、Ⅲ及Ⅳ型存在不同程度的髋臼缺损及肢体缩短等特点,治疗上存在诸多难点.一、资料与方法1.一般资料:本组29例患者,男13例,女16例,Crowe Ⅰ型8例,Ⅱ型12例,Ⅲ型9例.2.方法:患者取侧卧位,切一长10~12cm皮肤切口,暴露股骨颈并截骨,清理磨挫髋臼及股骨端扩髓,安装合适假体,髋臼缺损处植骨.
作者:赵良军;劳山;赵劲民;薄占东;花奇凯;罗高斌 刊期: 2017年第03期
目的 探讨去势抵抗性前列腺癌患者血清蛋白的异常表达并构建其诊断模型.方法利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术联合弱阳离子磁珠技术对48例前列腺癌患者(含去势敏感组、去势抵抗组)及21例正常对照组的血清多肽组份进行比较分析.结果应用化学计量学方法共筛选出28个具有明显差异的多肽组份,以此构建前列腺癌患者临床干预后的多肽指纹图谱,其中小二乘-支持向量机模型的预报准确率高(训练集预报率-100%,预报集预报率-100%).结论 以28个多肽组份构建前列腺癌患者的血清多肽指纹图谱,有助于诊断该疾病的临床转归.
作者:王道元;李宝辉;邹永强;闫书贤;高燕华;刘珂;董兴宝;陈永红;杨铁军 刊期: 2017年第03期
目的 探讨人破骨细胞中非受体型蛋白酪氨酸磷酸酶11(PTPN11)的表达及其作用机制.方法 收集不同年龄组健康志愿者(青年组28例:20~45岁;中年组33例:46~60岁;老年组31例:61~80岁)外周血单个核细胞,诱导成破骨细胞.将细胞分为对照组、空白组、Adv-PTPN11转染组.利用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测PTPN11、低氧诱导因子-1α(HIF-1α) mRNA的表达,利用Western blot检测PTPN11、HIF-1α蛋白的表达,噻唑蓝(MTT)法测定细胞存活,利用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定基质细胞衍生因子-1(SDF-1)、白细胞介素(IL)-6、巨噬细胞炎性蛋白-1α(MIP-1α)、B细胞激活因子(BAFF)分泌量,同时检测骨吸收.结果 与青年组(mRNA:4.468±1.441,蛋白:1.000±0.055)和中年组(mRNA:4.673±1.469,蛋白:1.021±0.076)比较,老年组破骨细胞中PTPN11 mRNA(7.510±1.941)和蛋白(1.556±0.123)表达明显上升.破骨细胞转染Adv-PTPN11后24、48、72h存活率比较差异无统计学意义.Adv-PTPN11转染组HIF-1α mRNA和蛋白的表达量明显高于对照组和空白组.Adv-PTPN11转染组SDF-1[(94.2±10.3)ng/ml]、IL-6[(25.1±3.2)ng/ml]、MIP-1α[(31.2±3.9)ng/ml]、BAFF[(39.8±3.7)ng/ml]表达量增高,同时骨陷窝数量和面积也增加.HIF-1α抑制剂YC-1处理则抑制破骨细胞中SDF-1[(73.8±7.5)ng/ml]、IL-6[(17.9±2.5)ng/ml]、MIP-1α[(19.8±1.6)ng/ml]、BAFF[(23.5±2.7)ng/ml]表达及骨吸收.结论 PTPN11可通过HIF-1α影响破骨细胞细胞因子表达和骨吸收.
作者:刘鸣;王丹;潘军伟 刊期: 2017年第03期
目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)在正常胃黏膜、慢性萎缩性胃炎伴低级别上皮内瘤变及胃癌中的表达与意义.方法 采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)法检测65例胃癌组织和35例癌旁胃组织(距癌灶5cm以上)及50例慢性萎缩性胃炎伴低级别上皮内瘤变标本中VEGF的表达,分析其过度表达与临床病理特征之间的关系.结果 正常胃黏膜、萎缩性胃炎伴低级别上皮内瘤变及胃癌中,VEGF主要为胞质染色,过度表达率分别为5.7%、36.0%、55.4%;与正常胃黏膜组织比较,VEGF在萎缩性胃炎伴低级别上皮内瘤变及胃癌组织中过度表达率明显增加(P=0.001);胃癌组织与慢性萎缩性胃炎伴低级别上皮内瘤变过度表达率差异无统计学意义;在胃癌组织中VEGF的表达程度与胃癌的侵犯深度、TNM分期明显相关(P=0.017).结论 VEGF可能参与了胃黏膜由慢性炎症、慢性萎缩性胃炎伴低级别上皮内瘤变向胃癌发展进程.
作者:朱志坚;马志杰;曹伟;张东娇;李元平;万灵燕;王爱民 刊期: 2017年第03期
目的 探讨膜联蛋白A1(ANXA1)与增殖细胞核抗原(PCNA)在胆管癌组织中的表达并分析其临床意义.方法 采用免疫组织化学技术检测ANXA1与PCNA在70胆管癌组织和15例非肿瘤胆道上皮组织中的表达.结果 免疫组织化学结果显示70例胆管癌、15例非肿瘤胆道上皮组织中ANXA1与PCNA阳性表达率分别为54.3%、13.3%和77.1%、33.3%.ANXA1与PCNA蛋白在胆管癌中的表达均明显高于非肿瘤胆道上皮组织(x2=11.170,P=0.001;x2=8.320,P=0.004).ANXA1蛋白表达与胆管癌的临床分期和组织学分级明显相关(x2=5.090,P=0.024;x2=6.090,P=0.047);胆管癌组织中PCNA蛋白表达与临床分期和组织学分级明显相关(x2=13.010,P=0.001;x2=6.660,P=0.017).ANXA1与PCNA表达呈正相关(r=0.250,P=0.036).结论 ANXA1与PCNA是反映胆管癌发生发展的重要生物学指标.
作者:刘兵;吕海涛;王晓雷;王文斌;王天阳;张腾飞;王子伟 刊期: 2017年第03期
目的 探讨3D打印技术在髋臼侧严重骨缺损的髋关节翻修术的临床疗效.方法 应用3D打印技术于PaproskyⅣ型髋臼骨缺损的复杂髋关节翻修手术11例.采集患者影像学数据并通过工作站重建CAD数据模型,转化并输出数据于3D打印机打印髋臼骨缺损模型模拟手术,同时通过髋关节翻修手术将打印的活性钛填充块修补缺损髋臼,达到髋关节的旋转中心解剖重建和髋关节假体植入.术后随访观察影像学资料和患髋Harris评分.结果 术前11例患髋Harris评分(46.6±10.7)分,影像学显示髋臼侧均有严重骨缺损,人工髋臼失稳移位.术后影像学显示髋臼侧骨缺损被打印的填充块修补,旋转中心解剖重建,翻修关节位置良好,术后6个月患髋Harris评分(85.2±4.5)分,近期临床疗效满意.结论 3D打印技术应用于髋臼侧PaproskyⅣ型骨缺损的髋关节翻修术,能够成功直观完成术前模拟手术,打印骨缺损髋臼填充块解剖修复髋臼,提高手术疗效和成功率.
作者:刘珂;刘晓潭;侯毅;刘云可;陈骁;郑稼 刊期: 2017年第03期
目的 观察淫羊藿苷对体外培养的成骨细胞增殖、分化及矿化的影响.方法 选用小鼠来源的MC3T3-E1细胞株作为成骨细胞前体细胞,采用终质量浓度为0、10-4、10-5、10-6、10-7、10-8mol/L的淫羊藿苷进行药物干预培养,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力;苏木素-伊红(HE)染色观察细胞形态及细胞生长密度;碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测成骨细胞ALP活性,评价成骨细胞早期分化能力;茜素红染色观察钙结节形成数量,评估成骨细胞矿化能力.结果 MTT结果显示,浓度为0、10-4、10-5、10-6、10-7、10-8mol/L的淫羊藿苷各组的吸光值分别为0.54±0.04、0.28±0.01、0.40±0.02、0.67±0.03、0.58±0.01、0.55±0.03,10-6mol/L组吸光度值明显高于其他组,差异有统计学意义(P=0.002);HE染色结果显示,正常成骨细胞呈典型的梭形、三角形、多角形等不规则形态分布,与空白对照组比较,在浓度为10-6mol/L组的细胞数量多,细胞分布密度大;浓度为10-4mol/L组整个视野下很难找到伸展开的成骨细胞.ALP活性检测结果显示,浓度为 0、10-4、10-5、10-6、10-7、10-8mol/L各组的ALP表达量分别是(1.75±0.11)、(0.85±0.35)、(1.50±0.21)、(2.80±0.12)、(2.10±0.36)、(1.80±0.23)U/g prot,10-6mol/L组中的成骨细胞ALP活性表达量高(P=0.001),10-4mol/L组表达量低(P=0.001),差异有统计学意义,10-8mol/L组的ALP活性略高于空白组,但差异无统计意义(P=0.292).茜素红染色结果显示,与对照组比较,10-6mol/L的淫羊藿苷显著促进成骨细胞矿化,有大量钙结节形成并积聚成团;10-4mol/L的淫羊藿苷组几乎未发现钙结节形成.结论 一定浓度的淫羊藿苷能促进成骨细胞增殖、分化及矿化.
作者:姜文涛;梅伟;王庆德;张振辉 刊期: 2017年第03期
目的 观察Kai1基因在由结直肠息肉进展至结直肠癌,以及结肠癌侵袭转移过程中表达水平的变化,探讨其临床意义.方法 通过免疫组织化学法检测Kai1在40例正常结直肠黏膜组织、80例结直肠腺瘤、40例结直肠癌(伴淋巴结转移者25例;不伴淋巴结转移者15例)中的表达;通过实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)方法探讨Kai1 mRNA的表达变化;并与临床病理特征比较分析.结果 免疫组织化学结果显示Kai1在结直肠癌的蛋白表达阳性18例(45.00%),明显低于结直肠腺瘤组(73例,91.25%)及正常肠黏膜组(40例,100.00%),差异有统计学意义(P=0.031);FQ-PCR结果显示Kai1 mRNA在结直肠癌、结肠腺瘤及正常结直肠黏膜组织中表达依次增高,分别为2.038±0.933、9.983±4.337、12.260±2.182 (F=11.960,P=0.015).Kai1蛋白和mRNA的表达与结直肠癌淋巴结转移相关(P=0.011).结论 Kai1蛋白和mRNA表达下调与结直肠癌的发生、发展明显相关.
作者:赵玉红;王爱民;耿焱;张东娇;陈健;刘海燕 刊期: 2017年第03期