董汉华;陈孝平;梁慧芳;张万广;张伟;靖凯;张峰
目的 检测Id1 mRNA在人前列腺癌(PCa)组织中的表达,探讨Id1 mRNA的表达与临床意义.方法 用SYBR Green Ⅰ嵌合荧光法进行实时逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),检测Id1mRNA在人正常前列腺、前列腺良性增生(BPH)和PCa组织中的相对定量,分析Id1 mRNA的相对含量与PCa临床病理参数间关系.结果 Id1 mRNA在PCa组织中的含量明显高于BPH组织(P<0.01).Id1 mRNA表达量与PCa的Gleason评分有明显相关性(r=0.9995,P<0.05).Id1 mRNA表达量高者,2年内发生浸润和转移的机率提高.结论 PCa组织中Id1 mRNA表达明显增高,与肿瘤分化程度成负相关,Id1 mRNA的高表达从转录水平反映了其与前列腺癌病情进展的关系;Id1 mRNA的实时定量检测有助于从转录水平对前列腺癌进行早期诊断并初步指导预后.
作者:周荣祥;韩保健;于小玲;徐晓慧;尚芳芳 刊期: 2007年第09期
目的 探讨MDm2和p53在胃肠道间质瘤(GISTs)中的表达及相关性.方法 采用免疫组织化学PV6000法检测52例GISTs中MDm2和p53的表达.结果 MDm2蛋白和p53蛋白阳性率分别为19.2%、48.1%,MDm2表达与肿瘤大小、发生部位、分级及病理性核分裂像有关(P<0.05).MDm2阳性组和阴性组5年生存率分别为40.0%和78.6%(P<0.05);p53蛋白阳性表达与肿瘤大小、部位、分级、病理性核分裂像和细胞密集程度有关,p53蛋白阳性组和阴性组5年生存率分别为56.0%和85.2%(P<0.05).结论 MDm2、p53表达与GISTs预后有关,可以作为GISTs预后的分子标记物.
作者:梁建芳;吴人亮;徐钧;郑绘霞;王宏坤 刊期: 2007年第09期
目的 探讨变异型IκBα(IκBαM)基因对人类多形性胶质母细胞瘤(GBM)细胞中基质金属蛋白酶(MMP)-2、-9表达的调控作用.方法 通过构建质粒、基因转染以及IκBαM蛋白表达的筛选,建立稳定表达IκBαM的人类GBM细胞株,运用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测细胞及肿瘤组织内MMP-2、MMP-9在RNA水平的表达;并将肿瘤细胞植入裸鼠皮下制作异位移植瘤生长动物模型,进一步通过免疫组织化学染色方法分析MMP-2、MMP-9的蛋白表达.结果 RT-PCR结果显示,体外试验中,MMP-2与对应GAPDH平均吸光度值的比值分别为1.450±0.180(G36△-W)、0.292±0.040(G36△-M)、1.187±0.140(G36△-P)和1.463±0.160(G36△);MMP-9与对应GAPDH平均吸光度值的比值分别为1.424±0.130(G36△-W)、0.275±0.020(G36△-M)、1.357±0.180(G36△-P)和1.608±0.240(G36△).在体内试验中,MMP-2与对应GAPDH平均吸光度值的比值分别为0.870±0.060(G36△-W)、0.024±0.010(G36△-M)、0.785±0.070(G36△-P)和0.686±0.070(G36△);MMP-9与对应GAPDH平均吸光度值的比值分别为0.768±0.010(G36△-W)、0.054±0.010(G36△-M)、0.802±0.020(G36△-P)和0.746±0.020(G36△).在体外和体内试验中,G36△-M组与其余各组之间的差异均有统计学意义(P<0.05),而其他3组间差异无统计学意义.体内试验肿瘤组织中,MMP-2及MMP-9的在G36△-M组中的染色显著低于G36△、G36△-W和G36△-P组;而在G36△、G36△-W和G36△-P三组间的表达差异无统计学意义.结论 IκBαM基因可以在分子及蛋白水平显著抑制人类恶性胶质瘤中MMP-2、MMP-9的表达,减弱肿瘤细胞的侵袭和浸润能力.
作者:吴建梁;史学芳;范振增;孔世奇;李鹏;扈玉华 刊期: 2007年第09期
目的 探讨P-gP、GST-π、Topo Ⅱ在脑胶质瘤中表达的相互关系以及其临床意义.方法 采用免疫组织化学技术链霉卵白素-过氧化物酶连结法(SP法)检测101例原发性脑胶质瘤组织中P-gP、GST-π和Topo Ⅱ在不同病理分级间(WHO Ⅰ级24例;Ⅱ级34例;Ⅲ级28例;Ⅳ级15例)的表达水平,评估三者间关系和临床意义.结果 P-gP、GST-π和Topo Ⅱ阳性表达率分别为62.4%、64.3%、59.4%.P-gP及GST-π表达水平在高级别(Ⅲ-Ⅳ级)胶质瘤显著高于低级别(Ⅰ~Ⅱ级)(P<0.05);Topo Ⅱ表达水平在高级别胶质瘤则显著低于低级别(P<0.05).各多药耐药因子共表达的比率分别为:P-gp+GST-π:44.6%,P-gp+Topo Ⅱ:19.8%,GST-π+Topo Ⅱ:17.8%;P-gp+Topo Ⅱ+GST-π:4.95%,两个或以上MDR基因产物共表达率为87.2%,显著高于单一基因产物表达率:P-gp(5.9%),GST-π(0.9%)及Topo Ⅱ(1.9%)(P<0.05).Topo Ⅱ阳性表达与P-gp、GST-π阳性表达呈显著负相关(P<0.01).P-gp阳性表达与GST-π阳性表达呈显著正相关(P<0.01).结论 原发性脑胶质瘤的多药耐药现象是由多个耐药因子共同参与作用的结果,多药耐药的发生在肿瘤细胞的病理分级间差异有统计学意义;同时检测三种耐药因子有助于优化临床化疗方案,提高化疗效果.
作者:梅文忠;何理盛;陈锦峰 刊期: 2007年第09期
急性脊髓损伤(ASCI)后,神经细胞死亡的方式不仅仅是坏死,同时细胞凋亡广泛存在[1,2].本研究旨在探讨Fas、Caspase-3基因与细胞凋亡的关系及在脊髓损伤发生发展中的作用.
作者:高万旭;程爱国;王相利 刊期: 2007年第09期
目的 观察肾钙敏感受体(CaSR)在特发性高钙尿症(IH)发病中的作用.方法 雄性遗传性高钙尿结石(GHS)大鼠和正常野生型SD大鼠各6只,相同的饮食和饲养条件下,检测各组大鼠血Ca2+、P5+、1,25(OH)2D3和连续2个24h尿Ca2+的水平,使用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肾组织钙敏感受体mRNA表达,PCR产物纯化后进行DNA直接测序.结果 两组大鼠血Ca2+、P5+、1,25-(OH)2D3水平相似,均在正常范围内,而GHS组平均24 h尿Ca2+排泄量为正常对照(NC)组的3.36倍[分别为(2.66±0.64)、(0.79±0.06)mg/d],两组比较差异有统计学意义(t=5.82,P<0.01);GHS组CaSR mRNA平均相对吸光度(A)值为1.354±0.108,NC组为0.602±0.218,差异有统计学意义(t=6.19,P<0.01);CaSR基因第7外显子区域cDNA测序结果与Genebank(Accession:NM-016996)公布的碱基序列比较,GHS组有4只大鼠存在第3072位碱基G/A替换,使第1024位谷氨酸(Glu)变为赖氨酸(Lys),其余2只和NC组均与Genebank公布的碱基序列一致.结论 肾组织CaSR mRNA高表达及其第7外显子Glu1024Lys替换可能是特发性高钙尿症发病的分子机制之一.
作者:王少刚;席启林;叶章群;胡东亮;白剑;陈志强;杨为民;刘继红 刊期: 2007年第09期
神经干细胞(NSCs)是一种具有自我更新及多向分化潜能的细胞,在胚胎及成体动物的中枢神经系统中都有存在.NSCs的发现不仅改变了人们对神经系统及其发育的固有观念,也深刻影响了对神经系统损伤及修复的认识.自其发现至今的数十年间,该项研究的发展已经有了长足的进步.然而目前我们对NSCs的研究成果并不足以使我们完整地刻画出这一细胞的形象,大量不得而知的细节限制了其在临床的应用,更多的研究停留在动物实验的阶段.现阶段对NSCs的研究集中在3个方面:细胞本身及其分化和细胞分泌产物的研究;受体对NSCs的反应;细胞移植后活体检测新技术的探索.这3个方面的研究对于跨学科合作有着更加强烈和深入的要求.在这里,谨对该研究领域所存在的一些问题进行总结,对未来的发展趋势做出展望.
作者:安沂华;张涵 刊期: 2007年第09期
基因治疗的关键是目的基因的高效转染和表达.我们采用2型重组腺相关病毒(rAAV2/EGFP)对人胰腺癌细胞PANC-1进行体外基因转移,观察EGFP基因能否在PANC-1中有效表达及其细胞毒性,探讨rAAV2介导目的基因转导胰腺癌细胞的效率.
作者:朱东明;李德春;张子祥;张克君;潘新亭 刊期: 2007年第09期
目的 观察雪旺细胞(SCs)和人胚神经干细胞(NSCs)共移植治疗帕金森病(PD)猴模型的疗效.方法 采用恒河猴自体SCs和人胚NSCs共同移植治疗PD猴,3只成年恒河猴偏侧部分损伤性PD模型采用3种不同的移植物,对照猴移植磷酸缓冲液(PBS),干细胞猴移植人胚NSCs,共移植猴移植SCs+NSCs.结果 猴行为学评分:在移植术后1个月,共移植猴中的各项指标有不同程度的恢复,而干细胞猴及对照猴无明显变化;2个月后,干细胞猴及共移植猴,恢复程度都在2分以上,术后4个月,共移植猴和干细胞猴已接近正常.PET示DAT的显像剂18F-FP-β-CIT在移植后2个月,共移植猴在正常侧(左侧)纹状体区呈明显的放射性浓聚,而在毁损侧(右侧)纹状体区放射性摄取也出现明显浓聚,干细胞猴毁损侧(右侧)纹状体区放射性摄取仍不明显;在移植后6个月,共移植猴和干细胞猴,DAT的显像剂在毁损侧(右侧)纹状体区放射性摄取都出现明显的浓聚,而对照猴仍无明显变化.移植区脑组织TH染色显示,对照猴中未见到TH阳性细胞,干细胞可见到有TH染色阳性细胞从移植区向周围迁移;而共移植猴可见到TH染色阳性细胞从移植区向周围迁移的数量明显增多,且细胞体积也较饱满.结论 SCs和NSCs共移植能有效的治疗PD猴模型,SCs可来源于患者自体的周围神经,能避免排异反应及伦理问题,可望在临床上推广应用.
作者:夏鹰;江澄川;丁忠良;汪洋;徐斌;管一晖 刊期: 2007年第09期
目的 建立一种不开颅的光化学诱导兔脑皮层梗死模型,以期为脑梗死疾病提供更为为仿真的实验研究手段.方法 兔30只,制备去除外板和板障而保留内板、直径为5 mm的颅骨骨洞,耳缘静脉注射荧光剂后应用LG-150B冷光源照射骨洞处30 min,24 h后进行5分制临床评价,48 h后处死取脑,常规病理切片.结果 模型制作成功率96.3%,病理切片显示梗死灶典型,可见组织片状坏死.结论 此模型建立方法方便可行,损伤小,维持了模型动物颅内环境的稳定,能更好地体现临床上脑梗死疾病的真实情况.
作者:游宇;赵振伟;王梁;白卉;马钰;董秀珍;高国栋 刊期: 2007年第09期
新型人工心脏瓣膜的研制及改进,动物体内植入是临床前评估不可少的重要环节[1,2],家猪的解剖及凝血特性与人相近,但体重增长过快为其不足,容易造成人工瓣膜失功及瓣周漏而影响其用于体内植入的远期评估[3].为了新型人工机械瓣膜体内植入远期评估研究的需要,本研究旨在建立小型猪人工二尖瓣植入远期存活模型.
作者:李德闽;张利东;申翼;王常田;任斌辉;牛冬梅;景华;黄楠 刊期: 2007年第09期
目的 利用体内、外迁移模型观察骨髓间充质干细胞对胶质瘤的趋向性.方法 体外应用圆环柱细胞共培养体系、Matrigel细胞球体共培养体系和Transwell双室培养体系模型观察BMSCs向胶质瘤细胞的趋瘤效应.建立颅内C6胶质瘤模型,将预先标记BrdU的BMSCs注射入对侧脑半球.免疫学方法检测BMSCs在胶质瘤内的分布.结果 3种体外模型从不同角度显示了BMSCs的胶质瘤趋向性的存在.体内经对侧注射的BMSCs向肿瘤侧发生迁移,主要分布于包括浸润区和肿瘤小灶在内的肿瘤与正常脑组织交界部位.结论 BMSCs具有明显的胶质瘤趋向性,可作为治疗胶质瘤新的侯选的基因药物投递系统.
作者:刘晓智;浦佩玉;康春生;李春晖;黄强;王广秀 刊期: 2007年第09期
目的 探讨应用聚合酶链反应(PCR)检测慢性非细菌性前列腺炎(CPPS)患者前列腺液(EPS)中细菌基因,并与CPPS患者的临床治疗效果做相关性分析.方法 以16SrRNA基因为靶序列,设计引物及寡核苷酸探针,采用PCR法检测标准菌株及135例CPPS患者前列腺液中细菌基因.所有CPPS患者均应用抗生素和中成药规范治疗,每2周为1疗程,每2周复查EPS常规1次,必要时适当调整药物.治疗3个月时,进行疗效评估.结果 135例CPPS患者中16SrRNA检测结果阳性为78例,阳性率为57.78%.16SrRNA阳性组患者有效率84.6%,阴性组有效率52.6%;16SrRNA阳性组患者疗效明显优于阴性组.结论 大部分CPPS患者的前列腺液中可以检测到细菌的16SrRNA基因,提示细菌感染在CPPS的发病中有重要作用.
作者:陈修德;赵勇;金讯波;夏庆华;蒋绍博;熊晖 刊期: 2007年第09期
肺缺血再灌注(I/R)损伤是肺移植早期和心脏转流术后肺功能障碍的重要原因,临床上主要表现为肺水肿和急性呼吸衰竭[1].我们过建立兔肺缺血再灌注损伤模型,观察盐酸戊乙奎醚(长托宁)抗肺I/R损伤作用,并探讨其机制.
作者:仲崇俊;张亚年;夏春秋 刊期: 2007年第09期
战、烧伤创面覆盖和修复问题成为战伤救治和后期康复的重点问题,而战、烧伤实验研究在创伤和创面修复上做了许多卓有意义的工作,其中目前研究热点就是以组织工程方法构建的活性皮肤替代物(living skin replacement)等研究.组织工程是一个新兴的前沿学科,其基本方法是:取少量组织,在体外分离、培养细胞,将一定量的培养细胞接种到具有一定空间结构的三维支架材料上继续培养,或将其植入体内,通过细胞生长繁殖,形成具有一定结构和功能的组织或器官.目前皮肤组织工程在其中居领先地位,迄今,已应用组织工程学方法研制出多种活性皮肤替代物并应用于临床.
作者:王钰;李恒宇;夏照帆 刊期: 2007年第09期
目的 观察应用新型输送系统经胸微创封堵膜周部室间隔缺损(VSD)效果.方法 11例膜周VSD患儿,年龄11月~12岁(中位年龄3.2岁),体重(15.8±6.4)kg,接受经胸微创非体外循环室间隔缺损封堵术.根据经食道超声心动图(TEE)选择合适的封堵器类型,然后自胸骨下端3~5 cm小切口入胸,TEE引导和实时监测下穿刺右心室前壁,建立轨道,释放封堵器关闭VSD.TEE评估封堵器的位置、对主动脉瓣、房室瓣的影响以及有无残存分流.结果 11例患儿均1次封堵成功,超声引导下释放封堵器的时间为5~12 min,无残余分流和主动脉瓣反流,心电监测无明显心律失常.术后3~5 d出院,随访5个月以上无残余分流、主动脉瓣反流以及周围组织卡压.结论 应用新型输送系统经胸微创非体外循环下置入室间隔缺损封堵器是一种安全、有效的治疗方法,有较大临床推广价值.
作者:邢泉生;庄忠云;泮思林;段书华;荣佑宝;李生德;侯可峰;武钦 刊期: 2007年第09期
目的 观察吡啡尼酮对大鼠异位气管移植物局部纤维化和气道闭塞的抑制作用及其对缺氧诱导因子(HIF)-1α表达的影响.方法 建立大鼠同种异体异位气管移植模型,受体鼠随机分为同基因移植组、异基因移植未治疗组和吡啡尼酮组,吡啡尼酮组给予吡啡尼酮(每日600mg/kg体重);其他组不给任何药物.移植后第28天处死受体鼠并取出移植物进行病理学、免疫组织化学及原位杂交检测.结果 未处理组气管移植物可观察到各种程度类似于闭塞性细支气管炎(OB)的病理改变.与未处理组比较,吡啡尼酮组标本局部纤维化程度[(42.45±19.09)%比(91.55±12.15)%]及Ⅰ型胶原1.86±0.12比4.51±0.48、Ⅲ型胶原2.55±0.37比10.60±1.26、HIF-1α4.48±0.43比9.34±0.62、转化生长因子(TGF)-β5.00±0.49比12.86±0.96和结缔组织生长因子(CTGF)4.33±0.64比11.83±0.96的表达明显受到抑制(P<0.01).结论 吡啡尼酮在大鼠异位气管移植模型中可能通过抑制HIF-1α的表达而抑制了OB的进展.
作者:徐进志;李野;张同;姜哲;夏求明 刊期: 2007年第09期
目的 研究细胞因子对肾癌细胞特异性抗原G250表达的影响.方法 单独或联合应用不同浓度的白细胞介素(IL)-2、干扰素(IFN)-α、IFN-γ刺激肾癌786-0细胞系,刺激24、48、96 h后,运用免疫组织化学、Western blot和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测G250抗原在肾癌786-0细胞上的表达.结果 IL-2、IFN-α、IFN-均能上调786-0细胞G250抗原表达,以IFN-γ作用强,上调作用具有浓度及时间依赖性.细胞因子联用能明显增强G250抗原表达的上调作用.结论 IL-2、IFN-α、IFN-γ能上调肾癌786-0细胞G250抗原表达,联合应用效果更大.提示细胞因子联合以G250抗原为靶点的免疫治疗有望成为晚期肾癌新的治疗途径.
作者:温儒民;郑骏年;武艺;刘俊杰;毛立军;薛松;李望;王军起;孔德领 刊期: 2007年第09期
目的 研究合成短肽S247对呼吸机相关性肺损伤凋亡的影响,探索其在肺损伤中的防护作用.方法 30只清洁级雄性SD大鼠随机分为3组:对照组(C组)、肺损伤组(Ⅰ组)和S247治疗组(S组),每组10只,大潮气量损伤性通气4 h建立呼吸机相关性肺损伤模型(呼吸参数:Vt=40 ml/kg体重,呼吸频率=80次/min,FiO2=21%),光镜下观察肺病理改变,测定肺湿/干比;收集肺泡灌洗液(BALF),考马思亮兰法测BALF中总蛋白含量,光境下行WBC计数,免疫组织化学检查肺组织Fas、Caspase-3蛋白的表达水平,TUNEL法检测肺组织细胞凋亡情况.结果 Ⅰ组肺病理改变明显,各组肺湿/干比、BALF中总蛋白含量、WBC计数差异都有统计学意义(P<0.05或P<0.01),Ⅰ组Fas、Caspase-3蛋白的表达水平(0.359±0.055;0.152±0.007)显著增高(P<0.01),凋亡指数(60.000±7.461)明显增加(P<0.01);在用S247后,Fas、Caspase-3蛋白的表达水平(0.240±0.062;0.146±0.004)显著下降(P<0.05),凋亡指数(47.857±3.716)有所减少(P<0.05).结论 S247能通过抑制细胞凋亡,有效降低呼吸机相关性肺损伤的程度.
作者:武庆平;王立奎;姚尚龙 刊期: 2007年第09期
目的 探讨外伤性癫痫的血清白细胞介素(IL)-2、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α的水平及意义.方法 应用放射免疫法检测56例外伤性癫痫患者的血清IL-2、IL-6、TNF-α水平,同时检测对照组45例.结果 外伤性癫痫血清IL-2、IL-6、TNF-α水平明显高于对照组(P<0.01).结论 IL-2、IL-6、TNF-α水平升高可能为外伤性癫痫的发病机制之一.
作者:陈海;唐洲平;林志雄 刊期: 2007年第09期