液压冲击脑损伤核因子-κB与胶质原纤维酸性蛋白相关性研究

扈玉华；卢圣奎；吴建梁；史学芳；邵恩得

关键词：颅脑损伤, 核因子-κB, 胶质原纤维酸性蛋白

摘要：目的探讨急性闭合性颅脑损伤(CCI)后胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)变化分布,以及与核因子-κB(NF-κB)变化的关系.方法28只SD大鼠随机分为对照组(n=4)与损伤组(n=24),使用改良的液压冲击装置制作闭合性颅脑损伤模型,使用免疫组织化学分别测试损伤后不同时间点脑组织内NF-κB与GFAP的变化.结果损伤后1 h,散在的NF-κB的免疫反应阳性细胞在病灶内可以观察到,损伤后24 h,NF-κB阳性反应遍布整个脑组织切片(吸光度90.2±2.2);损伤后6 h,病灶内GFAP表达开始增强(吸光度29.08±1.69),损伤后5 d,病灶内仍有大量的GFAP阳性表现(吸光度53.79±2.11),而NF-κB的反应明显减少.结论NF-κB部分参与了颅脑损伤后GFAP表达,抑制NF-κB的表达,将一定程度上抑制GFAP表达.

中华实验外科杂志相关文献

肝细胞癌GSTP1基因启动子区甲基化的研究

基因启动子区异常甲基化抑制转录是基因失活的又一机制,也是人类肿瘤发生的重要机制之一[1].肝细胞癌(HCC)发生的分子机制仍不十分清楚.我们采用甲基化特异性PCR(MSP法)检测了HCC中GSTP1基因启动子甲基化,探讨其在HCC发生中作用.

作者：杨卫富；李德春；张子祥刊期： 2005年第10期
膀胱白斑的超微病理学研究

目的探讨膀胱白斑的超微病理变化及其临床意义,为临床诊断治疗提供可靠依据.方法取52例膀胱白斑病灶组织,在电子显微镜下观察其超微病理学改变.同时取病灶旁正常膀胱黏膜12例作对照.结果膀胱白斑组织电子显微镜下改变显著,表面由多层鳞状上皮细胞组成,胞核较幼稚,核仁明显,胞浆内张力原纤维丰富,36例上皮细胞胞浆内可见糖原储积,14例糖原颗粒散在分布,上皮细胞之间的间隙较宽,细胞表面均有丰富的指状突起,相邻细胞以指状突起相连,连接部位可见桥粒结构.上皮基底部形成乳头状结构.结论电子显微镜检可更加清晰的显示膀胱白斑的超微病理变化,且可提示病变程度、发病趋势、细胞增殖活跃程度等,是膀胱白斑的重要诊断依据.

作者：唐秀英；叶章群；官阳；唐敏；李良玉刊期： 2005年第10期
腹主动脉瘤与尿激酶原型纤溶酶原激活剂及其Ⅰ型抑制剂的关系

腹主动脉瘤(AAA)是一种可危及生命的大动脉疾病,目前具体发病机制不明确.现在研究发现尿激酶原型纤溶酶原激活剂(u-PA)、纤溶酶原激活剂抑制剂Ⅰ(PAI-Ⅰ)在AAA发病中有一定作用,但其作用机制尚不清楚[1,2].我们采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学技术研究瘤壁组织中u-PA和PAI-1的mRNA和蛋白变化,探讨它们与AAA的相关性.

作者：王卓青；王深明；殷恒讳；黄雪玲刊期： 2005年第10期
突变k- ras基因修饰的树突状细胞疫苗的抗肿瘤作用

目的探讨腺病毒介导的突变k-ras基因修饰的树突状细胞疫苗在体内的抗肿瘤作用.方法将突变k-ras基因修饰的DC经腹腔注射免疫小鼠(5×105/只),1次/周,共2次,随后将肿瘤细胞接种于皮下,观察DC能否诱发机体的免疫保护.结果突变k-ras基因修饰的DC疫苗组Lewis肺癌(3LL)移植瘤生长明显延缓,肿瘤体积显著低于空载体组、DC组和对照组(P＜0.05),而抑瘤率显著高于空载体组、DC组和对照组(P＜0.05).突变k-ras基因修饰的DC疫苗组Lewis肺癌(3LL)移植瘤肺转移率(2/10,20%)显著低于空载体组(6/10,60%)、DC组(6/10,60%)和对照组(8/10,80%,P＜0.05);肺部转移灶数目亦显著少于空载体组、DC组和对照组(P＜0.05).结论突变k-ras基因修饰的DC疫苗能有效诱导机体产生特异的抗肿瘤免疫反应,抑制Lewis肺癌生长和远处转移.

作者：赵峰；周清华；陆燕蓉；张洁；王建军刊期： 2005年第10期
一氧化氮在犬离体胰腺低温灌注与保存中的作用

目的探讨一氧化氮(NO)对犬胰腺低温灌注及保存中缺血再灌注损伤的影响.方法在EC(Euro Collin)液中分别加用L-精氨酸(L-Arg,200 mg/kg体重)、N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME,10mg/kg体重)和生理盐水,分别对犬离体胰腺节段进行低温灌注保存(灌注量为30～50ml,温度为0～4℃,时间为24 h),应用犬胰节段移植模型,测定移植后犬血清中脂肪酶、淀粉酶含量,测定移植胰腺组织中髓过氧化酶(MPO)活性、一氧化氮(NO)含量、一氧化氮合酶(NOS)及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA的表达情况.并进行组织学观察.结果血清脂肪酶,L-Arg处理组＜对照组＜L-NAME处理组,差异有统计学意义(P＜0.05).移植后12 h,胰腺组织中NO含量:L-Arg处理组(0.51±0.11)μmol/L＞对照组(0.31±0.06)μmol/L＞L-NAME处理组(0.17±0.04)μmol/L;NOS活性:L-Arg处理组(3.13±0.19)U/ml＞对照组(2.37±0.20)U/ml＞L-NAME处理组(1.68±0.20)U/ml;iNOS mRNA的表达:L-Arg处理组(0.89±0.22)μmol/L＞对照组(0.63±0.18)μmol/L＞L-NAME处理组(0.49±0.20)μmol/L,差异有统计学意义(P＜0.05);L-Arg处理组胰小叶间质水肿和胰小叶内中性粒细胞浸润较轻.结论NO对犬胰腺低温灌注及保存中缺血再灌注损伤具有保护作用.

作者：原春辉；刘永锋；李桂臣；梁健；何三光刊期： 2005年第10期
腹腔镜下Marlex网片水平捆扎胃体对犬体重的影响

医疗减肥一直是人们的愿望,通过手术达到减肥和控制体重的目的是我们努力的方向,合适的动物模型是检验此种手术方式是否有效的重要参数.我们设计了一种新型胃腔捆扎模型来对此项工作进行研究.

作者：郭晓东；孙建军；陈新民；樊少敏；王少柏；李卫民；李刚；刘捷；桂云昌；赵菊萍；王宁刊期： 2005年第10期
多孔碳酸钙陶瓷的细胞相容性研究

目的探讨多孔碳酸钙陶瓷(PCCC)的细胞相容性.方法采用浸提法制备多孔碳酸钙陶瓷(PCCC)生理盐水和培养液浸提液,浸提液体外培养L929小鼠成纤维细胞,进行细胞形态学观察,采用MTT法测定细胞增殖率并进行细胞毒性分级;采用分光光度法进行溶血试验.结果培养期细胞大量增殖,形态良好,多孔碳酸钙陶瓷(PCCC)的细胞毒性分级为Ⅰ级,对健康人血的溶血率＜5%,存在轻微的细胞毒性和溶血作用.结论多孔碳酸钙陶瓷(PCCC)细胞相容性好,符合植入人体生物材料的相关要求.

作者：谭金海；陈振光；魏任雄；王会学；熊健刊期： 2005年第10期
胃癌表型与5p15.33位点等位基因丢失相关性研究

目的探讨胃癌5p15.33区微卫星标记杂合性缺失(LOH)与临床病理学表型的相关性.方法抽提80例胃癌标本及其配对正常胃黏膜中基因组DNA,应用4个微卫星标记对5p15.33区进行LOH检测并与Lauren分型等临床病理学指标分析.结果有76例临床信息齐全病例纳入统计分析.5p15.33区4个微卫星标记平均信息性病例比例为71.05%.其中31.58%(24/76)病例至少一个位点检测到LOH,以D5S2849位点LOH频率高(37.25%).5p15.33位点LOH以肠型胃癌多见(P＜0.01),与年龄、性别、部位、肿瘤大小、TNM分期及有无淋巴结转移无明显关系.结论5p15.33区可能存在控制胃癌形态学表型的候选抑癌基因,但该基因可能不是决定其他临床表型的主要基因.

作者：于颖彦；计骏；陆云；步磊；刘炳亚；朱正纲；林言箴刊期： 2005年第10期
Survivin在结直肠癌中的表达及其意义

目的探讨Survivin基因在结直肠癌中的表达及其意义.方法应用免疫组织化学(SP)法和TdT介导的dUTP缺口末端标记技术原位观察48例结直肠癌患者的癌组织、癌旁组织和正常组织中Survivin蛋白的表达和细胞凋亡.结果癌组织Survivin的阳性表达相对含量(PU)值(38.76±5.14)明显高于癌旁(25.17±7.26)和正常组织(0.57±0.03),差异有统计学意义(t=2.54,P＜0.05),正常大肠黏膜中极少见Survivin蛋白表达;癌旁和癌组织凋亡指数(AI)分别为(7.51±2.63)%和(4.65±1.76)%,两者差异有统计学意义(t=2.18,P＜0.05);Survivin蛋白的阳性表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小无相关性(P＞0.05),与癌组织的分化程度、淋巴结转移和Dukes分期相关,低分化、有淋巴结转移和Dukes C/D期的Survivin蛋白表达显著高于相关组别(P＜0.05).结论Survivin在结直肠癌组织中表达上调,Survivin表达可抑制结直肠癌的细胞凋亡,这可能是结直肠癌发生、发展的有关因素;Survivin的表达与结直肠癌的恶性生物学行为有关.

作者：谭海燕；刘军；邬善敏刊期： 2005年第10期
CEA启动子启动双自杀基因CD/TK重组AdEasy XL腺病毒构建

目的构建含有CEA启动子(CEA promoter,Cp)启动的双自杀基因CD与TK的复制缺陷型腺病毒.方法设计带有限制性内切酶酶切序列的PCR引物.在2μl T4 DNA ligase作用下,Cp插入pAdTrack(pAT)的MCS,形成pAT.Cp;CD插入pAT.Cp的MCS,形成pAT.Cp.C;TK插入pAT.Cp.C的MCS,形成pAT.Cp.C.T.5 μg pAT.Cp.C.T经4 μl Pme Ⅰ线化后,转化BJ5183-AD-1,1μl PacⅠ酶切鉴定.重组AdEasy质粒转化XL10-Gold细胞,大量扩增提取纯化,转染5 × 105 AD-293细胞,荧光显微镜观察,制备带有Cp.C.T重组腺病毒(recombinant adenovirus with Cp.C.T,RA-Cp.C.T),测定病毒滴度.结果pAT.Cp,pAT.Cp.C,pAT.Cp.C.T双酶切以及PCR均见长约500 bp的Cp,1 300 bp的CD,1 100 bp的TK.对照质粒DNA转化BJ5183-AD-1效率为7.36×106 cfu/μg.线化pAT.Cp.C.T转化BJ5183-AD-1,形成重组AdEasy质粒DNA,Pac Ⅰ酶切见典型长约3.0或4.5kb与30.0kbDNA片断.重组质粒转染AD-293出现绿色荧光.RA-Cp.C.T滴度为5.67×107 pfu/ml.结论RA-Cp.C.T构建正确;AdEasy XL腺病毒载体系统转导Cp.C.T具有高效性,易于观察转染效果.

作者：王天宝；汪建平；董文广；钟女奇；周军刊期： 2005年第10期
一步法联合冻存提高大鼠胰岛冻存质量的研究

目的探讨提高大鼠胰岛冻存质量的方法,以期为建立胰岛库奠定基础.方法将受体鼠分为实验组A组:即一步法联合冻存的胰岛移植组;对照组B组:新鲜的胰岛移植组;对照组C组:逐步法冻存的胰岛移植组.观察3组之间胰岛收获率,活性及移植后效果等方面的差异.结果纯化后收获大鼠胰岛每只(826.87±93.24)IEQ.A组平均胰岛收获率为(87±4)%,高于C组的胰岛收获率(81±4)%.A组和C组经过胰岛刺激素释放实验后均有较B组高的基础胰岛素释放量,但刺激指数则明显低于B组的637.3±39.5.胰岛移植入糖尿病鼠受体后,A组和B组在移植后1周即恢复血糖为正常值,并维持到观察结束.而C组中则需要较长时间纠正血糖到正常.移植(2 011.14±114.22)IEQ胰岛在A组和B组可达到100%纠正糖尿病.结论采用全新的细胞内低温保存液(HTS)结合细胞冻存液(DMSO)对大鼠胰岛进行一步法冻存取得了明显优于用DMSO逐步冻存的效果.

作者：周毅；许评；刘晓岭；李爱东；宋春芳刊期： 2005年第10期
心脏直视手术患者胸骨正中切口细菌学研究

我们采用常规细菌检测法,探讨心脏直视手术患者术前、术中及术后皮肤表面、切口内及深部组织的污染情况,为术后外科伤口感染的预防提供依据.

作者：周嫣；叶文琴；徐志云；陈艳琳；余丽群刊期： 2005年第10期
黏附分子T-cadherin表达对C6细胞恶性特性的影响

目的探讨T-cadherin分子表达对胶质母细胞瘤C6细胞的恶性生物学特征的影响.方法C6细胞分别转染pcDNA3.T-cadherin和pcDNA3表达质粒后,筛选3个表达不同水平T-cadherin的C6克隆和2个不表达T-cadherin的C6克隆,研究T-cadherin分子表达水平对C6细胞的细胞黏附、迁移及聚集能力的影响.结果与不表达T-cadherin的C6细胞相比,表达T-cadherin的C6细胞在附着后1 h和4 h时的细胞黏附能力均显著增强,分别增强61.2%和25.1%(P＜0.01),而其细胞迁移能力平均下降72.6%(P＜0.010).同时,T-cadherin表达诱导显著的同源细胞聚集,聚集指数平均下降52.4%(P＜0.01).结论T-cadherin分子表达显著抑制胶质母细胞瘤C6细胞的恶性生物学特性.

作者：黄志勇；罗钒；陈孝平；吴在德刊期： 2005年第10期
人胆囊癌裸鼠皮下瘤模型的建立

胆囊癌是胆道系统常见的恶性肿瘤[1].我们在建立人胆囊癌细胞系GBC-SD的基础上[2],建立了实用的人胆囊癌裸鼠皮下瘤模型,并对其生长特性及GBC-SD细胞系的致瘤性进行了初步观察.

作者：赵志伦；王占民；刘博；刘军；吴晓鹏；马道新刊期： 2005年第10期
葛根素在体外模拟脑缺血再灌注诱导的神经元损伤中的保护作用

目的探讨葛根素在体外模拟脑缺血再灌注诱导的神经元损伤中的保护作用及作用机制.方法培养N2a细胞,模拟缺血90 min,加入葛根素后正常培养24 h,采用细胞增殖实验观察细胞的生存能力,采用Annexin-V染色法检测早期细胞凋亡程度,收集培养上清分析LDH酶活性反应细胞膜通透性;同时检测Caspase-3的活性.结果葛根素能显著提高N2a细胞模拟缺血再灌注24 h后的存活率;显著降低培养液中LDH活性;显著降低缺血再灌注的N2a细胞的凋亡程度(P＜0.01);与此同时,葛根素可显著降低缺血再灌注诱导的Caspase-3的活性(P＜0.01).结论葛根素具有神经保护作用,可显著抑制脑缺血再灌注诱导的N2a细胞凋亡,其作用机制与显著抑制Caspase-3的活性有关.

作者：陈娟；陈庆；肖卫东；周洁；冯友梅刊期： 2005年第10期
伽玛刀照射不同形态猫视神经后视神经病理学的变化

我们应用不同的伽玛射线剂量分别对猫正常和压迫的视神经进行照射,照射后5个月进行光镜和电镜下观察其病理学的变化.

作者：刘如恩；赵洪洋；姜晓兵；朱贤立；赵沃华刊期： 2005年第10期
逆转录病毒携带白细胞介素-12转染树突状细胞体外诱导特异免疫杀伤肝癌细胞

目的探讨逆转录病毒携带白细胞介素(IL)-12转染树突状细胞(DC)体外诱导免疫杀伤肝癌细胞的效能及其机制.方法感染指数(MOI)为100,含IL-12的重组逆转录病毒修饰肝癌患者外周血DC(DC-IL-12),酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测DC-IL-12(5×103个/ml)培养上清中IL-12和γ-干扰素(IFN-γ)水平,以冻融肝癌细胞株HepG2(1×107个/ml)所获得的肿瘤相关抗原(TAA)刺激DC-IL-12,MTT法检测TAA负载的DC-IL-12刺激同源T淋巴细胞(1×105个/ml)增殖分化能力,细胞毒试验检测DC-IL-12诱导的细胞毒T淋巴细胞(CTL)及其上清液对HepG2肝癌细胞株杀伤作用,ELISA法检测CTL上清液IFN-γ水平.结果DC经IL-12基因修饰后48h分泌高水平IL-12(24.35±5.40)ng/L及IFN-γ(725 30)ng/L,均显著高于未转染DC组(P＜0.01及P＜0.05).DC-IL-12诱导的CTL及其上清液对HepG2均有显著杀伤作用,杀伤率显著高于未转染DC组,分别为(82.43±8.70)%vs(57.4±4.3)%(P＜0.01)和(76.45±8.50)%vs(18.23±5.30)%(P＜0.01),DC-IL-12诱导的CTL上清液IFN-γ水平显著高于未转染DC组,分别为(1125.0±32.7)ng/L vs(281.3±14.7)ng/L(P＜0.01).结论IL-12基因修饰增强DC体外诱导自体T淋巴细胞产生特异性抗肝癌免疫,其机制与IL-12基因修饰促进DC分泌IL-12、增强T淋巴细胞活化及分泌IFN-γ密切相关.

作者：刘晓平；李宝金；张超刊期： 2005年第10期
丁二醇改性戊二醛鞣制的牛颈静脉带瓣管道重建犬右室流出道

戊二醛固定的生物材料存在易钙化,具有细胞毒性作用及耐久性差等缺点,我们用2,3-丁二醇对戊二醛固定的牛颈静脉改性处理,将其连接于犬的右室-肺动脉间进行长期观察,旨在评价这种改性方法对血流动力学性能的影响.

作者：张竞超；吴忠仕；胡建国刊期： 2005年第10期
三氧化二砷对人脑胶质瘤生长的抑制作用

目的观察三氧化二砷(As2O3)对人脑胶质瘤细胞增殖抑制作用,探讨以As2O3治疗胶质瘤的可行性.方法将不同浓度As2O3(浓度分别为:0、0.5、1、2、3和4μmol/L)分别加入体外培养的TJ905人多形性胶质母细胞瘤,通过噻唑蓝(MTT)比色法检测体外细胞增殖率、PCNA染色检测细胞增殖活性、TUNEL法检测原位细胞凋亡和Western印迹检测bcl-2蛋白表达水平.结果与对照组相比,治疗组TJ905细胞增殖明显下降,且各组差异均有统计学意义(P＜0.01),TUNEL法表明细胞凋亡指数上升(P＜0.01);Western印迹显示凋亡相关基因bcl-2蛋白表达水平呈下降趋势.结论As2O3具有抑制人脑恶性胶质瘤细胞增殖的作用,可能成为临床治疗胶质瘤的候选化疗药物之一.

作者：夏之柏；齐铁伟；陈晓雷；张恒；石忠松；陈昆；黄正松刊期： 2005年第10期
超声波对猪前脂肪细胞体外培养与增殖的影响

目的观察超声波对前脂肪细胞体外培养与增殖的影响,论证超声辅助吸脂术后前脂肪细胞作为脂肪组织工程种子细胞的可行性.方法将经过超声波作用后(8 min,3 w/cm2)的猪前脂肪细胞进行体外培养,并每隔2 d测定其细胞数量及脂质含量,观察其细胞增殖速率及脂质含量的变化,与正常对照组相比较.结果实验组细胞贴壁时间为1～2 d,细胞倍增时间为72 h,脂滴出现时间为培养后6 d,脂质测定时其吸光度峰值为0.32,而正常对照组各项对应指标分别为6～24 h、36 h、4 d,0.68;说明经超声波处理的猪前脂肪细胞体外培养有延迟贴壁、细胞增殖速率减缓、脂质含量减少等改变.结论超声波对前脂肪细胞的增殖分化有明显的抑制作用,经超声波处理的前脂肪细胞不宜用作种子细胞.

作者：李爱林；张杰；龙道畴；张孝斌刊期： 2005年第10期