谭金海；陈振光；魏任雄；王会学；熊健
戊二醛固定的生物材料存在易钙化,具有细胞毒性作用及耐久性差等缺点,我们用2,3-丁二醇对戊二醛固定的牛颈静脉改性处理,将其连接于犬的右室-肺动脉间进行长期观察,旨在评价这种改性方法对血流动力学性能的影响.
作者：张竞超；吴忠仕；胡建国 刊期： 2005年第10期
目的探讨T-cadherin分子表达对胶质母细胞瘤C6细胞的恶性生物学特征的影响.方法C6细胞分别转染pcDNA3.T-cadherin和pcDNA3表达质粒后,筛选3个表达不同水平T-cadherin的C6克隆和2个不表达T-cadherin的C6克隆,研究T-cadherin分子表达水平对C6细胞的细胞黏附、迁移及聚集能力的影响.结果与不表达T-cadherin的C6细胞相比,表达T-cadherin的C6细胞在附着后1 h和4 h时的细胞黏附能力均显著增强,分别增强61.2%和25.1%(P＜0.01),而其细胞迁移能力平均下降72.6%(P＜0.010).同时,T-cadherin表达诱导显著的同源细胞聚集,聚集指数平均下降52.4%(P＜0.01).结论T-cadherin分子表达显著抑制胶质母细胞瘤C6细胞的恶性生物学特性.
作者：黄志勇；罗钒；陈孝平；吴在德 刊期： 2005年第10期
目的研究乳腺癌组织中黏着斑激酶(FAK)和PTEN蛋白的表达与肿瘤分化、浸润转移的关系,揭示细胞信号转导系统与乳腺癌发生发展的关系,同时为乳腺癌的基因治疗提供依据.方法应用免疫组织化学SP法检测92例乳腺癌组织和30例乳腺良性病变组织中FAK、PTEN的表达情况及其与临床病理参数的关系.结果(1)在92例乳腺癌中FAK和PTEN的阳性表达率分别为69.6%和51.1%,与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.01);(2)FAK表达与乳腺癌肿瘤大小、腋窝淋巴结转移、临床分期呈正相关(P＜0.01),PTEN表达与乳腺癌组织学分级、腋窝淋巴结转移、临床分期呈负相关(P＜0.05);(3)乳腺癌组织FAK表达与PTEN表达呈负相关(P＜0.01).结论乳腺癌FAK的高表达和PTEN的缺失表达与肿瘤发生发展、浸润转移密切相关;检测这些指标,有助于判断乳腺癌的恶性程度及生物学行为.
作者：黄玉钿；张声；郑曦；吴钦穗；黄双月；杨发端 刊期： 2005年第10期
基因启动子区异常甲基化抑制转录是基因失活的又一机制,也是人类肿瘤发生的重要机制之一[1].肝细胞癌(HCC)发生的分子机制仍不十分清楚.我们采用甲基化特异性PCR(MSP法)检测了HCC中GSTP1基因启动子甲基化,探讨其在HCC发生中作用.
作者：杨卫富；李德春；张子祥 刊期： 2005年第10期
目的观察三氧化二砷(As2O3)对人脑胶质瘤细胞增殖抑制作用,探讨以As2O3治疗胶质瘤的可行性.方法将不同浓度As2O3(浓度分别为:0、0.5、1、2、3和4μmol/L)分别加入体外培养的TJ905人多形性胶质母细胞瘤,通过噻唑蓝(MTT)比色法检测体外细胞增殖率、PCNA染色检测细胞增殖活性、TUNEL法检测原位细胞凋亡和Western印迹检测bcl-2蛋白表达水平.结果与对照组相比,治疗组TJ905细胞增殖明显下降,且各组差异均有统计学意义(P＜0.01),TUNEL法表明细胞凋亡指数上升(P＜0.01);Western印迹显示凋亡相关基因bcl-2蛋白表达水平呈下降趋势.结论As2O3具有抑制人脑恶性胶质瘤细胞增殖的作用,可能成为临床治疗胶质瘤的候选化疗药物之一.
作者：夏之柏；齐铁伟；陈晓雷；张恒；石忠松；陈昆；黄正松 刊期： 2005年第10期
目的探讨新型内皮细胞抑制素-血管内皮细胞生长抑制因子151融合基因(hENDOVEGI151)治疗胃癌的作用机制.方法应用重复感染系数(MOI=100)的重组腺病毒Ad hENDOVEGI151转染胃癌SGC-7901、MKN-28细胞和血管内皮ECV-304细胞4 h后,继续培养6 d,噻唑蓝(MTT)比色法检测第1至6天3种细胞的存活率;流式细胞仪(FCM)丙化碘锭(PI)单染色法检测转染后48 h胃癌和内皮细胞凋亡的情况;应用DNA片断化试验分析转染后12、24、36、48 h时ECV-304凋亡情况;应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹法(Western blot)检测融合基因转染对SGC-7901表达促血管生成因子VEGF165的影响.结果AdhENDO-VEGI151治疗强烈抑制ECV-304增殖,72 h抑制率为55.18%,144 h抑制率89.86%;FCM检测出现明显凋亡峰,凋亡细胞约占(20.70±5.83)%,并且出现G1期阻滞(65.41±2.38)%和S期明显减少(21.81±1.52)%,与Ad LacZ组和对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01);转染组细胞DNA出现典型的梯形条带,尤以转染后24～36 h为明显,Ad LacZ组及对照组DNA无裂解.Ad hENDO-VEGI151转染对胃癌细胞无直接毒性作用,但明显下调胃癌细胞VEGF165的表达水平.结论Ad hENDO-VEGI151治疗一方面强烈抑制内皮细胞增殖,诱导凋亡;另一方面抑制胃癌细胞表达VEGF165,多角度联合抑制肿瘤新生血管形成,使肿瘤细胞因缺血而发生大量凋亡.
作者：李喆；方国恩；华积德；毕建威；潘欣；戚中田 刊期： 2005年第10期
目的探讨重组大鼠转化生长因子-β1基因(pcDNA3+TGF-β1)单独转染及其与重组大鼠胰岛素样生长因子-1基因(pAT153+IGF-1)共转染兔软骨细胞后细胞增殖及所分泌的TGF-β1因子、IGF-1因子、Ⅱ型胶原的变化.方法兔软骨细胞体外分别用pcDNA3+TGF-β1单转染、pcDNA3+TGF-β1和pAT153+IGF-1共转染,筛选阳性克隆后,进行原位杂交、免疫组织化学、免疫荧光检测、流式细胞仪检测、3H-TdR(3H标记的胸腺嘧啶脱氧核苷)检测.结果基因转染组与空白组相比,TGF-β1、IGF-1、Ⅱ型胶原的含量均明显提高,空白组、基因单转染组、基因双转染组软骨细胞位于S期的比例分别为5.6%、33.4%、40.1%,差异有统计学意义(P＜0.05).结论基因pcDNA3+TGF-β1、pAT153+IGF-1转染软骨细胞后,细胞分泌的TGF-β1、IGF-1及Ⅱ型胶原显著增多,细胞增殖明显增强,上述基因转染有助于软骨细胞活力的提高;pcDNA3+TGF-β1和pAT153+IGF-1双基因共转染软骨细胞后,细胞分裂增生活跃程度及分泌的TGF-β1、IGF-1和Ⅱ型胶原含量高于pcDNA3+TGF-β1单基因转染,多基因共转染作为将来骨性关节炎基因治疗的方法,其治疗效果可能会优于单基因转染.
作者：向川；卫小春；杜靖远 刊期： 2005年第10期
目的探讨急性闭合性颅脑损伤(CCI)后胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)变化分布,以及与核因子-κB(NF-κB)变化的关系.方法28只SD大鼠随机分为对照组(n=4)与损伤组(n=24),使用改良的液压冲击装置制作闭合性颅脑损伤模型,使用免疫组织化学分别测试损伤后不同时间点脑组织内NF-κB与GFAP的变化.结果损伤后1 h,散在的NF-κB的免疫反应阳性细胞在病灶内可以观察到,损伤后24 h,NF-κB阳性反应遍布整个脑组织切片(吸光度90.2±2.2);损伤后6 h,病灶内GFAP表达开始增强(吸光度29.08±1.69),损伤后5 d,病灶内仍有大量的GFAP阳性表现(吸光度53.79±2.11),而NF-κB的反应明显减少.结论NF-κB部分参与了颅脑损伤后GFAP表达,抑制NF-κB的表达,将一定程度上抑制GFAP表达.
作者：扈玉华；卢圣奎；吴建梁；史学芳；邵恩得 刊期： 2005年第10期
目的探讨葛根素在体外模拟脑缺血再灌注诱导的神经元损伤中的保护作用及作用机制.方法培养N2a细胞,模拟缺血90 min,加入葛根素后正常培养24 h,采用细胞增殖实验观察细胞的生存能力,采用Annexin-V染色法检测早期细胞凋亡程度,收集培养上清分析LDH酶活性反应细胞膜通透性;同时检测Caspase-3的活性.结果葛根素能显著提高N2a细胞模拟缺血再灌注24 h后的存活率;显著降低培养液中LDH活性;显著降低缺血再灌注的N2a细胞的凋亡程度(P＜0.01);与此同时,葛根素可显著降低缺血再灌注诱导的Caspase-3的活性(P＜0.01).结论葛根素具有神经保护作用,可显著抑制脑缺血再灌注诱导的N2a细胞凋亡,其作用机制与显著抑制Caspase-3的活性有关.
作者：陈娟；陈庆；肖卫东；周洁；冯友梅 刊期： 2005年第10期
目的探讨胃癌5p15.33区微卫星标记杂合性缺失(LOH)与临床病理学表型的相关性.方法抽提80例胃癌标本及其配对正常胃黏膜中基因组DNA,应用4个微卫星标记对5p15.33区进行LOH检测并与Lauren分型等临床病理学指标分析.结果有76例临床信息齐全病例纳入统计分析.5p15.33区4个微卫星标记平均信息性病例比例为71.05%.其中31.58%(24/76)病例至少一个位点检测到LOH,以D5S2849位点LOH频率高(37.25%).5p15.33位点LOH以肠型胃癌多见(P＜0.01),与年龄、性别、部位、肿瘤大小、TNM分期及有无淋巴结转移无明显关系.结论5p15.33区可能存在控制胃癌形态学表型的候选抑癌基因,但该基因可能不是决定其他临床表型的主要基因.
作者：于颖彦；计骏；陆云；步磊；刘炳亚；朱正纲；林言箴 刊期： 2005年第10期
目的探讨乌头类生物碱在体外循环心内直视手术中抗心肌缺血再灌注损伤作用及其机制.方法将患者随机分成对照组和乌头类生物碱组.于开放主动脉时、体外循环结束时、手术结束时、术后1 d等各个时间点测两组患者血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白(cTnI)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量;于停机时测心肌组织SOD、MDA含量.结果乌头类生物碱组CK-MB水平分别为21.63±4.54,29.73±6.53,37.78±6.55,28.74±7.16,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05);cTnI值分别为0.337±0.141,0.497±0.271,0.758±0.399,0.542±0.244,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05);SOD值分别为75.56±20.09,77.01±20.36,91.39±19.56,108.44±24.23,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05);MDA水平分别为4.14±1.88,7.48±2.97,7.86±3.44,6.79±3.21,6.16±3.30,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).术后乌头类生物碱组心肌组织MDA值明显低于对照组(P＜0.05),而SOD值则明显高于对照组(P＜0.05).结论乌头类生物碱对体外循环心肌缺血再灌注损伤具有保护作用.
作者：殷胜利；刘子由；张希；蔡冬梅；罗汉川；吴伟康 刊期： 2005年第10期
目的探讨肺癌患者血清中可溶性CD44V6(sCD44V6)蛋白含量及活检癌组织中CD44V6蛋白表达的临床意义.方法应用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测130例肺癌手术前后、32例健康人和116例随访病例血清中sCD44V6;应用生物素-抗生物素免疫组织化学法(ABC法),检测所有肺癌患者经内镜活检癌组织内CD44V6蛋白表达状况.结果肺癌患者血清中CD44V6含量(3.58±0.56)明显高于健康对照组(1.59±0.44),术前(3.58±0.56)高于术后(1.78±0.52),复发转移组(3.16±0.54)高于无复发转移组(1.29±0.61);肺癌活检组织CD44V6蛋白表达率69.23%,与肺癌T分期无关,N0期CD44V6蛋白阳性表达率57.65%,N1期CD44V6蛋白阳性表达率92.93%,两者差异有统计学意义(P＜0.01).结论血清中CD44V6含量及经内镜活检的肺癌组织中CD44V6蛋白表达与肺癌的转移复发有关,可作为一种可靠的判断手术疗效、预后及复发转移的临床检测指标.
作者：黄兰卿；梁红卫；容永璋；张惠忠；李海刚 刊期： 2005年第10期
目的观察超声波对前脂肪细胞体外培养与增殖的影响,论证超声辅助吸脂术后前脂肪细胞作为脂肪组织工程种子细胞的可行性.方法将经过超声波作用后(8 min,3 w/cm2)的猪前脂肪细胞进行体外培养,并每隔2 d测定其细胞数量及脂质含量,观察其细胞增殖速率及脂质含量的变化,与正常对照组相比较.结果实验组细胞贴壁时间为1～2 d,细胞倍增时间为72 h,脂滴出现时间为培养后6 d,脂质测定时其吸光度峰值为0.32,而正常对照组各项对应指标分别为6～24 h、36 h、4 d,0.68;说明经超声波处理的猪前脂肪细胞体外培养有延迟贴壁、细胞增殖速率减缓、脂质含量减少等改变.结论超声波对前脂肪细胞的增殖分化有明显的抑制作用,经超声波处理的前脂肪细胞不宜用作种子细胞.
作者：李爱林；张杰；龙道畴；张孝斌 刊期： 2005年第10期
目的对可控性回结肠膀胱术的远期疗效进行评价.方法对23例回结肠膀胱术术后患者的可控性尿动力学、血清电解质、肾功能等进行随访观察.结果23例随访4～126个月,平均59个月.白天可控率为100%,夜间可控率96%.贮尿囊容量350～640 ml,平均560 ml,贮尿囊内压力9.30～32.08 cm H2O(1 cm H2O=0.098 kPa),平均19.20 cm H2O.B超、静脉肾盂造影(IVP)及贮尿囊造影显示:单侧输尿管狭窄并肾积水1例.贮尿囊结石2例.血清电解质及肾功能正常.结论可控性回结肠膀胱术远期疗效可靠、并发症少,是一种较理想的尿路分流术式.
作者：陈扬华；张子恒；周雄；邓松源；李永强；蔡郁；张炜 刊期： 2005年第10期
目的探讨高位尺神经损伤后尽早恢复手内在肌功能的一种修复方法.方法纯种大耳白兔18只,采用同体自身对照方法.左侧高位尺神经切断后直接吻合,同时在低位(前肢远端)切断尺神经,将其远侧断端与正中神经外膜开窗处作端侧吻合为实验侧,右侧尺神经高位切断后直接吻合为对照侧.按手术先后分为A、B、C三个时间组,分别于术后4、8、12周时做电生理检测和组织学检查.结果A、B、C三组实验侧均测出诱发电位,而对照侧均未测出诱发电位.组织学观察结果显示术后4、8、12周时实验侧神经纤维数量、密度随时间延长而逐渐增加,而对照侧未检测到再生神经纤维.结论高位尺神经损伤后在高位端端吻合恢复手外在肌功能的同时加低位端侧吻合可作为尽早恢复手内在肌的功能的一种新方法.
作者：詹海华；阚世廉；张铁良；宫可同；张建兵；鲁毅军；赵卫生；王瑞琳；章明放 刊期： 2005年第10期
目的探讨膀胱白斑的超微病理变化及其临床意义,为临床诊断治疗提供可靠依据.方法取52例膀胱白斑病灶组织,在电子显微镜下观察其超微病理学改变.同时取病灶旁正常膀胱黏膜12例作对照.结果膀胱白斑组织电子显微镜下改变显著,表面由多层鳞状上皮细胞组成,胞核较幼稚,核仁明显,胞浆内张力原纤维丰富,36例上皮细胞胞浆内可见糖原储积,14例糖原颗粒散在分布,上皮细胞之间的间隙较宽,细胞表面均有丰富的指状突起,相邻细胞以指状突起相连,连接部位可见桥粒结构.上皮基底部形成乳头状结构.结论电子显微镜检可更加清晰的显示膀胱白斑的超微病理变化,且可提示病变程度、发病趋势、细胞增殖活跃程度等,是膀胱白斑的重要诊断依据.
作者：唐秀英；叶章群；官阳；唐敏；李良玉 刊期： 2005年第10期
陷阱受体3(DcR3)是新近发现的肿瘤坏死因子受体家族的新成员,可竞争Fas与FasL的结合,从而阻断由Fas介导的细胞凋亡[1-6].本研究旨在探讨原发性肝癌的DcR3基因过度表达在Fas系统介导细胞凋亡中的作用以及肝癌细胞是否通过DcR3表达抑制Fas介导的细胞凋亡而起耐药作用.
作者：沈宏伟；吴育连；彭淑牖 刊期： 2005年第10期
目的探讨同种异体带瓣大血管移植后钙含量的改变及其意义.方法分为实验组、对照组和同基因组3组.分别于术后2、4、8、12、16周测定CD25和CD40的表达,光镜和电镜观察移植物并测定钙含量.与对照组和同基因组进行比较.结果对照组CD25和CD40表达水平的高峰在移植后2周,此后逐渐回落,12周后维持在低水平.CsA组在移植后2～4周的表达明显低于对照组(P＜0.01),但8周后的表达水平与对照组差异无统计学意义(P＞0.05).对照组的钙含量从4周开始升高,此后逐渐升高,在12周达到高峰并进入平台期.CsA组的钙含量显著低于对照组(P＜0.01).实验组的内皮细胞脱落和平滑肌细胞的坏死情况较对照组轻.结论移植后钙含量的变化与免疫排斥互为因果,互相影响.
作者：常青；李守先；徐平；张社华；丛林；谭金山 刊期： 2005年第10期
目的探讨一氧化氮(NO)对犬胰腺低温灌注及保存中缺血再灌注损伤的影响.方法在EC(Euro Collin)液中分别加用L-精氨酸(L-Arg,200 mg/kg体重)、N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME,10mg/kg体重)和生理盐水,分别对犬离体胰腺节段进行低温灌注保存(灌注量为30～50ml,温度为0～4℃,时间为24 h),应用犬胰节段移植模型,测定移植后犬血清中脂肪酶、淀粉酶含量,测定移植胰腺组织中髓过氧化酶(MPO)活性、一氧化氮(NO)含量、一氧化氮合酶(NOS)及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA的表达情况.并进行组织学观察.结果血清脂肪酶,L-Arg处理组＜对照组＜L-NAME处理组,差异有统计学意义(P＜0.05).移植后12 h,胰腺组织中NO含量:L-Arg处理组(0.51±0.11)μmol/L＞对照组(0.31±0.06)μmol/L＞L-NAME处理组(0.17±0.04)μmol/L;NOS活性:L-Arg处理组(3.13±0.19)U/ml＞对照组(2.37±0.20)U/ml＞L-NAME处理组(1.68±0.20)U/ml;iNOS mRNA的表达:L-Arg处理组(0.89±0.22)μmol/L＞对照组(0.63±0.18)μmol/L＞L-NAME处理组(0.49±0.20)μmol/L,差异有统计学意义(P＜0.05);L-Arg处理组胰小叶间质水肿和胰小叶内中性粒细胞浸润较轻.结论NO对犬胰腺低温灌注及保存中缺血再灌注损伤具有保护作用.
作者：原春辉；刘永锋；李桂臣；梁健；何三光 刊期： 2005年第10期
细胞内钙稳态的维持对生命活动至关重要.病理状态下细胞内钙超负荷将造成一系列代谢紊乱,致细胞坏死和凋亡[1,2].目前有关肠上皮细胞(IEC)缺血缺氧损伤导致IEC细胞内钙超载是否确切,钙离子阻断剂是否有防治作用,目前尚无这方面的研究报道.激光共聚焦扫描显微镜(LCSM)可定量分析活细胞内不同部位的[Ca2+]i及其动态变化,还可提供高分辨率的钙离子动态变化图像,是记录钙荧光信号的有效技术手段[3].我们采用LSCM技术,用钙敏荧光探针Fluo-3/AM标记培养的IEC,实时动态观察在缺血缺氧损伤及加用钙离子阻断剂后细胞内钙超载的影响.
作者：秦环龙；陈前；贾震易 刊期： 2005年第10期
中华实验外科杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
