杨竹林；黄生福；苗雄鹰；钟德玝；梁珊
陷阱受体3(DcR3)是新近发现的肿瘤坏死因子受体家族的新成员,可竞争Fas与FasL的结合,从而阻断由Fas介导的细胞凋亡[1-6].本研究旨在探讨原发性肝癌的DcR3基因过度表达在Fas系统介导细胞凋亡中的作用以及肝癌细胞是否通过DcR3表达抑制Fas介导的细胞凋亡而起耐药作用.
作者：沈宏伟；吴育连；彭淑牖 刊期： 2005年第10期
探索、了解各别肿瘤所特有的基因改变和表达异常已成为当前肿瘤分子生物研究的方向之一.大量临床和病理资料表明绝大多数结直肠癌起自原先存在的良性肿瘤(腺瘤)通过组织病理上好几个已明确的期,其间基因和环境因素对肿瘤发生形成过程同样地起作用.肿瘤原癌基因的激活和抑癌基因的丢失涉及这些肿瘤的发病机制.根据新的研究可以设想这是基因事件的纯累积,没有任何明确的程序.
作者：郁宝铭 刊期： 2005年第10期
目的探讨逆转录病毒携带白细胞介素(IL)-12转染树突状细胞(DC)体外诱导免疫杀伤肝癌细胞的效能及其机制.方法感染指数(MOI)为100,含IL-12的重组逆转录病毒修饰肝癌患者外周血DC(DC-IL-12),酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测DC-IL-12(5×103个/ml)培养上清中IL-12和γ-干扰素(IFN-γ)水平,以冻融肝癌细胞株HepG2(1×107个/ml)所获得的肿瘤相关抗原(TAA)刺激DC-IL-12,MTT法检测TAA负载的DC-IL-12刺激同源T淋巴细胞(1×105个/ml)增殖分化能力,细胞毒试验检测DC-IL-12诱导的细胞毒T淋巴细胞(CTL)及其上清液对HepG2肝癌细胞株杀伤作用,ELISA法检测CTL上清液IFN-γ水平.结果DC经IL-12基因修饰后48h分泌高水平IL-12(24.35±5.40)ng/L及IFN-γ(725 30)ng/L,均显著高于未转染DC组(P＜0.01及P＜0.05).DC-IL-12诱导的CTL及其上清液对HepG2均有显著杀伤作用,杀伤率显著高于未转染DC组,分别为(82.43±8.70)%vs(57.4±4.3)%(P＜0.01)和(76.45±8.50)%vs(18.23±5.30)%(P＜0.01),DC-IL-12诱导的CTL上清液IFN-γ水平显著高于未转染DC组,分别为(1125.0±32.7)ng/L vs(281.3±14.7)ng/L(P＜0.01).结论IL-12基因修饰增强DC体外诱导自体T淋巴细胞产生特异性抗肝癌免疫,其机制与IL-12基因修饰促进DC分泌IL-12、增强T淋巴细胞活化及分泌IFN-γ密切相关.
作者：刘晓平；李宝金；张超 刊期： 2005年第10期
基因启动子区异常甲基化抑制转录是基因失活的又一机制,也是人类肿瘤发生的重要机制之一[1].肝细胞癌(HCC)发生的分子机制仍不十分清楚.我们采用甲基化特异性PCR(MSP法)检测了HCC中GSTP1基因启动子甲基化,探讨其在HCC发生中作用.
作者：杨卫富；李德春；张子祥 刊期： 2005年第10期
目的探讨重组大鼠转化生长因子-β1基因(pcDNA3+TGF-β1)单独转染及其与重组大鼠胰岛素样生长因子-1基因(pAT153+IGF-1)共转染兔软骨细胞后细胞增殖及所分泌的TGF-β1因子、IGF-1因子、Ⅱ型胶原的变化.方法兔软骨细胞体外分别用pcDNA3+TGF-β1单转染、pcDNA3+TGF-β1和pAT153+IGF-1共转染,筛选阳性克隆后,进行原位杂交、免疫组织化学、免疫荧光检测、流式细胞仪检测、3H-TdR(3H标记的胸腺嘧啶脱氧核苷)检测.结果基因转染组与空白组相比,TGF-β1、IGF-1、Ⅱ型胶原的含量均明显提高,空白组、基因单转染组、基因双转染组软骨细胞位于S期的比例分别为5.6%、33.4%、40.1%,差异有统计学意义(P＜0.05).结论基因pcDNA3+TGF-β1、pAT153+IGF-1转染软骨细胞后,细胞分泌的TGF-β1、IGF-1及Ⅱ型胶原显著增多,细胞增殖明显增强,上述基因转染有助于软骨细胞活力的提高;pcDNA3+TGF-β1和pAT153+IGF-1双基因共转染软骨细胞后,细胞分裂增生活跃程度及分泌的TGF-β1、IGF-1和Ⅱ型胶原含量高于pcDNA3+TGF-β1单基因转染,多基因共转染作为将来骨性关节炎基因治疗的方法,其治疗效果可能会优于单基因转染.
作者：向川；卫小春；杜靖远 刊期： 2005年第10期
目的探讨多孔碳酸钙陶瓷(PCCC)的细胞相容性.方法采用浸提法制备多孔碳酸钙陶瓷(PCCC)生理盐水和培养液浸提液,浸提液体外培养L929小鼠成纤维细胞,进行细胞形态学观察,采用MTT法测定细胞增殖率并进行细胞毒性分级;采用分光光度法进行溶血试验.结果培养期细胞大量增殖,形态良好,多孔碳酸钙陶瓷(PCCC)的细胞毒性分级为Ⅰ级,对健康人血的溶血率＜5%,存在轻微的细胞毒性和溶血作用.结论多孔碳酸钙陶瓷(PCCC)细胞相容性好,符合植入人体生物材料的相关要求.
作者：谭金海；陈振光；魏任雄；王会学；熊健 刊期： 2005年第10期
目的检测肺鳞癌、肺腺癌细胞浆和细胞膜蛋白激酶C-α(PKC-α)蛋白的表达,探讨PKC-α在肺癌发生和发展中的作用.方法采用分别提取细胞浆和细胞膜蛋白,Western blot检测37例鳞癌(鳞癌组)、23例腺癌(腺癌组)和17例肺良性病变的正常肺组织(对照组)中细胞浆、细胞膜PKC-α蛋白表达含量,比较膜/浆PKC-α比率.结果三组胞浆PKC-α蛋白平均表达强度分别为0.083 2±0.015 2、0.184 5±0.008 9和0.179 5±0.015 0,三组间差异有统计学意义(P＜0.01);鳞癌和腺癌组胞浆PKC-α蛋白的平均强度显著高于对照组(P＜0.01).三组胞膜PKC-α蛋白的平均强度分别为0.033 1±0.009 6、0.091 8±0.014 8和0.100 9±0.021 3,三组间差异有统计学意义(P＜0.01);鳞癌和腺癌组织的胞膜PKC-α蛋白的平均强度显著高于对照组(P＜0.01).三组膜/浆PKC-α比值分别为0.319 0±0.017 2、0.500 4±0.095 0和0.558 9±0.086 5,三组间差异有统计学意义(P＜0.01);鳞癌和腺癌组的膜/浆PKC-α比值高于对照组(P＜0.05).结论肺鳞癌和腺癌细胞中无论是胞浆还是胞膜,PKC-α蛋白的表达都增加,尤其是胞膜PKC-α蛋白的表达增加幅度更大,提示PKC-α不仅通过表达量增加参与肺鳞癌、肺腺癌的发生和发展,还以膜转位的活化方式参与细胞的癌性病变.
作者：宋兴福；黄骥；王燕燕 刊期： 2005年第10期
目的探讨提高大鼠胰岛冻存质量的方法,以期为建立胰岛库奠定基础.方法将受体鼠分为实验组A组:即一步法联合冻存的胰岛移植组;对照组B组:新鲜的胰岛移植组;对照组C组:逐步法冻存的胰岛移植组.观察3组之间胰岛收获率,活性及移植后效果等方面的差异.结果纯化后收获大鼠胰岛每只(826.87±93.24)IEQ.A组平均胰岛收获率为(87±4)%,高于C组的胰岛收获率(81±4)%.A组和C组经过胰岛刺激素释放实验后均有较B组高的基础胰岛素释放量,但刺激指数则明显低于B组的637.3±39.5.胰岛移植入糖尿病鼠受体后,A组和B组在移植后1周即恢复血糖为正常值,并维持到观察结束.而C组中则需要较长时间纠正血糖到正常.移植(2 011.14±114.22)IEQ胰岛在A组和B组可达到100%纠正糖尿病.结论采用全新的细胞内低温保存液(HTS)结合细胞冻存液(DMSO)对大鼠胰岛进行一步法冻存取得了明显优于用DMSO逐步冻存的效果.
作者：周毅；许评；刘晓岭；李爱东；宋春芳 刊期： 2005年第10期
目的探讨肿瘤细胞分化诱导剂尿多酸肽(CDA-Ⅱ)对乳腺癌细胞周期分布和CyclinD1表达的的影响.方法将CDA-Ⅱ与不同生物学特性的乳腺癌细胞株MCF-7和MDA-MB-231进行体外培养,分成3组:对照组、CDA-Ⅱ组和维甲酸(ATRA)组,观察CDA-Ⅱ对乳腺癌细胞生长曲线、细胞周期、Cyclin D1表达及形态学等方面的影响.结果CDA-Ⅱ可减缓2株乳腺癌细胞的生长和增殖能力,改变细胞周期分布,使MCF-7细胞株对照组、CDA-Ⅱ组和ATRA组S期比例分别为33.04%、21.70%和23.64%;MDA-MB-231细胞分别为38.7%、28.7%和27.9%;MCF-7细胞株对照组、CDA-Ⅱ组和ATRA组细胞Cyclin D1表达(荧光强度)分别为12.26、6.46和6.74,MDA-MB-231细胞分别为12.43、8.32和8.97.结论CDA-Ⅱ可抑制不同生物学特性的2株乳腺癌细胞的生长和增殖能力,使细胞周期出现G0/G1期阻滞,并减少乳腺癌细胞Cyclin D1表达.
作者：郑伟；马林；陈凛；李荣；蒋彦永 刊期： 2005年第10期
目的研究乳腺癌组织中黏着斑激酶(FAK)和PTEN蛋白的表达与肿瘤分化、浸润转移的关系,揭示细胞信号转导系统与乳腺癌发生发展的关系,同时为乳腺癌的基因治疗提供依据.方法应用免疫组织化学SP法检测92例乳腺癌组织和30例乳腺良性病变组织中FAK、PTEN的表达情况及其与临床病理参数的关系.结果(1)在92例乳腺癌中FAK和PTEN的阳性表达率分别为69.6%和51.1%,与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.01);(2)FAK表达与乳腺癌肿瘤大小、腋窝淋巴结转移、临床分期呈正相关(P＜0.01),PTEN表达与乳腺癌组织学分级、腋窝淋巴结转移、临床分期呈负相关(P＜0.05);(3)乳腺癌组织FAK表达与PTEN表达呈负相关(P＜0.01).结论乳腺癌FAK的高表达和PTEN的缺失表达与肿瘤发生发展、浸润转移密切相关;检测这些指标,有助于判断乳腺癌的恶性程度及生物学行为.
作者：黄玉钿；张声；郑曦；吴钦穗；黄双月；杨发端 刊期： 2005年第10期
目的探讨一氧化氮(NO)对犬胰腺低温灌注及保存中缺血再灌注损伤的影响.方法在EC(Euro Collin)液中分别加用L-精氨酸(L-Arg,200 mg/kg体重)、N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME,10mg/kg体重)和生理盐水,分别对犬离体胰腺节段进行低温灌注保存(灌注量为30～50ml,温度为0～4℃,时间为24 h),应用犬胰节段移植模型,测定移植后犬血清中脂肪酶、淀粉酶含量,测定移植胰腺组织中髓过氧化酶(MPO)活性、一氧化氮(NO)含量、一氧化氮合酶(NOS)及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA的表达情况.并进行组织学观察.结果血清脂肪酶,L-Arg处理组＜对照组＜L-NAME处理组,差异有统计学意义(P＜0.05).移植后12 h,胰腺组织中NO含量:L-Arg处理组(0.51±0.11)μmol/L＞对照组(0.31±0.06)μmol/L＞L-NAME处理组(0.17±0.04)μmol/L;NOS活性:L-Arg处理组(3.13±0.19)U/ml＞对照组(2.37±0.20)U/ml＞L-NAME处理组(1.68±0.20)U/ml;iNOS mRNA的表达:L-Arg处理组(0.89±0.22)μmol/L＞对照组(0.63±0.18)μmol/L＞L-NAME处理组(0.49±0.20)μmol/L,差异有统计学意义(P＜0.05);L-Arg处理组胰小叶间质水肿和胰小叶内中性粒细胞浸润较轻.结论NO对犬胰腺低温灌注及保存中缺血再灌注损伤具有保护作用.
作者：原春辉；刘永锋；李桂臣；梁健；何三光 刊期： 2005年第10期
目的探讨腺病毒介导的突变k-ras基因修饰的树突状细胞疫苗在体内的抗肿瘤作用.方法将突变k-ras基因修饰的DC经腹腔注射免疫小鼠(5×105/只),1次/周,共2次,随后将肿瘤细胞接种于皮下,观察DC能否诱发机体的免疫保护.结果突变k-ras基因修饰的DC疫苗组Lewis肺癌(3LL)移植瘤生长明显延缓,肿瘤体积显著低于空载体组、DC组和对照组(P＜0.05),而抑瘤率显著高于空载体组、DC组和对照组(P＜0.05).突变k-ras基因修饰的DC疫苗组Lewis肺癌(3LL)移植瘤肺转移率(2/10,20%)显著低于空载体组(6/10,60%)、DC组(6/10,60%)和对照组(8/10,80%,P＜0.05);肺部转移灶数目亦显著少于空载体组、DC组和对照组(P＜0.05).结论突变k-ras基因修饰的DC疫苗能有效诱导机体产生特异的抗肿瘤免疫反应,抑制Lewis肺癌生长和远处转移.
作者：赵峰；周清华；陆燕蓉；张洁；王建军 刊期： 2005年第10期
目的探讨胃癌5p15.33区微卫星标记杂合性缺失(LOH)与临床病理学表型的相关性.方法抽提80例胃癌标本及其配对正常胃黏膜中基因组DNA,应用4个微卫星标记对5p15.33区进行LOH检测并与Lauren分型等临床病理学指标分析.结果有76例临床信息齐全病例纳入统计分析.5p15.33区4个微卫星标记平均信息性病例比例为71.05%.其中31.58%(24/76)病例至少一个位点检测到LOH,以D5S2849位点LOH频率高(37.25%).5p15.33位点LOH以肠型胃癌多见(P＜0.01),与年龄、性别、部位、肿瘤大小、TNM分期及有无淋巴结转移无明显关系.结论5p15.33区可能存在控制胃癌形态学表型的候选抑癌基因,但该基因可能不是决定其他临床表型的主要基因.
作者：于颖彦；计骏；陆云；步磊；刘炳亚；朱正纲；林言箴 刊期： 2005年第10期
目的探讨高位尺神经损伤后尽早恢复手内在肌功能的一种修复方法.方法纯种大耳白兔18只,采用同体自身对照方法.左侧高位尺神经切断后直接吻合,同时在低位(前肢远端)切断尺神经,将其远侧断端与正中神经外膜开窗处作端侧吻合为实验侧,右侧尺神经高位切断后直接吻合为对照侧.按手术先后分为A、B、C三个时间组,分别于术后4、8、12周时做电生理检测和组织学检查.结果A、B、C三组实验侧均测出诱发电位,而对照侧均未测出诱发电位.组织学观察结果显示术后4、8、12周时实验侧神经纤维数量、密度随时间延长而逐渐增加,而对照侧未检测到再生神经纤维.结论高位尺神经损伤后在高位端端吻合恢复手外在肌功能的同时加低位端侧吻合可作为尽早恢复手内在肌的功能的一种新方法.
作者：詹海华；阚世廉；张铁良；宫可同；张建兵；鲁毅军；赵卫生；王瑞琳；章明放 刊期： 2005年第10期
为搞清我国乳腺癌易感基因的突变状况,我们采用聚合酶链反应-单链构像多态性分析(PCR-SSCP)、正反双向测序方法对天津市肿瘤医院1997至2003年家族性乳腺癌家系进行了BRCA1基因检测,现将结果报道如下.
作者：史玉荣；李臣宾；只向成；宁连胜；牛瑞芳 刊期： 2005年第10期
目的通过在4号染色体寻找杂合缺失区域,为定位、筛选高频杂合缺失区存在的散发性结直肠癌相关肿瘤抑制基因提供依据.方法20个荧光标记的微卫星引物与83例结、直肠癌的肿瘤和正常组织进行聚合酶链反应.微卫星的平均遗传距离是10.4里摩(cmol).产物进行电泳、扫描及杂合缺失分析,并与临床、病理因素进行相关性检验.结果短臂(4p)、长臂(4q)的平均杂合缺失率为24.25%、28.56%,可见3个小的高频缺失区域(Region):R1:在D4S405和D4S3013(4p14-15.2)之间;R2:在D4S3000和D4S2915位点之间(4q12-21.1);R3:在D4S407和D4S2939位点之间(4q25-31.1).D4S1534位点与肝脏转移有关(P＜0.05),其余位点与临床病理因素均无显著相关(P＞0.05).结论4号染色体的3个高频杂合缺失区域4p14-15.2、4q12-21.1、4q25-31.1存在散发性结直肠癌发生、发展相关的肿瘤抑制基因.
作者：郑海涛；唐华美；彭志海；李大鹏；周崇治；裘国强；贺林 刊期： 2005年第10期
目的研究T-cadherin分子表达抑制胶质母细胞瘤C6细胞增殖的机制.方法利用脂质体转染pcDNA3和pcDNA3.T-cadherin质粒后获得的表达和不表达T-cadherin的C6细胞克隆,以流式细胞仪检测两种克隆细胞的细胞周期的变化,同时分析其细胞周期与细胞分裂指数的关系.结果转染后表达T-cadherin的C6细胞在去血清培养48 h使细胞周期同步后,分别用血清刺激培养12h后行流式细胞仪检测,与转染空载体的1、2克隆相比,转染T-cadherin基因后表达T-cadherin的3、4克隆于G2/M期的细胞比例显著增加(3、4克隆为52.60%和51.84%,1、2克隆为16.17%和13.47%),而G1期的细胞比例显著下降(3、4克隆为0.66%和0.39%,1、2克隆为50.6%和57.9%).在血清刺激0、4、8、12、24和48 h时,空载体克隆1在各时间点的分裂指数与其G2/M期的细胞比例一致,而表达T-cadherin的克隆3在各时间点的分裂指数显著低于其G2/M期的细胞比例数.结论T-cadherin分子表达能诱导C6细胞G2期细胞阻滞,该机制可能是T-cadherin抑制C6细胞增殖的主要机制.
作者：黄志勇；陈孝平；吴在德 刊期： 2005年第10期
普通外科是外科学的基础,是各种专业外科的发源地;普通外科总论的内容贯穿于各专业外科的始终,各专业外科的发展又反馈促进了普通外科总论内容的不断完善.但是普通外科又是一个古老的学科,随着跨学科研究和学科交叉现象的不断出现,医学的创新导致诸多新型学科的诞生,普通外科原有的内容逐步向专科化发展,使得普通外科的学科界线似乎已呈现模糊不清的状况.阅览普通外科领域的相关杂志,我们不难发现临床科研课题在慢慢向临床基础研究方面倾斜,由学科交叉涌现出的新型诊治手段的相关文章在不断增多;基础学科的科研课题也在向临床实用方向发展.在此,就学科交叉与医学创新问题根据文献资料谈谈个人的一点认识.
作者：汪谦 刊期： 2005年第10期
目的建立绝经后骨质疏松症山羊模型并探讨其意义.方法将10只6～8岁雌性健康山羊,随机分为两组,假手术组(SHAM组,2只,开腹后缝合切口)和双侧卵巢切除术组(OVX组,8只,切除山羊的双侧卵巢),术前和术后4个月,分别自颈静脉抽血检测血生化指标,使用双能X线吸收法(DEXA)测量L1～L4的骨密度(BMD,g/cm2),并取椎体内松质骨做病理组织学观察.结果OVX手术及假手术均较顺利,无动物死亡;腹腔切除物经组织学确认为卵巢组织,OVX术后4个月椎体内松质骨与术前相比,骨小梁变细、数量轻度减少,间距增宽,骨髓腔扩大;OVX术后4个月碱性磷酸酶为(472±63)IU/L,其与BMD均较术前明显降低(P＜0.05).结论中老年雌性山羊可能是一种有效且经济的绝经后骨质疏松症大动物模型,对于骨质疏松性骨折内植物的基础研究具有广阔而深远的意义.
作者：刘宏建；杜靖远；刘辉；韩松辉；王锐 刊期： 2005年第10期
我们采用常规细菌检测法,探讨心脏直视手术患者术前、术中及术后皮肤表面、切口内及深部组织的污染情况,为术后外科伤口感染的预防提供依据.
作者：周嫣；叶文琴；徐志云；陈艳琳；余丽群 刊期： 2005年第10期
中华实验外科杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
