程艳香;杨潇;陈干涛
目的:探讨促血管生成素-1(Ang-1)、血管内皮生长因子(VEGF)在颞叶癫痫发病机制中的作用.方法:腹腔注射氯化锂-匹罗卡品及生理盐水分别建立颞叶癫痫模型及对照组;观察大鼠行为学改变,比较实验组和对照组大鼠海马区Ang-1、VEGF的时间动态表达过程.结果:抽搐频繁时,海马区Ang-1表达减少;抽搐减少时,海马区Ang-1表达逐渐升至正常;抽搐频繁时,海马区VEGF表达升高;抽搐减少时,海马区VEGF表达逐渐恢复正常;Ang-1与VEGF二者表达呈直线负相关关系.结论:Ang-1与VEGF参与了颞叶癫痫发病机制,可能与海马区Ang-1表达下调,VEGF表达上调有关.
作者:张小芳;姚宝珍;张海菊 刊期: 2017年第02期
目的:探讨肾衰状态下不同药物对模型大鼠血管内皮生长因子(VEGF)表达和微血管密度(MVD)分布与肠道清除能力的影响.方法:50只大鼠随机分为5组,以5/6肾脏切除法制备肾衰模型,并分别采用吲哚美辛、盐酸川芎嗪和盐酸贝那普利进行灌胃,比较血、粪肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)和肾小球VEGF和MVD变化.结果:①灌胃8周后,模型组、吲哚美辛组、盐酸川芎嗪组和盐酸贝那普利组血、Cr、BUN均高于假手术组,差异具有统计学意义(P<0.05);盐酸川芎嗪组和盐酸贝那普利组血Cr、BUN,粪Cr均低于模型组,粪BUN高于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05);吲哚美辛组血Cr、BUN与模型组差异无统计学意义(P>0.05),粪Cr、BUN与模型组差异具有统计学意义(P<0.05);盐酸川芎嗪和盐酸贝那普利血Cr、粪Cr、BUN与吲哚美辛组差异具有统计学意义(P<0.05);盐酸贝那普利组与盐酸川芎嗪组血Cr、BUN,粪Cr差异具有统计学意义(P<0.05);②与假手术组相比,其他各组VEGF和MVD阳性表达均明显减弱(P<0.05);与模型组相比,盐酸川芎嗪组和盐酸贝那普利组VEGF和MVD阳性表达增强(P<0.05),吲哚美辛组表达降低(P<0.05);盐酸川芎嗪组和盐酸贝那普利组与吲哚美辛组组VEGF表达差异有统计学意义(P<0.05);盐酸川芎嗪组和盐酸贝那普利组MVD差异具有统计学意义(P<0.05),但VEGF差异无统计学意义(P>0.05);③经Pearson相关性分析发现,肾脏VEGF和MVD具有显著相关性(r=0.845,P<0.05);④经Pearson相关性分析发现,肾脏VEGF和MVD与血BUN具有负性相关关系,与粪Cr、粪BUN具有正性相关关系(P<0.05).结论:盐酸川芎嗪和盐酸贝那普利能够上调小肠黏膜VEGF和MVD表达,促进BUN和Cr的肠道清除,对慢性肾衰具有保护作用;吲哚美辛可以降低VEGF和MVD表达,有可能加重肾脏损伤.
作者:张淳;黄灿茂 刊期: 2017年第02期
目的:研究宫颈癌组织放化疗前后长链非编码RNA(lncRNA)的表达谱变化及其临床意义.筛选出与宫颈癌放化疗相关的lncRNA,为宫颈癌的临床放化疗敏感性预测提供依据.方法:取30例宫颈癌患者放化疗前宫颈活检组织和放化疗后手术切除的宫颈组织,应用高通量lncRNA芯片技术分别检测宫颈癌放化疗前后组织中的lncRNA的表达谱变化,并应用RT-PCR技术对结果加以验证.结果:与放化疗前的宫颈癌相比,宫颈癌放化疗组织中共有23 530条lncRNA和14 037个mRNA存在差异性表达.通过GO聚类分析表明:上调mRNA和下调mRNA分别参与多种不同的生物过程.通过进一步分析发现变化差异性明显的20个lncRNA可能通过影响相应的mRNA来发挥其生物学功能.经RT-PCR验证结果与芯片检测结果相一致.结论:本研究罗列了与宫颈癌放化疗密切相关的lncRNA及相关转录的分子功能、涉及的分子生物学通路等,筛选出了与放化疗密切相关的明显差异表达的lncRNA,为预测宫颈癌放疗敏感性标志物提供分子依据.
作者:程艳香;杨潇;陈干涛 刊期: 2017年第02期
目的:探讨抑郁引起大鼠结肠动力学改变导致肠易激综合征(IBS)后细胞膜上L-型钙电流(ICa-L)变化.方法:SPF级成年雄性SD大鼠分为正常对照组(对照组,n=15)和抑郁症模型组(抑郁组,n=15).抑郁模型制备方法是采用孤养加慢性温和不可预知性应激刺激方式进行,28 d后通过旷场试验(OFT)和液体消耗试验(FCT)确定抑郁模型成功.根据临床表现、生成的粪便性状和数量确定IBS发生率.酶解法分离单个结肠平滑肌细胞,全细胞膜片钳技术记录结肠平滑肌细胞膜上Ia-L及其电流-电压(I-Ⅴ)曲线变化.结果:与对照组比较,抑郁组大鼠出现体重增长减慢,OFT和FCT值显著降低(P均<0.01),提示抑郁大鼠模型建立成功;抑郁组大鼠出现严重体质减弱,排便颗粒数及其含水量明显增高(P均<0.01),与OFT和FCT值比较呈显著的负相关(r值均>-0.89,P均<0.01),胃肠道症状的发生率显著增高(P<o.01),说明抑郁引起大鼠出现严重的IBS病症.在电压钳制方式下,与对照组比较,抑郁组大鼠结肠平滑肌细胞膜上Ia-L峰值显著增大,其Ⅰ-Ⅴ曲线明显下移到底部和向左偏移.当钳制电位为+10 mV时,抑郁组大鼠结肠平滑肌细胞Ia-L由对照组的(--21.31±4.79)pA增加为(33.52±4.45)pA(P<0.01).与抑郁大鼠的排便颗粒数及其含水量进行比较,具有显著正相关(r均>0.91,P均<0.01).结论:抑郁能引起大鼠胃肠道出现明显的IBS病症,其发生机制可能是抑郁诱发了大鼠结肠平滑肌细胞膜上ICa-L增加出现电重构,造成结肠性动作电位失常促使肠动力学改变形成.
作者:柴红;王凤秀;杨峥;吴成云;周成志;陈明铠;谭诗云;王晓萍;王高华 刊期: 2017年第02期
目的:总结同期复合手术治疗累及弓部主动脉疾病的临床经验和疗效.方法:2010年1月至2015年1月,共96例弓部受累的主动脉疾病患者均同期行分站式复合手术,先在常规手术室完成血管旁路术再转入介入室行主动脉腔内修复术,根据支架锚定分区不同采取个体化的弓部重建方式,其中Z0区分支重建18例,Z1区34例,Z2区44例.结果:96例患者围术期死亡1例,无严重脑部并发症.所有患者均同期完成手术,术后即时造影示夹层近端破口封闭良好,重建血管通畅率100%,近端Ⅰ型内漏3例,2例患者术后出现升主动脉夹层行人工血管置换后治愈.90例病人随访6-48月,复查主动脉CT血管成像(CTA)示人工血管通畅、无内漏(工型内漏3例消失),支架远端降主动脉假腔闭合85例,无再次手术.结论:同期分站式复合手术治疗累及弓部的主动脉疾病安全有效,合理的弓部处理方式是手术成功的关键.
作者:任伟;王志维;吴智勇;夏军;李博文;昌金星 刊期: 2017年第02期
目的:探讨小细胞肺癌(SCLC) CT影像学表现.方法:搜集经病理证实的SCLC病例临床及胸部CT资料,统计分析SCLC的CT影像学表现.结果:164例中男性134例、女性30例,平均年龄(60.2±10.4)岁.病灶大小9-123mm,平均(46.0±18.3)mm.病灶密度均匀119例(72.6%),钙化3例(1.8%).平扫CT平均值(37.4±5.1)Hu,增强后平均增加(18.8±5.6)Hu.出现淋巴结肿大144例(87.8%).病灶单侧积液39例(23.8%),双侧胸腔积液2例(1.2%),心包积液17例(10.4%),心包并胸腔积液13例(7.9%).中央型肺癌121例(73.8%),合并肺不张44例(36.4%),胸膜转移3例(2.5%).周围型肺癌43例(26.2%),形状类圆形40例(93.0%),边缘光滑37例(86.0%),分叶征31例(72.1%),血管聚束征15例(34.9%),磨玻璃征11例(25.6%),毛刺征5例(11.6%),胸膜凹陷征3例(7.0%),空泡征2例(4.7%),胸膜转移14例(32.6%).结论:肺内病灶早期出现淋巴结肿大及远处转移时要考虑SCLC的可能.密度均匀、边缘光滑、轻中度强化是周围型SCLC主要影像学表现.终确诊依赖临床病理.
作者:曹毅媛;张寒菲;朱冬勇;陈杰;徐丽莹;屈艳娟 刊期: 2017年第02期
目的:寻找改善慢性肾脏病患者及血液透析患者血管钙化的原因,从而有效延缓血管钙化,保护透析患者生命通道.方法:以人血管平滑肌细胞(hVSMC)作为研究对象,观察用不同浓度哇巴因(0,1,10,100,1,10μmol/L)刺激hVSMC不同时间后细胞的生长凋亡情况,并采用MTT法检测细胞存活能力;以蒲黄灌胃小鼠所获得血清作为药物干预,将细胞分为:对照组、哇巴因刺激组、哇巴因+蒲黄干预组;选取适合的哇巴因浓度和时间点,采用免疫印迹法检测钠钾ATP酶(NKA)a1亚基及骨桥蛋白的表达;采用Von kossa法检测钙结晶的形成及阳性细胞百分比;统计学方法采用两样本t检验,多组间两两比较用方差分析(one-way ANOVA)中SNK检验.结果:哇巴因可以诱导血管平滑肌细胞发生钙化;NKAα1亚基参与血管平滑肌钙化形成;蒲黄通过抑制NKAα1亚基活化阻止血管平滑肌钙化.结论:哇巴因参与血管钙化机制中,蒲黄通过抑制钠钾NKAα1亚基,阻断了哇巴因/NKAα1/骨桥蛋白信号通路,从而抑制了血管平滑肌钙化的进展.
作者:娄美玉;刘昌璇;吴佳;陈文莉;丁国华 刊期: 2017年第02期
目的:探讨联合检测血清淀粉样蛋白A(SAA)、C反应蛋白(CRP)、血沉(ESR)在慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)病情监测中的临床价值.方法:87例COPD患者分为COPD急性加重期组(n=45例)和COPD稳定期组(n=42例),同期选择40例门诊健康体检者作为对照组.根据是否出现呼吸衰竭、是否合并肺心病将AECOPD患者分为呼吸衰竭组、无呼吸衰竭组和合并肺心病组、未合并肺心病组,比较各组血清SAA、CRP表达水平及ESR变化,并分析血清SAA、CRP及ESR的相关性.结果:COPD急性加重期组患者血清SAA、CRP表达水平及ESR均明显高于COPD稳定期组和对照组(P<0.05);呼吸衰竭组患者血清SAA、CRP表达水平及ESR均明显高于无呼吸衰竭组(P<0.05);合并肺心病组患者血清SAA、CRP表达水平及ESR均明显高于未合并肺心病组(P<0.05),血清SAA表达水平与CRP及ESR均呈正相关性关系(r1 =0.576,r2=0.607,P<0.05),血清CRP表达水平与ESR也呈正相关性关系(r3=0.482,P<0.05).结论:联合检测SAA、CRP、ESR在AECOPD患者病情监测中具有较高的临床应用价值.
作者:何攀文;李霞;叶胜兰;黄汉平;卢忠心;吴建红 刊期: 2017年第02期
目的:分析了234例冠心病患者临床特点及危险因素,为临床冠心病的防治积累经验.方法:选取2011-2012年间在我院行冠脉造影的324例研究对象,根据冠脉造影结果将研究对象分为冠心病组(n=234)及非冠心病组(n=90).详细询问高血压病、糖尿病、家族早发心脏病、吸烟及高脂血症等病史.并进行血常规、肝肾功能、尿酸、血脂等生化检查,采用Gensini积分评估患者冠脉病变情况.结果:冠心病组包含更多吸烟、家族早发冠心病、高血压及糖尿病等病史的患者;冠心病组WBC、L%、N%、NLR、PLR、ALT、AST、TG、HDL-C、apoA1、BUN、Cr、UA均显著高于非冠心病组,差异有统计学意义.结论:高血压、糖尿病、高AST、高NLR及高尿酸血症是冠心病患者的独立危险因素;AST、脂蛋白a、HDL-C、NLR是冠心病病变严重程度的危险因素.
作者:苟棋玲;干学东;王忠莉 刊期: 2017年第02期
目的:探讨miRNA-376c-3p(miR-376c-3p)对人胃肠道间质瘤GIST T1细胞迁移、增殖和凋亡的影响及其可能的调控机制.方法:qRT-PCR法检测13例胃间质瘤患者肿瘤和癌旁对照组织中miR-376c-3p表达;将miR-376c-3p类似物(mimic)、抑制物(inhibitor)和各自阴性对照分别转染GIST-T1细胞,另设空白对照组;qRT-PCR检测转染细胞miR-376c-3p表达;然后用CCK8检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell小室检测细胞迁移能力;通过Western Blot及qRT-PCR法检测miR-376c-3p对CASP-7 (Caspase-7)表达量的影响.结果:在胃间质瘤患者癌组织中,miR-376c-3p表达水平显著降低,为癌旁对照组织的58.7% (P<0.01);qRT-PCR显示:转染miR-376e-3p mimic后,GIST-T1细胞miR-376c-3p表达明显上调(P<0.01),而转染miR-376c3p inhibitor后表达受抑制(P<0.01);miR-376c-3p mimic转染组细胞增殖活性、迁移能力明显抑制(P<0.01),凋亡率增强(P<0.05);另外miR-376c-3p过表达后CASP-7 mRNA和蛋白水平出现上调,相反地,miR-376c-3p抑制却导致CASP-7 mRNA和蛋白水平下调(P<0.05).结论:在人胃肠道间质瘤GIST-T1细胞中miR-376c-3p可以间接调控CASP-7的表达,抑制细胞增殖、迁移能力,促进细胞凋亡.
作者:张林;李瑾;张小敏;肖军 刊期: 2017年第02期
目的:探讨保留髌下脂肪垫的膝关节镜高位前侧入路在膝关节镜手术中应用的临床疗效.方法:回顾性分析2014年10月至2015年10月我院膝关节镜手术60例.其中32例采取膝关节镜高位前侧入路保留髌下脂肪垫;28例采取常规入路,术中刨削部分髌下脂肪垫.记录患者手术时间、关节腔引流量,并于术后6个月进行膝前疼痛VAS评分及膝关节功能Lysholm评分.结果:膝关节镜常规入路切除髌下脂肪垫组与膝关节镜高位前侧入路保留髌下脂肪垫组临床治疗优良率分别为92.9%和93.8%,组间比较差异无统计学意义(P>0.05);但两组间手术时间、关节腔引流量、术后6个月VAS评分、Lysholm评分比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论:膝关节镜手术中,保留髌下脂肪垫对比切除髌下脂肪垫术后疗效优势明显.膝关节镜高位前侧入路在保留髌下脂肪垫的同时保证手术视野的充分暴露,利于手术操作,缩短手术时间,减轻患者术后膝前疼痛,有利于快速康复.
作者:谢威;李皓桓;张小龙;唐金明;施家奇;向绍奇 刊期: 2017年第02期
目的:通过对比并改良常见的原代(CAFs)细胞培养方法,建立一种成功率较高的宫颈癌相关成纤维细胞(CAFs)原代培养的方法.方法:取确诊为宫颈癌患者的活检或手术标本,通过对消化时间、重悬液量及培养基血清浓度进行改良原代细胞培养,观察细胞生长状况,并比较其与传统组织块贴壁法和酶消化法的细胞生长率.运用时间差酶消化及反复贴壁法进行分离纯化后,用免疫荧光的方法对宫颈癌相关成纤维细胞的纯度进行鉴定.结果:改良培养法消化时间为30 min,血清浓度为20%时成功率高(66.67%oo).反复运用时间差酶消化及反复贴壁法可以得出纯度较高的宫颈癌相关成纤维细胞.结论:本研究成功建立了一种成功率较高的宫颈癌相关成纤维细胞改良培养方法,为后期探讨CAFs在肿瘤形成、进展中的作用打好实验基础.
作者:李盼;蔡红兵 刊期: 2017年第02期
目的:观察盐酸氢吗啡酮与舒芬太尼用于剖宫产术后静脉自控镇痛(PCIA)的效果及安全性.方法:选择120例单胎孕妇随机分为HM组(氢吗啡酮组,n=60):盐酸氢吗啡酮8 mg+盐酸托烷司琼5 mg加0.9%的氯化钠溶液稀释至100 ml;SF组(舒芬太尼组,n=60):盐酸舒芬太尼100 μg+盐酸托烷司琼5 mg加0.9%的氯化钠溶液稀释至100 ml.两组PCIA均设为2 ml/h恒速输注,PCIA单次追加剂量为0.5 ml,时间锁定为15 min,镇痛时间约为48 h.结果:氢吗啡酮组与舒芬太尼组相对比,两组的镇痛评分、镇静评分、按压次数均无统计学差异(P>0.05),并且不良反应发生率两组均较低.结论:氢吗啡酮用于剖宫产术后静脉自控镇痛效果确切,不良反应少,镇痛作用类似于舒芬太尼.
作者:杨鹏;简道林;邹学军 刊期: 2017年第02期
目的:了解不同APOE基因型人群与血脂紊乱的相关性,指导合理治疗.方法:收集2015年11月至2016年4月我院高脂血症患者62例[高胆固醇(TC)、高甘油三酯(TG)、高低密度脂蛋白(LDL-C)任其一者]行APOE基因表型检测,根据不同的基因表型分为3组:E2表型组(E2/E2,E2/E3)、E3表型组(E3/E3,E2/E4)、E4表型组(E3/E4,E4/E4),对其结果与脂代谢紊乱相关性进行统计分析,选择性治疗.结果:62例高脂血症患者,其中高TC 21例;高TG 31例;高LDL-C 22例.APOE基因表型组各占比分别为E2型16.13%,E3型64.52%,E4型19.35%.血脂异常类型与APOE基因表型分布:TC异常类型中E4表型组占比多,为50%;E2表型组占比少,为10%;TG异常类型中E2表型组占比多,为70%;E4表型组占比少,为41.6%.LDL-C异常类型中E4表型组占比多,为50%;E2表型组占比少,为20%.3组基因表型TG、LDL-C浓度水平无统计学差异(P>0.05),E2、E3表型组TC浓度水平与E4表型组比较存在统计学差异(P<0.05).3组均值比较显示E2表型组TG浓度高,E4表型组TC、LDL-C浓度均值高.结论:高脂血症是冠心病常见的危险因素,APOE不同的基因表型间个体血脂水平存在差异,临床上可根据APOE不同的基因表型指导患者正确选择调脂药物和饮食干预治疗,以期降低冠心病的发病率和心血管事件风险.
作者:刘国栋;王桦;汪琦;李晨芳;吴晓玲;林晏晨;罗雅琪 刊期: 2017年第02期
老年性肌萎缩是一种随年龄而出现的,以骨骼肌质量减少、肌力下降、功能减低等为特点的慢性综合征,严重影响临床疾病的治疗及预后.活动减少和营养缺乏是其发病的重要因素,也是防治肌萎缩的重要举措.国内关于运动结合营养的综合研究甚少,本文就老年性肌萎缩的发生、发展进行分析,剖析运动和营养与老年性肌萎缩的关系,为运动结合营养改善老年性肌萎缩的研究提供参考.
作者:张汇敏;石爱桥;秦子来;孟思进;翟茜茜 刊期: 2017年第02期
目的:探讨快速康复外科理念在子宫肌瘤围手术期应用的价值.方法:107例子宫肌瘤术患者随机分为实验组和对照组,在围手术期实验组(n=54)应用快速康复外科理念,对照组(n=53)采用传统治疗方案,比较两组患者的术后肠道排气时间、下床活动时间、住院时间,以及手术前、后血清C反应蛋白(CRP)的差异.结果:实验组较对照组术后排气时间、下床活动时间、住院时间明显缩短,CRP浓度明显降低(P<0.05).结论:对于子宫肌瘤患者在围手术期中应用快速康复外科理念,能降低手术风险、缩短住院时间、减少手术并发症、减轻机体应激和炎症反应,加速患者康复.
作者:朱弘宇;陈建玲 刊期: 2017年第02期
目的:观察乳酸钠林格氏液应用于老年患者不同麻醉方式下的容量动力学改变.方法:入选2013年8月-2014年8月于我院择期行上腹部手术治疗的老年患者52例,随机分为两组各26例,A组行硬膜外麻醉,在注射局麻药前10 min恒速静注乳酸钠林格氏液,B组行全身麻醉,在麻醉诱导前20 min恒速静注乳酸钠林格氏液,比较两组容量动力学变化.结果:两组各时点心率(HR)均无显著变化,B组T3.和T6.时平均动脉压(MAP)下降明显,分别为(91.1±18.0)mmHg和(92.8±17.9)mmHg,均显著低于A组(104.9±17.1)mmHg和(102.7±17.2)mmHg,差异均具有统计学意义(P<0.05);B组T30和T60时血浆稀释度(0.17±0.05)和(0.30±0.09)均显著高于A组(0.12±0.05)和(0.18±0.10),血容量扩张效率(4.6±1.4)ml/kg和(7.7±2.9)ml/kg均显著高于A组(3.0±1.2)ml/kg和(4.6士2.7)ml/kg,单位体重血容量增加量(0.51±0.15)%和(0.44土0.18)%显著高于A组(0.39±0.14)%和(0.31±0.16)%,差异均具有统计学意义(P<0.05).结论:老年患者在全身麻醉下使用乳酸钠林格氏液容量动力学变化更明显.
作者:夏艳琼 刊期: 2017年第02期
目的:探讨咪唑斯汀治疗特应性皮炎的疗效及可能机制.方法:收集2013年4月至2014年10月在我院门诊收治并确诊为特应性皮炎的患者168例,按入院的顺序随机分为2个组别,对照组81例,观察组87例.结果:观察组治疗1周、2周和3周后痊愈的例数分别为5、42和75例,较对照组多,观察组治疗2周的总有效例数较对照组多,两个组别未出现明显的不良反应.治疗前,两个组别血清IgE、IL-5、TNF-α和IFN-γ与嗜酸粒细胞(EOS)计数无显著差异(P>0.05),治疗2周和4周两个组别的血清IgE、IL-5、TNF-α和IFN-γ与EOS计数显著降低(P<0.05),与对照组比,治疗2周观察组的血清IgE、IL-5、TNF-α和IFN-γ与EOS计数降低显著(P<o.05),治疗4周,观察组的IgE较对照组低,两个组别血清IL-5、TNF-α和IFN-γ与EOS计数无显著差异(P>0.05).结论:咪唑斯汀治疗特应性皮炎安全有效,可能通过降低血清IL-5、TNF-α和IFN-γ与降低外周血EOS计数而发挥作用.
作者:詹庆霞;谢艳秋;王晋 刊期: 2017年第02期
目的:探讨红景天苷对慢性间断性缺氧心肌细胞的影响及作用机制.方法:建立大鼠慢性间断性缺氧模型,红景天苷进行干预,实验分为假手术组、NaCl组及红景天苷组.检测心脏功能,TUNEL法检测心肌组织的心肌细胞凋亡情况.Western Blot检测心肌组织Bcl-2、Bax、caspase-3的表达情况.同时测定心肌组织caspase-3的活性.结果:与对照组比较,红景天苷干预组8周,心功能明显改善,心肌细胞的凋亡明显减少(P<0.05).同时红景天苷干预组Bcl-2和Bax的表达比例更趋于正常化,caspase-3的表达及活性则明显减少(P<0.05).结论:在慢性间断性缺氧中,红景天苷通过平衡Bcl-2和Bax的表达,抑制caspase-3的活性而对抗心肌细胞的凋亡,保护心功能.
作者:付金容;郭芙蓉;黎明江 刊期: 2017年第02期
目的:构建并表达靶向IgA肾病分泌糖基化缺陷IgA1分子B细胞(Gd-B)的人乳头瘤病毒16型(HPV16)L1重组蛋白病毒样颗粒(VLPs)基因载体.方法:PCR定点突变技术构建HPV16 L1-PH嵌合基因片段并与pPIC9K载体连接获得重组表达质粒;将上述质粒通过电转化形式转入毕赤酵母GS115,并在甲醇诱导下表达HPV16 L1-PH嵌合蛋白;对Ni柱纯化后获得的目的蛋白分别进行SDS-PAGE和LC-MS/MS鉴定;加入解组装及组装缓冲液对目的蛋白进行包装,透射电镜观察病毒样颗粒的结构及形态.结果:纯化后的重组蛋白经SDS-PAGE和LC-MS/MS鉴定确定所检测胶点中的蛋白质为与目的蛋白预测值相同.透射电镜分析粒径分布和结构与预测值相同.病毒样颗粒在组装及解组装缓冲液作用下通过电镜可观察到发生组装及解组装.结论:本研究成功获得了靶向IgA肾病患者异常Gd-B细胞的嵌合HPV16 L1-PH嵌合蛋白,为IgA肾病下一步实验研究与靶向性治疗奠定了基础.
作者:陈朝威;颜奇;张勤;付强;王惠明;丁国华 刊期: 2017年第02期