吴献洪
患者，女，46岁，绍兴县富盛镇人。自诉1997年2月开始咯血，多时达150 ml，咯血时自觉咽痒。平时咳嗽，少痰，痰中偶带血丝，乏力，夜间盗汗，无胸痛。曾在当地医院诊为肺结核，使用止血剂、抗菌素和抗结核药1年，未见明显好转。1998年去杭州市某医院检查，结素试验阴性，痰涂片未找到抗酸杆菌，疑似纵膈肿瘤，纤支镜涂片未找到癌细胞。建议继续查痰，找肺吸虫卵。因咯血未愈，于1999年4月来我县防疫站地方病防治门诊部就诊。
作者：朱锦炎 刊期： 2001年第01期
目的 探讨氯硝柳胺和o,o'-二乙基-o''-(邻氯苯乙腈肟)硫代磷酸 酯（代号B002）合用的灭螺增效机理。 方法 采用肉眼观察、组织学、 组织化学、酶组织化学方法对经氯硝柳胺和B002分别处理后的钉螺软体进行了观察。 结果 氯硝柳胺对钉螺肝、睾丸、卵巢等各组织、器官都有损伤作用。B00 2使钉螺软体肿胀、外伸，失去附着能力，对外界反应能力降低，呈麻痹状态；头足部呈现 明显病理性改变，糖元含量减少，神经节和足肌中的胆碱酯酶（CHE）、一氧化氮合成酶（N OS）活性降低。 结论 B002干扰钉螺神经介质的传递，使得头足部肌肉 失去张力，对外界刺激反应消失，增加与氯硝柳胺接触介面，导致钉螺对氯硝柳胺的吸收增 加，加剧了钉螺的损伤和死亡。
作者：戴建荣；梁幼生；王锐；熊希凯；张燕萍；王浦海；张艳；杭盘宇；黄轶昕；朱荫昌 刊期： 2001年第01期
青蒿素类抗疟药已作为治疗恶性疟的首选药，至今尚少有抗蒿甲醚的恶性疟临床报道，我院于1998年6月至1999年6月发现2例抗蒿甲醚的恶性疟，现报道如下。 例1，男，36岁，农民，海南人，住院号240608。因间歇性畏寒、寒战、发热4 d于1998年6月18日入院。患者于4 d前出现畏寒、寒战、发热，体温高达40℃。查体无特殊。厚血片找到恶性疟环状体和滋养体。遂给予蒿甲醚肌注治疗，总量为720 mg，患者仍有畏寒、寒战、发热，血中仍找到恶性疟环状体，改用喹哌、环丙沙星、赛庚啶治疗后治愈出院。 例2，男，42岁，农民，海南人，住院号311766。因发热、头痛7 d，眼黄4 d于1999年6月30日入院。患者于7 d前出现畏寒、发热、头痛，每天间歇性发作，体温高达41℃，4 d前出现皮肤黄、眼黄、恶心、呕吐。查体：T38℃，P86次/ min，R24次/min，BP16/10 kPa。神志清，皮肤、巩膜重度黄染，浅表淋巴结无肿大，心肺未见异常，肝肋下1 cm，质中、有压痛、表面光滑，脾肋下未触及。尿常规示黄清， PRO＋，BLD，URO，RBC 1～5个/HP，血常规WBC 8.12×109/L,N 0.67, L 0.14,M 0.13,E 0.05,B 0.01,RBC 3.04×1012/L，Hb 82.2 g/L，血中找到恶性疟环状体，诊为恶性疟合并黑尿热。经用蒿甲醚治疗6 d，总量1 120 mg，仍发热，血中找到恶性疟环状体，改用磷酸萘酚喹、环丙沙星、赛庚啶治疗，体温正常，血中疟原虫消失，结合输血、补碱、地塞米松、低分子右旋糖酐等治疗，治愈出院。 青蒿素及其衍生物有很强的抗疟作用，随着临床广泛应用其敏感性有所下降，乃至出现耐药虫株，值得重视。
作者：苏林光；王英；贾杰 刊期： 2001年第01期
1998年夏，我国长江、嫩江流域发生了特大洪涝灾害，山东临沂籍320名转退官兵参加了长江流域抗洪抢险。根据上级指示精神，于1999年5～7月对上述官兵进行了血吸虫感染情况调查，现将结果报道如下。1 内容与方法1.1 调查对象 参加长江流域抗洪抢险的转退官兵。1.2 调查内容 一般情况、病史、症状、体征、皮内实验和免疫学诊断。1.3 调查方法 对目标人群筛检性普查，筛检出的高危人群进行诊断性调查，所有被调查者均进行皮内实验，对皮内实验阳性者做间接血凝试验。2 结果 1998年参加长江流域抗洪抢险临沂籍转退官兵共320人，本次实查226人，调查率为70%，其中皮试阳性19人，阳性率为8.05%，间接血凝试验19人全部阴性。3 小结 本次调查实查率仅为70%，原因在于退役官兵离开部队时间较长，很多人已外出打工。本次调查未发现血吸虫感染阳性者，因为该人群大多在接触疫水前进行过预防服药，完成抗洪抢险任务后原部队进行过血吸虫感染调查和预防性治疗。另外，本次调查目标人群标本较小，实查率不高，也可能是未发现感染者的原因之一。 建议对调查的部分目标人群继续有计划地进行追踪观察，以保证抗洪转退官兵不因感染血吸虫病而对身体造成危害。
作者：刘庆文；闫素梅；张纪霖；付永春；张永建；康希平 刊期： 2001年第01期
发热是寄生虫病患者常见的症状之一，如疟疾、急性阿米巴痢疾、阿米巴肝脓肿、黑热病、急性血吸虫病、肝吸虫病重度感染早期、肺吸虫病急性期、蚴虫移行症等。1 发热和特点1.1 发热的高低、热型、期限与寄生的虫种、感染的轻重和机体的免疫力有关。无免疫力的机体在重度感染时，多为弛张型高热，发热期一般持续时间较长。急性血吸虫病、急性肺吸虫病及内脏蠕虫蚴虫移行症的轻度感染，表现为低热，发热仅数天。间日疟、三日疟一般为有规则的周期性发热，热度在40℃左右。恶性疟发热不规则，可出现超高热。1.2 热度与寄生虫在体内增殖和机体免疫状况有关。如疟疾在开始发作时，原虫密度低，发热则较轻。经过几个裂体增殖周期，血内原虫数猛增，热度明显增高。随着免疫力的产生，机体耐受力增强，发热将逐渐减轻。1.3 发热伴有常见症状有畏寒、头痛、全身肌肉疼痛或关节痛等，退热时有盗汗或大汗，严重者出现全身中毒症状。蠕虫病的发热期还伴有嗜酸性粒细胞增高。1.4 某些寄生虫病发热期可出现严重并发症或凶险的临床表现。如暴发型阿米巴痢疾可能出现肠出血、肠穿孔，某些反复发作的恶性疟用药后可出现黑尿热，患者排黑褐色血红蛋白尿，严重者有尿闭，甚至发生尿毒症。恶性疟还可能出现脑型、超高热型等凶险症状，病情险恶，病死率高。
作者：孟宪娥 刊期： 2001年第01期
目的 评价盾叶薯蓣制剂杀钉螺卵的效果。 方法 采用药液浸泡法对不同发育阶段的螺卵细胞进行孵化阻滞实验，用点斜法和直线回归法作统 计分析。 结果 10 mg/L浓度浸泡48 h杀灭1 d卵龄螺卵的效果可达到80% ，其LD50为10.28 mg/L（斜率b=1.9767），杀灭20 d卵龄螺卵的效果<5%；测定的生 物效应与螺卵的卵龄呈负相关。 结论 盾叶薯蓣制剂对1 d和5 d卵龄螺 卵具有良好的杀灭效果，而对20 d卵龄螺卵的杀灭作用不明显。
作者：刘汉成；冯冬初；曹慕民；蔡顺祥；CAI Xun-xiang 刊期： 2001年第01期
两江镇大部分居民有食鱼生的习俗，为了解本镇学生华支睾吸虫感染情况，1996年5月～1998年10月对该镇300名学生进行了粪便检查，现报道如下。1 材料与方法1.1 调查对象 3～6岁学前班学生90名，6～14岁小学生210名。1.2 调查方法 取2～4 g待检粪便置烧杯内，加水调成混悬液，用60～80目/2.54 cm2的铜筛过滤到10 ml的离心管中，以1 500～2 000 r/min，离心1～2 min，倾去上层液后，加10%甲醛8 ml，混匀后固定5 min，加入乙醚1.5 ml，塞紧管口，用力摇晃约30 s，小心地取下管塞，低速离心1 min，取出离心管，可见管内自上而下明显分为4层，即乙醚层、粪渣层、甲醛层，微细粪渣层(内含虫卵)，用竹签沿着管壁与粪渣层之间轻轻转动，使粪渣层游离，倾斜离心管将上3层倒出，用棉签擦去粘于管壁的粪渣，轻摇离心管使余留液体与沉渣混合，取1～2滴沉淀物于载玻片上镜检。1.3 统计学处理 卡方检验。2 结果2.1 华支睾吸虫感染情况 调查的300名学生中，44例粪检阳性，总感染率为14.67%。3～6岁组90人中，4例粪检阳性，感染率占该年龄组的4.4%；6～14岁组210人中，40例粪检阳性，感染率占该年龄组的19.1%。经统计学处理，两年龄组感染率差异显著(P<0.01)。
作者：覃权记；谭梅桥 刊期： 2001年第01期
为了解当前张家口市学龄前儿童蛲虫的感染情况，作者于1998年11月采用透明胶纸法对本市部分幼儿园儿童进行了蛲虫感染调查,其结果如下。 共检查学龄前儿童421名，蛲虫阳性者32人，平均感染率为7.6%。受检儿童分3个年龄组：4～岁组，入园半年，蛲虫感染率8.2%（10/121）；5～岁组，入园一年半，感染率为9.8%（16/108）；6～7岁组，入园两年半，感染率为4.4%（6/137）。在3个年龄组中，前两组感染率相近，6～7岁组感染率低。 崔俊改［1］、高风年［2］曾对张家口市学龄前儿童做过此项调查，当时感染率分别为33.4%和28.4%。与本次结果相比张家口市学龄前儿童的蛲虫感染率呈明显下降趋势。分析其原因：现多为独生子女家庭，儿童之间的相互感染已较少见，加之其生活条件、卫生习惯均较前几年大为改善，人们的防病意识不断提高。幼儿园每年两次定期集体驱虫，对降低幼儿蛲虫感染率起明显作用，应大力推广。同时，还应进一步加强儿童的健康教育，培养其生活自理能力，养成良好的卫生习惯，提高自我保护意识，降低蛲虫感染率。C
作者：卢致民；赵建玲；刘金花；唐宏伟；刘向东 刊期： 2001年第01期
患者，男，18岁，住沈阳市于洪区。自诉消瘦、食欲不振，近日大便中常排出大量白色窄细带状物于粪体表面，并能蠕动。到当地医院就诊疑为绦虫病。患者家长于2000年10月31日带虫来本站检诊。节片长1 cm左右，宽0.3～0.4 cm，一端平，一端椭圆，生殖孔分列两侧。挤压节片，发现大量卵囊，卵囊内含有16～40个卵，确认为犬复殖孔绦虫。 犬复殖孔绦虫人体感染很少见，至今国内报道15例，分布在11个省，多为儿童，成人只1例［1］。该例为青年，为辽宁省第2例。人体犬复殖孔绦虫感染为误食该绦虫中间宿主蚤而至。该患者家养犬，与犬接触密切可能与感染有关。给患者投以吡喹酮25 mg/kg一次顿服治疗，痊愈。
作者：许景田；李凤华 刊期： 2001年第01期
云南省地处祖国的西南边陲，位于东经97°31′39″～106°11′47″，北纬21°8′32″～29°15′8″，东与贵州省、广西自治区为邻，东北面与四川省隔江相望，西面与缅甸接壤，南部与老挝、越南比邻，边境线达 4 061 km，总面积为39.4万km2。总人口4千万，由26个民族组成，其中少数民族占30%左右。省内海拔高为6 740 m，低为76.4 m，由于受印度洋及太平洋季风气候以及特殊的地形地貌的影响，云南省具有多种气候类型，立体气候十分明显，呈现寒、温、热三带气候。干季与湿季分明，年温差小，日温差大。云南特殊的人文景观特别适合疟疾流行。该病历史悠久，早文字记载见于公元225年，诸葛亮率部南征有“士卒感染瘴疠，祭泸水以消患”的记载。近代疟疾给云南人民造成了惨重的灾难，如本世纪初法国修筑滇越铁路的9年间，因患疟疾死亡4万余人，留下了“一条枕木一条命”的民谣；1921～1931年，思茅疟疾大流行，使这个当时有30 000多人，商业发达的滇南大城市人口剧减，到1949年城区人口仅有1 000余人。这些铁的事实充分说明了云南疟疾的危害程度。 新中国成立50年来，各级党政部门对疟疾防治工作极为重视。1950、1952、1953年分别在普洱、芒市、耿马成立了3个省级疟防所，同期中央防疫大队、西南防疫队来滇开展以疟疾为主的防病工作。昆明军区抗疟总队和省防疫站在疟防工作中，投入了大量的人力物力，同期近20个县成立了防疫站。1956年对以上机构作了调整，经云南省委批准，同年在勐海成立了云南省疟疾防治所，明确该所任务为全省疟防和业务指导。1968年云南疟防所迁至思茅，1979年更名为云南省疟疾防治研究所。省卫生厅给该所下达的任务为:疟疾防治、研究及专业人员培训。1997年省政府将疟疾列入5个重点防治疾病之一。
作者：杨恒林 刊期： 2001年第01期
目的 观察现场应用青蒿琥酯预防日本血吸虫感染的效果。 方法 将5 098名接触疫水者随机分为青蒿琥酯组和安慰剂组，剂量均为6 mg/kg顿服，在接触疫水后7～10 d开始服药，每2 wk服1次，脱离疫水后1 wk内再服1次，末次服药后4 wk，用尼龙袋集卵孵化法加改良加藤法进行效果考核。 结果 青蒿琥酯组粪检阳性9例，阳性率0.37%（9/2438），无急性血吸虫病发生；而对照组粪检阳性189例，阳性率7.11%（189/2660），有5例发生急性血吸虫病。 结论 口服青蒿琥酯能有效预防日本血吸虫感染。
作者：徐明生 刊期： 2001年第01期
早在1938年，黑龙江省即有华支睾吸虫病例报道。根据首次全国人体寄生虫分布调查结果，黑龙江省华支睾吸虫感染率为1.18％，仅次于广东省（1.18％），位居全国第二。随着人们食谱的不断拓展，食生鱼、虾的人越来越多，其发病率有逐年升高的趋势。现将本站门诊收治的387例来自病区和非病区的华支睾吸虫病分析如下。1 一般情况 已确诊的387例华支睾吸虫病病人中，男317人，女70人。年龄小14岁，大67岁。其中20～50岁的占74.16％。有肝炎病史者101人，合并肝癌的3人 。来自流行区的病人309人，占病人总数的79.84％，非流行病区78人，占20.16％。有生食鱼、虾史者314人，占81.14％。2 临床资料 症状以腹胀、腹泻、肝区痛、食欲减退、消化不良、全身乏力、头昏和低热为主。体征以肝肿大为主，剑突下2～3 cm者44例，4～6 cm者16例，>6 cm者3例；肋下1～2 cm者32例，4.4 cm者11例，有黄疸者32例。3 实验室检查 皮试结果：阴性64人，假阴性率16.54％；可疑22人，阳性355人，与粪检符合率达97.42％。粪检检查：采用直接涂片、消化法和改良加藤厚涂片相结合的方法。每种方法均检3片。387例均检出华支睾吸虫虫卵。4 治疗 所有病人均服吡喹酮。采用成人总剂量7.2 g，12次分服的4 d疗法，儿童用量酌减。辅以保肝药物和维生素C。
作者：段淑梅；李萍；王惠君；韩丽娜 刊期： 2001年第01期
目的 进一步评价胶体染料试纸条免疫诊断试剂盒（DDIA）诊断血吸虫病 的现场应用价值。 方法 在非传播季节，用Kato-Katz 3片法现场筛选 粪 阳病人，在吡喹酮治疗前及治疗后2和4个月分别用DDIA，DGS-COPT和SEA-ELISA试剂盒做 血检，Kata-Katz法做粪检；比较3种试剂盒治前阳性检出率和治后阳性率的变化。 结果 治前DDIA、DGS-COPT和SEA-ELISA阳性率分别为96.69%、90.08%和98.36 %，DDIA与SEA-ELISA比较差异无显著性（χ2=1.46,P>0.05），与DGS-COPT比较差 异明显（χ2=4.28,P<0.05）；治愈后2和4个月3种试剂盒阴转率均较低；30例健康人 DDIA均为阴性。 结论 DDIA诊断试剂盒具有较高的敏感性和特异性，方 法快速、简便，适于血吸虫病现场大规模筛查。
作者：梁幼生；朱荫昌；宁安；戴建荣；何伟；杨小红；徐明；熊玉霞；高祖禄；胡启龙 刊期： 2001年第01期
双氢青蒿素作为青蒿素的又一衍生物，继青蒿琥酯、蒿甲醚应用于临床后，对各种类型疟疾的治疗都显示了良好的疗效。国外学者报道［1］，青蒿琥酯或蒿甲醚与甲氟喹联用具有协同抗疟作用，并可有效地控制复燃。作者在援助赤道几内亚的医疗工作中，以双氢青蒿素片联用甲氟喹，治疗51例恶性疟患者，亦取得满意的疗效。对象与方法1 一般资料 51例恶性疟患者均系1998年8月～1999年2月赤道几内亚巴塔地区医院的住院患者，其中赤几人35例，西班牙人7例，俄罗斯人4例，中国人3例，黎巴嫩人2例。男29例，女22例，年龄5～42岁，平均25岁。全部患者均有疟疾发作的症状与体征，并经末梢血涂片检查找到恶性疟原虫大小环状体或裂殖体而确诊。无肝、肾病疾患史，此次治疗前未接受过其他抗疟药治疗（引用该院病例，已事先征得其同意）。
作者：王文琦；杨伟；Micha ST 刊期： 2001年第01期
目的 探讨旋毛虫病鼠毒血症的形成以及与中枢神经系统氧化损伤的关系。 方法 应用黄嘌呤氧化酶（XOD）、丙二醛（MDA）和还原型谷胱甘肽（GSH）3个检测指标从发病学角度分析氧化酶类在宿主重要组织脏器产生的氧化损伤和修复的变化及作用。 结果 小鼠肠、肝、心和脑组织中的XOD、MDA和GSH 3个检测指标在感染旋毛虫后的不同时期（3～30 d）呈现出明显不同的改变。血液中的MDA在感染过程中一直维持较高的水平，并且脑组织中MDA的含量在感染过程中与血液及肠组织中的MDA呈正相关升高。 结论 宿主多个脏器组织的氧化损害、氧化代谢毒性产物在机体内的蓄积以及抗氧化能力的改变等因素可能是造成宿主毒血症的形成以及中枢神经系统损害的主要原因。
作者：程晓馨；崔昱；王莹；赵海东 刊期： 2001年第01期
患者，男，43岁。自1997年8月中旬，无明显诱因开始出现脐周隐痛、腹泻(每日2～3次)、腹胀、食欲不振、恶心、呕吐、乏力，体温38℃左右。曾被诊断为“细菌性痢疾”，经抗感染治疗，无效。后疑诊为“慢性非特异性结肠炎”。半月后，患者送粪便来本院检查。 从排出的粪便中，发现有白色、活动或不活动的小虫，长者约10 mm，短者约4 mm。根据其后气门的形态特征，经鉴定为麻蝇科幼虫。用甲苯咪唑治疗，症状逐渐消失。 目前国内报道的肠道蝇蛆病例数较少，加之该病无特殊临床表现，没有引起临床医师的足够重视，极易误诊。 肠道蝇蛆病只有依靠病原体的检查，方可确诊。部分检验室人员不熟悉蝇蛆形态，在粪便检查中又不属于常规检查的范围，很易漏诊。肠道蝇蛆病可能是人误食了含有蝇卵或蝇幼虫的食物、腐肉或腐烂水果，则幼虫可在肠内生长发育，然后随大便排出或在肠腔内化蛹后排出。另外，在野外大便或赤身睡眠时，蝇在肛门附近产卵或产幼虫，侵入肠内引起。该患者未曾在野外留宿，很可能通过不洁的饮食而感染。因此改善环境卫生和个人卫生、清除蝇蛆的孳生场所，发动群众杀灭成蝇是预防的关键。
作者：杨晓红杨晓红 刊期： 2001年第01期
脑囊尾蚴病是中枢神经系统常见的寄生虫病，东北地区为此病的高发区之一，本文拟对我院 1998年4月～2000年4月收治的90例脑囊虫病病人进行回顾性分析，以期对提高本病诊断治疗 水平提供资料。1 一般资料 本组病人按1986年全国脑囊虫病学术会议通过的诊断标准确定诊断［1］。90例病人 中男63例，女27例，年龄6～63岁，平均32.6岁，病程1个月～5年，平均1.2年，临床表现： 癫痫型69例（76.7%），高颅压型15例（16.7%），混合型6例（6.7%）。2 诊断及治疗 病人入院后做血、尿常规、生化检查、头部CT/MRI及血或脑脊液囊虫免疫试验。治疗上所有 病例除消除脑水肿，抗癫痫治疗外，71例进行了药物抗囊尾蚴治疗，囊尾蚴数量多、病情重 者用吡喹酮小剂量法，日剂量30 mg/kg，分3次服，总剂量120～200 mg/k g；数量少、病情轻者用大剂量法，日剂量50～60 mg/kg，分3～4次服，总剂量300～600 mg /kg，第1疗程剂量不宜过大，按日总量的1/4剂量治疗1～3 d，再采用正规剂量，间隔2～3 个月再进行第2疗程。
作者：丰宏林；李鹤；王鹏；孙伟；张忠玲；盛莉 刊期： 2001年第01期
青海省位于我国西北、青藏高原之东北部，总面积72.12万km2，总人口488.3万人(1996年)。青海是我国多民族聚居的省份，土族是其主要的少数民族之一，人口总数(18.4万人)仅次于藏族和回族，主要分布在互助、民和、大通、乐都、同仁等地。该民族具有悠久和特有的风俗习惯，以农业生产为主，种植青稞、小麦和薯类。1 调查方法 按全国人体寄生虫分布调查实施细则［1］的要求和方法进行。计数蛔虫卵，按WHO分类标准［2］划分感染强度，轻度：EPG≤5 000，中度：5 000
作者：吴献洪 刊期： 2001年第01期
目的 研究抗白纹伊蚊组织抗体在蚊体内的动态分布情况。 方法 采用直接法免疫酶组织化学染色法对吸食免疫小鼠血后不同时间的白纹伊蚊组织切片染色，在镜下观察并摄片。 结果 白纹伊蚊吸食免疫小鼠血后，0 h肠腔内呈阳性染色，肠壁及其它组织无着色反应；12 h肠壁细胞、马氏管和卵巢均出现阳性反应，蚊围食膜开始出现，但不完整；24 h围食膜发达，膜壁很厚。卵巢反应较强，马氏管和肠壁细胞反应较弱；36 h围食膜消失，血液完全被消化。卵巢呈阳性染色，肠壁及马氏管无明显反应；48 h除卵巢小管壁呈阳性反应外，仅少量卵巢管内部出现着色反应。马氏管和肠壁无反应。 结论 （1）白纹伊蚊吸血后12 h围食膜开始出现，到24 h时发达，36 h后消失；（2）抗白纹伊蚊小鼠抗体可穿过蚊肠壁进入到蚊体腔，并与相应的靶组织结合；（3）抗蚊抗体在蚊吸血后12 h进入蚊体腔的量多，抗体与蚊卵巢组织的作用时间长。
作者：石磊 刊期： 2001年第01期
80年代中期出现了一种新技术,称为聚合酶链反应(Polymerase chain reation,PCR),其基本原理是在目的基因的两端人工合成两段寡核苷酸引物,在提取于水生嗜热菌中的DNA聚合酶TaqI作用下,以溶液中4种脱氧核苷酸为原料,以待测的目的基因为模板,在人工控制的变性温度、复性温度及延伸温度条件下，于短期内完成目的基因的体外扩增。PCR技术诞生之初基本的用途之一是基因诊断。近随着分子生物学及分子遗传学的进步，针对PCR系统中模板取材、引物设计的改良及PCR产物的不同运用，PCR技术及其用途被多层面、全方位地发展了，从而也显示了PCR技术在生命科学不同领域中运用的强大功能。本文首先就普通PCR技术在各环节的革新方式作一简介，再例举不同PCR改良技术在各研究领域的运用。1 针对PCR技术各环节的革新措施1.1 引物的改良 引物的设计和选择是PCR技术的重要部分，直接关系到PCR的敏感性和特异性，通常需要了解基因背景信息而设计合成引物。随着所合成引物可裁信息量的增加，引物的职能也在不断增加，除了引导脱氧核糖核酸按模板限定聚合外，还可制造出特定的结构以便PCR产物进一步用于基因片段克隆及或基因突变位点的鉴定。如对裂殖子表面蛋白1的17区基因片段（MSP1-17）的PCR扩增，其引物设计时，在正向引物上设计有SalⅠ限制性内切酶位点及起始码，反向引物上设计有BamHⅠ限制性内切酶位点及终止码，由这对引物引导合成的DNA片段属于MSP-17基因，经SalⅠ和BamHⅠ双酶切后的回收片段能与被同样双限制性内切酶切的puc18质粒载体重组［1］。此处的引物的所含的4个功能序列为终得到MSP1-17基因片段的克隆提供了便利。又如，对恶性疟原虫二氢叶酸还原酶（DHFR）基因进行多态研究时，所用PCR引物F/3′末端以个别碱基替换的机制生成了DraⅠ限制性内切酶位点，通过相应限制性内切酶切后能灵敏地检测出该164号密码子为编码异亮氨基酸多态［2］。又如，为了能直接从PCR扩增产物的指纹图鉴定恶性疟原虫多药抗性基因（Pfmdr1）片段的多态性，使DCW3引物3′末端的碱基以替换方式产生TAT序列，带该3′末端序列的引物只能扩增可与该引物产生全面互补、且含酪氨酸编码序列多态的Pmdr1基因，从而对PCR产物的电泳分析就能鉴别酪氨酸编码的存在［3］。另外，在PCR引物末端带上某种配体，以便PCR通过配体结合机制与别的系统联结，如扩增恶性疟原虫SSUrRNA基因序列中疟原虫种特异保守序列的引物5′末端结合有生物素，带有生物素的PCR产物与包被在聚乙氯烯板上的亲和素结合,结合体可在荧光素标记的寡核苷酸探针介导下与ELISA系统相接［4］。这种对引物的改良所建立的有PCR参予的系统其敏感性、特异性均高于一般PCR。
作者：董莹 刊期： 2001年第01期
中国病原生物学杂志
主管:中国寄生虫病防治杂志
主办：中华人民共和国卫生部
