学术投稿

环孢素A促进HepG2.2.15细胞中乙型肝炎病毒核心蛋白入核的研究

潘孝本;韩进超;高燕;魏来

关键词:肝炎病毒, 乙型, 病毒核心蛋白质类, 环孢菌素, 细胞凋亡
摘要:目的 观察磷酸脂酶抑制剂环孢素A(CSA)对HBcAg表达和定位的影响,了解HBV生活的周期.方法 以30 μg/ml的CSA处理HepG2.2.15细胞2 d或4 d;共聚集显微镜观察细胞内HBcAg和HBsAg亚细胞定位;TUNEL方法检测细胞凋亡.结果 对照组HepG2.2.15细胞中HBcAg主要定位于胞质.CSA处理2 d后可使胞质中HBcAg和HBsAg水平下降,细胞核内HBcAg水平升高,可见约5%细胞发生凋亡.CSA处理4 d后细胞核内HBcAg水平进一步提高,约25%细胞核内表达强度明显高于胞质,并约有30%细胞发生凋亡.结论 CSA可促使HepG2.2.15细胞内HBcAg进入细胞核.HBcAg的核内表达定位增强可能与蛋白磷酸化水平增高,及细胞衰老或者凋亡有关.
中华实验和临床病毒学杂志相关文献
  • HIV-1/2抗体和P24抗原联合检测试剂盒的研制与评价

    目的 研制HIV-1/2抗体和P24抗原联合检测酶免疫试剂盒并评价其实用性.方法 联合使用基因工程HIV1/2型抗原和抗HIV P24单克隆抗体包被酶联反应板,以辣根过氧化物酶标记的HIV1/2型抗原和生物素化的兔抗HIV P24抗体作为标记物,研制了联合检测HIV1/2抗体和P24抗原的ELISA诊断试剂,并对其特异性、敏感性、稳定性等进行评价和临床考评.结果 检测P24抗原质控品的灵敏度可达0.2 ng/ml;与雅培公司试剂比较检测78份AIDS患者血清和85份正常人血清、对照检测中国药品生物制品检定所研制的HIV参比血清,特异度和灵敏度均为100%.临床考核检测12 051份各种血清,灵敏度为100%(543/543),特异度为99.48%(11 448/11 508).试剂在37℃放置6 d后,试验结果无明显差异.结论 本试剂盒具备特异度强、敏感度高、稳定性好、操作简便等优点,可以一步检出HIV特异性抗体和HIV P24抗原,缩短了HIV感染的检测窗口期,适用于HIV感染的实验室诊断和流行病学调查.

    作者:胡燕;侯俊;冯燕青;冯长访;史素娟;沈宏辉;王志杰;王保君;貌盼勇 刊期: 2007年第04期

  • 用双向凝胶电泳-飞行时间质谱技术分析HBV感染肝组织蛋白质组

    目的 比较正常肝组织与HBV感染肝组织中蛋白质表达谱的改变,筛查在HBV致病过程中相关蛋白质分子表达的不同.方法 应用双向聚丙烯酰胺凝胶电泳,对3例正常肝组织(A组),3例HBV感染肝组织(B组,均为组织HBsAg阳性,外周血HBsAg阳性、抗-Hbe阳性、抗-HBc阳性)的蛋白质组表达谱进行差异分析,应用基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱仪对差异蛋白质点进行了鉴定.结果 相同条件下对各组总蛋白样品分别进行3次双向电泳,各组检测到的蛋白点数如下:A组(1125±56)个,B组(1203±42)个.以各组中2-DE效果好、点数多的一块胶作为参考胶,分别进行2组间的匹配分析,筛选出两组之间差异大于或等于2倍的蛋白点40个.应用质谱鉴定出人线粒体醛脱氢酶H链、结合珠蛋白Hp2、抗过氧化物蛋白2等22种蛋白质.结论 HBV感染所致慢性炎症能使肝组织表现出明显的差异性蛋白表达谱.

    作者:秦雪;谢丽;陈晓燕;代智;崔杰峰;康晓楠;彭宽;舒宏;李山;刘银坤 刊期: 2007年第04期

  • 双环醇片对乙型肝炎病毒B、C基因型感染的疗效比较

    目的 比较双环醇片对乙型肝炎病毒B、C基因型感染的疗效.方法 选择乙型肝炎病毒B基因型感染者26例、C基因型感染者44例,同时给予双环醇片口服,50 mg/次,每日3次,疗程24周.观察受试者的临床症状、体征变化,并于治疗前、治疗期间(第12周)及治疗结束时(第24周),分别检测血常规、肝功能、乙肝三系和血清HBV DNA水平.结果 双环醇片能明显改善B、C基因型乙型肝炎病毒感染者的临床症状和肝功能,并有一定的抑制病毒作用,两组患者治疗24周时的血清HBV DNA阴转率分别为19.2%和15.9%,差异无统计学意义.结论 双环醇片不仅能保护慢性乙型肝炎患者的肝功能,同时能抑制乙型肝炎病毒复制,对B、C基因型乙型肝炎病毒感染者的疗效相近.

    作者:阮冰;王军伟;白雪玲 刊期: 2007年第04期

  • SiRNA对丙型肝炎病毒5'非翻译区的干扰作用实验研究

    目的 研究多种siRNA对丙型肝炎病毒(HCV)5'非翻译区(5'-UTR)的干扰作用.方法 以绿色荧光蛋白基因(GFP)为报告基因,构建HCV 5'UTR与GFP核酸序列连接的表达载体:pcDNA-HCV-5'UTR-GFP.设计针对HCV 5'UTR区3段小干扰RNA(siRNA),siRNA与表达质pcDNA-HCV-5'UTR-GFP共转染Hep G2细胞中,采用荧光显微镜观测细胞内荧光强度改变,并且用流式细胞术量化分析细胞荧光强度变化,评价多种siRNA对HCV基因表达的作用.结果 成功构建含HCV 5'UTR区的绿色荧光蛋白基因,siRNA能特异性地抑制绿色荧光蛋白基因的表达,siRNA A、siRNA B和siRNA C的抑制率分别为68.4%、72.6%、75.6%;siRN A+siRNA B、siRN B+siRNA C和siRN A+siRNAC的抑制率分别为91.8%、87.2%、92.4%;siRN A+siRNA B+siRNA C的抑制率高,为95.7%.结论 多种siRNA对HCV 5'UTR区具有干扰作用,组合使用效果更好.

    作者:陈兆军;张腊红;李伟;刘霞 刊期: 2007年第04期

  • 双环醇片联合胸腺肽治疗慢性乙型肝炎疗效和安全性分析

    目的 研究双环醇片联合胸腺肽治疗慢性乙型肝炎的疗效和安全性.方法 随机选择135例慢性乙型肝炎患者分2组接受治疗,试验组,68例,每日口服双环醇片75 mg,同时使用胸腺肽20 mg,肌内注射,隔日一次,对照组,67例,仅给予每日口服双环醇片75 mg,2组均连续用药24周.观察治疗前后血清氨基转移酶水平及血清病毒学标志方面的改变.结果 2组血清氨基转移酶均得到明显下降,但差异无统计学意义.试验组HBeAg阴转率(35.3%)显著高于对照组(19.4%)P<0.05,HBeAg血清转换率(22.0%)虽高于对照组(14.9%),但差异无统计学意义,HBV DNA阴转率(36.7%)显著高于对照组(20.9%)P<0.05.2组均未出现明显不良反应.结论 双环醇片和胸腺肽联合应用治疗慢性乙型肝炎可提高抗病毒疗效且安全.

    作者:侯世荣;谢碧红;顾小军;严晓敏;邱杰 刊期: 2007年第04期

  • 甲型流感病毒核糖核蛋白复合体的核质转运过程

    甲型流感病毒的基因组由8个负链RNA片段组成,共编码10种蛋白质,每一节段RNA都是以不同的核糖核蛋白复合体(RNPs)形式存在.本综述的目的是根据RNPs中各蛋白的结构特点阐述RNPs在病毒核质转运过程中发挥的作用.

    作者:王乃福;张晓光;周玲 刊期: 2007年第04期

  • 环孢素A促进HepG2.2.15细胞中乙型肝炎病毒核心蛋白入核的研究

    目的 观察磷酸脂酶抑制剂环孢素A(CSA)对HBcAg表达和定位的影响,了解HBV生活的周期.方法 以30 μg/ml的CSA处理HepG2.2.15细胞2 d或4 d;共聚集显微镜观察细胞内HBcAg和HBsAg亚细胞定位;TUNEL方法检测细胞凋亡.结果 对照组HepG2.2.15细胞中HBcAg主要定位于胞质.CSA处理2 d后可使胞质中HBcAg和HBsAg水平下降,细胞核内HBcAg水平升高,可见约5%细胞发生凋亡.CSA处理4 d后细胞核内HBcAg水平进一步提高,约25%细胞核内表达强度明显高于胞质,并约有30%细胞发生凋亡.结论 CSA可促使HepG2.2.15细胞内HBcAg进入细胞核.HBcAg的核内表达定位增强可能与蛋白磷酸化水平增高,及细胞衰老或者凋亡有关.

    作者:潘孝本;韩进超;高燕;魏来 刊期: 2007年第04期

  • 正确使用医学名词

    随着医学科学的迅猛发展,浩如烟海的新医学名词不断出现,使人们应接不暇;一些老医学名词也有待人们去重新审视.有的命名不正确、欠科学;有的一名多译、欠统一.所有这些均不利于医学科学的交流和发展.

    作者:张伟 刊期: 2007年第04期

  • 血清谷氨酰转肽酶含量测定在慢性乙型肝炎中的临床意义

    目的 探讨血清谷氨酰转肽酶(GGT)含量变化在慢性乙型肝炎(CHB)不同程度肝脏病理损害中的变化规律及临床意义.方法 测定70例CHB患者血清ALT、AST、GGT水平,同时行肝活体组织检查,对肝脏进行炎症分级和纤维分期.分析ALT、AST、GGT与CHB之间的关系.结果 (1)ALT、AST、GGT随炎症程度和纤维化程度的上升而上升,但到G4和S4后则下降.GGT随ALT、AST的升高而升高,ALT、AST和GGT的相关系数分别为:0.322、0.328(P<0.05).在保肝治疗后,ALT较快降至正常且GGT保持在一个较低水平的为轻度CHB,而随着ALT下降,GGT仍持续在一个较高水平的为中度及重度CHB,其中重度CHB的GGT水平有所波动.结论 血清GGT比ALT、AST更准确的反映肝脏的炎症程度,GGT的活动度给临床判断慢乙肝的炎症提供了重要的判断依据.

    作者:冼永超;杨景毅;徐茹;黄成军;吴洛琳 刊期: 2007年第04期

  • 湖南3县(市)狂犬病病毒分子生物学研究

    目的 研究湖南省狂犬病高发区和无病例区动物携带狂犬病的分子生物学特征.方法 用直接免疫荧光法检测犬唾液及犬、猫脑标本,以RT-PCR法复核阳性进行遗传学分析.结果 武冈市和洞口县送检的82只和17只犬中,分别有12只和1只检测到狂犬病毒抗原与核苷酸阳性,阳性率分别为14.63%和5.88%.凤凰县67份犬脑标本未检测出病毒.28份猫脑组织标本也未检测出狂犬病毒.用RT-PCR法扩增阳性犬脑组织(编号为Wg13,Dk13)的狂犬病毒N基因,两株病毒之间核苷酸与氨基酸的同源性分别为99.4%及99.1%;Wg13株与中国疫苗株CTN株和aG株的核苷酸同源性(氨基酸)分别为89.4%(98.2%)、86.1%(95.1%);Dk13株与中国疫苗株CTN株和aG株的核苷酸同源性分别为89.1%(98.0%)、86.1%(94.9%).与其他国家分离到的狂犬病毒相比,两株病毒与印度尼西亚的同源性大,分别为92.8%、93.2%,而与印度、日本及斯里兰卡等其他国家同源性相对较小.结论 两株狂犬病毒均为Ⅰ型狂犬病毒,其N基因的核苷酸序列与当前使用的疫苗株相比,两株病毒与CTN疫苗株分在同一组,同源性较大.

    作者:肖奇友;吕伟;罗述斌;钟群;熊成龙;王祥迪;杨安宝;张永振 刊期: 2007年第04期

  • 单纯疱疹病毒糖蛋白D与IL-2基因共表达质粒的构建及其免疫学鉴定

    目的 构建含单纯疱疹病毒Ⅰ型糖蛋白D(gD)全长基因和人白细胞介素2(IL-2)共表达的重组真核表达质粒IRES-gD-IL-2,并诱导其在抗原提呈细胞--树突状细胞(DCs)的表达.方法 应用PCR方法分别扩增出HSV-1 gD和IL-2基因,经PCR、双酶切及测序证实正确后分别插入真核表达载体IRES的上、下游.通过脂质体介导转染DCs,并进行免疫学鉴定.结果 重组表达质粒IRES-gD-IL-2经PCR和酶切均出现相应长度的片段.经Western Blot证实,HSV-1 gD抗体可特异识别DCs内表达的gD蛋白.结论 构建了gD与IL-2共表达的重组真核表达质粒IRES-gD-IL-2,免疫印迹鉴定证实该表达产物具有免疫学活性.

    作者:李伟荣;王得新;王健伟;牛勃;胥显民 刊期: 2007年第04期

  • 甲胎蛋白异质体的检测及临床应用

    甲胎蛋白(alpha fatoprotein,AFP)是早期肝细胞癌(HCC)诊断的良好指标,但是部分良性肝病也有AFP升高,30%~40%的肝细胞癌AFP正常,这样导致部分肝病无法判断良恶性.

    作者:陈松劲;邵平扬 刊期: 2007年第04期

  • 慢性重型肝炎合并真菌感染61例临床分析

    近年来随着高效、广谱抗生素及激素在临床上的广泛应用,真菌感染的发病率呈上升趋势[1].慢性重型肝炎由于肝功严重障碍,免疫力低下,易并发真菌感染,感染又再次加重肝功衰竭,促使病情恶化和死亡.本研究对我院近年来收治的慢性重型肝炎患者合并真菌感染的情况进行分析.

    作者:姚云洁;吴贻琛;朱琼香;邢汉前;游绍莉;辛绍杰 刊期: 2007年第04期

  • 再谈感染病学相关新概念及新词汇的翻译问题

    随着科技水平的不断发展,专业新词汇和新概念不断增加,感染病学亦不例外.由于感染病学学科广泛涉及到病毒学、细菌学、寄生虫学、免疫学、病理学、药理学及肝病学等,新词汇/新概念涉及面广,对在其理解和翻译中很易产生各种问题,笔者在多种场合曾与不同学科学者进行过有关讨论,并发表过专文[1].现对近年出现的部分新词汇/新概念的翻译问题进行探讨,供各位同道参考和商讨.

    作者:王宇明;胡仕琦 刊期: 2007年第04期

  • 痘苗病毒增强子样序列的筛选及应用研究

    目的 从痘苗病毒基因组中筛选原核增强子样序列,构建携带原核增强子样序列的表达载体,探讨其对干扰素基因表达的影响.方法 采用氯霉素乙酰转移酶基因(cat)作为报告基因,从痘苗病毒基因组中筛选具有原核增强子样活性的序列,构建携带增强子样序列VV1的表达载体,表达干扰素基因和检测干扰素活性.结果 从痘苗病毒天坛株DNA基因组中筛选出18个在大肠埃希菌中具有增强活性的序列,从中筛选到两个原核增强子样序列VV1和VV16,VV1正反向分别可使lacZ基因活性提高10.9倍和3.8倍,VV16正反向分别可使lacZ基因活性提高9.0倍和4.1倍;证实它们的增强活性体现在转录水平;用痘苗病毒增强子样序列VV1构建的表达载体,其表达的IFN-α2b型干扰素比原表达载体活性高2.6倍.结论 从痘苗病毒天坛株DNA基因组中筛选到2个原核增强子样序列-携带有痘苗病毒增强子样序列的表达载体可提高干扰素基因的表达水平.

    作者:韩峰;秘晓林;曹茹;王艳;吴淑华 刊期: 2007年第04期

  • 人巨细胞病毒感染致动脉粥样硬化的研究进展

    近年来动脉粥样硬化(artherosclerosis,AS)病变在全球的发病率越来越高,而且逐渐年轻化.根据REACH(Reduction of Atherothrombosis for Continued Health)调查研究显示,动脉粥样硬化血栓形成是世界头号杀手.

    作者:李丹;王佳伟;赵伟秦;王得新 刊期: 2007年第04期

  • 恶性肿瘤与人细小病毒B19DNA的关系探讨

    人细小病毒B19(human parvovirus B19,B19)是传染性红斑和急性再障危象的病因.为了解恶性肿瘤与B19病毒感染的关系,我们进行了如下研究.

    作者:焦丽;李林瑞 刊期: 2007年第04期

  • 2006年中国流感病毒抗原性及基因特性研究

    目的 分析2006年中国季节性流感的流行状况,以及病毒的抗原性和基因变异情况.方法 对来自流感监测网络的毒株进行单向血凝抑制试验,在此基础上选择不同时间、地点分离的毒株进行血凝素基因的序列测定,然后分析其基因特性.结果 2006年我国同时流行A型(H1N1亚型、H3N2亚型)和B型流感病毒.H1N1亚型毒株和B型Victoria系流感病毒为优势毒株.对H1N1亚型毒株的HA1区序列比较发现,2006年分离的毒株与A/湖北洪山/53/2005(H1N1)比较,在192、193、196、198位发生氨基酸替换的毒株,这些位点位于抗原决定簇的B区.H3N2亚型毒株与A/云南/1145/2005(H3N2)比较,在142、144位发生氨基酸替换.我国流行的B型流感毒株无论是Victoria系和Yamagata系毒株的抗原性均没有发生变异,与2005-2006年我国的流行株B/shenzhen/155/2005、B/tianjin/144/2005类似.结论 2006年中国流行的H1N1亚型和H3N2亚型流感病毒的抗原性及基因特性已经发生改变;B型流感病毒的抗原性和基因特性没有改变.

    作者:张烨;赵翔;郭峻峰;隗合江;成艳辉;李鑫婉;徐翠玲;郭元吉;舒跃龙 刊期: 2007年第04期

  • 慢性乙型肝炎患者病毒基因型分布及与临床关系

    目的 了解邯郸市乙肝病毒基因型分布情况,并探讨其与临床的关系.方法 采用PCR-RFLP方法对邯郸108份HBV感染者的血清进行基因型分型,并结合转氨酶和HBV-DNA结果,分析乙肝病毒基因型的临床意义.结果 邯郸市慢性乙肝人群感染的HBV主要以C基因型为主,占93.5%,B基因型占6.5%.不同性别感染基因型差异无统计学意义.肝生化指标ALT、AST、TB比较提示C基因型患者的肝脏炎症似乎比B型患者重,但差异无统计学意义.C基因型的患者血清HBeAg阳性率高于B基因型.C基因型的患者血清HBV-DNA略高于B基因型,但无统计学差异.结论 邯郸市慢性乙肝人群感染的HBV主要以C基因型为主.C基因型患者血清HBeAg阳性率高于B基因型,C基因型患者与B基因型相比肝脏炎症较重,HBV-DNA略高,但差异无统计学意义.

    作者:孔洪彬;李友生 刊期: 2007年第04期

  • HBV慢性感染者免疫耐受相关临床与病理探讨

    目的 了解HBV慢性感染免疫耐受相关的临床与病理特征,探讨临床免疫耐受期患者的诊断.方法 对135例既往未出现过肝功异常的HBV慢性感染患者进行分析,了解他们年龄、性别、血清HBV DNA水平,肝功及肝脏病理情况.结果 本组患者平均年龄(22.61±8.95)岁,大部分肝脏损害轻微(99/135),病理损害轻微组(G≤1和S≤1)与病理损害明显组(G≥2或S≥2)在年龄、乙型肝炎家族史、性别等无明显差异,但在ALT≥30及ALT<30两组患者中,高水平的ALT组病理损害明显的患者更多见(20/41及16/94);血清HBVDNA≥107拷贝/ml与血清HBVDNA<107拷贝/ml两组患者比较,低水平的HBVDNA组病理损害明显的患者更多见(7/13及29/108).结论 HBV慢性感染HBVDNA、HBeAg阳性、既往肝功一直正常的患者,一般病理损害轻微,但尚有部分患者肝脏损害较明显,说明这部分人群不是都处于免疫耐受期,监测肝功及HBV DNA水平有助于免疫耐受的判断,特别是肝组织活体穿刺是指导诊治的有效办法.

    作者:游绍莉;邢汉前;刘鸿凌;荣义辉;朱冰;辛绍杰 刊期: 2007年第04期

中华实验和临床病毒学杂志

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主管:实验和临床病毒学杂志

主办:中国科学技术协会