李小红；杨沁；李荣庆；王佐；姜志胜；危当恒
目的：观察姜黄素对gp120 V3环所致大鼠海马神经元突触可塑性损伤的作用及机制。方法：制备离体大鼠海马脑片，1 mol／L姜黄素或10 mol／L尼莫地平单独或分别与1 nmol／L gp120 V3环共同作用于大鼠海马脑片1h后，采用细胞外微电极记录技术，分别记录Schaffer侧支－CA1区神经元的输入／输出曲线（input－output curve，I／O curve）、场兴奋性突触后电位（field－ex－citatory postsynaptic potential，fEPSP）、长时程增强（ long－term potentiation，LTP）和双脉冲易化（ paired－pulse facilitation，PPF）。结果：各组药物对大鼠海马CA1区神经元突触的基本传递、突触前膜效应未产生明显影响（ P＞0．05），但gp120 V3环可显著抑制LTP的诱发，抑制神经元突触可塑性（ P＜0．05）；尼莫地平与姜黄素可拮抗gp120 V3环对海马脑片LTP的抑制作用，改善神经元突触可塑性（ P＜0．05）。结论：姜黄素可能是通过减少Ca2＋内流拮抗gp120 V3环对大鼠海马脑片CA1区神经元LTP的抑制作用，维持LTP稳定，改善突触可塑性。
作者：陈桂玲；刘思思；江明亮；行妍妍；林丽清；董军 刊期： 2015年第10期
目的：胶质纤维酸性蛋白（ GFAP）是一种1型糖尿病治疗热点靶位自抗原。但是，GFAP自抗体与1型糖尿病表型之间的关联仍然不清楚。经过对GFAP自抗体效能评估，我们筛选出了适当的GFAP抗原序列并设计新型多肽疫苗对于1型糖尿病预防和治疗。结果：我们发现在1型糖尿病模型（ NOD）小鼠，GFAP自抗体与空腹C多肽分泌呈负相关趋势。17周龄的NOD小鼠中阳性GFAP自抗体能呈周龄依赖性预测30周龄NOD小鼠糖尿病的发病。另外，通过自抗体结合实验，我们从4种候选多肽中筛选出C4多肽有效结合糖尿病小鼠的GFAP抗原。每只50μg的多肽量注射NOD小鼠，成功抑制了血糖的升高和增加了空腹C多肽分泌。在胰脏病理学分析中，GFAP疫苗有效抑制了T 细胞对胰岛的侵入。为了清楚GFAP疫苗的机制，我们检测了T细胞活性和分化，通过IgG子类别检测和ELISpot方法，我们发现原始T细胞从毒性Th1细胞向体液反应Th2细胞方向分化。结论：GFAP是一种有效的1型糖尿病预测靶位点蛋白，为今后1型糖尿病的免疫治疗提供新方案。
作者：庞正达；Hironori NAKAGAMI；Hiroshi KORIYAMA；Masayoshi HIGUCHI；Ryuichi MORISHITA 刊期： 2015年第10期
目的：动脉粥样硬化是冠状动脉性心脏病的主要病因。线粒体活性氧（ ROS ）导致的内皮功能损伤是动脉粥样硬化的重要发病机制之一。解偶联蛋白2（UCP2）具有改善线粒体功能障碍导致的血管内皮氧化应激的作用。辣椒素激活TRPV1上调UCP2可以改善代谢相关的血管功能损害。但其是否能通过改善内皮细胞线粒体功能，拮抗冠状动脉粥样硬化还不清楚。方法：ApoE－／－、TRPV1－／－／ApoE－／－和UCP2－／－／ApoE－／－小鼠给予普食、高脂和高脂加辣椒素饮食。观察小鼠生存情况，干预结束后检测冠状动脉功能和形态，分析内皮细胞线粒体呼吸功能，测定PKA、UCP2和eNOS等蛋白的表达。结果：（1）膳食辣椒素减少高脂饮食介导的 ApoE－／－小鼠血管内膜 ROS 的生成，改善血管功能和预后， TRPV1－／－／ApoE－／－和 UCP2－／－／ApoE－／－小鼠无效。（2）辣椒素激活TRPV1促进PKA磷酸化并上调UCP2表达。（3）激活内皮细胞TRPV1显著改善线粒体呼吸功能，减少线粒体ROS生成并与PKA／UCP2通路相关。结论：（1）膳食辣椒素激活内皮细胞TRPV1上调UCP2表达，通过改善线粒体呼吸功能减轻冠状动脉粥样硬化病变。（2）血管内皮TRPV1可以作为干预冠状动脉粥样硬化内皮线粒体功能的靶点。
作者：熊诗强；马丽群；王沛坚；高鹏；黎黎；杨涛；路宗师；崔元廷；刘道燕；祝之明 刊期： 2015年第10期
目的：研究孤束核ghrelin对化疗呕吐大鼠胃运动的影响，探讨下丘脑外侧区的可能调控作用。方法：腹腔注射顺铂制备化疗呕吐大鼠模型；荧光免疫组化和Western blot法检测化疗呕吐大鼠孤束核ghrelin和ghrelin受体GHSR－1a的表达变化；神经元逆行追踪结合免疫组化观察下丘脑外侧区－孤束核ghrelin能纤维联系；在体胃运动记录观察孤束核微量注射ghrelin、电刺激下丘脑外侧区对化疗呕吐大鼠胃运动的影响。结果：化疗呕吐大鼠孤束核ghrelin表达低于正常大鼠，而GHSR－1a表达高于正常大鼠，且胃运动显著减弱（ P＜0．05）；下丘脑外侧区有神经元投射至孤束核，且有部分神经元是ghrelin免疫阳性神经元；孤束核注射ghrelin和电刺激下丘脑外侧区可显著促进正常大鼠和化疗呕吐大鼠胃运动（ P＜0．05）；孤束核微量注射ghrelin受体阻断剂［ D－Lys－3］－GHRP－6对正常大鼠电刺激下丘脑外侧区胃运动效应无影响，而对化疗呕吐大鼠电刺激下丘脑外侧区胃运动效应显著减弱（ P＜0．05）。结论：孤束核ghrelin可促进化疗呕吐大鼠胃运动，并受下丘脑外侧区调控。
作者：公衍玲；徐珞；郭菲菲 刊期： 2015年第10期
目的：探讨糖基化终末产物（ AGEs）激活上皮细胞钠通道（ ENaC）的作用，及H2 S对抗AGEs引起ENaC异常激活的机制研究。方法：应用膜片钳记录爪蟾肾皮质集合管上皮细胞ENaC电流，研究H2 S对抗AGEs引起ENaC激活的机制；应用共聚焦显微镜技术观察H2 S对AGEs引起胞内活性氧水平升高的调节作用；应用分子生物学实验检测AGEs处理后过氧化氢酶的表达水平变化。结果：AGEs通过抑制过氧化氢酶的表达引起胞内活性氧水平升高进而上调ENaC活性；H2 S通过削弱AGEs引起活性氧水平增高从而逆转AGEs引起ENaC的激活；PTEN／PI3 K通路参与了AGEs上调ENaC活性。结论：AGEs通过抑制过氧化氢酶的表达上调胞内活性氧水平，并通过PTEN／PI3K途径调节ENaC活性，该作用可被H2 S逆转，并且AGEs上调ENaC活性具有代谢记忆现象。
作者：梁辰；张志仁 刊期： 2015年第10期
目的：本实验旨在研究A类清道夫受体（ SR－A）在肥胖相关性高血压发生发展中的作用及其机制。方法与结果：我们分别建立了SR－A缺失的自发性肥胖小鼠模型（ SR－A－／－ob／ob）和饮食诱导的肥胖小鼠模型。检测结果显示，无论是自发性肥胖还是饮食诱导的肥胖小鼠，当SR－A表达缺失以后，其血压明显高于对照组小鼠。此外，血管舒张功能检测显示，乙酰胆碱（ ACh）介导的内皮舒张收缩功能明显受损。进一步，real－time PCR的结果显示SR－A表达缺失的肥胖小鼠其血管周围脂肪组织（ PVAT）中巨噬细胞浸润明显更加，炎症因子分泌增加，血浆ELISA检测得到同样的结果。此外，我们还检测发现SR－A表达缺失的肥胖小鼠其PVAT分泌VEGF－B明显增加，而VEGF－B可以加重脂肪酸造成的内皮细胞功能受损。结论：总而言之， ；SR－A可以保护肥胖相关性高血压的形成与发展，这一作用可以为临床防治相关疾病提供新的靶点。
作者：主流；朱旭冬；陈琪 刊期： 2015年第10期
目的：研究花生四稀酸代谢产物EET的水解酶（ sEH）基因敲除对脑缺血再灌注损伤、星形胶质细胞活化和BDNF表达变化的影响。方法：分别对sEH－／－小鼠和野生型小鼠进行大脑中动脉栓塞（MCAO）2 h，再灌注24 h。用TTC染色，计算梗死体积。用TUNEL法对缺血皮层半影区凋亡细胞染色和计数。采用免疫组化染色检测BDNF、GFAP、PPAR－γ等分子表达。使用激光共聚焦技术检测BDNF与GFAP、PPAR－γ与GFAP在半影区的共定位。结果：sEH－／－小鼠脑梗死体积明显小于野生型，其半影区的凋亡细胞数量也明显少于野生型。 sEH－／－小鼠半影区的星形胶质细胞显著激活，BDNF表达显著增多，并与活化星形胶质细胞共定位，sEH－／－小鼠半影区高表达PPAR－γ，并与GFAP共定位。阻断BDNF信号通路后，sEH－／－小鼠脑梗死体积和半影区凋亡细胞数量与野生型相近。结论：sEH－／－小鼠缺血皮层半影区星形胶质细胞显著激活，通过合成和表达BDNF，减轻脑缺血再灌注损伤。
作者：苑琳；刘晶；董瑞瑞；祝锦杰；陶昶煜；祝世功 刊期： 2015年第10期
目的：探讨靶向干扰SIRT2基因表达对急性粒细胞白血病（ AML）多药耐药细胞株HL60A细胞增殖的影响。方法：针对SIRT2基因构建shRNA真核表达载体，制备慢病毒并感染HL60A细胞。沉默SIRT2基因之后，改良MTT法检测对HL60A细胞活力的影响；甲基纤维素集落形成实验观察对HL60A细胞集落形成能力的影响；采用流式细胞术检测分析对HL60A细胞的细胞周期的影响。结果：干扰组SIRT2基因的表达量被有效抑制；干扰SIRT2基因表达量后，HL60A细胞的细胞活力明显下降，集落形成数量减少及集落的形状减小，细胞被明显阻滞于G1／S期。结论：shRNA靶向干扰SIRT2基因的表达可有效抑制急性粒细胞白血病耐药细胞系HL60A细胞的增殖。
作者：许华；王齐；李元叶；李庆华；庞天翔 刊期： 2015年第10期
目的：探讨内质网应激（ endoplasmic reticulum stress，ERS）对快速心房起搏家兔房颤心房ANP分泌的调节作用。方法：建立快速心房起搏家兔在体模型和离体跳动心房灌流模型进行实验，同时记录体表肢体导联心电图；利用透射电镜观察快速起搏2 h后心房肌内质网超微结构变化，Western blot法检测ERS标志蛋白GRP78的表达，利用放射免疫分析法检测血和灌流液中ANP浓度。结果：（1）透射电镜下可见起搏2 h心房肌肌浆网扩张，大量空泡形成，糖原颗粒聚集明显，缝隙连接增宽，肌丝溶解；（2）起搏2 h组心房组织GRP78表达较对照组明显增加；（3）起搏2 h组血中ANP浓度明显高于假手术组；衣霉素对心房搏出量和房内压无显著性变化，但是明显增加离体跳动灌流心房ANP分泌。结论：内质网应激对心房ANP分泌起调节作用，而快速心房起搏引起心肌ERS，进而参与房颤心房ANP分泌增多。
作者：玄春花；王程瑜；李香丹；吴锋；许东元 刊期： 2015年第10期
G蛋白偶联受体（ GPCR）与心血管疾病病、肿瘤、免疫和感染性疾病等重要疾病的发生、发展密切相关。同时，约50％药物都是以受体为靶点。但目前对受体精密调控机制尚不清楚。利用蛋白质组学、活细胞单分子荧光成像等方法，我们研究发现多种G蛋白偶联受体新调控机制。发现了肾上腺素受体新的调控子HIP－55（ hematopoietic progenitor kinase 1［ HPK1］－in－teracting protein of 55 kD）。 HIP－55通过蛋白质相互作用调控肾上腺素诱导转位激活、双相激活等受体激活方式。 HIP－55通过cAMP非依赖途径调控肾上腺素受体介导的p38、ERK1／2等重要信号通路。 HIP－55通过调控受体Clathrin内吞途径介导受体内吞、减敏及下游信号。此外，我们还发现另外一个生长分化因子15（growth differentiation factor－15，GDF－15）。 GDF－15通过抑制MMP途径，负调控肾上腺素诱导EGFR转位激活信号通路。基于G蛋白偶联受体信号调控机制的研究，我们也探索新的受体功能选择性药物研究开发，获得了一些候选化合物。
作者：李子健 刊期： 2015年第10期
目的：研究长链非编码RNA SNHG5在胃癌中的表达、功能及机制。方法：实时荧光定量 PCR检测SNHG5在胃癌和癌旁组织中的表达差异；在人胃癌细胞中研究过表达或敲低SNHG5对细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响；建立裸鼠皮下及转移瘤模型，研究SNHG5在体内对肿瘤发生发展及转移的影响；利用RNA－pulldown联合质谱的策略寻找SNHG5的相互结合蛋白，再通过RIP进行验证。结果：发现SNHG5在胃癌组织中表达异常增高，其表达水平与肿瘤的TNM分期和癌栓的形成显著相关。 SNHG5可以抑制胃癌细胞在体内外的增殖和转移。此外还发现，SNHG5主要通过阻止其结合蛋白MTA2从细胞质到细胞核的易位而发挥功能。过表达SNHG5能够促进组蛋白H3和p53的乙酰化水平，这也提示SNHG5可能通过捕获细胞质中的MTA2，从而干扰核小体的重塑和组蛋白去乙酰化酶复合物的形成，进而调节其功能。结论：SNHG5是一个影响胃癌细胞增殖和转移的关键分子，可能成为胃癌的预防、诊断和治疗的新靶标分子。
作者：史娟 刊期： 2015年第10期
作者： 刊期： 2015年第10期
死亡受体4／5（DR4／5）是肿瘤坏死因子大家族成员TRAIL的受体。和人类不同，小鼠只有DR5基因而没有DR4基因。以往研究证实敲除TRAIL基因加重动脉粥样硬化的形成，提示TRAIL具有血管保护作用。然而DR5在介导TRAIL对动脉粥样硬化调节作用中的角色尚不清楚。我们培育了ApoE／DR5双敲小鼠。我们意外发现，敲除DR5基因并没有复制TRAIL敲除后的血管表型，相反，DR5敲除后动脉粥样硬化形成减轻。我们用外源性TRAIL处理ApoE敲除小鼠，发现TRAIL增加了动脉粥样硬化形成，而这种作用在ApoE／DR5双敲小鼠中观察不到。 TRAIL的促动脉粥样硬化作用可被CCL2加 CCL5的中和抗体所阻断。 TRAIL对小鼠单核细胞的表型没有明显改变。体外研究发现TRAIL可以通过DR5刺激巨噬细胞吞噬脂质，刺激巨噬细胞凋亡，刺激平滑肌细胞的炎症反应。为了解释TRAIL和DR5敲除后相互矛盾的血管表型，我们推测在小鼠体内TRAIL可能还具有非DR5依赖的生物学作用。在DR5＋／＋和DR5－／－的外周血单个核细胞中，我们用TRAIL刺激后进行了基因转录组的检测。我们发现TRAIL不但在DR5＋／＋细胞中引起了众多基因表达水平的变化，而且在DR5－／－细胞中也引起了基因表达的变化，而且这些变化的基因只有10％是与DR5＋／＋细胞重合的，提示TRAIL可能的确有非DR5依赖的作用。我们的结果首次提示DR5介导的信号通路对动脉粥样硬化形成可能具有增强作用。
作者：刘芳芳；程文；蒋凡 刊期： 2015年第10期
目的：探讨金丝桃素结合低频超声（ HY－SDT）对THP－1巨噬细胞产生的作用及机制研究。方法：激光共聚焦检测细胞内HY定位、活性氧（ ROS ）产生、线粒体通透性转换孔（ mPTP ）开放和 LC3表达。荧光显微镜观察线粒体膜电位（ MMP ）。Hoechst－PI染色、透射电镜和流式细胞术观察自噬与凋亡。 Western blot（ WB）检测Bax与cytochrome C转位以及凋亡与自噬相关蛋白的表达。结果：HY在THP－1巨噬细胞的细胞核和线粒体等细胞器均有分布。 HY－SDT后2 h细胞内自噬增加；6 h细胞存活率下降，凋亡率、ROS和MDA升高，MMP降低，自噬抑制剂3MA导致凋亡率进一步升高。 WB显示SDT后早期LC3－II和Beclin 1表达增多，随后Bax和cytochrome C发生转位，Bcl－2下调，线粒体－caspase凋亡相关蛋白表达增多。 NAC可明显抑制ROS增加、MMP下降、mPTP开放和凋亡自噬相关蛋白的变化。结论：HY－SDT通过产生ROS早期增加自噬，随后促凋亡因子Bax从胞浆转位锚定在线粒体上，增加Bax／Bcl－2比值，诱导mPTP开放，释放cytochrome C，从而诱导凋亡。
作者：李雪松；郑龙彬；寇佳媛；田野；杨力明 刊期： 2015年第10期
目的：脓毒症时常伴有组织因子（ TF）表达增加，致凝血功能异常。血小板与白细胞相互作用可促进白细胞表达TF，增强凝血活性。以往研究表明热休克因子1（HSF1）能减轻脓毒症时组织器官的损伤并降低死亡率。本研究探讨内毒素血症时小鼠HSF1对血小板激活、血小板与白细胞相互作用和白细胞TF表达的影响。方法：采用HSF1基因敲除（ HSF1－／－）和野生型（ HSF1＋／＋）小鼠复制内毒素血症模型，应用流式细胞术检测外周血血小板与白细胞黏附和白细胞TF表达。结果：（1）与生理盐水组相比，内毒素血症小鼠血小板P－选择素表达、血小板－白细胞黏附和白细胞TF表达显著升高，出血时间明显缩短；（2）内毒素血症时，HSF1－／－小鼠血小板P－选择素表达、血小板－白细胞黏附和白细胞TF表达均显著高于HSF1＋／＋小鼠，出血时间比HSF1＋／＋小鼠显著缩短。结论：HSF1能抑制小鼠内毒素血症时血小板激活、血小板与白细胞相互作用和白细胞组织因子表达。
作者：肖子辉；冯宇鹏；肖献忠 刊期： 2015年第10期
目的：探讨G试验对侵袭性肺部真菌感染（ invasive pulmonary fungal infection，IPFI）的临床诊断价值及与传统真菌培养之间的关系。方法：应用MB－80微生物动态快速检测系统及GKT－5MSet动态真菌检测试剂盒，定量检测血浆中（1－3）－β－D葡聚糖的含量，并与真菌培养结果进行比较。结果：50例患者中，35例患者真菌培养阳性，其中白色念珠菌18例，热带念珠菌6例，克柔念珠菌6例，光滑假丝酵母菌3例，近平滑假丝酵母菌2例。 G试验含量增高者13例，占总数的26％，G试验含量正常37例，占总数的74％。 G试验含量增高组真菌培养阳性13例， G试验含量正常组真菌培养阳性22例，G试验含量增高组真菌培养阳性率显著高于G试验含量正常组（ P＜0．05）。以真菌培养为标准，G试验的敏感度为37．14％，特异度100％，阳性预测值为100％，阴性预测值为40．5％。结论：G试验较传统的真菌培养法特异性强，可作为侵袭性肺部真菌感染的辅助诊断。
作者：张格睿；万献尧；秦永新；代晓明 刊期： 2015年第10期
目的：研究3R－tau和4R－tau对学习记忆的影响及其机制。方法：将0N3R、1N3R和2N3R 等体积混合为3R－tau病毒；将0N4R、1N4R和2N4R等体积混合为4R－tau病毒。采用脑立体定位技术在小鼠海马CA3区注射混合的3R／4R病毒，水迷宫实验检测小鼠学习记忆能力，LTP检测CA3到CA1的突触传递，免疫化学检测学习记忆相关蛋白及DNA损伤标志分子γH2A．X的表达。结果：过表达3R－tau小鼠学习记忆能力降低，突触传递减弱。4R－tau组PSD95、NR2A和NR2B含量增高，3R－tau组γH2A．X含量增高。结论：过表达3R－tau明显损伤小鼠学习记忆能力，其机制可能与DNA双链损伤有关。
作者：徐诚 刊期： 2015年第10期
探讨与医学相关的社会热点问题，如对WHO提出的各种世界“疾病日”的认识，结合多媒体展示融入病理生理学教学的意义。以认识“世界肾脏病日”、“世界COPD日”等为例，从话题提出到相关知识引入，再到体现“以学生为中心”，借助不同教学模式，如Sandwich或PBL教学对历年“疾病日”主题的深入探讨和相关知识延伸，引导学生对所学知识融会贯通。不但能激发学生的学习热情，提高探究问题的兴致和积极性，培养科学的临床思维、自主学习和创新能力，增强其自信心和社会责任感，而且使授课形式多样化，知识掌握更易形成系统，并能拓宽师生知识视野，从而提高病理生理学教学效果。
作者：赵爽；蒙山；卢露碧；高洁；朱名毅 刊期： 2015年第10期
目的：探讨降钙素（ calcitonin， CT）在流行型牛白血病（ enzootic bovine leukosis，EBL）肿瘤组织中的表达、分布及其意义。方法：本研究采用免疫组织化学S－P方法首次对14例牛EBL肿瘤组织及瘤旁组织中CT的表达、分布进行了观察与检测。结果：CT蛋白表达阳性信号为棕黄色颗粒，位于细胞质内。肿瘤组织中，可见阳性细胞呈圆形或椭圆形、多形性。阳性细胞呈弥散性或灶状分布。在EBL淋巴结肿瘤组织可见肿瘤细胞自分泌CT阳性物质，阳性表达率为85．7％，并见多数肿瘤细胞呈强阳性表达，明显高于相应瘤旁组织（27．3％），二者比较差异极显著（P＜0．01）。心脏肿瘤组织中CT阳性表达率为80％，可见肿瘤细胞分泌并呈较强的CT阳性表达，相应瘤旁组织中未见CT阳性表达，二者比较，差异极显著（ P＜0．01）。结论：EBL病牛肿瘤细胞可自分泌大量的CT异位激素，表明CT参与了EBL肿瘤的形成过程，对肿瘤细胞的生长、分化异常可能起重要作用。提示EBL肿瘤组织中CT水平可作为EBL诊断指标之一。
作者：龙塔；刘志军；潘耀谦；程相朝 刊期： 2015年第10期
作者： 刊期： 2015年第10期
中国病理生理杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国病理生理学会
