陶涛；秦新月；马勋泰；罗华；李小刚
目的：探讨氯喹对哮喘小鼠气道高反应性的作用及其可能机制。方法 Balb/c小鼠随机分为对照组、哮喘组、氯喹治疗组、地塞米松治疗组、氯喹+地塞米松治疗组，除对照组外，其余各组小鼠均给予OVA致敏和激发，建立哮喘小鼠模型，于每次激发前腹腔注射给药，对照组则于同一时间予等量PBS处理，末次激发后24 h内小鼠肺功能仪检测小鼠气道高反应性；检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞总数及分类计数；制作肺组织病理切片，HE染色后光镜下观察病理变化；ELISA检测支气管肺泡灌洗液中细胞因子IL-6、PGF2α水平。结果氯喹可明显降低哮喘小鼠气道高反应性（吸入25 mg/ml Ach时4.5±0.4 vs 6.1±0.9，P<0.05，吸入50 mg/ml Ach时4.6±0.5 vs 8.2±1.0，P<0.001）；明显降低哮喘小鼠支气管肺泡灌洗液中炎症细胞数（P<0.01）；显著降低哮喘小鼠病理评分（P<0.05）；可一定程度降低哮喘小鼠BALF中PGF2α因子水平；与地塞米松合用可明显减轻哮喘小鼠支气管细支气管周围炎症（P<0.05）、血管周围炎症（P<0.01）、肺组织病理评分（P<0.001），明显降低哮喘小鼠BALF中IL-6因子水平（P<0.05）。结论氯喹可抑制哮喘小鼠气道高反应性；地塞米松与氯喹合用较单独用药效果更好，可能对中性粒细胞参与的哮喘有效。
作者：孙晓春；胡晓燕；王莉佳；刘恩梅；符州 刊期： 2015年第01期
目的：通过探索适宜的培养条件，建立小鼠睾丸器官培养模型。方法利用旋转通气培养法在体外培养睾丸，优化培养条件，并与Transwell小室培养法进行形态学比较。HE染色观察睾丸组织结构的变化，BrdU染色法观察睾丸在体外的细胞增殖，放射免疫法观察体外培养睾丸的睾酮分泌能力，免疫组化法观察睾丸中功能蛋白的表达。结果通过培养结局的对比，旋转通气培养法培养的睾丸组织形态更完整。睾丸大小以0.3~0.8 mm3为宜。各组精原细胞增殖指数呈上升趋势，Sertoli细胞增殖指数呈下降趋势：3 d组精原细胞增殖指数的增加与1 d组相比有统计学差异（P<0.05），5 d组Sertoli细胞增殖指数的减小与1 d组相比有统计学差异（P<0.05）。睾酮分泌量随培养天数的增加而减少且差异均有统计学意义（P<0.05）。培养3 d后，Leydig细胞胞浆内可见3β-羟基类固醇脱氢酶（3β-HSD）、细胞色素P45017α羟化酶（P450c17）、胆固醇侧链裂解酶（P450Scc）蛋白的表达， Sertoli细胞胞浆内可见波形蛋白（Vimentin）表达。结论利用旋转通气培养法成功建立睾丸器官体外培养的模型。
作者：刘艺；朱彦锋；高志斌；李敏；钟灵毓；印德娇；李云 刊期： 2015年第01期
目的：探讨米诺环素（minocycline, MC）对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞（PC12）缺氧缺糖（oxygen glucose deprivation， OGD）损伤的保护作用及其机制。方法采用氧糖剥夺6 h方法建立PC12细胞缺氧缺糖损伤模型，并将细胞随机分为正常对照组、模型组、米诺环素组及MEK1/2抑制剂组，在OGD/复氧24 h后，采用MTT比色法测定PC12细胞的存活率，Western blotting法检测血红素加氧酶-1（HO-1）及胞外信号调节蛋白激酶1/2（ERK1/2）的磷酸化水平。结果 OGD组PC12细胞存活率显著低于正常对照组，米诺环素（0.1~10μmol/L）能缓解OGD损伤导致细胞存活率的下降，同时上调HO-1蛋白的表达及增加ERK1/2的磷酸化水平，其中1μmol/L浓度佳。其次，ERK1/2上游激酶MEK1/2特异性抑制剂U0126（10μmol/L）能阻断米诺环素诱导HO-1蛋白表达的增加。结论米诺环素可减轻OGD导致PC12细胞的损伤并上调抗氧化蛋白HO-1的表达，其作用机制可能与激活ERK1/2信号通路有关。
作者：陶涛；秦新月；马勋泰；罗华；李小刚 刊期： 2015年第01期
目的：探讨糖尿病患者脑钠肽前体水平（NT-proBNP）和心率变异性（HRV）的相关性。方法对58例糖尿病患者均进行HRV分析与NT-proBNP测定，按HRV结果分为HRV异常组和HRV正常组，比较两组的时域和频域指标以及NT-proBNP水平，并将所有患者的HRV指标与NT-proBNP进行相关性分析。结果 HRV异常组NT-proBNP水平（320.2±88.3 pg/ml ）与HRV正常组（80.4±25.2 pg/ml ）比较，显著增高（P<0.01），NT-proBNP与SDNN、三角指数、低频功率、极低频功率负相关（r=-0.55, P<0.05；r=-0.52, P<0.05；r=-0.62, P<0.01；r=-0.56，P<0.05）。结论糖尿病患者NT-proBNP水平与HRV相关，NT-proBNP升高提示糖尿病的心脏自主神经病变。
作者：林茴；陈小欢；吴志华；张东辉；陈晓燕 刊期： 2015年第01期
目的：建立具有人免疫学特征的NOD/SCID小鼠模型，并观察其对三阴乳腺癌的免疫应答。方法筛选无免疫渗漏NOD/SCID小鼠24只，分成4组，免疫重建组提前3 d腹腔注射250 mg/kg环磷酰胺（CTX），后经腹腔注射健康人外周血单个核细胞（PBMC）同时背部皮下接种人三阴乳腺癌细胞MDA-MB-231；单纯免疫组只注射CTX及PBMC；单纯荷瘤组只接种MDA-MB-231；空白对照组不作任何处理。定期观察各组小鼠生物学及免疫学特征。结果免疫荷瘤组成瘤潜伏期（10~12 d）较单纯荷瘤组（8~10 d）延长，肿瘤生长速度减缓，第5周末肿瘤体积分别为1244.82±792.82 mm3和4308.77 mm3（P<0.01），生存率提高（P<0.01）。接受免疫重建的小鼠外周血人IgG于第2周即可测到，并逐渐上升，较未接受免疫重建小鼠差异有统计学意义（P<0.01）。外周血中CD3+细胞比例于第2周逐渐下降，但于第9周仍可测到。第9周小鼠脾脏细胞中CD3+T细胞比例高达55.3%（免疫荷瘤组）及52.7%（单纯荷瘤组）。免疫荷瘤组小鼠脾指数9.64 mg/g明显高于单纯免疫组3.82±0.31 mg/g及空白对照组1.51±0.14 mg/g。结论成功构建稳定的具有人免疫学特征的NOD/SCID小鼠模型，并观察到其对三阴乳腺癌产生免疫应答，可为三阴乳腺癌免疫治疗研究提供较为理想的动物模型。
作者：张翘楚；李玺；刘瑞磊；姜华；黄泽楠；刘宇；汤谧；黄勇 刊期： 2015年第01期
目的：学习总结利妥昔单抗（美罗华，RTX）相关的间质性肺炎（RTX-IP）的疾病特点、发病机制及诊疗方法。方法通过相关检查并结合文献回顾，对2例在使用RTX治疗过程中发生IP的淋巴瘤患者进行病例分析及治疗。结果2例患者在治疗后间质性肺炎病灶消失，后续原发病治疗过程顺利。结论 RTX-IP起病隐匿，病理机制不明，症状不典型，需引起临床医生重视。高分辨CT对其早期发现应用价值高，RTX增加了患者对机会菌的易感性可能是部分患者的发病机制。
作者：平宝红；岳春燕；朱阳敏；高雅；吴彬；洪佳琼 刊期： 2015年第01期
目的：分析抑制miR-23a表达后，耐药卵巢癌A2780细胞对化疗药物顺铂的敏感性变化及其分子机制。方法选择顺铂耐药卵巢癌A2780细胞株为研究样本，并分为两组，其中对照组仅加入顺铂，实验组加入顺铂及antagomir-23a。应用MTT法检测antagomir-23a抑制miR-23a并经顺铂处理后细胞增殖抑制率；应用流式细胞仪分析细胞周期分布情况；应用Hoechst33258染色分析细胞凋亡形态学变化；应用Western blot法分析耐药糖蛋白P-gp的表达变化。结果抑制miR-23a并经顺铂处理后，细胞增殖抑制率显著上升（P<0.01），顺铂中效浓度（IC50）为17.89μmol/L，比对照组IC50110.18μmol/L降低了83.76%（P<0.01），细胞被阻滞于G0/G1期且凋亡率增加（P<0.01）；Hoechst33258染色见细胞核浓缩、染色增强。Western blot检测提示细胞P-gp蛋白表达随着顺铂浓度加大而逐渐减低（P<0.01）。结论抑制耐药卵巢癌A2780细胞内miR-23a表达后，细胞对顺铂的敏感性显著增加，这可能miR-23a靶基因负性调控因素得以缓解，并由此引发P-gp蛋白表达受抑有关。
作者：金爱红；周霞平；周凤珍 刊期： 2015年第01期
目的：研究诱导痰中过敏毒素C3a在支气管哮喘发病中的变化特点及临床意义。方法自2006年9月~2007年2月于我院呼吸科门诊和病房就诊的哮喘急性发作期患者共33例，收集其人口学资料、病史及家族史、肺功能数据及诱导痰中C3a水平，进行分析和总结。结果（1）哮喘急性发作期诱导痰中C3a水平[2.24（1.68~5.58）ng/ml]高于治疗后哮喘临床缓解期C3a水平[0.7（0.24~2.31）ng/ml]（P<0.01），哮喘临床缓解期C3a水平高于对照组[0.12（0.07~0.39）ng/ml]（P<0.05）；（2）哮喘急性发作期，诱导痰C3a水平随轻度急性发作[0.25（0.09~0.40）ng/ml]、中度急性发作[2.21（1.16~3.41）ng/ml]、重度急性发作[4.69（2.69~6.59）ng/ml]依次升高，且存在明显差异（P<0.01）；（3）哮喘急性发作期组患者诱导痰C3a水平与诱导痰细胞总数呈正相关（r=0.718, P<0.05），嗜酸性粒细胞计数呈正相关（r=0.495, P<0.05），巨噬细胞计数呈正相关（r=0.600, P<0.05）。结论诱导痰C3a水平与哮喘严重程度和局部炎症细胞学分类相关，可能成为重要的临床标志物指导哮喘的治疗。
作者：张静；丁艳苓；陈亚红；姚婉贞 刊期： 2015年第01期
目的：建立一种可以得到高纯度肺微血管内皮细胞的分离方法，并分别观察野生型小鼠及晚期糖基化终产物受体（RAGE）敲除小鼠细胞在脂多糖（LPS）刺激下细胞骨架F-actin变化情况。方法取6~8周龄野生型C57小鼠及RAGE基因敲除小鼠的肺，经I型胶原酶消化后，尼龙细胞筛过滤，然后采用免疫磁珠法分离原代小鼠肺微血管内皮细胞（PMVEC），经形态学及免疫荧光法鉴定后，以LPS（1 mg/L）刺激不同时间后用激光共聚焦显微镜观察细胞骨架F-actin的变化情况。结果镜下可见原代培养的PMVECs呈梭形或多角形，经细胞抗Ⅷ因子相关抗原（ⅧF-Ag）染色鉴定纯度高，LPS刺激后野生型小鼠PMVEC骨架重排，形成应力纤维，而RAGE敲除小鼠PMVEC骨架破坏不明显。结论采用免疫磁珠法可以获得高纯度的小鼠肺微血管内皮细胞，且RAGE参与了LPS介导的小鼠肺微血管内皮细胞骨架破坏。
作者：周晓燕；张伟金；黄巧冰；郭晓华 刊期： 2015年第01期
目的：观察丙戊酸钠对阿霉素体外抗乳腺癌Hs578T细胞作用的影响。方法 Western blot检测缝隙连接蛋白Cx43的表达；MTT法检测阿霉素的细胞毒性；Annexin V/PI双染法观察阿霉素对细胞早期凋亡的影响；Hochest 33258荧光染色法检测阿霉素对细胞晚期凋亡的影响。结果 Western blot结果显示丙戊酸钠可以显著增强缝隙连接蛋白Cx43的表达（P<0.01）；MTT结果表明在细胞间缝隙连接功能形成的条件下，丙戊酸钠联用阿霉素组的细胞存活率显著低于阿霉素组（P<0.01）；Annexin V/PI双染法显示丙戊酸钠联用阿霉素组的细胞早期凋亡率显著高于阿霉素组（P<0.01）；Hochest 33258荧光染色结果显示丙戊酸钠联用阿霉素组的细胞晚期凋亡率显著高于单用阿霉素组（P<0.01）。结论丙戊酸钠可显著增强阿霉素的细胞毒性及其诱导的细胞凋亡作用，其机制可能与增强缝隙连接通讯功能有关。
作者：童旭辉；郑超；蒋国君；董淑英 刊期： 2015年第01期
目的：探讨宫颈癌及宫颈癌前病变中人类乳头瘤病毒16型（HPV-16）整合人宿主基因组的发生情况。方法选取252例宫颈病变组织，其中宫颈癌48例，宫颈上皮内瘤样病变（CIN）204例，包括CINⅠ125例、CINⅡ46例、CINⅢ33例，另取因子宫肌瘤行全子宫切除术的正常宫颈上皮20例为对照，采用重叠定量PCR检测HPV-16感染标本中病毒整合状态。结果宫颈癌中HPV-16阳性感染31例，占宫颈癌患者总数的65.6%（31/48），其中HPV-16整合感染18例，占HPV-16阳性宫颈癌患者的58.1%（18/31）；在CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ中，HPV-16阳性感染率分别为19.2%（24/125）、34.8%（16/46）、42.4%（14/33），整合感染率分别为16.7%（4/24）、18.8%（3/16）、35.7%（5/14）；与不同级别CIN病变相比，宫颈癌患者的HPV-16整合感染率明显增加，差异具有统计学意义。结论 HPV-16整合感染状态与宫颈病变严重程度呈正相关，在HPV DNA检测基础上联合应用高危HPV感染状态的检测有利于提高宫颈癌筛查的靶向性并早期预测宫颈病变的转归。
作者：魏文斐；苏桂栋；吴兰芳；何丽娜；陆琳；周静；刘国炳；刘萍；陈春林；余艳红；王薇 刊期： 2015年第01期
目的：评估磁共振T2mapping成像技术在基质诱导自体软骨移植（MACT）术后的定量分析价值。方法纳入6例膝关节MACT术后患者（9处软骨损伤），分别在术后3月、6月及12月进行磁共振动态随访检查，测量软骨修复区与正常对照区深浅两个区域及全层T2值，横向比较同一时间点修复区与正常区T2值差异，纵向评估术后3、6、12个月修复区T2值的变化。结果MACT术后3、6月移植区全层T2值显著高于邻近正常软骨（P均<0.05），术后12月修复区全层T2值变化较正常对照区无明显统计学差异（P=0.063）。术后6、12个月修复区浅层软骨T2值显著高于深层（P均<0.05）。术后3、6、12个月修复区深浅层T2值纵向变化均有统计学差异（P均<0.05）。结论 MACT术后磁共振T2mapping成像可作为评估关节软骨修复效果的重要依据。
作者：张君；徐贤；李雪；陈敏；董天明；左盼利；安宁豫 刊期： 2015年第01期
目的：探讨电针对急性痛风性关节炎（AGA）大鼠受试踝关节滑膜组织髓样细胞表达激发受体（TREM）-1表达的影响。方法将40只SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、西药组、电针组，每组各10只；正常组常规喂养，其余采用尿酸钠溶液注射法建立AGA模型。造模前2 d，正常组与模型组按20 ml/kg予以生理盐水灌胃，西药组按1 mg/kg予以秋水仙碱溶液灌胃，电针组选取受试侧三阴交、解溪、昆仑，频率1.5~2 Hz，电压9V，电流强度1~3 mA，疏密波，留针20 min，1次/d，连续9 d。分析各组大鼠关节功能障碍，采用ELISA法检测受试踝关节滑膜组织中肿瘤坏死因子TNF-α、白细胞介素IL-1β的含量，采用免疫组化及Western blot法检测TREM-1表达。结果与正常组比较，模型组大鼠功能障碍指数显著增高（P<0.01），TNF-α和IL-1β含量显著增高（P<0.05），受试踝关节滑膜组织TREM-1表达明显增加（P<0.05）；与模型组比较，西药组和电针组大鼠功能障碍指数显著降低（P<0.01），TNF-α和IL-1β含量显著降低（P<0.05），受试踝关节滑膜组织TREM-1表达明显降低（P<0.05）；西药组与电针组比较，均无统计学意义（P>0.05）。结论电针治疗AGA的机制可能是通过抑制TREM-1的表达。
作者：张超男；黄学宽；骆言；蒋娟；万磊；王玲 刊期： 2015年第01期
目的：鉴定与癌源性免疫球蛋白G（IgG）全分子相互作用的蛋白质，为研究其生物功能提供重要的线索。方法分别用兔抗人IgG全分子抗体和兔IgG在宫颈癌细胞系HeLa中进行免疫共沉淀，将得到的免疫复合物经电泳分离后进行银染。经比较分析后3条差异条带切下来做质谱鉴定，质谱数据经Swiss-Prot数据库分析。后对所得的蛋白质进行筛选和功能注释分析。结果终得到6个可能与癌源性IgG全分子相互作用的蛋白质。结论通过免疫共沉淀结合质谱分析的方法终得到了6个可能与癌源性IgG全分子相互作用的蛋白质，为其功能研究提供了重要线索。
作者：王居平；陈韩英；彭慧 刊期： 2015年第01期
目的：探讨高糖导致血管钙化机制是否与WNT信号通路有关。方法采用体外血管钙化模型，高糖诱导血管平滑肌细胞钙化，检测WNT信号分子和骨相关蛋白Cbfa1，Osx，OCN，BMP2的表达以及细胞钙化程度。观察WNT信号抑制剂Dkk1对高糖诱导的血管平滑肌细胞钙化和Cbfa1，Osx，OCN，BMP2表达的影响。结果高糖能上调血管平滑肌细胞WNT信号通路分子包括Wnt3a，Wnt7a，Fzd4，Wisp1 mRNA的表达（1.86±0.15,1.68±0.13,2.10±0.17,2.30±0.20, P<0.05），促进WNT信号通路关键分子β-catenin的磷酸化（2.70±0.22, P<0.05），激活WNT信号通路。使用WNT信号抑制剂Dkk1能减轻血管平滑肌细胞钙化，下调骨相关蛋白Cbfa1，Osx，OCN，BMP2 mRNA的表达[（51±9）%，（58±11）%，（56±10）%，（62±10）%，P<0.01）]。结论 WNT信号通路参与了高糖诱导的血管平滑肌细胞钙化。
作者：颜建云；周芹；于汇民；侯梦琳；陆立鹤 刊期： 2015年第01期
目的：研究大鼠血浆中氯吡格雷-人参皂苷血浆蛋白结合率协同效应。方法选择人参皂苷Rg1、Rb1为指标，首先建立了Rg1、Rb1在透析内液（大鼠血清RSA）、外液（PBS）含量检定方法，采用平衡透析法揭示了氯吡格雷对人参Rg1、Rb1血清蛋白结合率协同作用；接下来，采用同源模建方法建构RSA三维构造，并用分子模拟方法揭示氯吡格雷、人参皂苷Rg1、Rb1与大鼠血清白蛋白RSA间结合效应，揭示氯吡格雷-人参皂苷在血浆蛋白结合率层面协同效应。结果人参皂苷Rg1、Rb1在0.40、1.00、2.00 mg· L-1三种浓度下与大鼠血清蛋白结合率分别为30.16±2.82、33.42±4.21、34.61±3.42和50.13±2.34、51.23±3.23、53.11±3.26，当合并加入氯吡格雷（1.0 mg· L-1）后血浆蛋白结合率分别下降至22.13±2.72、21.42±3.22、25.45±3.52和40.13±3.24、41.25±4.15、43.11±3.31，分子模拟结果显示氯吡格雷、Rg1、Rb1与RSA存在不同程度的竞争结合效应。结论平衡透析法和分子模拟实验综合揭示了氯吡格雷-人参皂苷血浆蛋白结合率协同效应。
作者：马世堂；戴国梁；赵文珠；孙冰婷；居文政；谈恒山 刊期： 2015年第01期
颅内动脉粥样硬化性疾病（intracranial atherosclerotic disease, ICAD）是国人缺血性卒中主要原因，防治难点在于卒中高危人群筛查及有效治疗方法的选择（药物治疗/介入治疗）。3.0 T HR MRI具有在体、无创、无电离辐射等优势，能够从管壁结构及斑块特性的视角筛选大脑中动脉（middle cerebral artery, MCA）粥样硬化狭窄的卒中高危因素，观察疾病进程和临床疗效，具有潜在的预判介入手术获益人群的优势，临床应用前景广阔。目前HR MRI在MCA狭窄患者评估中的应用研究主要集中在方法学可行性、诊断与鉴别诊断、病因学等3方面，缺乏临床疗效评估及预后因素分析（尤其是术后再狭窄）相关实践，值得深入探讨。
作者：贾泽军；赵瑞；杨志刚；黄清海；邓晓群；洪波；刘建民 刊期： 2015年第01期
目的：探讨3T3-L1脂肪胰岛素抵抗细胞（insulin resistant 3T3-L1 adipocytes cell, IR-3T3-L1）佳的建立条件。方法采用地塞米松（Dexamethason，DEX）、1-甲基-3-异丁基黄嘌呤（3-isobutyl-methylxanthine, IBMX）和不同浓度的胰岛素（10-8、10-7、10-6 mol· L-1）诱导3T3-L1前脂肪细胞分化为成熟的脂肪细胞，Oil red O染色确定佳胰岛素诱导浓度，继而用1μmol· L-1 DEX诱导建立IR-3T3-L1脂肪胰岛素抵抗细胞。采用葡萄糖氧化酶-过氧化物酶（Glucose oxidase-peroxidase, GOD-POD）法对IR-3T3-L1细胞的佳诱导时间（24~120 h）及其稳定时间（24~48 h）进行了考察。结果 Oil red O染色发现3T3-L1前脂肪细胞用DEX、IBMX和10-6 mol· L-1胰岛素诱导9 d，>90%的前脂肪细胞分化为成熟的脂肪细胞；用1μmol· L-1 DEX培养96 h后，脂肪细胞葡萄糖消耗率达到大（P=0.0003）；稳定时间考察发现，在36 h内葡萄糖消耗与对照组比较有统计学意义（P<0.001）。结论3T3-L1前脂肪细胞在1μmol· L-1 DEX、0.5 mmol· L-1 IBMX和10-6 mol· L-1佳胰岛素浓度作用下诱导分化为成熟的脂肪细胞后，用1μmol· L-1 DEX培养96 h即可成功诱导成IR-3T3-L1-IR脂肪胰岛素抵抗细胞，且在36 h内稳定。
作者：聂绪强；杨建文；史海霞；张玉金；张建永；卞卡 刊期： 2015年第01期
目的：探讨不同浓度CYP1B1抑制剂TMS（2,3’,4,5’,-四甲氧基二苯乙烯）对于C3H10T1/2多潜能干细胞脂肪分化及相关基因表达的影响。方法体外培养C3H10T1/2细胞株至完全融合后，接触抑制2 d，用激素刺激混合物（IDM）（10μg/ml胰岛素，2μmol/L地塞米松和0.5 mmol/L 3-异丁基1-甲基黄磦呤）诱导分化，同时加入不同浓度TMS（0，1.0，2.0、4.0μg/ml）。观察各组细胞分化程度，脂肪分化关键转录核因子——过氧化物酶体增殖物活化受体（PPARγ）及其下游靶基因CD36、脂肪酸结合蛋白4（FABP4）的的表达状况。结果油红和TG含量测定结果显示，CYP1B1选择性抑制剂TMS可剂量依赖地抑制IDM诱导的多潜能干细胞C3H10T1/2向脂肪细胞分化；这一作用源于TMS抑制转录核因子PPARγ的转录和蛋白表达以及下游靶基因CD36与FABP4表达。结论 TMS抑制由IDM诱导的多潜能干细胞C3H10T1/2向脂肪细胞分化。
作者：范翠芳；朱安娜；黄婷婷；李露；王素青 刊期： 2015年第01期
目的：通过检测ASK1和PRKCD在单核细胞分化过程中的表达变化，探索其在门静脉高压症(PH)脾亢脾脏巨噬细胞（MΦ）功能变化中所起的作用。方法采用佛波酯诱导U937分化成为巨噬细胞样细胞，q-PCR检测不同分化阶段ASK1和PRKCD mRNA的表达，Western Blot检测诱导前后ASK1和PRKCD蛋白表达水平变化，ELISA法检测细胞分化过程中与吞噬功能相关的细胞因子IL-10和TNF-α的分泌情况，鸡红细胞吞噬试验鉴定诱导后细胞功能。结果随着PMA诱导U937细胞时间延长，ASK1和PRKCD基因表达水平下降，TNF-α的分泌量逐渐增加，而IL-10在诱导后24 h达到大分泌量，随后又呈下降趋势；Western Blot结果显示，ASK1及p-ASK1蛋白表达水平较诱导前均显著上升，PRKCD及p-PRKCD蛋白表达水平显著下降；吞噬实验结果显示，诱导后的细胞具有一定的吞噬功能。结论在PMA诱导的U937细胞向单核细胞分化过程中，ASK1蛋白表达上调，PRKCD蛋白表达下调，与脾亢脾Mφ一致，并导致Mφ活性增强。
作者：闫峰；王效民；袁思波；马全明；韩慧平 刊期： 2015年第01期
南方医科大学学报杂志
主管:广东省教育厅
主办：南方医科大学
