郭超凡;周剑;吴晓亮;蒋晖;鲁凯伍;陈建庭;吴增晖;虞容豪;刘捷;朱青安
目的:探讨中国汉族人群细胞因子可诱导的SRC同源区2结构域蛋白(CISH)基因rs414171位点与慢性乙型肝炎易感性的关系。方法利用Sequenom MassArray-IPLEX SNP分型技术,对233例慢性乙型肝炎患者和148例健康对照者CISH基因的rs414171位点进行基因分型,采用χ2检验方法统计分析病例组与对照组间等位基因频率和基因型频率的差异。结果病例组和对照组的rs414171位点的基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律(P>0.05)。该位点的等位基因频率和基因型频率在病例组和对照组中的分布无统计学差异(P>0.05)。结论 CISH基因rs414171位点的多态性与中国汉族人慢性乙型肝炎易感性无明显相关性。
作者:张鑫;孙学华;周振华;李曼;高月求 刊期: 2014年第04期
目的:探索和建立同步分离大鼠原代肝细胞、星状细胞、枯否细胞和肝窦内皮细胞,并进一步鉴定和培养的方法。方法联合应用原位灌注、离体灌注、梯度密度离心和差速贴壁等分离方法,获取4种大鼠肝内原代细胞,采用形态学观察、免疫荧光染色和墨汁吞噬实验等方法对所分离的各种原代细胞进行纯度鉴定。结果通过原位灌注结合离体灌注、密度梯度离心结合差速贴壁等分离手段,成功实现了大鼠原代肝细胞、星状细胞、枯否细胞以及肝窦内皮细胞的同步分离,且所得原代细胞得率、活力及纯度等指标均符合后续细胞实验要求。结论通过简易方法同步分离大鼠原代肝细胞、星状细胞、枯否细胞以及肝窦内皮细胞是可行的。
作者:李洋;蔡双明;张莉莉;李旭 刊期: 2014年第04期
目的:通过表型和基因型分析方法,初步了解造血干细胞移植术后巨细胞病毒(HCMV)感染患儿的耐药情况。方法采用人包皮成纤维细胞培养分离并鉴定HCMV临床株;Reed.Muench法测定其半数组织培养感染量(TCID50),空斑减数实验测定病毒对丙氧鸟苷的敏感性,同时以HCMV UL97基因为靶序列,用Nested-PCR扩增目的基因,并对PCR产物做直接序列测定。结果成功从患者尿标本中分离出HCMV临床病毒株,测得其TCID50为:10-4.618/0.1 ml;IC50值为5.847μmol/L,对丙氧鸟苷高度敏感;同时基因序列与AD169株的序列相比较,发现四个位点发生碱基突变,分别是1509 T→C、1575 C→T、1794 T→C、1815 C→G;上述突变的编码子分别为503,525、598和605,前3个位点的突变未导致相应氨基酸改变,第四个位点氨基酸则改变为D605E,未发现与耐药有关的基因突变。结论初步建立造血干细胞移植后HCMV耐药表型和基因型检测的实验方法,本次试验从临床标本中尚未发现HCMV耐药现象。
作者:曾爱红;董德坤;崔喜梅;郭明明;邹德志;方建培 刊期: 2014年第04期
目的:探讨SCF/c-Kit信号对膀胱癌T24细胞侵袭性的影响。方法采用Western blot检测T24细胞c-Kit表达及经SCF刺激后PI3K途径激活情况;Transwell侵袭实验(直接与间接计数法)观察T24细胞经过SCF(1 ng/ml)刺激前后及使用Wortmannin(特异性PI3K阻断剂)预处理后侵袭性的变化。结果 T24细胞存在c-Kit蛋白的表达并且经SCF(1 ng/ml)作用24 h后,出现明显的磷酸化Akt;与对照组相比,SCF(1 ng/ml)刺激组穿过聚碳酸酯膜的T24细胞数明显增多(P<0.01),而Wortmannin预刺激阻断了SCF的这种效应。结论 SCF/c-Kit信号促进了T24细胞的侵袭性,这一效应是由PI3K途径介导的。
作者:郭术俊;陶象男;汪忆梦;唐洁;申林;宋传旺 刊期: 2014年第04期
现代图像显示技术使腹腔镜技术向前迈出了一大步,但是传统腹腔镜的二维图像缺乏深度感知与空间定向,需要经过长期的严格训练才能适应,而3D腹腔镜技术利用其立体视野弥补了传统腹腔镜技术呈现在术者面前的单眼视觉图像的缺点。本文就3D腹腔镜的临床应用与研究现状作一综述。
作者:赵大川;黄宗海;邹兆伟 刊期: 2014年第04期
目的:探讨非肿块型钙化性乳腺癌的微钙化X线表现与病理结果的关系,以期提高对不同病理类型非肿块型钙化性乳腺癌微钙化X线表现的认识。方法收集108例非肿块型钙化性乳腺癌,回顾分析其微钙化形态及分布的X线表现,并与病理结果进行对照研究。结果微钙化形态、分布在不同病理类型的乳腺癌间差异均无统计学差异(P形态=0.743,P分布=0.389)。微钙化形态在浸润性与非浸润性癌中的差异亦不具有统计学意义(P=0.382);且浸润性癌与非浸润性癌均以细小多形性钙化多见(分别约占41.2%、57.5%),而浸润性癌中线样或线样分支状钙化及多种恶性钙化混合较非浸润性多见(32.3%vs 20%)。微钙化分布在浸润性与非浸润性癌中的差异具有统计学意义(P=0.006),浸润性与非浸润性癌中的微钙化分布分别以段样、成簇分布为主(分别约占33.8%、45.0%)。结论(1)非肿块型钙化性乳腺癌中不同病理类型间微钙化的形态及分布均不具有鉴别意义。术前仅根据微钙化特点尚难以鉴别,必须结合其他影像征象及临床资料;(2)术前可依据微钙化形态与分布对浸润性与非浸润性乳腺癌进行初步鉴别。
作者:陈卫国;秦耿耿;徐维敏;廖昕;婵娟;张玲;欧阳晨雨 刊期: 2014年第04期
目的利用无血清条件悬浮培养人大细胞肺癌H460系,从中分离到肺癌干细胞并进行其生物学特性研究。方法无血清条件培养法悬浮培养H460细胞形成悬浮细胞球,通过qPCR、Western blot、流式细胞术、平皿克隆形成等实验,比较H460细胞和H460细胞球中干性相关分子表达水平及细胞增殖能力强弱,并利用裸鼠移植瘤形成实验研究肺癌细胞干细胞球的体内生物学特性。结果利用无血清条件培养法成功从H460细胞中分离出悬浮生长的肿瘤干细胞样细胞,其增殖能力强于H460贴壁细胞(P<0.05),干细胞相关转录因子Sox2、Oct4和Nanog表达在mRNA及蛋白水平均有增加(尤以Nanog提升水平明显(P<0.01)),细胞球在裸鼠体内具有较强成瘤能力。结论无血清条件培养法可以有效富集到H460细胞系中的肺癌干细胞,Nanog可能与H460细胞系中CSLCs的干性特征维持相关。
作者:刘攀;周向东 刊期: 2014年第04期
本文提出了基于状态机工作流模型的急性加重慢性阻塞性肺疾病(AECOPD)临床路径。通过响应临床事件,降低AECOPD临床路径的执行难度和增加变异的适应性。与传统的顺序工作流临床路径管理进行对比表明,本文所提出的临床路径建模方法在住院时间、住院平均花费及变异率等临床路径评价指标均较优,能更好地处理AECOPD临床路径执行过程中出现的变异。
作者:谭剑;郝立巍;程远雄;许统亮;宋应诺 刊期: 2014年第04期
目的:调查慢性乙型肝炎病毒感染相关的成年初治肝硬化患者肾功能情况,并探讨其危险因素。方法回顾性收集860名于2011年1月1日~2011年12月31日在南方医院肝病中心住院治疗的慢性乙肝病毒感染相关成年肝硬化且既往未接受过抗乙肝病毒治疗的患者资料,应用Child-Pugh评分系统对患者进行肝功能分级、采用美国肾脏病基金会组织推荐的MDRD公式计算肾小球滤过率(Glomerular Filtration Rate, GFR),评估目标人群肾功能受损(eGFR<60 ml/min/1.73 m2)的发生率,同时分析影响肾功能的危险因素。结果共有296名患者被纳入分析,结果显示肝硬化患者肾功能受损的发生率为8.45%(25/296),Child-Pugh C级患者肾功能受损发生率显著高于Child-Pugh B级和Child-Pugh A级(17.2%[17/99] vs.6.67%[7/105] vs.1.09%[1/92], P<0.001);年龄、高尿酸血症、Child-Pugh评分均为肾功能受损的危险因素。结论随着肝硬化患者肝功能的恶化,肾功能受损发生率显著上升,应密切监测肾功能,以指导患者临床用药。
作者:刘颖;樊蓉;陈简;郑志丹;廖宝林;梁携儿;尹军花;周秋根;孙剑 刊期: 2014年第04期
目的:观察三黄茵赤汤防治D-氨基半乳糖(D-GalN)联合内毒素(LPS)诱导的大鼠急性肝衰竭氧化应激及肝细胞凋亡的作用。方法48只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、三黄茵赤汤高、中、低剂量组、双环醇组,每组8只。各组对应给药5 d,建立急性肝衰竭模型48 h后处死动物,检测血清中丙氨酸转氨酶、天门冬氨酸氨基转移酶、总胆红素,检测全血中凝血酶原时间、国际标准比率、血浆纤维蛋白原;HE染色观察肝脏病理的变化,检测肝脏组织匀浆液SOD、MDA的含量;免疫组化、免疫印迹检测肝组织caspase-3蛋白表达。结果与模型组比较,三黄茵赤汤高、中、低剂量组、双环醇组均能减少血清中丙氨酸转氨酶、天门冬氨酸氨基转移酶、总胆红素的含量、缩短全血中凝血酶原时间、国际标准比率时间,增加血浆纤维蛋白原的含量(P<0.05);明显改善肝脏组织病理变化,提高肝脏组织匀浆液SOD活性,减少MDA含量(P<0.05);下调caspase-3蛋白表达(P<0.05);三黄茵赤汤中剂量组与双环醇组无统计学差异(P>0.05),高剂量组优于双环醇组(P<0.05)。结论三黄茵赤汤防治D-GalN联合LPS诱导的急性肝衰竭大鼠成量效关系,具有抗氧化的作用;三黄茵赤汤可能通过抗氧化应激抑制caspase3表达从而减少肝细胞凋亡,以达到防治大鼠急性肝衰竭的作用。
作者:马文校;杨运高;刁建新;刘亚伟;华何与;文小敏 刊期: 2014年第04期
目的:探讨气体信号分子外源性硫化氢(H2S)对高糖条件下培养的原代皮层及海马神经元β位淀粉样前体蛋白裂解酶-1(BACE-1)和β淀粉样蛋白(Aβ)代谢的影响。方法原代培养大鼠皮层及海马神经元,随机分组为正常培养神经元组、高糖(60 mmol/L)培养神经元组、高糖(60 mmol/L)加25μmol/L NaHS组、高糖(60 mmol/L)加50μmol/L NaHS组和高糖(60 mmol/L)加100μmol/L NaHS组,酶联免疫吸附试验检测Aβ1-42水平,荧光实时定量检测BACE-1 mRNA表达,Western blot检测BACE-1蛋白表达水平。结果高糖培养的神经元组Aβ1-42水平明显高于正常培养神经元组(P<0.05),加入25、50和100μmol/L NaHS后,Aβ水平显著降低(P<0.05);高糖培养的神经元组BACE-1 mRNA表达显著高于正常培养神经元组(P<0.05),加入25、50及100μmol/L NaHS后,BACE-1 mRNA水平显著降低(P<0.05);高糖培养的神经元组BACE-1蛋白显著高于正常培养神经元组(P<0.05),加入25、50及100μmol/L NaHS后,BACE-1蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论在高糖条件下,神经元Aβ1-42、BACE-1 mRNA和蛋白表达明显升高,NaHS呈浓度依耐性降低高糖条件下培养神经元中升高的Aβ1-42水平,降低BACE-1 mRNA及蛋白表达。
作者:朱丽娟;陈筱山;何选丽;戚韵雯;晏勇 刊期: 2014年第04期
目的:比较长方案和拮抗剂方案应用于再次接受体外受精/卵细胞浆内单精子注射(IVF/ICSI)治疗周期患者的临床效果和成本效果比。方法回顾性分析于我中心接受第2次IVF/ICSI助孕治疗患者198例,其中长方案(A组)109例,拮抗剂方案(B组)89例,分别比较两种方案的获卵数、优良胚胎数、临床妊娠率、流产率、活产率及平均总费用、成本效果比。结果在重复周期患者,两种方案组的优良胚胎数、临床妊娠率、流产率、及双胎妊娠率均无显著差异;A组临床结局好于B组,但无统计学差异。A组的活产率为20.2%,显著高于B组的9.0%,A组的获卵数为9.13±4.98枚,显著高于B组的7.11±4.74枚(P<0.05);A组平均每周期总费用均高于B组,但A组每获得一枚卵子、一枚优良胚胎和一例临床妊娠的的成本-效果比(CER)均低于B组(A组分别为2729.11、8867.19、77598.06元,B组分别为3038.60、9644.85、96139.85元)。结论对于重复IVF/ICSI周期患者,即使卵巢储备功能减退,长方案仍能获得较好的临床结局和经济效益。
作者:陈潇;耿玲;李红 刊期: 2014年第04期
目的:探讨髋臼骨折中应用3D打印技术术后的康复策略。方法筛选1例髋臼骨折患者,先采用3D技术打印患者仿真骨盆模型,并进行钢板螺钉佳位置设计、螺钉长度测量、螺钉进入途径设计等一系列术前模拟手术,然后在腹腔镜辅助下行复位内固定术;术后进行分步骤、渐进性、系统性的康复锻炼。结果手术成功完成,康复周期缩短。结论3D打印技术的应用可使手术更加精准、安全,缩短患者康复周期,使患者早日重返工作岗位,从而减少住院日,降低医疗成本。
作者:邓爱文;熊日波;何伟明;魏东;曾参军 刊期: 2014年第04期
本文通过系统回顾单孔腹腔镜结直肠手术相关文献,从体表切口入路、单孔腹腔镜装置及操作器械三方面阐述单孔腹腔镜结直肠手术的技术实现,并全面分析数据初步证实单孔腹腔镜结直肠手术是安全、可行的,与传统腹腔镜具有相当的近期疗效,然而其潜在的微创优势和远期肿瘤学疗效还有待深入研究。
作者:熊文俊;王亚楠;李国新 刊期: 2014年第04期
目的:探讨3D高清腹腔镜在腹腔镜胃癌根治术中的临床应用价值。方法选取我院2013年1月~2013年12月分别采用3D高清腹腔镜(3D组)和2D高清腹腔镜(2D组)行胃癌根治术各40例,对比两组在手术持续时间、术中失血量、学习曲线、住院花费等方面的差异。结果手术持续时间3D高清腹腔镜组2.8±0.6 h,明显低于2D高清腹腔镜组3.2±0.8 h(P=0.032),两组相比有明显差异(P<0.05)。术中失血量3D高清腹腔镜组110±18 ml,2D高清腹腔镜组120±21 ml,两组相比无统计学上差异(P=0.543)。住院花费3D高清腹腔镜组7.5±1.6万元,2D高清腹腔镜组7.1±1.3万元,两组相比无统计学上差异(P=0.162)。结论3D高清腹腔镜能提供清晰的三维立体视觉,良好的深度感,可实现精确操作,缩短手术时间。并且,在3D高清视野下能更快地提高外科医生的手术操作能力和手术技巧,明显缩短学习曲线。
作者:陈海金;俞金龙;黄宗海;林晓华 刊期: 2014年第04期
目的:探讨18F-FDG PET/CT双时相显像在膀胱癌术前分期中的应用价值。方法2003年5月~2012年5月进行18F-FDG PET/CT检查的膀胱癌初诊患者73例,男54例,女19例,年龄58.7(41~80)岁。所有患者18F-FDG PET/CT常规全身显像后,口服40 mg呋塞米并多饮水,多次排尿,服呋塞米后约2 h憋尿充盈膀胱,再进行18F-FDG PET/CT盆腔延迟显像。所有患者于18F-FDG PET/CT检查后1周内进行手术治疗,将PET/CT与手术病理学检查结果进行对比分析,评价18F-FDG PET/CT双时相显像在膀胱癌术前分期中的应用价值。结果18F-FDG PET/CT双时相显像对膀胱癌原发灶的T分期与病理分期符合率为63.0%(46/73),其中pT4期膀胱癌的分期符合率为100%(7/7);另外检出75.0%(6/8)的淋巴结转移灶,100%(4/4)的远隔器官转移灶和100%(4/4)原发性第二种恶性肿瘤病灶。结论本研究结果表明18F-FDG PET/CT双时相显像在T分期方面,尽管对pTa、pT1、pT2、pT3期膀胱癌的T分期价值不大,但对pT4期膀胱癌的T分期可能有重要的应用价值;在膀胱癌的N分期、M分期及发现第二种原发癌方面也可能有重要的应用价值。
作者:李洪生;吴湖炳;王巧愚;韩彦江;王全师 刊期: 2014年第04期
目的:探讨牙列缺损患者的种植术前焦虑水平对术后疼痛感受的影响。方法临床随机选取80例牙列缺损种植义齿修复的患者,在种植手术前完成状态-特质焦虑量表(STAI)、修正版牙科焦虑量表(MDAS)的填写,术后即刻采用视觉模拟评分(VAS)和现时疼痛强度问卷(PPI)对患者的疼痛感受进行测评,分析术前状态焦虑、特质焦虑、牙科焦虑与术后VAS评分的相关性,将状态-特质焦虑量表的测评分数分为3组。L组:为较少的或没有焦虑组(20~37);M组:为适中的焦虑组(38~44);H组:为较高的或极度的焦虑组(45~80),研究不同状态焦虑和特质焦虑水平对术后疼痛感受的影响。结果种植术前的状态焦虑、特质焦虑、牙科焦虑评分之间均有显著的正相关关系(P<0.01),种植术后的VAS评分与术前的特质焦虑评分之间存在显著的正相关关系(P<0.01),不同特质焦虑水平分组之间的VAS评分差异具有统计学意义(P<0.01),H组的VAS评分,高于M组和L组(P<0.05)。结论牙列缺损患者种植术前的特质焦虑水平与术后的疼痛感受具有一定的相关性,临床上应对术前的焦虑状况加以重视。
作者:刀俊峰;章锦才;宋光保;信琪 刊期: 2014年第04期
目的:探讨淋巴结转移度(LNR)对结直肠癌术后远处转移的预测价值。方法回顾性分析解放军总医院普通外科2007年1月~2012年1月行根治性切除手术的180例结直肠癌患者的临床资料,按照术后有无出现远处转移将患者分为非转移组和转移组,分析LNR与结直肠癌术后出现远处转移的关系。结果非转移组118例(65.6%);转移组62例(34.4%),其中肝转移39例,肺转移12例,骨、肺及多脏器转移11例。两组在肿瘤大体类型、分化程度、检出淋巴结总数及LNR方面差异有统计学意义(P<0.05),溃疡型和浸润型较隆起型,低分化程度较高、中分化程度,LNR≥0.17较LNR<0.17结直肠癌更易发生远处转移;多因素分析结果显示LNR与分化程度及大体类型均是影响结直肠癌术后远处转移的独立相关因素(RR:2.098;CI%:1.050-4.192;P=0.036)。结论 LNR与结直肠癌术后发生远处转移独立相关,可联合分化程度等作为评估结直肠癌术后发生远处转移及预后的参考指标。
作者:薛虎臣;杜晓辉;肖春红;晏阳;邹振玉;徐迎新 刊期: 2014年第04期
目的:探讨屋尘螨(HDM)对气道上皮细胞系(16-HBE)胸腺基质淋巴生成素(TSLP)表达的影响,进一步评价活性维生素D3(1,25VD3)的干预作用。方法四唑盐(MTT)比色法检测不同浓度HDM(200、400、800 U/L)及其联合10-8 mol/L 1,25VD3对16-HBE活力的影响。按下述分组刺激16-HBE,对照组,400 U/L HDM组,10-8 mol/L 1,25VD3组,10-8 mol/L 1,25VD3预处理1 h后400 U/L HDM组,10-8 mol/L 1,25VD3联合400 U/L HDM组,6 h后,实时荧光定量PCR检测细胞TSLPmRNA表达情况;刺激24 h后,ELISA检测细胞培养上清中TSLP的浓度。结果200~800 U/L HDM作用气道上皮细胞后,可以上调16-HBE TSLP的基因和蛋白表达(P<0.05);10-8 mol/L 1,25VD3预处理后400 U/L HDM组的TSLP蛋白水平较400 U/L HDM组显著下降(P<0.05);但10-8 mol/L 1,25VD3联合400 U/L HDM组的TSLP蛋白水平较400 U/L HDM组无显著差异(P=0.58)。结论HDM和1,25VD3均可增加16-HBE TSLP的表达和释放。1,25VD3预处理气道上皮细胞可减少屋尘螨诱导的TSLP分泌。
作者:周丽芹;董航明;赵海金;邹梦晨;姚利红;邹飞;蔡绍曦 刊期: 2014年第04期
目的:联合检测育龄男性无精子患者血清卵泡刺激素(FSH)和抑制素B(INHB)水平评估睾丸生精功能的临床诊断价值。方法95例无精子症患者均行血清FSH、INHB检测,根据睾丸活检病理组织学分类,唯支持细胞综合征20例、生精低下25例、成熟阻滞18例和生精功能正常32例。统计分析FSH和INHB的血清水平与病理分类的相关性。结果血清FSH、INHB和INHB/FSH在唯支持细胞综合征组与其他组比较具有显著性差异(P<0.05),生精功能低下组、成熟阻滞组和生精功能正常组比较没有显著性差异(P>0.05);FSH、INHB和INHB/FSH与精细胞成熟阻滞无显著相关性(P>0.05),而在其他组别中均具有显著负相关性(P>0.05);INHB和INHB/FSH在所有研究组别中均具有显著性正相关(P<0.05);血清INHB小于28.55 pg/ml诊断唯支持细胞综合征的敏感度为97%,特异性为85%。结论血清FSH和INHB水平不能有效区分睾丸生精功能状态,但能有效确定唯支持细胞综合征,其他类型的生精功能异常仍需依赖活检病理组织学检查。
作者:邓永键;李东;胡勇华;陈君洋;褚庆军 刊期: 2014年第04期