严伟玲;陈国强
目的 构建凋亡素基因的原核表达载体,进行表达并制备表达蛋白的多克隆抗体.方法 构建凋亡素 pGEM-T/Apoptin载体,并将凋亡素基因亚克隆至原核表达载体pET-28a(+)中,将该质粒转化至大肠杆菌E.coli BL21(DE3)受体菌中,以IPTG对其进行诱导表达,聚丙烯酰胺凝胶电泳分析目的蛋白.用表达蛋白常规免疫Balb/c小鼠,间接ELISA检测小鼠血清中抗体的滴度.结果 凋亡素基因被成功的克隆至pET-28a(+),表达产物经SDS-PAGE分析,在相对分子量约17 000的位置出现目的蛋白条带,大小与预期结果一致,Balb/c小鼠经5次免疫后,得到了滴度为1:5×10~5血清抗体.结论 凋亡素原核表达载体的成功构建和多克隆抗体的制备为进一步研究凋亡素的功能和凋亡素的应用研究奠定了基础.
作者:王健生;张明鑫;段小艺;莫非;王全颖;杨广笑 刊期: 2009年第07期
目的 探讨肥大细胞(MC)、胃肠激素在三硝基苯磺酸(TNBS)所致大鼠溃疡性结肠炎模型发病机制中的作用及其相互作用.方法 大鼠经肛门按100 mg/kg注入TNBS的50%乙醇溶液0.3 ml,分别于实验第0、6、11、16、21 d处死,行结肠MC计数,采用荧光测定、放免等方法测定血组胺、结肠组织组胺、P物质(SP)、血管活性肠肽(VIP)、生长抑素(SS)含量;采用免疫荧光双染法观察TNBS模型MC与SP、VIP、SS阳性神经纤维关系.结果 TNBS模型实验第6d见远段结肠有明显溃疡形成,血组胺含量显著增加(P<0.05),结肠组织组胺浓度显著下降(P<0.05),以后上述指标逐渐恢复正常;实验第16天起MC计数显著增加(P<0.05),并持续至实验第21天,MC分布发生改变,结肠肌层出现MC聚集.实验第11天起SP显著增加(P<0.05),并持续至实验第21天.免疫荧光双染显示TNBS模型各时期远段结肠多数MC与SP、VIP阳性神经纤维紧邻,结肠肌层VIP阳性神经纤维增加,但MC与SP、VIP无共染现象.MC与SS阳性神经纤维无伴行关系.结论 MC及其释放的组胺参与了TNBS所致大鼠的肠粘膜损伤过程.SP、VIP分泌异常参与了TNBS所致大鼠UC发病过程.MC与SP、VIP的双向调节机制在TNBS所致大鼠UC发病过程中起重要作用.
作者:赵平;董蕾;罗金燕;管海涛;马卉;王学勤 刊期: 2009年第07期
目的 研究标准通道下经皮肾镜Ⅰ期治疗结石性脓肾的可行性.方法 取36例脓肾患者为研究对象,取同期行经皮肾镜手术的非脓肾结石患者36例作为对照,行经皮肾镜Ⅰ期手术治疗,术中肾造瘘扩至F24标准通道,用瑞士EMS碎石清石系统进行碎石取石,监测术中肾盂内压力变化,同时行手术前后血培养、尿培养、术后体温变化、血WBC等相关指标监测.手术前后使用抗生素治疗.结果 两组病例均顺利完成手术,对照组和试验组术中所测肾盂内压力平均为23.2 cm H_2O和22.8 cm H_2O,两组各有1例术后一过性菌血症,无1例败血症发生,两者相比无统计学差异,其他相关指标也无统计学差异.结论 通过标准通道,在肾盂低压状态下利用EMS碎石清石系统Ⅰ期治疗结石性脓肾有效.
作者:周大庆;王坚;李文刚;庞翔;刘尚文;余小祥;江波 刊期: 2009年第07期
目的 总结47例关节镜下半月板修复缝合的经验.方法 关节镜下双针缝合法修复半月板撕裂,用于治疗半月板三区纵形撕裂合并前交叉韧带(ACL)损伤所致的关节不稳定.结果 所有患者随访平均15个月.12例患者按Henning评定标准:9例愈合,1例不全愈合,2例未愈合,患者满意率为93%.结论 关节镜直视下清楚了解半月板损伤的病理变化,在重建ACL同时,应尽量修复缝合撕裂的半月板,有助于防止关节表面后遗症的发生,更好地稳定关节.采用双针缝合法不需要昂贵的特殊器械,不易损伤血管神经,该方法安全可靠,简单易行.
作者:刘宝荣;肖晟;王国平;沈雄杰 刊期: 2009年第07期
目的 观察门静脉和下腔静脉阻断与开放后门静脉高压模型犬体循环的变化及与NO/ET、PGI2/TXA2的关系.方法 正常家犬12只,随机均分为对照组和门静脉高压模型组(采用部分结扎门静脉的方法建立门静脉高压症犬的模型并饲养12周),进行门静脉和肝后下腔静脉阻断与开放实验,监测围术期心率(HR)、平均动脉压(MABP)、中心静脉压(CVP)、肺动脉楔压(PAWP)、心指数(CI)、体循环阻力指数(SVRI).分别于麻醉后术前、无肝期30min、新肝期30min 3个时点抽取中心静脉血,用放免法测定血浆一氧化氮(NO)/内皮素(ET)、前列环素(PGI_2)/血栓素A2(TXA_2)水平.结果 在门静脉和下腔静脉阻断后两组犬出现了明显的体循环的变化,表现为门静脉和下腔静脉阻断后均处于低有效循环,但模型组相对稳定;门静脉高压模型组围术期体循环血浆NO水平在门静脉和下腔静脉阻断后持续显著降低.结论 在围术期两组犬出现了明显的体循环的变化,门静脉高压组阻断期体循环相对稳定,血浆NO、ET、PGI_2、TXA_2的意义需进一步探讨.
作者:池信锦;魏涧琦;黑子清;葛缅;刘德昭 刊期: 2009年第07期
目的 研究惠州市两家医院在2006年12月至2008年12月间,各临床科室住院及门诊病人265株血液感染的病原菌构成和分布特点.方法 采用BACTEC 9120全自动血培养仪对血标本进行培养,MicroScan-4微生物系统对血培养阳性标本进行菌种鉴定.结果 2342份血标本中,共检出细菌265株,检出率为11.3%,其中革兰阳性球菌143株(54.0%),革兰阴性杆菌105株(39.6%),阳性杆菌14株(5.3%)真菌3株(1.1%).血液感染中内科疾病127例占47.9%,外科疾病67例占29.2%,儿科71例占26.8%.儿科检出病原菌主要为凝固酶阴性的葡萄球菌(CNS)77.5%(55/71).结论 内科主要为革兰阴性杆菌感染,外科与儿科主要为革兰阳性球菌感染,葡萄球菌尤其是CNS已成为血液感染的主要病原菌,应引起临床医生的重视.
作者:严伟玲;陈国强 刊期: 2009年第07期
目的 探讨西藏小型猪、比格犬与人血液流变学指标的相互关系.方法 采集成年西藏小型猪、比格犬和人的血液样品,用全自动血液粘度计分别测定其全血粘度(WBV,高、中、低切变率)、血浆粘度、红细胞压积、血沉及血浆纤维蛋白原5项血液流变学指标.结果 (1)雄性西藏小型猪的WBV值(150、30、5、1s~(-1))和血浆纤维蛋白原含量均显著低于雌性(P<0.05,P<0.01,P<0.05,P<0.01,P<0.01);(2)雄性比格犬的WBV值(150和1 s~(-1))显著低于雌性(P<0.05);(3)男性的WBV(1s~(-1))和红细胞压积值显著高于女性(P<0.05,P<0.01),而男性的血沉值则显著低于女性(P<0.01);(4)比格犬的WBV(1 s~(-1))、血浆粘度、血沉值均显著低于西藏小型猪和人(P<0.05,P<0.01,P<0.05),而红细胞压积值和血浆纤维蛋白原含量则显著高于西藏小型猪和人(P<0.01);(5)西藏小型猪和人的各项血液流变学指标之间均不存在显著差异(P>0.05).结论 与比格犬相比,西藏小型猪的血液流变学指标更接近于人.
作者:袁进;吴清洪;陈丽;张嘉宁;顾为望 刊期: 2009年第07期
目的 总结肝移植手术成功的经验.方法 回顾性分析我院近3年来105例肝移植资料.结果 所有手术均顺利完成,手术时间210~350 min,平均250 min;无肝期35~65 min,平均53.5 min.手术中输血0~6600 ml,平均400ml.95例术后恢复顺利,10例死亡,手术成功率90.5%.术后并发症发生率:胆道并发症12例(11.4%),内出血6例(5.7%).结论 减少术中出血是肝移植手术成功的关键因素,术中彻底止血、保证胆道有充足的血供能大大降低术后并发症的发生.
作者:周杰;林建华;崔忠林;张思云;王宇;张国伟;林艺雄 刊期: 2009年第07期
目的 构建大鼠δ阿片受体基因的pIRES2-EGFP表达质粒,并实现其在HEK293细胞的表达.方法 提取大鼠脑组织总RNA,通过逆转录巢式PCR,扩增δ受体全长cDNA,克隆至pMD20-T载体中,测序鉴定,经酶切、连接克隆人pIRES2-EGFP中,将获得的δ-pIRES2-EGFP重组子转染人HEK293细胞中,应用荧光显微镜观察EGFP和δ基因表达情况.结果 酶切和测序结果表明δ基因正确构建入 pIRES2-EGFP表达质粒中,转染了重组子的HEK293细胞在荧光显微镜下可以观察到绿色荧光,应用细胞免疫荧光,可以观察到δ基因高强度表达.结论 利用巢式RT-PCR等成功构建了δ-pIRES2-EGFP表达质粒,并在HEK293细胞中实现了高效表达.
作者:胡子有;漆松涛;张遐;曹琼;吴炳义 刊期: 2009年第07期
目的 了解超声检查在急性阑尾炎诊断和指导治疗方面的应用价值.方法 回顾以急性阑尾炎为初步诊断,实施了阑尾区B超检查的139个病例资料,作统计学分析.结果 超声诊断急性阑尾炎的敏感度约96.3%,特异性约67.7%,阳性预测值约91.2%,阴性预测值约84.0%.结论 超声检查在急性阑尾炎诊断和指导治疗方面具有重要价值.
作者:沈嫱;戴九龙;石小红;高蕾 刊期: 2009年第07期
目的 探讨膜联蛋白V(Annexin V)在子痫前期蜕膜组织中的表达及意义.方法 采用荧光实时定量PCR、Western blot和免疫组织化学技术分别对正常足月妊娠妇女(对照组)35例、晚发型重度子痫前期33例及早发型重度子痫前期38例的Annexin V mRNA及蛋白进行测定.结果 Annexin V主要表达于蜕膜细胞的胞膜、胞浆及间质.荧光实时定量PCR,Western blot和免疫组化表达等各方法验证结果显示:Annexin V mRNA及蛋白在正常妊娠组蜕膜组织中表达高;晚发型子痫前期组中次之;早发型子痫前期中低,正常妊娠组与早发组和晚发组差异有统计学意义(P<0.01),早发组和晚发组差异没有统计学意义(P>0.05).结论 Annexin V在子痫前期蜕膜组织中表达下调,Annexin V 的低表达可能与子痫前期高凝状态形成有关.
作者:冯亚玲;周昌菊;薛敏 刊期: 2009年第07期
目的 了解转化生长因子β(TGF)对肝星状细胞c-fos基因表达的影响.方法 在培养的肝星状细胞系中加入不同浓度的TGF(终浓度0.2、1、5 ng/ml),于8、24、48、72h四个时间点分别收集细胞,提取肝星状细胞总RNA;用逆转录定量PCR方法测定c-fos基因的表达水平.结果 TGF不同浓度组肝星状细胞c-fos基因表达水平在8、24、48、72 h四个时间点均显著高于对照组;随剂量加大,c-fos基因表达水平逐渐升高;3组间也有显著差异.结论 转化生长因子β对肝星状细胞c-fos基因表达有明显的上调作用.
作者:王爱民;任春海;马志杰;向英;张志伟;朱志坚;王宝恩 刊期: 2009年第07期
目的 观察布托啡诺持续硬膜外输注镇痛用于老年病人髋关节置换术后的临床效应及安全性.方法 60例年龄60~103岁,ASAⅠ~Ⅱ级的择期髋关节置换术患者,术毕随机分为两组,使用一次性镇痛泵分别用布托啡诺(B组,n=30例)和吗啡(M组,n=30例)持续输注镇痛.观察术后4、8、12、24、48h患者的疼痛程度,患者对镇痛治疗总体印象评分以及不良反应.结果 B组与M组术后不同时间点镇痛效果比较差异无显著性(P>0.05),但是术后48h内B组不良反应(呼吸抑制、恶心、呕吐、瘙痒、腹胀等)比M组少(P<0.01).结论 布托啡诺持续硬膜外输注镇痛用于髋关节置换手术后老年病人的镇痛是安全的,效果确切,不良反应轻.
作者:胡冬华;李雅兰;蔡明雪;张惠;项明方;帅兵;聂偲 刊期: 2009年第07期
目的 探讨肝移植手术中广泛门静脉病变时的处理方法.方法 回顾性总结4例广泛门静脉病变在原位肝移植术围手术期CT/MR、彩色多普勒超声及肝功能等,评估选择门静脉重建术式的效果.结果 4例门静脉病变患者情况各异,肝移植中都克服了手术困难、成功地重建了供肝门静脉灌注并取得较好的效果.结论 术前详尽的影像学资料,尤其是门静脉及肝动脉血流动力学资料对术式选择非常重要;术中结合具体情况,采用PV属支直接或架桥吻合或CPHT是解决供肝PV灌流的有效方法.
作者:钱世鹍;陈德;彭和平;薛平;何晓顺;朱晓峰 刊期: 2009年第07期
目的 了解广西三江县侗族乳母的膳食营养及乳汁营养素的状况.方法 收集广西三江县侗族120名0~6月乳母的乳汁,测定其蛋白质、脂肪、碳水化合物、钙、铁、锌、维生素A的含量,并对产妇进行膳食调查.结果 乳母产后1个月内蔬菜、豆类等摄入严重不足,产后1个月以后优质蛋白质摄入不足.满月前乳母乳汁中蛋白质、脂肪、铁的含量高于参考值,满月后蛋白质、铁的含量低于参考值.钙、锌、维生素A的含量低于参考值.碳水化合物的含量接近参考值.结论 应加强对少数民族农村地区乳母的营养指导,改变哺乳期不均衡的膳食习惯.建议广两i江侗族孕妇及乳母应适当增加铁、锌和优质蛋白质的摄取量.
作者:江蕙芸;陈红慧;杨万清;王艳华 刊期: 2009年第07期
目的 观察多次食管酸灌注对豚鼠气道阻力和气道反应性的影响并探讨其作用机制.方法 应用双室体描仪测定对照豚鼠和多次食管酸灌注豚鼠的气道阻力和气道反应性,同时用ELISA法测定豚鼠肺组织、气管、神经节和肺泡灌洗液的P物质(SP)和血管活性肠肽(VIP)含量.结果 多次食管灌酸组豚鼠第15天灌酸后的气道阻力增长率与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),4个时间点气道反应性的差异无统计学意义.多次食管酸灌注可增加豚鼠肺组织、气管、结状神经节、支气管肺泡灌洗液(BALF)中SP含量.结状神经节SP含量与气管中SP含量呈正相关.正常对照组、多次灌生理盐水组、多次灌酸组豚鼠肺组织、气管、神经节、BALF的VIP含量两两比较差异无统计学意义.结论 多次食管灌注盐酸可以增加豚鼠气道阻力但不能改变其气道反应性,其原因可能与迷走神经介导的食管-支气管反射引起气道神经末梢释放SP有关.
作者:姚卫民;赖克方;罗远明;刘春丽;陈如冲;罗炜;钟南山 刊期: 2009年第07期
目的 探讨改良微创伤Nuss手术矫治青少年漏斗胸的可行性,并讨论围手术期的处理.方法 8例青少年漏斗胸患者(7男1女,平均年龄17.2岁)施行改良漏斗胸矫治术.在患者两侧腋中线胸骨凹处略高水平做两个2.5 cm小切口,在胸腔镜下将已塑形的矫形板由右胸腔经胸骨后穿至左胸腔,翻转矫形板将胸骨顶起,矫正凹陷畸形,并将矫形板固定于胸壁;加强、改进围手术期处理并随访.结果 8例患者均顺利完成手术,放置矫形板满意,无心脏、肺脏等伤害性事件发生,疼痛超过1周的3例,伤口延迟愈合1例,术后平均术后住院日8.8d;全部患者随访2~19个月,取得满意的结果,矫形效果优的6例,良好2例;无矫形板移位、塌陷.结论 Nuss手术矫治青少年漏斗胸是一种创伤小,美观,效果确切的良好术式,改进、加强围手术期处理是手术取得满意效果的关键.
作者:陈群清;闫玉生;童健;陈坤棠;张福伟;肖飞;李辉 刊期: 2009年第07期
目的 分析广东地区妇女乳腺癌的危险因素,为建立乳腺癌风险模型,有针对性地筛查高危人群进行早期干预提供依据.方法 采用成组配对的病例对照研究,对绝经前和绝经后妇女分别进行乳腺癌人群和非乳腺癌人群危险因素的单因素分析和Logistic多元回归分析.结果 绝经前妇女中,服用避孕药、亲属中有乳腺癌患者、有不良情绪、有不良事件、劳动强度大等因素是乳腺癌的危险因素;有乳腺增生病史、有乳腺组织活检史、有相对剧烈的运动等因素可能是乳腺癌的保护因素.绝经后妇女中,亲属中有乳腺癌患者是危险因素,情绪调节能力强是保护因素.结论 绝经前后乳腺癌的危险因素和保护因素不完全相同,根据不同的影响因素,建立绝经前后不同的乳腺癌预报模型,更有针对性地进行乳腺癌的早期干预应是今后工作的重点.
作者:张安秦;夏建红;王颀;李文萍;许娟;陈中扬;杨剑敏 刊期: 2009年第07期
目的 开发肺癌辅助诊断系统.方法 回顾性分析原发性肺癌及肺良性疾病(肺炎、肺结核、肺炎性假瘤)共1883例患者的临床资料,运用SPSS11.5统计软件进行非条件Logistic回归分析,建立回归诊断模型,参考模型利用Microsoft Visual Studio 2005系统开发平台VB.Net语言开发相应肺癌辅助诊断系统.结果 多因素非条件logistic回归模型显示:模型的拟合优度(R2)为0.806(>0.7).内对照情况:肺良性疾病诊断准确率=92.8%,肺癌诊断准确率=89.0%,总体诊断准确率=90.8%.结论 肺癌诊断系统对临床早期发现肺癌有较积极的作用,随着多中心数据的增加,模型的应用价值将越来越高.
作者:吕优江;俞守义 刊期: 2009年第07期
目的 探讨人工肝血浆置换术治疗对药物性肝炎亚急性肝功能衰竭(简称药物性亚急性肝衰竭)患者救治成功率的影响. 方法 回顾性选择我院收治的药物性亚急性肝衰竭患者94例;分治疗组61例(早、中、晚期患者分别为32例、19例、10例),在常规内科综合治疗基础上给予人工肝血浆置换术治疗,观察其肝功能主要生化指标变化和救治成功率,并与仅以常规内科综合治疗的对照组33例患者(早、中、晚期分别为17例、11例、5例)进行比较分析.结果 治疗组肝功能主要生化指标明显优于对照组(P<0.05);患者救治成功率明显高于对照组(P<0.05),其中早期患者救治成功率显著高于对照组(P<0.01),中期患者明显高于对照组,晚期患者两组差别不大.结论 人工肝血浆置换术治疗药物性亚急性肝衰竭,可以改善患者肝功能,提高早、中期患者救治成功率,但对晚期患者救治成功率无明显影响;针对药物性亚急性肝衰竭患者,提倡尽早予以人工肝治疗,力争在早、中期进行.
作者:黎明;吴锦瑜 刊期: 2009年第07期