马德选；徐如祥；朱红胜
目的构建PcDNA4/His C-MBL表达载体,在哺乳细胞中表达人甘露聚糖结合凝集素(MBL).方法应用PCR从含有中国人野生型MBL cDNA的质粒pGEM-MBL中扩增目的基因片段,将其克隆至PcDNA4/His C真核表达载体.经酶切及测序鉴定后,以电穿孔法转染CHO细胞,以RT-PCR分析其mRNA表达,通过Ni-NTA琼脂糖柱层析纯化目的蛋白并以SDS-PAGE和Western-blotting鉴定,以其为免疫原免疫小鼠后取鼠血清进行ELISA检测分析目的蛋白的免疫活性.结果从pGEM-MBL中扩增得到约750 bp的cDNA片段,构建成重组载体经酶切出现约5 100和750 bp片段,测序鉴定与预期的完全一致.RT-PCR证实转染细胞有MBLmRNA表达,纯化蛋白经SDS-PAGE电泳可见约29000、58 000和87 000条带,其中29 000蛋白带可与6-His抗体反应.纯化蛋白免疫小鼠所获抗血清ELISA效价是1:819 200,与天然人MBL和重组MBL三聚体糖识别域反应的ELISA效价均为1:25 600.结论获得了表达中国人MBL的CHO细胞株和重组人MBL,为MBL分子的进一步研究提供了条件.
作者：白志军；张丽芸；林佐贤；卢晓；陈政良 刊期： 2004年第08期
目的检测广东汉族人群HLA-Cw及HLA-A、B、DRB1基因频率,分析该人群HLA-Cw等位基因多态性及其单体型特点.方法骨髓移植供者185例,抗凝血提取DNA,半量全自动PCR-RSSO分型检测HLA-A、B、Cw、DRB1基因型.结果在分辨水平检出Cw等位基因11个,其中分布频率较高的依次为:Cw*03(0.2580)、Cw*07(0.1887)、Cw*01(0.1732)、Cw*08(0.1070).统计分析呈现显著连锁不平衡的HLA-Cw-A单体型7个,HLA-Cw-B单体型20个,HLA-Cw-DRB1单体型10个.结论广东汉族群体HLA-Cw基因具有较为丰富的多态性,其与HLA-A、B、DRB1间连锁不平衡单体型具有地区性遗传特征.
作者：马红京；肖露露；尹晓林；郭坤元；叶欣 刊期： 2004年第08期
目的在原核中高效表达及活性鉴定重组人survivin蛋白分子.方法应用RT-PCR的方法得到survivin的cDNA,并构建成pBV220-survivin原核表达质粒,将其导入E.coli B121(Gold)中,诱导表达survivin蛋白.通过DEAE SepharoseFastFlow离子交换柱和Sephacryl S-200分子筛二步柱纯化以获取目的蛋白.用Western blotting检测表达产物.结果PT-PCR产物经测序分析与预期结果完全一致,表达质粒在E.coli B121(Go1d)中得到高效表达,表达的survivin蛋白占总蛋白含量的30%以上,表达产物以包涵体的形式存在.通过离子交换柱和分子筛二步柱纯化及复性后获得的目的蛋白,其纯度达到95%以上.Western blotting证明表达产物具有特异性.结论获得了较高纯度的survivin蛋白,为进一步深入研究该蛋白的细胞凋亡调控功能提供了工具.
作者：别俊；孙茂盛；孙强明；郑建平；孙雯佳 刊期： 2004年第08期
目的观察蚌肉提取物LX01对肺癌细胞株A549的抑制作用及对血液白细胞数目的影响.方法MTT法检测不同浓度的LX01对肺癌细胞株A549细胞增殖的抑制率;A549细胞接种BALB/C裸鼠,观察给药后肿瘤的生长情况,高、中、低剂量LX01对荷瘤小鼠的生存时间、瘤重及血液白细胞数目的影响.结果LX01对A549细胞的增殖有明显的抑制作用,IC50为56.85mg/L,与阴性对照组比差异有显著性(P＜0.01);LX01能剂量依赖性的抑制A549接种瘤的生长;LX01中、高剂量可明显延长A549荷瘤小鼠生存时间,高剂量组荷瘤瘤重明显减轻,与阳性对照药环磷酰胺相似,明显高于阴性对照组(P＜0.01);与5-FU治疗组相比,LX01各剂量组对A549荷瘤小鼠血白细胞数目无降低作用.结论蚌肉提取物LX01能显著抑制肺癌细胞株A549接种BALB/c裸鼠后的生长,且对免疫系统无明显抑制作用.
作者：王顺官；李琳 刊期： 2004年第08期
目的了解对专业不同满意程度军校医学生的心理健康状况及其人格特征.方法采用自编大学生一般情况调查问卷(其中一项是调查被试对录取专业的满意度)、症状自评量表(SCL-90)、艾森克个性问卷(EPQ),对4294名军校医学生进行测试和评定.结果对专业不同满意程度军校医学生在个性和心理健康水平上存在显著差异.军校医学生对专业的满意程度与个性因素和心理健康水平存在一定相关关系.结论人格特征表现为较内向、高神经质、高精神质的军校医学生更容易对专业不满意;对所学专业越不满意的军校医学生则表现出越多相应的心理问题.
作者：刘欢欢；张小远；肖蓉；冯现刚 刊期： 2004年第08期
目的观察抗小鼠TLR-2胞外段B细胞识别表位抗体对小鼠肉瘤S180生长的影响.方法在对小鼠Toll样受体2(mTLR-2)B细胞优势表位预测的基础上,合成B细胞识别表位20 mer短肽,将其与载体蛋白偶联,制备免疫原.所得兔抗mTLR-2胞外段B细胞识别表位多克隆抗体TSP-1纯化后,采用Westem blotting、免疫组织化学和流式细胞仪进行初步鉴定.小鼠肉瘤株S180细胞注射小鼠左后肢,其中实验组混合100μg纯化抗体TSP-1,无关免疫球蛋白对照组混合100 μg正常兔IgG,空白对照组仅接种S180.小鼠经麻醉分别于10、14、18 d处死,称量瘤质量并计算抑瘤率.结果Western blotting显示在相对分子质量约95 000处可见清晰的反应条带;免疫组织化学和流式细胞术检测显示抗体可与表达天然mTLR-2的J774A.1细胞反应;实验组小鼠肉瘤生长明显受到抑制,其瘤质量在10、14、18 d与对照组相比差异显著(P＜0.05);抑瘤率分别为77%、51%和53%.结论局部应用抗mTLR-2胞外段B细胞识别表位抗体可抑制小鼠肉瘤S180生长,且表现在肿瘤生长的早期.
作者：赵文忠；刘艳君；朱平；刘洁；韩强涛；富宁 刊期： 2004年第08期
目的观察双开门颈椎管成形合并羟基磷灰石人工骨材料植骨术治疗颈椎管狭窄症的效果.方法采用双开门法行颈椎管成形、椎管扩大及羟基磷灰石人工骨植骨术治疗12例颈椎管狭窄症.结果经过5年随访,11例发育性颈椎管狭窄患者临床症状明显缓解、体征改善,1例疗效不佳.结论双开门颈椎管成形及人工骨材料植骨术是治疗颈椎管狭窄症的一种安全有效的手术方法.羟基磷灰石载体具有良好的生物相容性及骨传导性,是理想的骨移植替代材料,在颈椎椎管成形术中具有良好的应用价值.
作者：吕琦；庄颜峰；陈学明；王万明 刊期： 2004年第08期
目的研究洛拉曲克作用后不同细胞胸苷酸合成酶(TS)蛋白质表达水平的动态变化有无差异.方法时间曲线中,LoVo、Lo2细胞分别用浓度为10、75μmo1/L(接近各自的IC90值)的洛拉曲克处理0～60h.剂量曲线中,洛拉曲克作用时间36h,LoVo细胞剂量范围0～40μmol/L.Lo2细胞剂量范围0～125μmol/L.分别以流式细胞术法、Westemblot法检测两种细胞TS蛋白表达水平.结果两种细胞在经过洛拉曲克处理后,TS表达的时间和剂量曲线具有显著不同的动态规律.在时间曲线中,LoVo细胞TS蛋白的表达水平与对照相比呈持续升高的趋势,Lo2细胞TS蛋白的表达水平与对照相比先降低,24 h后TS蛋白表达水平逐渐回升,但至60 h尚未恢复至对照水平.在剂量曲线中,LoVo细胞TS蛋白的表达水平的变化呈峰形,以IC90值附近为高,Lo2细胞TS蛋白的表达水平,在低于IC90值的剂量点TS蛋白水平降低程度相似,高于IC90值的剂量处理后TS水平随剂量的升高而下降.结论洛拉曲克可以产生TS诱导现象,不同细胞在洛拉曲克作用后TS动态表达的差异是细胞耐药性不同的原因之一.
作者：李亦蕾；吴曙光 刊期： 2004年第08期
目的研究鼻咽癌常规放疗和调强放疗(IMRT)受照剂量的差异.方法用放疗计划系统分别进行鼻咽癌常规放疗和调强放疗计划设计,计算肿瘤量70 Gy时正常组织受照剂量-体积直方图和所需照射的总跳数.用X射线能量为6MV的加速器实施放疗计划.根据方野散射线和漏射线剂量率的测量值和总跳数,估算射野外不同距离正常组织所受辐射剂量.结果调强放疗射野内正常组织受照剂量低于28 Gy的体积是常规放疗的1.43～1.81倍,而高于35 Gy时,受照体积仅为常规放疗的0.73～0.30倍;射野外正常组织所受散射线和漏射线照射剂量的估计值约为常规放疗的2倍.结论鼻咽癌常规放疗与调强放疗相比,正常组织受照剂量和受照体积具有成倍差异,调强放疗漏射线和散射线是常规骀放疗的2倍.
作者：张书旭；徐海荣；林生趣；李文华 刊期： 2004年第08期
目的建立中医阴阳数字模型.方法采用计算机二进制数字语言解构和重建中医阴阳理论.结果建立了中医阴阳二进制数字模型并成功模拟了中医阴阳理论的主要内容.结论可以通过二进制数字语言对中医理论进行合理解构和重建,实现中医药理论的数字化.
作者：秦建增；陈宝田 刊期： 2004年第08期
目的探讨原位肝移植术后并发症的诊治经验.方法回顾性分析我院18例次原位肝移植(其中2例再次肝移植)病人术后各种并发症的诊治经过.结果对16例患者(5例终末期肝硬化、7例原发性肝癌、l例肝癌术后肝功能衰竭、l例肝豆状核变性、l例慢性肾功能衰竭合并肝炎后肝硬化、1例急性暴发性肝功能衰竭)进行原位肝移植.手术成功12例,术后长存活已超过4年.术后并发症包括:腹腔内出血3例、脑血管病变2例、肺部感染6例、急性呼吸窘迫综合征(ARDS)2例、肝上下腔静脉狭窄2例、肝动脉血栓形成l例、胆道结石或胆泥3例、胆漏1例、急性排斥反应2例、慢性排斥反应2例、急性肾功能衰竭2例.围手术期死亡6例,直接死亡原因:脑出血1例、ARDS 1例、急性肾功能衰竭1例、肝动脉血栓1例、急性排斥反应l例、肝功能衰竭1例.结论肝移植围手术期采取合理的防治措施能有效减少肝移植术后并发症的发生,对肝移植术后并发症的及时诊断和正确处理是提高肝移植成功率的关键.
作者：苏树英；陈焕伟；甄作均；许卓明；计勇 刊期： 2004年第08期
目的探讨恶性腹膜间皮瘤的诊治方法.方法回顾分析16例恶性腹膜间皮瘤临床表现、实验检查及治疗方法.结果16例中术前确诊3例,剖腹探查10例,急诊手术1例,腹腔镜探查2例.随访12例,半年内死亡2例,2年内死亡7例,1例生存超过2年.另2例为近1年内患者,继续治疗中.结论恶性腹膜间皮瘤无特异性症状,诊断困难,误诊率高.诊断主要依据脱落细胞检查、腹腔穿刺活检、腹腔镜及剖腹探查.预后差,综合治疗有望延长患者生存期.
作者：王浩；厉周；黄宗海 刊期： 2004年第08期
目的评价RT-PCR法检测MN/CAⅨ基因在肾癌组织表达的可靠性.方法以5例肾癌和5例正常肾组织为研究对象,提取总RNA,两步法进行RT-PCR反应,用MN/CAⅨ的特异性引物扩增,2%琼脂糖凝胶电泳后观察并测序.结果经过测序证实5例肾癌组织的RT-PCR产物中有4例可见特异的MN/CAⅨ条带,而正常肾组织的RT-PCR产物均无相应的MN/CAⅨ条带.结论RT-PCR法检测MN/CAⅨ在肾癌组织中的表达是准确、可靠的.
作者：姜耀东；郑少斌；王战会 刊期： 2004年第08期
目的探讨重型脑损伤患者亚低温(33～35℃)治疗前后颅内压(ICP)、脑组织氧分压(PO2)的变化及临床意义.方法32例重型颅脑损伤患者分为亚低温组及对照组,放置ICP脑组织PO2光纤探头,持续监测ICP及脑组织PO2.结果亚低温治疗24h后ICP逐渐下降,脑组织PO2逐渐上升,与对照组比较差异有显著性(P＜0.05).结论亚低温治疗能明显降低重型颅脑损伤患者ICP,改善脑组织氧代谢,使患者死亡率及致残率降低.
作者：林源泉；贾军；刘文锋；张浚 刊期： 2004年第08期
目的探讨纤溶酶原激活剂抑制物-1(PAI-1)基因4G/5G多态性与广东汉族人2型糖尿病肾病(DN)发病的关系.方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析,对147例病史7年以上的2型糖尿病患者[其中DN患者77例,糖尿病非肾病(DNN)患者70例]和26名健康人进行了PAI-1基因4G/5G多态性分析.结果DNN组PAI-1基因的4G/4G基因型、基因频率显著高于DN组(x2=13.008,P＜0.01);与5G/5G基因型相比,DNN组PAI-1基因4G/4G型对DN组的比数比为1.447,95%的可信区间:0.533～3.934(P＜0.05),差异有显著性.而DN与DNN组PAI-1基因4G等位基因频率无显著差异(x2=1.22,P＞0.05);结论PAI-1基因4G/4G基因型与广东汉族人2型DN的发病有关联,4G/4G基因型广东汉族2型糖尿病人易发生DN.
作者：刘仕群；薛耀明；杨光彩；何飞英；赵小山 刊期： 2004年第08期
目的探讨彩超对新生儿紫绀型先天性心脏病的诊断价值.方法对149例青紫的新生儿进行彩超检查,诊断紫绀型先心病25例并分析其疾病类型.结果25例紫绀型先心病中存在大动脉转位、法乐四联症、单心室、永存动脉干等复杂畸形,其中大动脉转位多见,其次为法乐四联症,单心室位居第3.结论彩超可作为青紫新生儿先心病的常规筛查手段.
作者：李彬；龙振荣；刘卓华 刊期： 2004年第08期
目的克隆日本血吸虫8k CaBP(Sj8CaBP)基因启动子区并对该序列进行分析.方法提取日本血吸虫基因组DNA,并按ClontechUniversal Genome WalkerTM Kit的操作手册说明,建立日本血吸虫基因组DNA文库.根据手册要求及Sj8CaBP基因的cDNA序列,设计合成该基因染色体步移的特异性引物与试剂盒提供的端子引物进行巢式PCR.将得到的PCR产物克隆测序,测序结果用启动子区的分析软件及与其cDNA序列比对进行分析.结果得到的Sj8CaBP基因长度为1 079 bp(GenBank登录号AY262018),该基因包含Sj8CaBP基因完整的开放阅读框(ORF),包括1个内含子及2个外显子,在其5'端UTR区具有明显的启动子区,包括TATA盒及CAAT盒,没有发现GC盒及一些血吸虫基因启动子区所常见的AP-1(Active protein 1)结合位点.结论从日本血吸虫基因组文库中获得一个长1 079bp的Sj8CaBP基因片段(GenBank登录号为AY262018),经分析证明,该片段包含一个启动子区,具有TATA盒及CAAT盒的结构及1个内含子2个外显子.
作者：彭鸿娟；陈晓光；周晓红；沈树满 刊期： 2004年第08期
目的研究犬单侧膈神经离断后不同时期呼吸肌腺嘌呤核苷酸含量变化.方法选取8只成年健康杂种犬,离断其左侧膈神经,分别取其同侧肋间肌和膈肌组织,用高效液相色谱法测量膈神经离断前及离断后1、2个月呼吸肌中腺嘌呤核苷酸含量.结果犬肋间肌三磷酸腺苷(ATP)的含量三个时间组相比均无差别;而二磷酸腺苷(ADP)的含量上升,膈神经离断后2月组与离断后1月组相比,有统计学差别(P＜0.05);犬肋间肌总腺苷酸(TAN)含量以膈神经离断后1月组为低,但并无统计学差别;肋间肌腺苷酸能荷(AEC)以膈神经离断后1个月为低,与离断前组和离断后2月组相比,均有统计学差别(P＜0.05).犬的膈肌ATP、ADP及TAN、AEC含量在膈神经离断后2个月分别为:9.05±12.70,2.99±2.57,14.72±13.98,0.57±0.29;与膈神经离断前及离断后1个月相比,有统计学意义(P＜0.05).结论犬膈神经离断后膈肌能量代谢明显下降,肋间肌有一定程度代偿.
作者：田建昌；陈钢；肖飞；马俊杰；蔡瑞君 刊期： 2004年第08期
目的介绍指尖离断再植的手术方法和治疗经验.方法根据指尖的解剖学特点和离断指尖血管的损伤情况,对26例32指灵活采用同时吻合动静脉、仅吻合动脉、静脉动脉化及动静脉转流的方法进行再植,并对再植手指进行一体化功能康复治疗.结果32指共成活29指,成活率为90.06%.经4个月～5年的随访,29指外形与功能良好,按照中华医学会手外科学会断指再植功能评定试用标准评定均为优.结论采用正确的手术方法并进行一体化功能康复治疗,不仅可使指尖再植获得较高的成活率,而且可恢复良好的外形与功能.
作者：任高宏；裴国献；顾立强；郭钢 刊期： 2004年第08期
目的观测并评价止血气雾剂对肢体动脉破裂伤口的止血效果.方法剪断30头猪的共30条股动脉,按照向伤口喷洒止血气雾剂前是否辅助其他止血方法分为:指压止血+止血气雾剂、止血带止血+止血气雾剂和单纯喷止血气雾剂止血这3种方法制作动脉破裂止血模型,每种模型均制作10个,术后12 h内观察止血效果.结果止血带组的止血成功率为90%,指压法组的止血成功率30%,单纯喷止血气雾剂的止血成功率为10%.结论对于肢体动脉破裂伤口,采用先扎止血带暂时止血,之后喷洒止血气雾剂,10min后放松止血带的止血方法成功率高,是首选的止血方法.
作者：孙鸿涛；裴国献；王运斗；张洪涛；张敬良 刊期： 2004年第08期
南方医科大学学报杂志
主管:广东省教育厅
主办：南方医科大学
