李彬；龙振荣；刘卓华
目的构建人全长PLCγ1基因真核表达载体,以便进一步研究PLCγ1的作用及其机制.方法自行设计一对带有HindⅢ和NotⅠ酶切位点的引物,采用RT-PCR技术从MG63细胞中扩增人全长PLCγ1 cDNA(3 878 bp),纯化后,经HindⅢ-NotⅠ酶切,插入真核表达载体pLNCX2中,构建重组质粒pLNCX2/PLCγ1.通过PCR,限制性酶切分析及DNA直接测序对所构建的重组质粒进行鉴定.同时经瞬时转染后,利用RT-PCR及Western blotting转染后LoVo细胞中PLCγ1的表达.结果RT-PCR产物经琼脂糖电泳分析所得片段大小与预期相符(3 878bp).重组质粒经HindⅢ-Not Ⅰ酶切后,得到3 878bp(PLCγ1基因)及6 100bp(载体pLNCX2)两个片段,同时重组质粒经HindⅢ-BglⅡ酶切后,得到约4300bp及约8 500bp两个片段,与预期一致.DNA测序也证实了重组质粒的正确.经RT-PCR和Western blot分析证实转染pLNCX2/PLCγ1的LoVo细胞中PLCγ1的表达均高于转染空质粒pLNCX2的LoVo细胞及未转染的LoVo细胞.结论成功构建了人全长PLCγ1基因真核表达载体pLNCX2/PLCγ1,为进一步研究PLCγ1的作用奠定了基础.
作者：李秀梅；邓凡；曾位森；华亮；陆地；李明；王宏；刘忠英；罗深秋 刊期： 2004年第08期
目的分析甲状腺癌骨转移的临床及影像学表现,探讨其临床及影像特点和诊断价值.方法经病理证实为甲状腺癌骨转移10例,对其X线、CT表现进行回顾性分析.10例均行X线平片检查,其中3例做CT扫描.结果甲状腺癌具隐匿病史,在骨转移病例,先发现骨转移,后查出原发灶者3例,7例在原发灶或甲状腺结节的基础上出现骨转移.甲状腺癌骨转移以溶骨性转移为主,多发于上半身的骨骼,表现为膨胀性囊状破坏区,呈大片状、地图样骨缺损,范围大、广泛为其特点.结论甲状腺癌可发生骨转移,以溶骨型为主,可有成骨性转移.
作者：刘光俊 刊期： 2004年第08期
目的研究鼻咽癌常规放疗和调强放疗(IMRT)受照剂量的差异.方法用放疗计划系统分别进行鼻咽癌常规放疗和调强放疗计划设计,计算肿瘤量70 Gy时正常组织受照剂量-体积直方图和所需照射的总跳数.用X射线能量为6MV的加速器实施放疗计划.根据方野散射线和漏射线剂量率的测量值和总跳数,估算射野外不同距离正常组织所受辐射剂量.结果调强放疗射野内正常组织受照剂量低于28 Gy的体积是常规放疗的1.43～1.81倍,而高于35 Gy时,受照体积仅为常规放疗的0.73～0.30倍;射野外正常组织所受散射线和漏射线照射剂量的估计值约为常规放疗的2倍.结论鼻咽癌常规放疗与调强放疗相比,正常组织受照剂量和受照体积具有成倍差异,调强放疗漏射线和散射线是常规骀放疗的2倍.
作者：张书旭；徐海荣；林生趣；李文华 刊期： 2004年第08期
目的研究药物1,25-二羟基维生素D3(二羟维D3)在高危角膜移植模型中对免疫排斥反应及新生血管生长情况的影响,揭示1,25-二羟维D3作为免疫抑制剂在角膜移植中的治疗作用及机制.方法建立大鼠高危角膜移植模型,按不同浓度的1,25-二羟维D3(1×10-5和1×10-7mol/L)及环孢霉素A(CsA)分组,连续用药2周,观察移植物排斥情况并于术后4、7、14 d取材行原位杂交等实验,分析各组细胞因子:白介素1α(IL-1α)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血管内皮生长因子(VEGF)mRNA水平的变化情况.结果在1,25-二羟维D3作用下,高危角膜移植物的存活时间明显延长;新生血管生长受抑制;合用CsA后效果更明显.原位杂交实验证实1,25-二羟维D3能显著抑制植片IL-1α、TNF-αmRNA表达(P＜0.01);对VEGF表达无直接影响.结论1,25-二羟维D3能有效地抑制新生血管生长及角膜移植急排期的免疫哌排斥反应,机制可能包括对前炎症因子(IL-1α、TNF-α)生成的抑制作用,而对VEGF无明显直接作用.
作者：党森涛；陆晓和；周瑾；白浪 刊期： 2004年第08期
目的研究湿热环境对猫颅脑火器伤早期脑微循环的影响,为临床治疗提供实验依据.方法24只成年猫用改良Carey法制作猫颅脑火器伤模型后,随机分为两组,每组12只,放入温度和相对湿度分别为25℃和50%,35℃和85%仿真模拟气候舱.通过脑微血管形态学及通透性和周围组织病理变化的观察,测定生命体征代偿指标、微血管中流动血液流变学特征和血脑屏障的变化来反应脑微循环的变化.结果全部动物无死亡.两组动物在脑微血管形态学及通透性和周围组织病理变化显著;在生命体征指标、血液流变学特征和血脑屏障的损害程度上存在显著差异.结论湿热环境对颅脑火器伤的早期脑微循环有显著影响,是颅脑火器伤的二次创伤.
作者：马德选；徐如祥；朱红胜 刊期： 2004年第08期
目的探讨重型脑损伤患者亚低温(33～35℃)治疗前后颅内压(ICP)、脑组织氧分压(PO2)的变化及临床意义.方法32例重型颅脑损伤患者分为亚低温组及对照组,放置ICP脑组织PO2光纤探头,持续监测ICP及脑组织PO2.结果亚低温治疗24h后ICP逐渐下降,脑组织PO2逐渐上升,与对照组比较差异有显著性(P＜0.05).结论亚低温治疗能明显降低重型颅脑损伤患者ICP,改善脑组织氧代谢,使患者死亡率及致残率降低.
作者：林源泉；贾军；刘文锋；张浚 刊期： 2004年第08期
目的检测广东汉族人群HLA-Cw及HLA-A、B、DRB1基因频率,分析该人群HLA-Cw等位基因多态性及其单体型特点.方法骨髓移植供者185例,抗凝血提取DNA,半量全自动PCR-RSSO分型检测HLA-A、B、Cw、DRB1基因型.结果在分辨水平检出Cw等位基因11个,其中分布频率较高的依次为:Cw*03(0.2580)、Cw*07(0.1887)、Cw*01(0.1732)、Cw*08(0.1070).统计分析呈现显著连锁不平衡的HLA-Cw-A单体型7个,HLA-Cw-B单体型20个,HLA-Cw-DRB1单体型10个.结论广东汉族群体HLA-Cw基因具有较为丰富的多态性,其与HLA-A、B、DRB1间连锁不平衡单体型具有地区性遗传特征.
作者：马红京；肖露露；尹晓林；郭坤元；叶欣 刊期： 2004年第08期
目的探讨原位肝移植术后并发症的诊治经验.方法回顾性分析我院18例次原位肝移植(其中2例再次肝移植)病人术后各种并发症的诊治经过.结果对16例患者(5例终末期肝硬化、7例原发性肝癌、l例肝癌术后肝功能衰竭、l例肝豆状核变性、l例慢性肾功能衰竭合并肝炎后肝硬化、1例急性暴发性肝功能衰竭)进行原位肝移植.手术成功12例,术后长存活已超过4年.术后并发症包括:腹腔内出血3例、脑血管病变2例、肺部感染6例、急性呼吸窘迫综合征(ARDS)2例、肝上下腔静脉狭窄2例、肝动脉血栓形成l例、胆道结石或胆泥3例、胆漏1例、急性排斥反应2例、慢性排斥反应2例、急性肾功能衰竭2例.围手术期死亡6例,直接死亡原因:脑出血1例、ARDS 1例、急性肾功能衰竭1例、肝动脉血栓1例、急性排斥反应l例、肝功能衰竭1例.结论肝移植围手术期采取合理的防治措施能有效减少肝移植术后并发症的发生,对肝移植术后并发症的及时诊断和正确处理是提高肝移植成功率的关键.
作者：苏树英；陈焕伟；甄作均；许卓明；计勇 刊期： 2004年第08期
目的构建PcDNA4/His C-MBL表达载体,在哺乳细胞中表达人甘露聚糖结合凝集素(MBL).方法应用PCR从含有中国人野生型MBL cDNA的质粒pGEM-MBL中扩增目的基因片段,将其克隆至PcDNA4/His C真核表达载体.经酶切及测序鉴定后,以电穿孔法转染CHO细胞,以RT-PCR分析其mRNA表达,通过Ni-NTA琼脂糖柱层析纯化目的蛋白并以SDS-PAGE和Western-blotting鉴定,以其为免疫原免疫小鼠后取鼠血清进行ELISA检测分析目的蛋白的免疫活性.结果从pGEM-MBL中扩增得到约750 bp的cDNA片段,构建成重组载体经酶切出现约5 100和750 bp片段,测序鉴定与预期的完全一致.RT-PCR证实转染细胞有MBLmRNA表达,纯化蛋白经SDS-PAGE电泳可见约29000、58 000和87 000条带,其中29 000蛋白带可与6-His抗体反应.纯化蛋白免疫小鼠所获抗血清ELISA效价是1:819 200,与天然人MBL和重组MBL三聚体糖识别域反应的ELISA效价均为1:25 600.结论获得了表达中国人MBL的CHO细胞株和重组人MBL,为MBL分子的进一步研究提供了条件.
作者：白志军；张丽芸；林佐贤；卢晓；陈政良 刊期： 2004年第08期
目的评价RT-PCR法检测MN/CAⅨ基因在肾癌组织表达的可靠性.方法以5例肾癌和5例正常肾组织为研究对象,提取总RNA,两步法进行RT-PCR反应,用MN/CAⅨ的特异性引物扩增,2%琼脂糖凝胶电泳后观察并测序.结果经过测序证实5例肾癌组织的RT-PCR产物中有4例可见特异的MN/CAⅨ条带,而正常肾组织的RT-PCR产物均无相应的MN/CAⅨ条带.结论RT-PCR法检测MN/CAⅨ在肾癌组织中的表达是准确、可靠的.
作者：姜耀东；郑少斌；王战会 刊期： 2004年第08期
目的探讨脑源性神经营养因子(BDNF)体外诱导骨髓间充质干细胞(MSCs)分化成神经元样细胞的作用及其对诱导后的神经元样细胞保护作用,为治疗神经系统疾病提供更优良的细胞.方法体外培养MSCs至第5代后,分别用BDNF、β-巯基乙醇(β-ME)诱导MSCs,诱导后的第1、3和6小时计算两组神经元样细胞数,对各时间点两组神经元样细胞阳性率进行了比较;诱导后行神经细胞标记抗体的免疫细胞化学、RT-PCR及蛋白质印迹鉴定.结果两组诱导剂诱导后的细胞均呈神经元样细胞的形态;BDNF组诱导分化后细胞的存活时间远较β-ME组长;BDNF组在诱导后6 h近于诱导高峰,而β-ME在诱导2 h即达高峰,但随后神经元样细胞渐死亡.免疫细胞化学结果显示在两组诱导后细胞的巢蛋白(Nestin)、神经细胞特异性烯醇化酶(NSE)、微管相关蛋白-2 MAP-2)、神经丝蛋白(NF)表达均呈阳性,而胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达呈阴性;RT-PCR显示NSE、NFL,MAP-2的mRNA表达阳性,GFAP有较弱的表达;蛋白质印迹可见两组诱导剂诱导的细胞均表达神经元的特异性标记抗体NSE.结论BDNF能单独诱导MSCs分化形成神经元样细胞,而且分化后细胞的存活时间长,有望用于治疗脑缺血、神经变性等疾病.
作者：黄文；张成；陈松林；张为西；姚晓黎；曾缨；黄慧；冯善伟；柳太云 刊期： 2004年第08期
目的观察双开门颈椎管成形合并羟基磷灰石人工骨材料植骨术治疗颈椎管狭窄症的效果.方法采用双开门法行颈椎管成形、椎管扩大及羟基磷灰石人工骨植骨术治疗12例颈椎管狭窄症.结果经过5年随访,11例发育性颈椎管狭窄患者临床症状明显缓解、体征改善,1例疗效不佳.结论双开门颈椎管成形及人工骨材料植骨术是治疗颈椎管狭窄症的一种安全有效的手术方法.羟基磷灰石载体具有良好的生物相容性及骨传导性,是理想的骨移植替代材料,在颈椎椎管成形术中具有良好的应用价值.
作者：吕琦；庄颜峰；陈学明；王万明 刊期： 2004年第08期
目的探讨恶性腹膜间皮瘤的诊治方法.方法回顾分析16例恶性腹膜间皮瘤临床表现、实验检查及治疗方法.结果16例中术前确诊3例,剖腹探查10例,急诊手术1例,腹腔镜探查2例.随访12例,半年内死亡2例,2年内死亡7例,1例生存超过2年.另2例为近1年内患者,继续治疗中.结论恶性腹膜间皮瘤无特异性症状,诊断困难,误诊率高.诊断主要依据脱落细胞检查、腹腔穿刺活检、腹腔镜及剖腹探查.预后差,综合治疗有望延长患者生存期.
作者：王浩；厉周；黄宗海 刊期： 2004年第08期
目的观测并评价止血气雾剂对肢体动脉破裂伤口的止血效果.方法剪断30头猪的共30条股动脉,按照向伤口喷洒止血气雾剂前是否辅助其他止血方法分为:指压止血+止血气雾剂、止血带止血+止血气雾剂和单纯喷止血气雾剂止血这3种方法制作动脉破裂止血模型,每种模型均制作10个,术后12 h内观察止血效果.结果止血带组的止血成功率为90%,指压法组的止血成功率30%,单纯喷止血气雾剂的止血成功率为10%.结论对于肢体动脉破裂伤口,采用先扎止血带暂时止血,之后喷洒止血气雾剂,10min后放松止血带的止血方法成功率高,是首选的止血方法.
作者：孙鸿涛；裴国献；王运斗；张洪涛；张敬良 刊期： 2004年第08期
目的探讨高压交变电磁场对脑卒中病人康复治疗的临床治疗的效果及机制.方法选择脑卒中病人115例,分为治疗组55例和对照组60例,对比分析治疗前后患者血清脂蛋白及其亚组分和血液流变学指标的变化,以Barthel指数和功能独立性评定法(FIM)进行康复评定.结果治疗组显效29例;好转24例,无效2例,与对照组比较P＜0.05;治疗后血清甘油三酸酯(TG)、总胆固醇(Tc)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)降低,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)浓度升高,Tc/HDL-c、LDL-c/HDL-c比率降低,降低了全血和血浆粘度,与对照组比较P＜0.01;治疗组患者的Barthel指数增加了(38.4±5.3),与对照组比较P＜0.05;治疗组患者的FIM评分与对照组比较增加了(34.7±5.3),与对照组比较P＜0.0l;治疗组患者一年内脑卒中再发率下降明显,与对照组比较P＜0.05.结论高压交变电磁场能改善脂蛋白代谢,改变血液流变学性质,提高脑卒中患者ADL能力及功能独立性,对脑血管疾病有显著的防治作用.
作者：邓爱文；袁雪光；魏东；张建宏；冉春风；王敏 刊期： 2004年第08期
目的介绍指尖离断再植的手术方法和治疗经验.方法根据指尖的解剖学特点和离断指尖血管的损伤情况,对26例32指灵活采用同时吻合动静脉、仅吻合动脉、静脉动脉化及动静脉转流的方法进行再植,并对再植手指进行一体化功能康复治疗.结果32指共成活29指,成活率为90.06%.经4个月～5年的随访,29指外形与功能良好,按照中华医学会手外科学会断指再植功能评定试用标准评定均为优.结论采用正确的手术方法并进行一体化功能康复治疗,不仅可使指尖再植获得较高的成活率,而且可恢复良好的外形与功能.
作者：任高宏；裴国献；顾立强；郭钢 刊期： 2004年第08期
目的建立中医阴阳数字模型.方法采用计算机二进制数字语言解构和重建中医阴阳理论.结果建立了中医阴阳二进制数字模型并成功模拟了中医阴阳理论的主要内容.结论可以通过二进制数字语言对中医理论进行合理解构和重建,实现中医药理论的数字化.
作者：秦建增；陈宝田 刊期： 2004年第08期
目的探讨彩超对新生儿紫绀型先天性心脏病的诊断价值.方法对149例青紫的新生儿进行彩超检查,诊断紫绀型先心病25例并分析其疾病类型.结果25例紫绀型先心病中存在大动脉转位、法乐四联症、单心室、永存动脉干等复杂畸形,其中大动脉转位多见,其次为法乐四联症,单心室位居第3.结论彩超可作为青紫新生儿先心病的常规筛查手段.
作者：李彬；龙振荣；刘卓华 刊期： 2004年第08期
较系统地介绍了高温高湿环境下颅脑火器伤的病理生理改变特点,指出高湿高湿环境是引起脑二次创伤的重要因素,是导致伤病员早期伤死的主要原因之一.提出加强这一军事医学课题研究、提高救治成功率的重要性.
作者：徐如祥 刊期： 2004年第08期
目的了解广东地区围绝经期妇女的健康状况和健康需求,从而进一步探索围绝经期、老年期保健模式和方法,为政府部门提供决策依据.方法采取分层整群抽样的方法,将广东省按地理地貌分为5层,共抽取了5个地级市(代表城市)和4个县级市(代表农村).对40～65岁的4 500个围绝经期妇女进行调查.结果广东地区妇女自然绝经年龄48.6岁,其中城市48.9岁、农村48.3岁.现患病率39%,其中城市38.5%、农村39.5%,两者比较无显著性差异.前6位现患疾病的顺位是骨关节疾病(12.5%)、高血压(9.2%)、子宫肌瘤(6.8%)、胃或十二指肠溃疡(5.2%)、心脏病(2.7%)和糖尿病(2.2%).骨关节疾病中膝关节疾病(34.3%)、腰椎疾病(32.8%)是高发病,骨折患病率2.5%.围绝期综合征的患病率为68.1%,为痛苦的症状是失眠、肌肉骨关节疼痛、烦躁、头晕,以心理症状(86.8%)和躯体症状(86.0%)为主;出现围绝经期综合征未就医者占71.2%,到妇产科就医者仅20.5%,以服用中药为主(53.9%),应用性激素疗法者1.4%(城市1.8%、农村1.0%).无健康体检者37.8%,有过健康体检者62.2%,其中城市80.4%、农村44.4%,城市明显高于农村.结论围绝经期综合征及相关疾病严重地影响围绝经期妇女的身心健康,这一人群的保健、医疗存在广泛需求,应该全方位地进行防治.
作者：田丰莲；杨冬梓；张小庄；赵庆国；詹新林；李容汉；穆荔；江雪芳；李洁明 刊期： 2004年第08期
南方医科大学学报杂志
主管:广东省教育厅
主办：南方医科大学
