学术投稿

头尾串联双拷贝HBV DNA重组体的构建

刘定燮;骆抗先

关键词:基因重组, 乙型肝炎病毒
摘要:为构建含筛选基因并能在转染细胞内建立HBV复制状态的真核表达载体,利用Bam H与Bgl 粘端互补的特点,将经Bam H线性化的HBV DNA(adr亚型)克隆于表达新霉素基因的载体pcDNA3的Bam H 与Bgl 位点间,获得含头尾串联双拷贝HBV基因组的重组质粒.
南方医科大学学报杂志相关文献
  • 新型免疫抑制剂来氟米特合成的改进

    目的合成新型免疫抑制剂来氟米特.方法以乙酰乙酸乙酯为原料与N,N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛反应,所得产物同盐酸羟胺反应合成5-甲基-4-异噁唑甲酸乙酯;后者经水解、酰氯化,与对三氟甲基苯胺反应合成出来氟米特.结果所得产品结构均经IR、1HNMR、MS等光谱鉴定.

    作者:陈卫民;徐继红 刊期: 1999年第03期

  • 尖锐湿疣患者人乳头瘤病毒的快速检测与分型

    RDB是将我们设计的HPV6B、11、16、18、31、33、35的7个序列特异性寡核苷酸(SSO)探针分别依次固定在尼龙膜上,再与经PCR扩增的DNA靶序列杂交,即可在同一张膜上分辨7型HPVDNA的任一型.我们检测尖锐湿疣患者62例,对其中20例进行组织活检,阳性检出率为95%(19/20).阳性检出中,HPV6B型8例(40.0%)、HPV11型9例(45.0%)、HPV6B/11型(混合型)2例(10.0%);对其中42例进行宫颈抹片检测,阳性检出率为92.9%(39/42).阳性检出中,HPV6B型15例(35.7%)、HPV11型19例(45.2%)、HPV6B/11型3例(7.1%)、HPV16型2例(4.8%).结果表明尖锐湿疣患者检出HPV总阳性率为94%,感染HPV型主要为HPV6B及11型.

    作者:齐凤菊;徐钤;黄杨中 刊期: 1999年第03期

  • 聚合酶链反应技术检测女性生殖道湿疣的临床应用体会

    女性生殖道湿疣是由人乳头瘤病毒(HPV)感染引起的.用聚合酶链反应(PCR)可检测HPV、DNA(引起尖锐湿疣一般是HPV11型及HPV6型).但通过检测会发现尚未有临床表现或临床表现不典型的HPV病毒携带者,从而可与女性生殖道其他感染鉴别,为合理治疗、控制病情发展及播散提供可靠依据.

    作者:周行;于庆云 刊期: 1999年第03期

  • 获高层次科技奖励应把握的几个问题

    根据我们多年的工作体会,从科技人员的角度谈谈培养高层次成果必须注意的几个问题.1 成果评审中落选的原因科研成果评审工作已基本规范化,这主要是从成果的科学技术水平、经济或社会效益和推动科技进步的作用三方面进行评价.

    作者:李海燕;赵醒村;王可炜;周增桓 刊期: 1999年第03期

  • 羊膜结节伴多器官畸形1例报告

    1 病例报告1.1 临床资料患者,女,27岁,妊娠8月余,阴道流血2h入院.行双胎剖宫产术,术中取出一正常男婴.另一婴儿呼吸微弱,活动力差,脐带细,双下肢融合成鱼尾状,九趾,无外生殖器及肛门.产后10min死亡.两婴共单胎盘,双羊膜囊,畸形胎儿羊膜上见粟粒样结节.

    作者:江庆萍;郭琳琅;曹长安 刊期: 1999年第03期

  • 外用皮质类固醇激素所致糠秕孢子菌感染性痤疮的治疗

    通过对157例严重糠秕孢子菌感染痤疮患者的治疗观察发现,临床上很多痤疮患者乱用皮质类固醇激素外用药膏治疗痤疮,使轻型痤疮转化为严重糠秕孢子菌感染为主的囊肿型痤疮,给治疗上造成困难.作者将157例严重糠秕孢子菌感染痤疮患者随机分为五组,分别给予治疗.结果表明,抗真菌与抗细菌联合用药较单纯抗细菌治疗效果好.

    作者:兰海梅;张建秀 刊期: 1999年第03期

  • 心脏手术期间及术后血浆甲状腺激素的变化

    目的观察心脏手术期间及术后血浆甲状腺激素的变化规律.方法在静脉复合麻醉下行心脏手术,分别在麻醉前、诱导插管后5min、转流开始后10min、停止转流后30min及术后1、3、5 d等时间点从外周静脉取血5ml,进行血浆T3、FT3、T4、FT4、TSH的放射免疫测定.结果在转流期间血浆T3、FT3、T4、FT4均显著降低 (P<0.001);停止转流后有所回升;术后1、3、5d血浆T3、FT3甚至低于转流停止后水平(P<0.01),而血浆T4、FT4 则回升并接近术前水平(P>0.05).结论本研究表明在心脏手术期间和术后,确实存在低T3或T4综合征,其对心脏复跳及术后低心排综合征的发生有何作用有待研究.

    作者:梁仕伟;古妙宁;林春水 刊期: 1999年第03期

  • 金属烤瓷美容修复前牙的护理

    1 临床资料门诊患者458例,男187例,女271例,年龄21~45岁.随访2年以上.2 烤瓷修复的护理配合2.1 基牙预备要求严格磨削牙前先让患者放松,医生切磨牙时,护士主动配合患者作好吸唾工作,注意吸引器头的放置位置,同时协助医生牵拉口角,压患侧舌体,以防邻近组织受伤,为医生提供清晰和干净的视野,使基牙预备顺利进行.

    作者:刘桂平 刊期: 1999年第03期

  • 超声内镜对食管癌和贲门癌切除可能性的术前评估

    目的探讨超声内镜在食管癌和贲门癌的临床诊断上的应用价值.方法自1996年3月至1997年8月,应用超声内镜检查33例食管癌和28例贲门癌,了解癌肿的影像特征,浸润深度及癌旁淋巴结情况.结果超声内镜显示肿瘤影像特征为不规则的低回声肿块伴部分或全部管壁结构的破坏; 对肿瘤浸润深度诊断总符合率:食管癌为81.8%,贲门癌为75%;对癌旁淋巴结的发现率:食管癌为88.9%,贲门癌为92%;超声内镜发现癌旁肿大淋巴结癌转移率:食管癌为75%,贲门癌为91.39%.结论超声内镜对食管癌、贲门癌术前临床治疗方法的选择、手术方式的确定和预后的评估具有重要的参考价值.

    作者:邹小明;黄志勇;王武军;林文;郭文;潘德寿 刊期: 1999年第03期

  • 骨组织工程研究(Ⅰ):人成骨细胞培养及成骨特性观察

    1 实验资料成骨细胞分离培养取流产胎儿颅骨,无菌条件下清除骨板内外软组织;将颅骨剪切成3mm×3mm,TE酶消化20min除去残留软组织,加数滴血清终止胰酶;再将其剪切成1mm×1mm大小,0.5%II型胶原酶(Sigma)连续消化5次,每次20min,各次消化完毕即加入D-Hanks液吹打,收集第三、四、五次所得上清,1200r/min离心5min,沉淀加0.83%NH4Cl孵育10min去红细胞,1200r/min离心5min,沉淀用199基础培养基洗涤一次后计数接种,3d换液一次.

    作者:杨德鸿;陈建庭;金大地 刊期: 1999年第03期

  • 幼儿卵巢胚胎癌1例报告

    1 临床资料患者,女,1岁,因腹胀12余天,啼哭、肛门停止排气、排便1d.入院查体:T36.3℃,心肺听诊正常,腹部高度膨隆,腹壁硬,有压痛,无肠型,肝脾包块未触及,肠鸣消失.B超示肠梗阻.即行剖腹探查:见右卵巢一巨大囊肿12cm×10cm,囊内有血性液约1000ml.切除送检.病理诊断为胚胎癌.

    作者:陈磊;张萍 刊期: 1999年第03期

  • 应用Amplatzer封堵器经导管治疗动脉导管未闭1例

    1 病例资料患者男,6岁,自幼发现心脏杂音,曾先后在多家医院就诊,诊断为动脉导管未闭(PDA),建议行外科手术治疗,为保证治疗安全、有效、损伤小,患儿家属特来我院咨询而收入院.

    作者:孟素荣;彭健;翁昌鸿;马立勤;许顶立 刊期: 1999年第03期

  • 思密达对驻营区部队急性腹泻病的防治效果

    目的评价思密达对驻营区部队急性腹泻病的防、治效果.方法比较综合性预防(A组)和思密达预防(B组)实施后急性腹泻病的发病率和思密达、黄连素治疗后主要临床表现的消失时间与治疗效果.结果实施上述措施后急性腹泻病的发病率分别下降55.76%和46.00%.思密达治疗有效率较黄连素高约20%, 且主要临床表现期明显缩短.结论思密达预防在短期内可以取得同综合性预防措施相似的预防效果,其治疗效果优于对照药.

    作者:聂军;孙长柱;梁力;梁晓珊;王红;俞守义 刊期: 1999年第03期

  • 应用Amplatzer封堵器经导管治疗房间隔缺损1例

    1 临床资料患者,女性,37岁,自幼发现心脏杂音,1999年6月来我院住院检查治疗,入院查体:发育正常,心界不大,心率70次/min,律齐,胸骨左缘2、3肋间可闻III/6吹风样收缩期杂音.

    作者:孟素荣;彭健;许顶立;翁昌鸿;龚渭冰;谢志斌 刊期: 1999年第03期

  • 高效液相色谱法分析测定大鼠肠系膜血管网灌流液中皮质醇、醛固酮方法的研究

    采用高效液相色谱(HPLC)测定高血压模型大鼠肠系膜血管网灌流过程中灌流液皮质醇、醛固酮的含量,为定量分析血管分泌皮质醇和醛固酮机制提供可靠的量化依据,建立用HPLC分离检测皮质醇和醛固酮的方法.结果表明该方法准确、快速、稳定,检测灵敏度可达到50ng/L,仪器系统重复测定变异系数为2.32%,标准曲线线性分析相关系数r均大于99%,平均回收率均大于90%.

    作者:叶绿;王煊;赵清;周俊岭;张永生 刊期: 1999年第03期

  • 骨灵丸对抗维甲酸致骨质疏松作用的实验研究

    目的用中药骨灵丸进行防治原发性骨质疏松症 (POP)的动物实验研究,以观察骨灵丸防治POP疗效并探讨其主要作用机理.方法以维甲酸制作POP大鼠模型,观测骨密度、血生化指标、骨生物力学、骨组织形态计量学指标.结果大鼠灌服维甲酸后出现高转换型骨质疏松, 而骨灵丸能够有效对抗模型大鼠出现的骨丢失, 维护骨强度, 保持骨生物力学性能.结论骨灵丸可防止POP模型鼠骨丢失, 有效地维持其骨密度, 其作用可能通过影响垂体-下丘脑-性腺轴和/或影响成骨细胞(OB)活性、抑制破骨细胞(OC)活性等途径实现,其防治机制,值得深入研究.

    作者:李娟;陈晓光;吴启富;陈宝田 刊期: 1999年第03期

  • 成人巨大肝母细胞瘤手术切除1例报告

    1 病例报告患者男,18岁,因右上腹持续性胀痛1月,乏力、纳差伴发热20余天,双下肢浮肿10d,由消化科转入.查体:营养不良,极度消瘦.腹部高度膨隆,胸腹壁浅静脉怒张,剑突下可扪及15cm ′ 20cm肿物,质硬,有触痛,腰背部、阴囊及双下肢高度水肿.辅助检查:总胆红素35.3mmol/L,白蛋白29.0g/L,球蛋白30.0g/L,HBsAg(-),AFP<25mg/L.

    作者:贾随旺;叶方鹏;李朝龙 刊期: 1999年第03期

  • 非小细胞肺癌p16基因突变与表达的研究

    目的观察p16基因在非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer, NSCLC)中的表达与突变情况及其与NSCLC发生发展的关系.方法应用免疫组织化学、PCR、PCR-SSCP技术对52例非小细胞肺癌石蜡标本进行p16蛋白及p16基因纯合性缺失与点突变检测.结果发现44 (84.6%)例p16蛋白表达阳性,p16蛋白在良、恶性细胞中均有表达,肿瘤细胞中p16表达呈现异质性.各肿瘤类型中鳞癌和大细胞癌阳性率高于腺癌,但无显著差异.高分化腺癌阳性率高于低分化腺癌(P<0.005).伴淋巴结转移组阳性率(63.1%)显著低于非转移组(96.9%)(P<0.005).同步检测发现5例标本出现p16基因异常(4例纯合性缺失和1例点突变),相应p16蛋白亦表达缺失,且5例患者临床分期皆为期.结论 p16基因突变与表达缺失参予了NSCLC的发生发展过程,且与肿瘤分化、转移有关,但可能为肿瘤进程中的迟发事件.

    作者:李伟峰;赵彤;李晓丹;朱梅刚 刊期: 1999年第03期

  • 头尾串联双拷贝HBV DNA重组体的构建

    为构建含筛选基因并能在转染细胞内建立HBV复制状态的真核表达载体,利用Bam H与Bgl 粘端互补的特点,将经Bam H线性化的HBV DNA(adr亚型)克隆于表达新霉素基因的载体pcDNA3的Bam H 与Bgl 位点间,获得含头尾串联双拷贝HBV基因组的重组质粒.

    作者:刘定燮;骆抗先 刊期: 1999年第03期

  • 经左胸不阻断主动脉再次换瓣术1例报告

    我科于1998年3月11日在湖南医科大学专家指导协助下,首次采用左胸入路、中度低温体外循环、不阻断主动脉的新术式,成功实施二尖瓣再次替换术1例.现将经验体会总结如下:

    作者:冀亚琦;童健 刊期: 1999年第03期

南方医科大学学报杂志

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