学术投稿

重组人磷脂酰肌醇3-激酶p110β催化亚基的原核表达

刘文;梁念慈

关键词:磷脂酰肌醇3-激酶, 原核表达
摘要:目的:表达人磷脂酰肌醇3-激酶 p110 β催化亚基.方法:将构建有人磷脂酰肌醇3 -激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI 3-K)p110 β催化亚基cDNA的重组质粒,转化大肠杆菌BL 21(DE3),用IPTG进行诱导表达.用磷脂酰肌醇-4、5-二磷酸、[γ-32P]ATP与重组PI 3-K p110 β催化亚基一起保温的方法测定PI 3-K的活性;32P标记的磷脂用氯仿和甲醇抽提、板薄层层析和放射自显影来分析.结果:SDS-PAGE显示表达出一110 kD的新蛋白质分子,重组蛋白占菌体总蛋白的比例为15%,大多数重组蛋白以可溶性形式存在.wortmannin是PI 3-K特异的抑制剂,wortmannin对重组PI 3-K p110 β亚基有抑制作用,这种抑制作用呈剂量依赖关系(2.5~20 nmo1/L).结论:重组蛋白是有活性的人PI 3-K p110 β催化亚基.
广东医科大学学报杂志相关文献
  • 孕期心理干预对改善孕产妇心理状况的研究

    目的:探讨孕期心理干预对改善孕产妇心理状况的可行措施.方法:随机将孕妇分为2组并随访至产后2周(非心理干预组402人,随访至产后2周者356人;心理干预组323人,随访至产后2周者287人),心理干预组孕妇分孕早期、孕中期和孕晚期进行三阶段的心理干预,孕期调查用医院焦虑和抑郁量表(HAD),产后2周调查用艾迪产后抑郁量表(EPDS)并增加本次有关妊娠、分娩前后的生活事件等内容并进行比较.结果:心理干预组孕妇临产前焦虑和抑郁情绪均分值明显低于非心理干预组,其焦虑和抑郁情绪发生率也明显低于心理干预组,差异非常显著(P<0.01);产后抑郁症发生率明显低于非心理干预组(P<0.01).对其潜在心理背景分析表明:心理干预组的孕产妇在妊娠心境、产后育儿、与社会家人关系等得到明显改善(P<0.01);而对来自分娩周围环境、分娩疼痛等压力无明显改善,与非心理干预组比较差异不显著(P>0.05).结论:孕期心理干预可明显改善孕产妇的心理状况和降低产后抑郁症的发生率.

    作者:赵淑婷;陈月嫦;谭章云;李秀云 刊期: 2003年第01期

  • 蝙蝠葛碱和胡椒碱对两株鼻咽癌细胞增殖的影响

    目的:观察蝙蝠葛碱和胡椒碱对两株鼻咽癌细胞增殖的影响.方法:用MTT法测定两种药物分别处理CNE-1、CNE-2Z细胞株24、48、72 h的IC50值.结果:蝙蝠葛碱和胡椒碱分别作用CNE-1、CNE-2Z两株细胞的IC50值随作用时间的延长而减少(P<0.01),两种药物处理CNE-1细胞24、48 h的IC50值均明显低于CNE-2Z细胞(P<0.01),蝙蝠葛碱处理两株细胞72 h的IC50值差异显著(P<0.05).结论:蝙蝠葛碱和胡椒碱对CNE-1、CNE-2Z细胞株的生长增殖呈时间依赖性抑制,对CNE-1细胞株的增殖抑制作用明显强于CNE-2Z细胞株.

    作者:丁航;唐旭东;周克元 刊期: 2003年第01期

  • 姬松茸对K562细胞的抗肿瘤作用

    目的:研究姬松茸对K562细胞增殖与分化的影响.方法:采用细胞培养、流式细胞术、形态学观察、免疫组化等方法观察姬松茸对K562细胞增殖与分化的影响.结果:姬松茸对K562细胞增殖具有明显的抑制作用,并能阻止细胞由G0/G1期向G2/M+S期过渡.经2.5 g/L的姬松茸诱导后,K562细胞形态趋向成熟分化;联苯胺染色、糖原染色阳性表达率显著提高,阳性强度增加.结论:姬松茸是抑制白血病细胞增殖并诱导其分化的天然诱导剂,但其机理有待进一步探讨.

    作者:张星星;杨大雷 刊期: 2003年第01期

  • 血清恶性肿瘤特异性生长因子在原发性肝癌诊断中的价值

    目的:探讨血清恶性肿瘤特异性生长因子(TSGF)和甲胎蛋白(AFP)在原发性肝癌(PHC)诊断中的临术意义和两者联检的应用价值.方法:采用放射免疫分析法和生物化学比色定量法对56例PHC患者、43例良性肝病患者以及56例健康人员TSGF和AFP水平进行检测,并进行相关性分析.结果:肝癌患者二项指标均明显高于正常及良性病变组(P均<0.01),良性病变组与正常对照组无明显差别(P>0.05).两项联检在灵敏度、准确性方面均优于单项指标.但两者变化无明显相关性.结论:TSGF可作为PHC的一项辅佐性指标,TSGF与AFP联检,可提高PHC早期诊断的检出率和准确性.

    作者:马丽 刊期: 2003年第01期

  • 筋膜下全子宫切除术与常规子宫切除术的效果比较

    目的:了解筋膜下全子宫切除术的临床应用价值.方法:将161例患者随机分为两组,分别以筋膜下全子宫切除术及常规全子宫切除术进行手术治疗,对比观察两组患者的手术时间、术中出血量、术后住院时间及术后并发症.结果:筋膜下全子宫切除术的手术时间、术中出血量、术后住院时间均少于常规全子宫切除术组,差异有非常显著性(P<0.01),且前者具有术后并发症少、生活质量高等优点.结论:筋膜下全子宫切除术具有较高的临床应用价值.

    作者:黄东;蔡絮吟 刊期: 2003年第01期

  • 米索前列醇在人工流产术的应用

    目的:观察人工流产术前应用米索前列醇的临床效果.方法:210例要求人工流产的早孕妇女随机分为两组,实验组108例于人工流产术前1 h顿服米索前列醇400 μg;对照组102例术前不服任何药物.观察两组术时宫口大小、人工流产综合征(RAAS)发生率及术中出血量.结果:实验组人流术中宫口扩张程度>7号者为97例(占89.8%),明显高于对照组(P<0.001);RAAS的发生率(3.7%)则明显低于对照组(18.6%)(P<0.01);术中出血量两组无明显差别.结论:米索前列醇在人工流产术前应用能软化宫颈,扩张宫颈口,减少RAAS的发生率.

    作者:林小萍 刊期: 2003年第01期

  • 基于第三类极限数学理论的Goldbach猜想和Fermat猜想的同时证明

    目的:基于第三类极限的数学理论用一个定理同时证明Goldbach猜想和Fermat猜想.方法:把数学与计算机、相对绝对、有限无限、时间空间有机地结合成一个统一整体,把用计算机证明两个猜想的问题转化为计算机运行的时空问题,再把计算机运行的时空问题转化为数学问题,进行严格的数学推导,取极限.结果:一次性地证明了(1+1)、一次性地证明了Goldbach猜想的两个部分、一次性地证明了Fermat猜想、一次性地用一个定理同时证明了Goldbach猜想和Fermat猜想.结论:Goldbach猜想和Fermat猜想都成立.

    作者:李英杰 刊期: 2003年第01期

  • 156株支原体对9种抗生素的耐药性分析

    目的:了解支原体的耐药性.方法:采用体外培养的方法,测定9种抗菌药物的抗支原体作用.结果:强力霉素、美满霉素抗支原体作用强,解脲支原体和人型支原体对其他7种抗生素有不同的耐药性.结论:强力霉素、美满霉素可以作为治疗支原体感染的首选药物.

    作者:熊典勇;李杰萍 刊期: 2003年第01期

  • 《组织学》实验考试方法的改革与评价

    <组织学>实验考试是检验学生对实验内容的认知程度,了解教学对培养学生实验技能及各种能力效果的一种手段,也是督促学生学习、记忆的一种方法.本文旨在通过对<组织学>实验考试方法的改革及考试结果分析,发现实验教学中存在的问题和不足,从而达到改进实验教学方法,提高实验教学质量.

    作者:郭惠兰;孙宏;黄绍轩;张志平;杨大雷 刊期: 2003年第01期

  • 断指再植术术后的护理

    断指再植手术的成功,除了需要精细的显微外科操作外,精心周密的护理也不可缺少.我科自2001年正式开展显微外科手术以来,共收治15例,成功率达100%,现将护理体会介绍如下.

    作者:程晓桃;罗鉴兰 刊期: 2003年第01期

  • 第2~6肋间神经前皮支及其营养血管的解剖学研究

    目的:为临床设计胸前区皮神经营养血管皮瓣提供解剖学基础.方法:在17例34侧成人躯干标本上,用显微解剖法观测第2~6肋间神经前皮支的外侧支及其营养血管的来源、走行及分布规律.结果:第2~6肋间神经前皮支的外侧支及其营养血管于胸骨两旁相应肋间穿出深筋膜,呈节段性、重叠性分布于胸前区皮肤.皮神经营养血管相互间形成丰富的吻合.结论:可设计以第2~6肋间神经前皮支的外侧支及其营养血管为蒂的皮神经营养血管皮瓣.

    作者:梁大宁;罗少军;汤少明;吕端远;张新营 刊期: 2003年第01期

  • 重组人磷脂酰肌醇3-激酶p110β催化亚基的原核表达

    目的:表达人磷脂酰肌醇3-激酶 p110 β催化亚基.方法:将构建有人磷脂酰肌醇3 -激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI 3-K)p110 β催化亚基cDNA的重组质粒,转化大肠杆菌BL 21(DE3),用IPTG进行诱导表达.用磷脂酰肌醇-4、5-二磷酸、[γ-32P]ATP与重组PI 3-K p110 β催化亚基一起保温的方法测定PI 3-K的活性;32P标记的磷脂用氯仿和甲醇抽提、板薄层层析和放射自显影来分析.结果:SDS-PAGE显示表达出一110 kD的新蛋白质分子,重组蛋白占菌体总蛋白的比例为15%,大多数重组蛋白以可溶性形式存在.wortmannin是PI 3-K特异的抑制剂,wortmannin对重组PI 3-K p110 β亚基有抑制作用,这种抑制作用呈剂量依赖关系(2.5~20 nmo1/L).结论:重组蛋白是有活性的人PI 3-K p110 β催化亚基.

    作者:刘文;梁念慈 刊期: 2003年第01期

  • 门诊患者离院后返回作药物咨询的原因分析

    目的:提高药师的服务质量,减少患者不必要的往返.方法:分析2001-01-01至2002-06-30我院门诊患者离院后返回作药物咨询的原因.结果:患者返回咨询的原因有:不明药物用法(38.8%);怀疑药师发错药或对药物质量不放心(40.8%);药物不良反应(12.2%);药师错、漏、少发药(8.2%).结论:减少患者不必要往返作药物咨询的关键是不断改进药师的服务质量.

    作者:钟智;吴万征 刊期: 2003年第01期

  • 冰冻保存自体颅骨二期回植37例

    目的:观察冰冻保存自体颅骨二期回植的效果.方法:将消毒的自体颅骨密封冰冻保存,择期行自体颅骨二期回植.结果:37例骨瓣对应吻合良好,均无骨瓣下积液,无骨瓣缩小、变形吸收等表现,亦无排斥反应,骨密度基本正常.结论:冰冻保存自体颅骨方法简单易行,二期回植后骨瓣结构和功能恢复良好.

    作者:曾昭明;冯正执;吴波 刊期: 2003年第01期

  • Burst法食管心房调搏治疗阵发性室上性心动过速20例

    目的:观察Burst法食管心房调搏治疗阵发性室上性心动过速(PSVT)的疗效.方法:20例PSVT患者[男13例,女7例,平均年龄(45±10)岁]接受Burst法治疗.结果:20例中有19例经Burst法治疗后转复窦性心律.结论:Burst法食管心房调搏治疗折返性PSVT是一种安全、简便、有效的治疗方法.

    作者:曾纪羡 刊期: 2003年第01期

  • 浅谈新信息环境下医学科研人员的信息能力培养

    医学科研的目的,就是要为人类健康服务,为国家经济建设服务,故选择的科研题目应具有较大的实用价值,能解决医学领域中的理论问题,或在临床实践中能提高诊断治疗水平,特别应选择当前危及人类健康的普通和严重疾病的病因、诊断及防治方法中存在的问题进行研究[1].

    作者:刘华 刊期: 2003年第01期

  • 脑卒中患者的健康教育和家庭护理指导

    脑卒中患者病程长、并发症多,绝大部分患者只能在医院接受早期的治疗、护理和康复,较长的康复过程则在家中进行.有研究表明,在脑卒中生存者中,病残率为70%~80%[1],不但给家庭、社会带来沉重的负担,而且严重影响患者的生存质量.因此对患者和家属做好健康教育和家庭护理指导尤为重要.我科自2001年2月开展整体护理以来,对脑卒中患者和家属进行了科学的健康教育和家庭护理指导,报道如下:

    作者:黄淑芳;张丽娜;颜彩虹;叶素惠 刊期: 2003年第01期

  • 阻塞性黄疸时IL-18对肝损害的作用和机制的研究现状

    阻塞性黄疸(阻黄)时,门静脉内含有大量内毒素,而肠道是内毒素血症的主要来源.Baystone等认为内毒素吸收的主要途径有三个:(1)经肠道直接吸收入门静脉血;(2)经肠道淋巴途径;(3)直接穿过肠壁进入腹膜腔.其主要原因是阻黄时,肠道粘膜下层水肿,肠上皮细胞变性、坏死或脱落,线粒体肿胀、内质网扩张,这些病变可使肠粘膜屏障功能受损[1],通透性增加,从而使细菌和内毒素易进入血液循环.肠壁发生水肿时漏入腹腔的内毒素也增多,同时阻黄对肠道可能发生淤血性缺氧致使内毒素产生和吸收增多.除肠道因素外,阻黄时内毒素血症发生的机理尚有:(1)肠道内胆盐缺乏:正常情况下,胆汁酸盐进入肠道,有灭活和分解内毒素或抑制细菌生长的作用[2].

    作者:包仕廷;王三明 刊期: 2003年第01期

  • 胃癌急性穿孔36例临床分析

    目的:分析胃癌急性穿孔的临床特点.方法:回顾分析近10 a手术确诊的胃癌急性穿孔36例.结果:60岁以上者占70%,男女比例为4.1∶1;52.8%患者有诱因.穿孔前主要症状为上腹不规律疼痛,乏力、纳差、消瘦,贫血等;穿孔时表现为突发性上腹剧痛和腹膜炎改变.穿孔部位以胃体小弯(63.9%)和胃窦部(30.6%)多见;癌肿直径4~8 cm;穿孔直径0.6~2.5 cm,形态多不规则,穿孔周围有硬块,浆膜有癌肿浸润.本组均为进展期溃疡型胃癌,以腺癌为主(88.9%).治疗采用穿孔修补16例、姑息切除6例和根治性切除14例.结论:胃癌急性穿孔多发生于60岁以上的老年人,术前难与消化性溃汤穿孔鉴别,预后差.对全身情况好、能耐受手术、穿孔时间短、腹腔污染轻、无远处转移者,应争取行胃大部切除术或根治术,以延长生存期.

    作者:邓交 刊期: 2003年第01期

  • 2型糖尿病合并高血压对冠心病发生的影响

    目的:了解2型糖尿病合并高血压对冠心病发生的影响.方法:以185例2型糖尿病合并高血压的患者为观察组,171例2型糖尿病不合并高血压的患者为对照组,对两组进行回顾性分析.结果:冠心病在观察组的发生情况明显比对照组增高,差异有显著性.并且病程长的患者比病程短的患者发生率高.结论:2型糖尿病合并高血压的患者应当及早严格控制血压,以预防和减少冠心病的发生.

    作者:张宁;胡妙仪 刊期: 2003年第01期

广东医科大学学报杂志

广东医科大学学报杂志

主管:广东省教育厅

主办:广东医科大学