学术投稿

RAPD扩增分枝杆菌DNA优化条件及菌型分型的诊断应用

许丽;杨应周;谭卫国;林世平;胡志上;吴清芳;张玉华

关键词:分枝杆菌, 非典型性, 结核杆菌, RAPD, 分型
摘要:目的探讨随机扩增多态性DNA (Randomly amplified polymorphic DNA, RAPD)技术在分枝杆菌分型诊断中优化条件及其应用价值. 方法优化RAPD技术扩增分枝杆菌DNA的条件,并分别扩增深圳市临床病人分离株DNA,对比RAPD电泳条带特征. 结果以条带稳定、丰富、清晰为标准,确定引物1 RAPD佳反应条件为: 50μl反应体系中,含100ng模板DNA,2.5mmol/L MgCl2,2U DNA聚合酶,引物0.5μmol/L,dATP、dGTP、dCTP和dTTP各250μmol/L, 反应40个循环,每个循环为:94℃ 1min,36℃ 1min,72℃ 2min.所扩增结核杆菌临床分离株的DNA条带丰富、清晰,各条带差异较明显. 结论 RAPD技术能较好地鉴别MTB和NTM.
中国热带医学杂志相关文献
  • 标准剂量和大剂量的糖皮质激素对慢性ITP的疗效比较

    目的比较标准剂量和大剂量的糖皮质激素对慢性ITP的疗效. 方法 71例血小板(PLT)《10×109/L的慢性ITP患者随机分成两组,A组用大剂量的甲基强的松龙,剂量为500~1 000mg/d;B组用标准剂量的醋酸泼尼松(pred)治疗,剂量为1mg/kg/d;分别比较两组第3、5、7d血小板计数上升值,并比较副作用的发生率. 结果在治疗开始后的第3d, 两组间PLT计数上升值的差别有显著性(P《0.05);而在第3、5d,两组间PLT计数上升值的差别无显著性(P》0.05). 结论对于初治的慢性ITP并有血小板明显下降的患者使用大剂量的甲基强的松龙不能提高疗效.

    作者:陈江声;杨燕娇 刊期: 2006年第05期

  • 一起金黄色葡萄球菌引起的食物中毒调查

    目的调查某学校发生以呕吐为主要症状的集体食物中毒的发病原因和传染源. 方法采用流行病学调查方法和对病人呕吐物、肛拭、可疑食物进行实验室检查,糕点加工场员工的肛拭、咽拭等样本按食品卫生微生物学检验和变形杆菌食物中毒诊断标准及处理原则附录A方法进行检验. 结果金黄色葡萄球菌检出率为呕吐物88%、肛拭80%、墨西哥面包100%,从业人员1人检出此菌. 结论这是一起从业人员感染金黄色葡萄球菌再污染墨西哥面包而引起的细菌性食物中毒.

    作者:徐灼均 刊期: 2006年第05期

  • 1995~2004年濮阳市甲乙类传染病流行特征分析

    目的了解濮阳市1995~2004甲乙类传染病发病、死亡的变化趋势,分析传染病在该地区的流行规律与特征,为制定防治策略提供依据. 方法利用濮阳市1995~2004年传染病疫情报告资料进行分析. 结果濮阳市甲乙类传染病1997~2004年报告发病率高于1995年及1996年,2004年报告发病率达到高.年龄别发病率呈现三个高峰期,死亡率呈现两头高的现象;不同传播途径的各类传染病发病构成发生了显著变化. 结论传染病防治工作,是一项长期而艰巨的任务,需要多部门共同参与,综合防治.

    作者:任广秋 刊期: 2006年第05期

  • 乙肝病毒基因分型与HBV-DNA水平及临床表现的研究

    目的探讨HBV各基因型与DNA水平及HBeAg关系,分析不同基因型引起不同的临床表现. 方法对108例HBV-DNA阳性患者进行基因分型、HBV-DNA定量检测、ELISA法检测HBeAg及肝功能检查后综合分析. 结果基因分型为B型29例,C型51例,混合型16例,D型4例和未分型8例;C型HBV-DNA水平和HBeAg阳性率分别为(6.87±1.55)log值和74.51%,明显高于B型的(5.32±1.04)log值和44.83%(P《0.01);C型发展为慢性乙型肝炎(CHB)、肝硬化(LC)和原发性肝细胞癌(HCC)分别为49.0%、17.6%、13.7%,明显高于B型的41.4%、6.9%和3.4%(P《0.05);乙型肝炎病人中C型ALT、AST、TBIL和γG水平及发病年龄等均高于B型(P《0.05). 结论广州地区HBV基因型以C型为主,B型次之.C型HBV-DNA水平显著高于B型,B基因型HBeAg阳性率较C基因型高.C型肝脏损害比B型严重.

    作者:区映研;杨海红;曾文铤;朱科伦;马佩球 刊期: 2006年第05期

  • 复方混合杀虫粉剂套餐使用对德国小蠊的灭效研究

    目的探讨几种杀虫粉剂混合配方、交叉使用对德国小蠊的杀灭情况,为德国小蠊的防制提供依据. 方法用奋斗呐、胺菊脂、残杀威、蝇克星按一定的剂量比例交换混合配伍,套餐交叉使用. 结果灭效提高,抗药性降低,复合性配方杀虫剂可以应用于德国小蠊的防制. 结论杀虫粉剂混合配伍、交叉使用,可提高杀灭效率,并可降低抗药性的发生.

    作者:陈伟;谢光 刊期: 2006年第05期

  • 深圳市46例成年人麻疹临床特征及流行病学分析

    目的探讨成年人麻疹的发病特点和流行特征,为控制成年人麻疹流行提供依据. 方法对2000年1月~2005年10月所收集的46例成年人麻疹病例进行回顾分析. 结果成年人麻疹的临床特点主要为全身中毒症状较重,体温较高,皮疹典型,肝功能损害较重.患者以外来流动人员为主,平均年龄28.9岁,以3~6月为发病高峰,患者普遍无麻疹疫苗接种史. 结论成年人麻疹病情较重,合并症较多,临床症状不典型,易被误诊,建议在做好常规免疫的基础上,对15岁左右的中学生再进行一次强化免疫,以有效解决体内抗体水平随年龄增长而降低的问题.

    作者:袁飞雁 刊期: 2006年第05期

  • 重症急性胰腺炎合并肺损伤发病机制的研究进展

    重症急性胰腺炎合并肺损伤的发病机制复杂,中性粒细胞的活化、巨噬细胞活化、巨噬细胞移动抑制因子、炎症介质与细胞因子、核因子-κB、肝脏枯否细胞、神经肽受体等多种因素在其发病机制中发挥一定的作用,现就近年来有关重症急性胰腺炎合并肺损伤发病机制的研究进展进行综述.

    作者:曾仕平;蔡笃雄 刊期: 2006年第05期

  • 食品中李斯特菌检测方法探讨及药敏结果分析

    目的探讨食品中李斯特菌(LM)检测的方法,以提高李斯特菌检出率. 方法以国标法、Mini VIDAS和改良方法平行检测,结果经API鉴定;药敏试验用琼脂扩散法. 结果在8类食品45件样品中,国标法检出7株可疑菌株,改良方法检出9株可疑菌株,经国标生化法鉴定其中均有1株为默氏李斯特菌,其他均为LM,而检出的所有菌株经API鉴定均为LM.Mini VIDAS法均未检出LM.药敏试验显示LM对万古霉素、红霉素、麦迪霉素、先锋Ⅴ、SMZ、庆大霉素、氨苄青霉素等全部敏感;而对萘啶酸、头孢氨塞肟、头孢克肟、奥普托欣、多粘菌素B等则全部耐药. 结论改良方法对LM检出高于国标法,Mini VIDAS检测LM需进一步摸索,API法鉴定LM方便快捷.

    作者:陈慧燕;洪程基;李毅;洪隽 刊期: 2006年第05期

  • 上海市南汇区淋巴丝虫病防治效果分析

    目的了解和评价上海市南汇区淋巴丝虫病防治效果,为今后的丝虫病监测提供依据. 方法采用病原学、免疫学方法对本地居民、儿童、流动人口、历史慢丝病患者、原微丝蚴血症阳性者等对象进行监测,并同时进行蚊媒监测. 结果在丝虫病全面普查普治阶段,微丝蚴率高达1.48%;在重点查治阶段,微丝蚴率高达0.95%;在丝虫病基本消灭阶段,微丝蚴率为0,于1981年宣布基本消灭后,微丝蚴率高为0.02%,1996年通过消除丝虫病的市级审评;巩固监测阶段,微丝蚴率为0,且各类对象免疫学检测阳性率均很低,蚊媒监测均未发现幼丝虫. 结论南汇区已达到消除淋巴丝虫病的标准,传播已经阻断,结果显示丝虫病消除成果巩固.

    作者:宋海红 刊期: 2006年第05期

  • 肺炎衣原体感染对急性脑梗死患者脑血流动力学的影响

    目的探讨肺炎衣原体(CPn)感染的急性脑梗死患者脑血流动力学变化情况. 方法对有CPn慢性感染的121例急性脑梗死患者作为观察1组和有CPn急性感染的25例急性脑梗死患者作为观察2组进行经颅多谱勒超声检查,并与同期非CPn感染的39例急性脑梗死患者(对照组)进行对比分析. 结果观察1组中颅内血流动力学异常的血管有3支和3支以上的患者明显少于观察2组和对照组(均P《0.01),供应梗死病灶的主要血管的平均峰流速度低于对照组(P《0.05),而阻力指数和脉动指数均高于观察2组和对照组(均P《0.05),尤其大脑中动脉和基底动脉. 结论 CPn慢性感染的急性脑梗死患者脑血管病变虽不如非CPn感染的急性脑梗死患者广泛,但其梗死区供血血管不仅血流慢,且阻力高和弹性差.

    作者:苏海芳;邹蓉;赖颂辉;涂西林 刊期: 2006年第05期

  • 胰岛素样生长因子在人胎盘绒毛滋养层细胞的基因表达

    目的探讨胰岛素样生长因子系统(IGFs)在体外培养的胎盘绒毛滋养层细胞中的基因表达及其作用. 方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测58例体外培养的胎盘绒毛滋养层细胞中IGF-ImRNA、IGF-IImRNA、IGF-IRmRNA、IGF-IIRmRNA、IGFBP-1mRNA、IGFBP-2mRNA、IGFBP-3mRNA、IGFBP-4mRNA、IGFBP-5mRNA、IGFBP-6mRNA等10种胰岛素样生长因子的基因表达. 结果 58例体外培养的胎盘绒毛滋养层细胞均有IGF-ImRNA、IGF-IImRNA的基因表达;56例存在IGF-IRmRNA、IGF-IImRNA、IGFBP-3mRNA的基因表达;2例同时检测出上述10种基因. 结论 IGFs可能在早期细胞滋养层的侵入、增殖分化、胎盘形成和胚胎生长发育过程中以自分泌或旁分泌方式发挥重要的调节作用.

    作者:黄维加;肖桂初;肖晓友;莫凡;朱国都;朱新建 刊期: 2006年第05期

  • 黄褐斑与甲状腺功能的关系探讨

    黄褐斑的发病机制尚未明确,一般多认为与内分泌失调、紫外线照射、遗传、药物与化妆品、氧自由基、微生物的影响、情绪以及其他慢性疾病等因素有关[1].

    作者:谢志杰;郑志昂;李毓阳 刊期: 2006年第05期

  • 快速检测卡检测细菌性阴道病

    目的探讨应用细菌性阴道病快速检测卡检测细菌性阴道病(BV)的临床应用价值. 方法取164例疑为细菌性阴道病的标本,同时用细菌性阴道病快速检测卡和Amsel标准检测细菌性阴道病(BV). 结果与传统的Amsel标准相比,细菌性阴道病快速检测卡法诊断细菌性阴道病(BV)的敏感性为92.7%,特异性为81.2%,阳性预测值为80.8%,阴性预测值为93.2%. 结论细菌性阴道病快速检测卡检测阴道分泌物中的致病因子胺较为可靠、快速、简便的诊断细菌性阴道病(BV)的方法,值得推广.

    作者:丘利玲;顾向明;许翠锦 刊期: 2006年第05期

  • RAPD扩增分枝杆菌DNA优化条件及菌型分型的诊断应用

    目的探讨随机扩增多态性DNA (Randomly amplified polymorphic DNA, RAPD)技术在分枝杆菌分型诊断中优化条件及其应用价值. 方法优化RAPD技术扩增分枝杆菌DNA的条件,并分别扩增深圳市临床病人分离株DNA,对比RAPD电泳条带特征. 结果以条带稳定、丰富、清晰为标准,确定引物1 RAPD佳反应条件为: 50μl反应体系中,含100ng模板DNA,2.5mmol/L MgCl2,2U DNA聚合酶,引物0.5μmol/L,dATP、dGTP、dCTP和dTTP各250μmol/L, 反应40个循环,每个循环为:94℃ 1min,36℃ 1min,72℃ 2min.所扩增结核杆菌临床分离株的DNA条带丰富、清晰,各条带差异较明显. 结论 RAPD技术能较好地鉴别MTB和NTM.

    作者:许丽;杨应周;谭卫国;林世平;胡志上;吴清芳;张玉华 刊期: 2006年第05期

  • 2005年长沙市雨花区人群麻疹免疫水平监测分析

    目的了解长沙市雨花区人群麻疹抗体水平. 方法在辖区内随机抽取一个街(镇、乡),分别在2~5岁、6~8岁、12~15岁、30~39岁组人群各约30人,采手指血用ELISA法检测麻疹IgG抗体. 结果街道与乡镇人群麻疹抗体阳性率和GMT分别为84.00%和1:1002与76.47%和1:986(P》0.05);GMT水平以30~39组为高;麻疹疫苗预防阶段人群的GMT明显低于自然感染麻疹阶段的人群GMT(P《0.05). 结论雨花区人群麻疹抗体水平较低,未能形成免疫屏障,应及时进行免疫接种和补种.

    作者:邓婷;吴铁钢 刊期: 2006年第05期

  • 糖尿病并急性脑卒中的相关临床特点分析

    目的观察2型糖尿病(T2DM)并急性脑卒中在相关人群中的发病情况及其临床特点. 方法回顾分析近4年住院的T2DM并急性脑卒中388例,其中脑出血组93例,脑梗死组295例,分别与同期住院的非糖尿病(DM)脑出血组及非DM脑梗死组做对照分析. 结果 T2DM并急性脑卒中占同期住院T2DM人群的12.0%,急性脑卒中人群的17.0%;T2DM并急性脑梗死占T2DM并急性脑卒中的76.0%.与非DM脑出血组相比,T2DM并脑出血组的大出血灶多,死亡率高,治愈率低(P《0.01);与非DM脑梗死组相比,T2DM并脑梗死组的大病灶、多发病灶、复发病灶、腔隙病灶多,死亡率高,治愈率低(P《0.01). 结论 T2DM并急性脑卒中以缺血性卒中为主,病情较严重,预后差,应积极防治.

    作者:王庆开;翁雪燕;郑地明;林凌;叶苗苗 刊期: 2006年第05期

  • 溶组织阿米巴的流行、诊断和治疗

    在近的几十年间,由于先进的技术,溶组织阿米巴与和迪斯帕内阿米巴得已区分使阿米巴的病原学重新定义.随着对阿米巴的认识深入,在阿米巴病的流行病学,诊断,治疗和控制方面也取得了更多的知识.

    作者:李丽;张再兴;周升 刊期: 2006年第05期

  • 吡喹酮治疗华枝睾吸虫病4 680例临床观察

    目的总结吡喹酮治疗华枝睾吸虫病4 680例疗效,以期为临床有效治疗提供依据. 方法回顾分析近15年以吡喹酮治疗华枝睾吸虫的疗效情况及特点. 结果服药后3个月粪检1 188例复查重度感染10例、中度感染52例和轻度感染1 126例,虫卵期转阴率分别为82%、96%、98.7%. 结论吡喹酮治疗华枝睾吸虫病口服方便,疗程短、疗效佳,有副反应,但不会影响治疗,佳为留院观察治疗.

    作者:陈良贵;邹学华;何丽洁;罗金萍;潘登;陈蔚 刊期: 2006年第05期

  • 肺炎支原体肺炎患儿体液免疫活性探讨

    目的探讨肺炎支原体肺炎(MPP)患儿血清补体(C)、免疫复合物(IC)、免疫球蛋白(Ig)成分含量变化和在发病机理中的作用. 方法采用免疫透射比浊法和聚乙二醇沉淀比浊法对MPP患儿及正常对照组血清IgA、IgG、IgM、C4和C3含量进行检测. 结果 MPP患儿急性期和恢复期血清IgG、IgM、IC、C3、C4含量均明显高于正常对照组(P《0.01).MPP重症组血清IgA、IgG、IC、C3、C4含量明显高于轻症组(P《0.01或0.05). 结论 MPP患儿体液免疫活性变化在MPP发病机制中起重要作用,并对判定病情严重程度有实用价值.

    作者:吴志钢;鞠忠玲;欧阳林静;滕丽珍 刊期: 2006年第05期

  • 促肝细胞生长素、茵桅黄联合治疗婴儿肝炎综合征疗效观察

    目的评价促肝细胞生长素、茵桅黄治疗婴儿肝炎综合征效果. 方法 40例婴儿肝炎综合征分两组,对照组21例常规使用葡萄糖、维生素、肝太乐、联苯双酯、白蛋白等.治疗组19例在常规治疗基础上,加用促肝细胞生长素、茵桅黄联合治疗,观察两组黄疸消退、丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)下降情况. 结果对照组黄疸明显消退,ALT、AST有所下降,但两者比较差异无显著性(P》0.05);治疗组黄疸消退,ALT、AST明显下降(P《0.05). 结论促肝细胞生长素联合茵桅黄治疗婴儿肝炎综合征效果显著.

    作者:王旭举 刊期: 2006年第05期

中国热带医学杂志

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主管:国家卫生和计划生育委员会

主办:中华预防医学会;海南疾病预防控制中心