学术投稿

人LAK细胞抗菌杀瘤活性多肽的分离纯化及初步鉴定

张旗;黄宁;王伯瑶

关键词:人外周血单个核细胞, 抗菌活性, 活性多肽, 分离纯化, 聚丙烯酰胺凝胶电泳, 激活的杀伤细胞, 过继免疫治疗, killer cells, 植物血凝素, 生物治疗法, 肿瘤, 细胞因子, 晚期癌症, 分子机制, 分离鉴定, 提取物, 酸溶性, 应用, 酸性, 杀菌
摘要:LAK细胞( Limphokine - activated killer cells)是淋巴细胞因子激活的杀伤细胞,用以过继免疫治疗晚期癌症为近年来肿瘤生物治疗法中引人瞩目的手段之一.但LAK细胞杀菌肿瘤的分子机制并不十分清楚.我们应用酸性尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳(AU-PAGE)方法,从植物血凝素和IL-2刺激的人外周血单个核细胞酸溶性提取物中,分离鉴定出3组有抗菌活性的多肽成分,分别命名为HLP-1,HLP-2和HLP-3.
四川生理科学杂志相关文献
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    作者: 刊期: 2000年第02期

  • 猪冠状动脉平滑肌细胞急性酶分离及在离子通道研究中的应用

    目的:建立冠状动脉平滑肌细胞急性酶分离法并检验其在离子通道研究中的可靠性.方法:采用胶原酶分离单个平滑肌细胞和膜片钳单通道记录法记录通道电流.结果:用该急性酶分离方法所获的细胞数量多,形态正常,在这些细胞上容易记录到通道活动.结论:用该方法获得的单个细胞性能好,所记录的细胞膜上的离子通道活性正常.

    作者:李妙龄;杨艳;曾晓荣;刘智飞;周文;裴杰;贺军;聂红艺 刊期: 2000年第02期

  • Ⅱ型糖尿病治疗药物研究进展

    Ⅱ型糖尿病是由遗传和环境等多种因素导致胰β-细胞分泌胰岛素功能缺失,表现为高血糖症和胰岛素抗性的疾病,研究发现Ⅱ型糖尿病和胰岛素抗性关系密切,Ⅱ型糖尿病在饮食和运动等生活方式的改变不能控制血糖水平时,需要求助于药物治疗。传统的磺酰脲类药物和双胍类药物由于易引起低血糖或酸中毒使两类药使用受限。近年Ⅱ型糖尿病治疗药物研究取得很大进展,一些优秀品种先后用于临床,它们从不同的角度控制糖尿病患者的高血糖。

    作者:佟红岩;刘浚 刊期: 2000年第02期

  • 豚鼠心肌细胞急性酶分离方法

    用于膜片钳实验的细胞必须具备细胞膜完整、表面光洁、活性良好.这类细胞既可以通过原代培养方式获得,也可通过急性酶分离方法获得.细胞情况如何是膜片钳实验是否成功的第一个关键性步骤.本研究总结多年的经验摸索出一套行之有效的豚鼠心肌细胞分离方法,具体步骤如下:

    作者:周亮;曾晓荣;杨艳;刘智飞;李妙龄;裴杰 刊期: 2000年第02期

  • 葛根素对豚鼠心室乳头肌动作电位的影响

    葛根素(puerarin)是从中药葛根中提取的异黄酮化合物.近二十余年国内学者对其进行了大量的研究并广泛应用于临床,尤其在心血管方面,它具降压,扩冠,改善微循环,缩小缺血心肌面积,保护心肌缺血再灌注损伤及抗心律失常等多种药理作用,但其作用的细胞及分子机制未见报道.本实验采用细胞内标准微电极技术,记录用药前后豚鼠乳头肌动作电位变化,旨在探讨葛根素抗心律失常的电生理基础.实验采用方波刺激,频率分别为0.2,0.5,1,2Hz波宽3mS,强度为阈强度的3倍.每次结果均在同一细胞内获得.

    作者:闫福曼;曾晓荣;杨艳;刘智飞;周文 刊期: 2000年第02期

  • 提高“药理”教学效果的几点经验

    好的学习体系应是简单和充满乐趣的.药理教学目标实施中,应用“概貌法”,指导学生动手制作读书卡片,应用它们进行“横向比较”,重难点处使用押韵简短词融入卡片,利用“处方”进行综合能力训练是实施目标教学,提高教学质量,培养学生自学能力,观察能力,思维能力,实际应用能力的有效途径.

    作者:崔如玉 刊期: 2000年第02期

  • 心解1号对实验性心律失常的影响

    大鼠静脉恒速推注与头碱(Aco)诱发大鼠心律失常法和结扎犬冠状动脉前降支造成动物急性心肌缺血诱发心律失常法,以ECG改变为指标观察心解1号对实验性心律失常的影响.结果显示心解1号能显著提高Aco诱发大鼠心律失常的阈值.心0.9mg/kg组与同毒水平(1/10 LD50)普鲁卡固胺(PA)比较,两药组Aco对室性早博(VE)诱发剂量相当,而对室性过速(VT)、室性纤颤(VF)、死亡(CA)等指标,心解1号对Aco诱发剂量分别较PA组提高30.8ug/kg、40.4ug/kg、42.0ug/kg;心解1号能有效降低犬心肌缺血时VE、VT的发生,给药前后结果比较P《0.001.实验表明:心解1号具有较好的抗Aco所致心律失常作用及改善犬心肌缺血性心律失常作用.

    作者:孔古娅;卿德华 刊期: 2000年第02期

  • 抗解浸膏镇咳、祛痰作用的实验观察

    抗解浸膏是由黄苓、黄柏、金银花等组方,经现代制剂工艺制成的浸膏,用于风热感冒、咽喉肿痛的治疗.以1.51、2.52和5.04g(生药)/kg给小鼠灌胃1.0小时后,采用浓氨水气雾刺激30秒钟,记录各实验鼠3.0分钟内的咳嗽次数,以磷酸可待因和生理盐水分别作阳性和阴性对照,抗解浸膏三个剂组的咳嗽次数分别为22. 9(19.3、20.4(7.8和19.9(10.2,与生理盐组(37.5(16.7)比较,2.52和5.04g(生药)/kg具有显著抑制(P《0.05)浓氨水所致的小鼠咳嗽,而1.51g(生药)/kg具有镇咳作趋势,但与生理盐水组比较无显著差异(p》0.05).另以同样剂量给小鼠灌胃后0.5小时,各鼠腹腔注射0.5%酚红溶液0.5ml,以酚红气管排泌法,测定气管灌洗液于560nm处的光密度,并以化痰口服液和生理盐水分别作阳性和阴性对照,结果显示,抗解浸膏三个剂量组与生理盐水组比较,均能显著地促进气管对酚红的排泌(P《0.05,0.001和0.01),表明具有显著的祛痰作用.

    作者:包旭;包定元;李建农;杨艳 刊期: 2000年第02期

  • 一氧化氮的临床研究新进展

    生物活性分子一氧化氮(Nitric?oxide,NO)自发现开始,其广泛而重要的生理和病理功能日益为人们所认识,是近十年来被深入研究的小分子化合物,为目前所知强的血管舒张因子和收缩因子,生物作用极其广泛,与心血管系统、中枢神经系统、吸收系统、消化系统、内分泌系统、泌尿生殖系统等的正常生理活动以及疾病的发生密切相关。在烧伤、创伤、休克和感染病理生理演化过程中也扮演着重要角色。(参考文献38篇略)

    作者:令红艳 刊期: 2000年第02期

  • 青霉烯类酶抑制剂的进展

    多种细菌产生的β-内酰胺酶是引起β-内酰胺抗生素失活的主要原因。克服这种作用的手段有两个:(1)使用对β-内酰胺酶氢解作用稳定的β-内酰胺类抗生素。(2)β-内酰胺类抗生素与具有使β-内酰胺酶失活的酶抑制剂联合用药。β-内酰胺酶抑制剂克拉维酸,舒巴坦和他唑巴坦已成功应用于临床。自从Woodward报道了青霉烯核的化学和生物特性以来,引起了人们广泛的兴趣。但大多数研究都集中在6-位为羟乙基结构的青霉烯类的抗菌活性的研究上。近年来史克·比成研究室致力于对6-位羟乙基青霉烯的脱水产物的研究。发现,此类8-位为烷基或杂环取代的亚甲基系列青霉烯类化合物的抗菌活性比6-羟乙基青霉烯低,但是具有广泛的抑酶活性。同时对青霉烯核的结构进行修饰研究,获得了一系列的8-位为烷基或杂环取代的亚甲基青霉烯化合物并对他们的抑酶活性和抗菌活性进行了研究。

    作者:韩红娜;刘浚;王燕云 刊期: 2000年第02期

  • 酚妥拉明加黄芪注射液治疗肺心病心衰疗效分析

    血管扩张剂及黄芪注射用于治疗肺心病的疗效日益受到临床重视.自1996-1998年用酚妥拉明加黄芪注射液(中科院成都地奥制药公司生产)治疗肺心病心衰30例,取得了满意疗效,现报告如下:1临床资料1.1观察对象治疗组30例(男19例,女11例),年龄49-72岁,平均年龄59岁;对照组20例中男18例,女12例,年龄47-70岁,平均年龄54岁.两组病例均为心衰Ⅲ°的病人.年龄性别无显著性差异(P》0.05).

    作者:史世平 刊期: 2000年第02期

  • 对胡崎主编的《生理学》教材几处表述的修改建议

    作者: 刊期: 2000年第02期

  • 22例慢性重型肝炎合并真菌感染的临床分析

    目的:探讨论慢性重型肝炎患者并发真菌感染类型,临床表现特点和预后.方法:回顾性观察了我院近3年收治的慢性重型肝炎患者合并真菌感染的情况.结果61例患者中真感染22例(36.0%)、慢性重型肝炎并发真菌感染的病死率为72、73%.结论:慢性重型肝炎并发医院真菌感染并不少见,感染后预后差,主要防治措施是合理应用抗生素早期诊治真菌感染.

    作者:洪文昕;张玲;张复春 刊期: 2000年第02期

  • 附子多糖FI的分离纯化及生物学活性研究

    附子是毛茛科乌头属植物的侧根,是一种常用的中药材,具有回阳救逆、温补肾阳、祛寒止痛之功能.近年来研究表明,附子提取液尚具有强心、抗癌、抗衰老和增强免疫机能的作用.因此,对附子中所含多糖的研究与利用具有重要的医学价值.我们将白附片经热水抽提、Sevag法脱蛋白、乙醇沉淀、DEAE-C32柱层析分离,再通过SephadexG-200柱层析进一步纯化,得到一种纯白色粉末状多糖.苯酚-硫酸法测定糖含量为97%,Sephadex G-200柱层析测定其平均分子量为2.6(105.熔点测定结果为270℃.经完全酸水解,薄层层析、红外光谱分析,证明为葡聚糖.生物学活性研究发现这种多糖具有较高的亲水性和保湿性,且能显著降低小白鼠的血清糖水平,增强其常压下耐缺氧能力.

    作者:阮期平;赵莉;陈吉森 刊期: 2000年第02期

  • 一氧化氮(NO)的生理作用及临床意义

    一氧化氮(NO)这个“不起眼”的小分子,因其在生物体中的作用,90年代以来即成为生物医学研究的热点之一。因各类专题研究报道较多,本文仅对NO的生理作用和临床意义综述如下:1?NO的发现概况发现NO在生物体中的作用,是因美国药理学家Furchgott,在研究乙酰胆碱(Ach)对血管的作用时,发现引起舒张作用(1978年),这与他本人从1953年研究Ach对血管起收缩作用以来,极为矛盾。Furchgott于是反复检查实验过程,终相信实验无误,确信Ach对血管起舒张作用。在实验过程中,他还发现“血管内膜损伤会使血管丧失对Ach的舒张反应”和“血管的内皮细胞是Ach引起血管舒张的关键”。这个实验结果使他想到:在血管内皮细胞与血管平滑肌细胞之间存在某种物质介导这种舒张作用。之后,他用构思精妙、技术简单的实验证实了该物质的存在,于1982年发表论文,称该物质为(血管)内皮源性舒张因子(EDRF),终于1987年证实EDRF就是NO。

    作者:覃琥云 刊期: 2000年第02期

  • 加强药理实验课学生动手能力的培养

    药理实验以动物实验为主,如何在有限的时间内,利用有限的教学条件,加强学生动手能力的培养,笔者采用的方法有:一、尽量多分组,以确保每个学生均有动手操作的机会.二、充分发挥实验小组的作用,增加学生责任心,加强学生协作,有利学生动手能力培养.三、利用实验后动物,加强学生动手能力培养,有效提高学生操作技能,有利实验顺利进行.四、严格考核,促进学生勤于动手、主动学习、真正掌握操作技能.

    作者:秦朝芳 刊期: 2000年第02期

  • 重组人beta防御素基因在COS-7细胞的转染表达

    为探索建立持续稳定表达hBD-2的哺乳类动物型工程细胞的可能性,本研究构建真核重组表达载体pCMV.tag2B/hBD-2以进行COS-7细胞转染表达实验.将本室克隆获得的hBD-2全长cDNA片段插入带有报告基因的真核表达质粒pCMV.tag2B构建出hBD-2的重组表达裁体pCMV.tag2B/hBD-2,并经DNA顺序证明hBD-2 cDNA片段的插入方向和其全长cDNA的硷基组成顺序均准确无误.通过脂质体转染法将pCMV.tag2B/hBD-2导入COS-7细胞.RT-PCR法和免疫印迹法分别从mRNA水平和蛋白质水平检测到被转染的COS-7细胞系能有效表达hBD-2.

    作者:蔡绍晖;杜军;陈新年;黄宁;王伯瑶 刊期: 2000年第02期

  • 机能学实验设计教学体会

    机能学作为一门独立的实验学科,集生理学、药理学、病理生理学实验于一体,既节约了资源,又使学生有一个系统整体的观念来理解机能学问题.我校已开设机能学一学期,学生普通反映较好.我们还对医学生有专门的一次实验设计课(4学时)作为考核这门学科的主要成绩.作为实验设计,二、三年级医学生可能还不知为何物,教材上也没有相关的内容,并且学生对图书馆的利用也不是很高,因此如何上好实验设计课,使学生了解实验设计,并作好实验设计,教师的指导是非常重要的.结合本人的教学经验、心得体会归纳如下:

    作者:熊文碧 刊期: 2000年第02期

  • 大鼠β-防御素rBD-2的分子克隆及其在皮肤组织的诱导表达

    本文应用RT-PCR技术,根据Genbank公布的Noreway大鼠β-防御素-2cDNA序列设计引物,从Wistar大鼠皮肤组织总RNA中扩增出一cDNA片段,经核苷酸序列测定证实为全长β-防御素-2cDNA.本文实验还显示大鼠β-防御素rBD-2基因在大肠杆菌感染性损伤皮肤组织中的表达明显增强,与人hBD-2的表达相似.这些实验结果提示β-防御素-2可能是皮肤组织对感染损伤的防御反应所产生的重要免疫介质.

    作者:陈新年;黄宁;吴琦;王伯瑶 刊期: 2000年第02期

  • 生理教学中学生能力培养之初见

    面向21世纪深化教育改革,提高教学质量,在教学由“应试”型转变为“素质”型的同时,教师的教学观念也应转变,教师不仅要给学生传授知识,同时还要利用各种方法、手段、各种途径加强学生能力的培养.

    作者:师显跃 刊期: 2000年第02期

四川生理科学杂志

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