学术投稿

卡介苗胞壁蛋白增强人肺腺上皮细胞hBD-1mRNA的表达及抗菌活性

冯云;黄宁;吴琦;王伯瑶

关键词:卡介苗胞壁蛋白, 免疫增强剂, 人肺腺上皮细胞, 蔗糖密度梯度离心, 基因表达, 聚合酶链反, 分离和鉴定, 粘膜, 杂交检测, 杂交分析, 有效成份, 培养上清, 抗菌活性, 方法, 柱层析, 琼脂糖, 逆转录, 抗菌性, 抗菌肽, 防御素
摘要:目的:分离和鉴定增强人肺腺上皮细胞(SPC-A-1)抗菌活性核β-防御素-1(hBD-1)基因表达的菌种及其有效成份,为开发增强粘膜抗菌肽基因表达的免疫增强剂以防治粘膜感染的研究打下基础.方法:采用超声波破碎细胞、蔗糖密度梯度离心、SephadesG-150柱层析等方法分离卡介苗胞壁蛋白质组份:采用琼脂糖弥散杀菌法检测SPC-A-1细胞培养上清的抗菌性;应用逆转录聚合酶链反庆(RT-PCR)法和Northern杂交检测SPC-A-1细胞hBD-1 mRNA的表达.结果:利用RT-PCR和Northern杂交分析,证实了卡介苗诱导SPC-A-1细胞hBD-1 mRNA的2倍增强表达.
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  • 生理教学中学生能力培养之初见

    面向21世纪深化教育改革,提高教学质量,在教学由“应试”型转变为“素质”型的同时,教师的教学观念也应转变,教师不仅要给学生传授知识,同时还要利用各种方法、手段、各种途径加强学生能力的培养.

    作者:师显跃 刊期: 2000年第02期

  • 氯胺酮对缺氧大鼠海马神经元钙激活钾通道的作用

    脑缺血时细胞外兴奋性氨基酸浓度增高,增高的兴奋性氨基酸将通过N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体及非NMDA受体门控的离子通道导致细胞内游离Ca2+浓度([Ca2+]i)增高,终将导致神经元的损害或坏死.另一方面,脑缺血也诱导产生多种自身代偿机制,以拮抗各种病理性损伤及增加神经元的存活率.其中钙激活钾通道(Kca通道)激活产生超极化电位,使细胞兴奋性降低,减少Ca2+的内流及兴奋性氨基酸的释放,这对于避免各种损伤事件的发生具有重要的作用.氯胺酮为NMDA受体非竞争性拮抗剂,对Kca通道具有激活作用,但氯胺酮对缺氧神经元Kca通道作用情况尚未见报道.

    作者:唐兴江;范生尧;李小刚;曾晓荣;杨艳;贺军;李妙龄;刘智飞;周文 刊期: 2000年第02期

  • SPA与IVF受精率的比较

    生殖医学理论的发展及技术进步为临床治疗不育不孕症提供了有效手段.在体外实验室条件上让人卵与精子共同孵育完成受精过程,发育到早期胚胎阶段植入母体即为第一代试管婴儿( In Vitro fertilization,IVF),这个过程中,精、卵的品质直接影响IVF成功与否.在IBF中发现即使精液常规检测各项指标正常的精液标本其精子用于IVF也常常有受精失败的情况.就其原因,受精是一个复杂的生物学过程,精子数量及精子活动能力指标并不能代表精子受精力的高低.对这类由精子受精力低下所致的不育病例,有效的治疗措施同少、弱精症一样,宜选用卵细胞胞浆内单精子注射的方式(ICSI)即第二代试管婴儿.因此,准确评估精子受精力,正确选择助孕手段,无疑可增加助孕措施成功的可能性.

    作者:岳利民;张金虎;何亚平;黄萍;王丽;刘伟信 刊期: 2000年第02期

  • 青霉烯类酶抑制剂的进展

    多种细菌产生的β-内酰胺酶是引起β-内酰胺抗生素失活的主要原因。克服这种作用的手段有两个:(1)使用对β-内酰胺酶氢解作用稳定的β-内酰胺类抗生素。(2)β-内酰胺类抗生素与具有使β-内酰胺酶失活的酶抑制剂联合用药。β-内酰胺酶抑制剂克拉维酸,舒巴坦和他唑巴坦已成功应用于临床。自从Woodward报道了青霉烯核的化学和生物特性以来,引起了人们广泛的兴趣。但大多数研究都集中在6-位为羟乙基结构的青霉烯类的抗菌活性的研究上。近年来史克·比成研究室致力于对6-位羟乙基青霉烯的脱水产物的研究。发现,此类8-位为烷基或杂环取代的亚甲基系列青霉烯类化合物的抗菌活性比6-羟乙基青霉烯低,但是具有广泛的抑酶活性。同时对青霉烯核的结构进行修饰研究,获得了一系列的8-位为烷基或杂环取代的亚甲基青霉烯化合物并对他们的抑酶活性和抗菌活性进行了研究。

    作者:韩红娜;刘浚;王燕云 刊期: 2000年第02期

  • 抗MRSA药物潜在的作用靶位Fem因子

    在现代药物研究中,药物新靶点的发现往往是新药创制的前提和条件。随着人们对MRSA耐药机制研究的不断深入,有关fem基因与细菌胞壁合成的关系及其在细菌耐药性产生中的作用已得到初步阐明。本文将根据现有文献,展望fem因子作为抗葡萄球菌药物作用靶位的可能性。

    作者:雷军;凌保东 刊期: 2000年第02期

  • 医学本科生理学教学模式的改革

    传统的生理学教学模式以教师讲授为主,与中学教学模式并无本质的差别.多年来,我们在生理学教学中虽然先后尝试过一些新的教学方式,如“学导式”、“启发式”、“自学讨论式”等,但大多局限于生理学教学的分部内容,难以对旧的教学模式起到根本的变革作用.

    作者:岳利民;周祖玉;李红宇;吕广能;何亚平;郑煜 刊期: 2000年第02期

  • 孤啡肽的生物学功能研究进展

    1995年Meunier和Reinscheid等几乎同时从脑组织中分离出一种新的由17个氨基酸组成的肽-孤啡肽(OFQ)或痛敏肽,并证明孤啡肽特异性结合阿片样受体(opioid-like?receptor?1,OLR1)为OFQ的同源性配体。由于孤啡肽前体的分子结构与阿片类前体,如强啡肽和脑啡肽原的前体分子有很高的同源性。因此,它也可能有着巨大的潜在生物学功能。为此,许多学者作了大量的研究工作,现就其近年来的研究进展综述如下。

    作者:唐勇;郝亮;罗群英;蒲艺;余曙光 刊期: 2000年第02期

  • 大肠杆菌对大鼠肺组织β-防御素-2基因表达的抑制

    目的:探讨细菌对大鼠β-防御素-2(rBD-2)基因的表达调控.方法:将大肠杆菌E. coliML-35和绿脓杆菌27853大鼠气管内接种,于24小时后提取肺组织RNA,用RT-PCR法检验大鼠β-防御素-2基因的表达情况.结果:气管内接种大肠杆菌使大鼠肺组织β-防御素-2mRNA的表达受抑制.结论:大肠杆菌及其产物直接或通过炎症细胞因子间接抑制rBD-2mRNA的表达.

    作者:陈新年;黄宁;吴琦;王伯瑶 刊期: 2000年第02期

  • 老年人用药问题

    随着人类社会的进步,生活、医药卫生条件的改善与和平的环境,人的寿命逐渐延长。WHO的一份报告称发展中国家人的平均寿命50年代为46岁,在90年代已上升为72岁,预计2020年将达到78岁。而发达国家目前人的寿命男性已达76岁,女性80岁以上。65岁以上老年人占人口比例10~12,且有日益增强的趋势。

    作者:王浴生 刊期: 2000年第02期

  • 一氧化氮(NO)的生理作用及临床意义

    一氧化氮(NO)这个“不起眼”的小分子,因其在生物体中的作用,90年代以来即成为生物医学研究的热点之一。因各类专题研究报道较多,本文仅对NO的生理作用和临床意义综述如下:1?NO的发现概况发现NO在生物体中的作用,是因美国药理学家Furchgott,在研究乙酰胆碱(Ach)对血管的作用时,发现引起舒张作用(1978年),这与他本人从1953年研究Ach对血管起收缩作用以来,极为矛盾。Furchgott于是反复检查实验过程,终相信实验无误,确信Ach对血管起舒张作用。在实验过程中,他还发现“血管内膜损伤会使血管丧失对Ach的舒张反应”和“血管的内皮细胞是Ach引起血管舒张的关键”。这个实验结果使他想到:在血管内皮细胞与血管平滑肌细胞之间存在某种物质介导这种舒张作用。之后,他用构思精妙、技术简单的实验证实了该物质的存在,于1982年发表论文,称该物质为(血管)内皮源性舒张因子(EDRF),终于1987年证实EDRF就是NO。

    作者:覃琥云 刊期: 2000年第02期

  • 附子多糖FI的分离纯化及生物学活性研究

    附子是毛茛科乌头属植物的侧根,是一种常用的中药材,具有回阳救逆、温补肾阳、祛寒止痛之功能.近年来研究表明,附子提取液尚具有强心、抗癌、抗衰老和增强免疫机能的作用.因此,对附子中所含多糖的研究与利用具有重要的医学价值.我们将白附片经热水抽提、Sevag法脱蛋白、乙醇沉淀、DEAE-C32柱层析分离,再通过SephadexG-200柱层析进一步纯化,得到一种纯白色粉末状多糖.苯酚-硫酸法测定糖含量为97%,Sephadex G-200柱层析测定其平均分子量为2.6(105.熔点测定结果为270℃.经完全酸水解,薄层层析、红外光谱分析,证明为葡聚糖.生物学活性研究发现这种多糖具有较高的亲水性和保湿性,且能显著降低小白鼠的血清糖水平,增强其常压下耐缺氧能力.

    作者:阮期平;赵莉;陈吉森 刊期: 2000年第02期

  • 一氧化氮的临床研究新进展

    生物活性分子一氧化氮(Nitric?oxide,NO)自发现开始,其广泛而重要的生理和病理功能日益为人们所认识,是近十年来被深入研究的小分子化合物,为目前所知强的血管舒张因子和收缩因子,生物作用极其广泛,与心血管系统、中枢神经系统、吸收系统、消化系统、内分泌系统、泌尿生殖系统等的正常生理活动以及疾病的发生密切相关。在烧伤、创伤、休克和感染病理生理演化过程中也扮演着重要角色。(参考文献38篇略)

    作者:令红艳 刊期: 2000年第02期

  • 记忆机制在教学过程中的应用

    近年来在商品经济的冲击下,随着学校招生人数的扩大,学生的文化基础程度日趋逾下,给教学工作带来许多困难,如何教学达标是每位教师极为关注的问题.为此针对学生的实际情况科学地指导教学,从理论上充分地认识学习方法与学习效果的关系,严格把握教学的各个环节,对提高学习效率极其重要.作者几年来将记忆机制应用于教学过程之中,以成社班、成护班、社区班学生为对象,随机为50%的人数进行对比,取得了较好收效.

    作者:尹月波;曾加肾 刊期: 2000年第02期

  • 豚鼠心肌细胞急性酶分离方法

    用于膜片钳实验的细胞必须具备细胞膜完整、表面光洁、活性良好.这类细胞既可以通过原代培养方式获得,也可通过急性酶分离方法获得.细胞情况如何是膜片钳实验是否成功的第一个关键性步骤.本研究总结多年的经验摸索出一套行之有效的豚鼠心肌细胞分离方法,具体步骤如下:

    作者:周亮;曾晓荣;杨艳;刘智飞;李妙龄;裴杰 刊期: 2000年第02期

  • 血管内皮细胞在切应力刺激后Toll基因的表达变化

    目的:本室先前的实验观察到原代培养的贴壁融合脐静脉内皮细胞层流刺激后,IL-8 mRNA的增强表达和NF-κB的活化.本文探讨Toll蛋白在切应力诱导血管内皮细胞表达趋化细胞IL-8基因表达中的可能作用.方法:从正常对照和层流刺激后的原代培养的人脐静脉内皮细胞提取总RNA,根据TLR-2和TLR-4cDNA序列设计特异引物,应用RT-PCR技术扩增其cDNA片段,并经DNA序列测定于以证实.RT-PCR产物经凝胶电泳后,在凝胶成像分析仪上进行电泳条带的灰度半定量分析.

    作者:梁峰;黄宁;王伯瑶;吴立志;陈槐卿 刊期: 2000年第02期

  • 心解1号对实验性心律失常的影响

    大鼠静脉恒速推注与头碱(Aco)诱发大鼠心律失常法和结扎犬冠状动脉前降支造成动物急性心肌缺血诱发心律失常法,以ECG改变为指标观察心解1号对实验性心律失常的影响.结果显示心解1号能显著提高Aco诱发大鼠心律失常的阈值.心0.9mg/kg组与同毒水平(1/10 LD50)普鲁卡固胺(PA)比较,两药组Aco对室性早博(VE)诱发剂量相当,而对室性过速(VT)、室性纤颤(VF)、死亡(CA)等指标,心解1号对Aco诱发剂量分别较PA组提高30.8ug/kg、40.4ug/kg、42.0ug/kg;心解1号能有效降低犬心肌缺血时VE、VT的发生,给药前后结果比较P《0.001.实验表明:心解1号具有较好的抗Aco所致心律失常作用及改善犬心肌缺血性心律失常作用.

    作者:孔古娅;卿德华 刊期: 2000年第02期

  • 提高“药理”教学效果的几点经验

    好的学习体系应是简单和充满乐趣的.药理教学目标实施中,应用“概貌法”,指导学生动手制作读书卡片,应用它们进行“横向比较”,重难点处使用押韵简短词融入卡片,利用“处方”进行综合能力训练是实施目标教学,提高教学质量,培养学生自学能力,观察能力,思维能力,实际应用能力的有效途径.

    作者:崔如玉 刊期: 2000年第02期

  • 酚妥拉明加黄芪注射液治疗肺心病心衰疗效分析

    血管扩张剂及黄芪注射用于治疗肺心病的疗效日益受到临床重视.自1996-1998年用酚妥拉明加黄芪注射液(中科院成都地奥制药公司生产)治疗肺心病心衰30例,取得了满意疗效,现报告如下:1临床资料1.1观察对象治疗组30例(男19例,女11例),年龄49-72岁,平均年龄59岁;对照组20例中男18例,女12例,年龄47-70岁,平均年龄54岁.两组病例均为心衰Ⅲ°的病人.年龄性别无显著性差异(P》0.05).

    作者:史世平 刊期: 2000年第02期

  • 抗解浸膏的抗炎、镇痛的实验研究

    抗解浸膏是由黄柏、黄苓、栀子、金银花、板兰根等中药组成,用于风热感冒的治疗,本文对其抗炎和镇痛作用进行了实验研究,小鼠灌胃给药0.84、1.68和2.52g(生物)/kg,每日一次连续三天,末次给药后1.0小时,以二甲苯小鼠耳廓致炎,阿司匹林和生理盐水分别作阳、阴性对照,结果显示抗解浸润膏三剂量组耳肿胀度分别为10.3±3.0、8.8±2.3和9.3±2.7mg,与阴性对照组比较(13.0±2.5mg)具有显著差异性(P<0.05,0.01),另以相同剂量给大鼠灌胃每日一次,连续三天,以角叉菜胶致足跖肿胀容量法,结果显示,1.68和2.52g(生药)/kg,对角叉菜胶致炎后0.5-5.5小时的各时间点均有显著(P《0.05,0.01)抑制足跖炎症的作用.

    作者:包旭;包定元;李建农;杨艳 刊期: 2000年第02期

  • 大鼠不同发育阶段β-防御素-2基因在肺组织的表达研究

    目的:探讨大鼠β-防御素-2基因在肺组织表达的发育调控.方法:根据Genbank大鼠β-防御素-2的cDNA序列,设计一对特异引物.采用RT-PCR技术在大鼠不同发育阶段的肺组织总RNA中,扩增其特异cDNA片段,并进行DNA序列测定.借助Genbank中BLAST程序,将从该cDNA序列推导的氨基酸序列与人的hBD-2和大鼠的rBD-1做相似性分析.结果:从足月胎鼠、出生8h和4日以及成年大鼠相同重量肺组织所提取的总RNA中,均扩增出一条密度相同、长度约为220bp的cDNA片段.

    作者:周慧;黄宁;陈新年;吴琦;王伯瑶 刊期: 2000年第02期

四川生理科学杂志

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