段宏；袁慧军
由于耳蜗特殊的解剖和生理结构，使全身给药和基因治疗很难在局部达到有效的浓度。因此关于内耳局部给药的研究目前已成为耳科研究的热点。选择合适的载体是内耳局部给药的关键问题。阳离子聚合物纳米载体是具有低毒、无免疫原性、可修饰、携带力强、易获得等优点，为内耳给药载体的选择提供了新的可能。本文总结了阳离子聚合物的特性，介绍了其在携带基因/药物方面的优越性，回顾其作为载体在内耳的应用情况，为内耳疾病局部药物/基因治疗的临床应用提供指导。
作者：王方园；吴南；陈正一；杨仕明 刊期： 2015年第01期
大鼠被广泛应用于内耳科学研究，其内耳膜迷路取材和观察对评估内耳感觉上皮的组织形态学改变和病理学改变以及分子生物学改变有着不可或缺的重要意义。由于大鼠内耳结构精巧复杂，如何完整取出内耳膜迷路一直是相关研究的难点之一。为促进同道间交流并为初学者提供经验，本文在详细介绍大鼠内耳的解剖结构的同时还点评部分与其他哺乳类实验动物内耳结构的异同之处，并在组织学层面讨论了耳蜗和前庭感受器解剖结构的生理学意义。本文在介绍大鼠内耳解剖结构的基础上，进一步讲解了两种不同的内耳膜迷路取材技术并强调某些关键步骤的操作体会和技巧。
作者：高可雷；李鹏；蒋海燕；丁大连；孙虹；Richard Salvi 刊期： 2015年第01期
目的：分析讨论先天性前庭窗缺如或闭锁的影像学诊断技术及个性化手术方法。方法采用高分辨率CT(High resolution CT, HRCT)、后期多平面重组（Multi-plane reformation, MPR)技术对2010.7-2014.8临床上表现为自幼传导性耳聋、外耳道鼓膜正常、鼓室压图为“A”型曲线、盖莱试验阴性的患者进行筛选诊断，并进行外科听力重建手术。结果术前HRCT及MPR影像诊断为先天性前庭窗畸形6例（耳）、先天性镫骨底板固定2例（耳），经术中探查证实为前庭窗、镫骨及面神经畸形，其中6例以TORP或Piston进行个性化听力重建。结论 HRCT冠状位及MPR可较好的显示前庭窗、镫骨及面神经的畸形，尤其是对固定的镫骨底板及前庭窗闭锁骨板的区分；对于前庭窗闭锁且被面神经完全覆盖的病例，鼓岬开窗不失为一种有效的方法，目前国内外文献尚未见此技术的报告。
作者：杨凤；刘阳；孙建军；宋任东；李进让 刊期： 2015年第01期
本文综述了哺乳类动物耳蜗血管纹细胞的离子转运、内淋巴液生成以及耳蜗内淋巴电位产生的主要机制。详细阐述了每一种离子转运蛋白的作用，讨论了耳蜗血管纹中钾离子循环、氯离子循环和盐的平衡，以及这些平衡得以维持的机制。
作者：许庆庆；郭维维；翟所强；杨仕明 刊期： 2015年第01期
氨基糖苷类药物（AmAn）是一类经典的治疗革兰阴性菌感染的抗生素，但具有耳毒性和肾毒性。以往的研究认为AmAn的耳毒性仅仅针对内耳毛细胞并可引起继发的延迟性螺旋神经节细胞（SGNs）死亡。但是随着关于AmAn耳毒性和对耳蜗其他细胞的研究进展，人们逐渐意识到耳蜗内支持细胞的损害也是引起SGNs延迟死亡的重要原因之一。我们发现，不同的AmAn对内耳的损害方式不同，以硫酸链霉素为代表的少数AmAn可以不受血-迷路屏障阻碍直接进入内耳并首先损害内耳的周边神经元；而以往认为只能间接损害SGNs的其他那些难以跨越血-迷路屏障的AmAn，比如卡那霉素，对出生后三天大鼠处于发育阶段的SGNs也具有直接的损害作用。因此我们提出一个根据不同内耳损害方式来区分AmAn的分类建议，并希望本文介绍的新内容能够为更深入理解不同种类AmAn的不同耳毒性机制以及听觉系统各个重要组织成分之间的相互作用关系提供新的参考信息。
作者：高可雷；丁大连；李鹏；孙虹；Richard Salvi 刊期： 2015年第01期
目的：运用不同测试技术对白噪声暴露前后豚鼠的听觉功能进行检测，分析120 dB SPL白噪声暴露对豚鼠听觉功能的影响，为豚鼠的听力学研究提供模型及方法参考。方法以120 dB SPL白噪声为噪声暴露条件，比较噪声暴露组、对照组各20只豚鼠听性脑干反应（ABR）、畸变产物耳声发射（DPOAE）、电诱发听性脑干反应（eABR），总结分析120 dB SPL白噪声暴露对豚鼠听觉功能的影响。结果对照组与噪声暴露组之间的ABR阈值、DPOAE幅度值、eABR阈值差异均具有统计学意义（p<0.05）。结论120 dB SPL白噪声建立豚鼠噪声性聋动物模型稳定，听性脑干反应（ABR）、畸变产物耳声发射（DPOAE）、电诱发听性脑干反应（eABR）可以很好地检测白噪声暴露前后豚鼠听觉功能的变化。
作者：张纪帅；陈星睿；吴军；韩维举 刊期： 2015年第01期
目的：检测血红素加氧酶-1在豚鼠耳蜗螺旋神经节顺铂损伤后的表达变化。方法通过免疫组织化学及Western Blot技术，观察耳蜗螺旋神经元损伤后HO-1在不同组间的表达变化。将32只健康豚鼠随机分为4组，每组8只。A组对照组：按体重以0.9%生理盐水12ml/kg腹腔注射，早晚各一次，持续3天。B组顺铂组：按体重12mg/kg顺铂腹腔注射（IP），早晚各一次，持续3天。C组阿魏酸（FA）+顺铂组：先150mg/kgFA腹腔注射预处理1h，再以12mg/kg顺铂IP，早晚各一次，持续三天。D组FA+锌原卟啉Ⅸ（ZnppⅨ）+顺铂组：同时给予150mg/kgFA+ZnppⅨ15umol/kg IP预处理1h，再以12mg/kg顺铂IP，早晚各一次，持续三天。采用免疫组织化学及Wstern Blot技术检测不同组间螺旋神经元HO-1蛋白表达变化。结果在不同的分组中，HO-1在耳蜗螺旋神经节中表达量不同。空白组中，螺旋神经节组织存在微弱的HO-1表达，其蛋白表达量为0.48±0.07；A组蛋白表达量为0.81±0.07，B组蛋白表达量为0.9±0.05,C组蛋白表达量为0.61±0.07。4个组两两间差异均有统计学意义（p<0.0001）。结论 HO-1在C组中表达量多，B组次之，D组少，表明HO-1可能参与顺铂损伤螺旋神经元后的修复过程。
作者：邓丹；骆文龙 刊期： 2015年第01期
本文主要介绍了Neurod1在内耳感觉神经元及毛细胞发育中的相关研究。Neurod1是bHLH转录因子家族中的重要一员，它能促进感觉神经元前体细胞分化为成熟感觉神经元细胞。在内耳中，Neurod1主要表达于感觉神经元细胞，部分感觉上皮也有表达。Neurod1基因条件性敲除小鼠可出现听力及平衡障碍，其内耳感觉神经元细胞大量缺失，同时内耳中的传入及传出神经也存在缺陷。Neurod1基因敲除小鼠螺旋神经节中还可出现异位毛细胞的生长。在内耳发育过程中，Neurod1基因与多种基因相互调控，协同促进内耳发育成熟。如Neurog1、Atoh1、Sox2、Nhlh1等。
作者：王春梅；卿洁；谢鼎华 刊期： 2015年第01期
近年来，全外显子组测序技术迅猛发展，为遗传疾病的基因研究带来了新的机遇，受到遗传学多个领域的重视与应用，其在遗传性耳聋的应用也日益受到关注。该技术先应用靶向富集技术捕获基因组的外显子区域，再通过高通量测序获得编码区序列遗传信息。本文主要介绍全外显子组测序的技术路线及在遗传性耳聋中的应用与研究成果。
作者：姜海鸥；全庆丽；胡祥上；王义旺 刊期： 2015年第01期
目的：探讨一种适宜耳蜗组织贴壁培养的方法。方法 PET滤膜预先置入层粘连蛋白、鸟氨酸、胎牛血清按2：2：1比例混合均匀的液体中在4℃预孵过夜，选取出生四天的C57BL/6J小鼠作为研究对象。剥取基底膜以PET滤膜作为承载介质培养在加入含青霉素的培液中，48小时后收取样本，进行免疫荧光（一抗goat anti-otoancorin、mouse anti-beta tubu?linⅢ及对应二抗采用cy3 donkey anti goat，647 donkey anti mouse，染核试剂DAPI，phalloidin)观察不同部位细胞，扫描电镜及制备原位超薄切片透射电镜观察体外培养新生小鼠基底膜内外毛细胞、螺旋缘内细胞、螺旋神经元细胞显微结构的改变。结果耳蜗基底膜在PET膜上贴附生长良好。各种细胞的微小结构和超微结构保持正常状态。结论PET滤膜能作为一种新颖的承载基底膜培养的介质。
作者：刘永泽；周函；麻晓峰；马登滨；高下 刊期： 2015年第01期
耳蜗内的细胞连接具有高度复杂性和有序性，它们是维持耳蜗结构和听觉功能的必要条件。本文将对耳蜗内的细胞连接蛋白进行分类，并简要综述连接蛋白在耳蜗中的功能和作用。
作者：王博；胡博华；杨仕明 刊期： 2015年第01期
《中华耳科学杂志》是中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊、中国科技核心期刊、中国科学引文数据库来源期刊（CSCD)。本刊诚约涉及耳科学领域的论文，请作者遵守以下投稿要求。
作者： 刊期： 2015年第01期
目的：探讨膜迷路积水患者眼肌前庭诱发肌源性电位(oVEMP)的临床特征。方法对40例膜迷路积水患者患者及38例（76耳）年龄、性别与之匹配的健康人进行眼肌前庭诱发肌源性电位（oVEMP）测试，分析对比oVEMPs的引出率及各参数指标。结果(1)病例组患耳和健耳的oVEMP引出率和振幅均低于对照组；（2）病例组患耳和健耳的oVEMP与对照组oVEMP引出率、峰-峰波幅差异有显著性意义；（3）病例组与对照组振幅比、不对称性比较差异具有著性意义结论 oVEMP可以作为迷路积水异常变化的客观量化评估指标，并迷路积水的确诊提供一定帮助。
作者：林少莲；林有辉；舒博；胡婕；林丁丁；叶胜难 刊期： 2015年第01期
突发性聋是耳鼻喉科常见的急症，目前临床上全身使用糖皮质激素治疗突发性聋获得较为肯定的疗效，但全身使用糖皮质激素的禁忌症及可能引起严重的不良反应，使得糖皮质激素鼓室给药治疗突发性聋逐渐得到应用并成为广泛关注的热点。本文将对糖皮质激素鼓室给药的疗效进行评估，以及对其临床运用的现况进行阐述。
作者：刘璐；钟时勋 刊期： 2015年第01期
目的：为50个无家族遗传史的聋儿家庭寻找可能的致聋基因突变，为这些家庭的再生育计划予以指导并进行风险评估。方法通过受检者静脉血提取基因组DNA，应用直接测序技术对GJB2、SLC26A4、线粒体DNA 12SrRNA的1494和1555等3个基因进行分析。结果50个家庭中明确遗传倾向的有22家，其中GJB2基因突变者12家，突变方式有235delC、176del16bp、299_300delAT、257C>G、427C>T、189del14bp、605ins46bp等；SLC26A4基因突变者10家，突变的方式有IVS7-2A>G、2168A>G、317C>A、413-414delT、589G>A、IVS15+5G>A、1229C>T、1594A>C、1975G>C、2027T>A。结论即使没有家族史，聋儿家庭再生育前也须行基因诊断，以降低再生育聋儿的风险。
作者：王淑娟；梁鹏飞；王剑；陈阳；邱建华 刊期： 2015年第01期
目的：研究PPARγ激动剂15D-PGJ2对H2O2诱导的离体小鼠耳蜗螺旋神经节氧化损伤的防护作用。方法分离生后3-5 d的小鼠耳蜗基底膜,培养24 h后不同浓度PPARγ激动剂15D-PGJ2(10μM,30μM)预处理24h,再分别加入含有不同浓度H2O2(3mM,6mM)的培养基培养24小时。采用NF200免疫荧光染色方法行离体耳蜗基底膜螺旋神经纤维免疫荧光染色，在免疫荧光显微镜下观察各组螺旋神经纤维形态以及密度改变。结果3mM H202单独作用于原代培养的基底膜螺旋神经节24h时，螺旋神经纤维呈节断状损失改变,神经纤维逐渐变细局部断裂,染色变淡,神经纤维数量明显降低。随着H202浓度的增加，受损伤的螺旋神经微丝数目呈明显增加趋势。10μM 15D-PGJ2预处理24小时能提高H202损伤后基底膜螺旋神经纤维的数量。30μM 15D-PGJ2预处理组螺旋神经纤维数量明显增加。随着15D-PGJ2浓度提高,其保护作用加强。结论 PPARγ激动剂15D-PGJ2可减轻H2O2诱导的离体小鼠耳蜗基底膜螺旋神经节氧化损伤。
作者：罗颜；曹忠胜；朱政文；袁辉 刊期： 2015年第01期
内耳离体培养在研究内耳细胞功能、内耳组织发育再生、细胞损伤退化等方面具有重要价值。但由于内耳的组织结构微小复杂，其取材和培养具有较大难度，使该技术的普及和应用受到一定限制。本文在简要点评不同内耳离体培养方法优劣的基础上，结合本实验室多年来积累的实践经验，详细介绍了新生大鼠各个内耳终器取材及培养的具体步骤。从解剖迷路到分离终器，从凝胶制备到标本铺放，都有详细的操作指南，本文还针对各环节中的技术动作和关键事项进行了具体探讨并配以指导图例，希望这些内容能够弥补以往文献中抽象简略的条款式步骤所造成的实验困难，为开展内耳器官培养研究的初学者提供一定的帮助。
作者：于进涛；丁大连；李鹏；高可雷；蒋海燕；孙虹；Richard J. Salvi 刊期： 2015年第01期
硫胺素即维生素B1，在机体中会被转化为辅酶参与能量、脂类及核酸代谢等生理过程。机体缺乏硫胺素可以导致韦尼克脑病（WE），其患者由于双侧对称的间脑和脑干损害，常常出现ABR的波间期延长并时有听力下降的症状。SLC19A2基因变异会导致硫胺响应性巨幼细胞贫血综合征（TRMA），其患者由于缺乏该基因编码的硫胺转运体THTR-1，使得内耳组织无法转运硫氨素，造成源于内耳的逐渐加重的感音神经性听力损失。由于听力下降不是WE中典型的症状，TRMA也是不常见的遗传疾病，使得听力学研究者们对它们不甚熟悉，但其实两者的听力损失恰好是由于听觉通路的不同环节对硫胺素的依赖程度不同而造成的。本文首次系统地将缺乏硫胺素所造成的听力损失串联起来。通过介绍其中听力损失的发生机制以及相关的研究模型，我们希望能将这些理论应用于听力学研究，帮助研究者们加深对中枢性听力损失的发病机制以及内耳不同组织间的相互作用的理解。
作者：高可雷；丁大连；李鹏；孙虹；Richard Salvi 刊期： 2015年第01期
目的：采用分子生物学技术方法探讨胆红素诱导神经母瘤细胞（SH-SY5Y）凋亡和茵陈水提物（Yincheng extract, YCE）的保护机制。方法噻唑蓝（MTT）观察茵陈提取物对SH-S5Y5细胞增殖影响，Western blotting观察NF-KB蛋白核质分布，免疫荧光显微镜观察JC-1探针标记线粒体电位变化，流式细胞仪Annexin-FITC/PI观察细胞凋亡，荧光定量PCR观察IL-1β、TNF-α变化。结果茵陈提取物浓度的时间依赖性提高胆红素对细胞增殖的抑制作用（p<0.05）。胆红素促进NF-KB核转移，茵陈提取物抑制NF-KB核转移。免疫荧光显微镜观察到胆红素处理组与正常组对比线粒体膜电位明显降低（p<0.05）表现早期凋亡特性。茵陈提取物抑制线粒体膜电位降低（p<0.05）。流式细胞Annexin-FITC/PI结果显示，胆红素诱导细胞凋亡，YCE保护胆红素诱导的凋亡。荧光定量PCR结果显示茵陈提取物抑制NF-KB转录因子调控的炎症相关蛋白IL-1β、TNF-α基因的表达（p<0.05）。结论胆红素明显诱导SH-S5Y5细胞凋亡，YCE能有效抑制NK-KB激活和抑制线粒体膜电位变化，呈现多靶点抑制胆红素诱导的细胞凋亡。
作者：张奕；梁勇；李鹏；符秋养；刘钊；李琦；张威；杨衬 刊期： 2015年第01期
2015年3月28日由北京协和医院、北京大学第三医院、中国聋儿康复中心、北京同仁医院、解放军总医院和北京儿童医院六家北京市听力诊断中心第一季度学术研讨会在北京儿童医院举行。80人参加了此次会议，在会议中，各位专家、讲者及与会人员就相关内容进行了认真的交流和学习，现将会议主要情况向大家介绍如下。
作者：杨扬；张杰 刊期： 2015年第01期
中华耳科学杂志
主管:解放军总医院
主办：解放军总医院耳鼻咽喉科研究所
