咸云淑；熊文；程刚
目的探讨dUTP/UDG反应体系在荧光定量PCR中抗PCR产物污染的能力.方法用TaqMan荧光定量PCR检测方法进行定量检测.将一系列不同浓度的含dUTP的HBV-DNA PCR扩增产物作为污染源,分别加至含dUTP/UDG的PCR反应体系和普通荧光定量PCR反应体系中,在荧光定量PCR仪上进行定量检测,从而得出含dUTP/UDG的PCR反应体系的抗污染能力.结果 1.佳抗污染实验条件:UDG酶含量0.05 U,消化时间37℃5 min,灭活时间92℃1 min;dUTP100%代替dTTP,四种底物浓度相等.2.含0.05 U的UDG抗污染反应体系对每管浓度为103拷贝/ml的污染物可完全消化,并随UDG含量的增高及消化时间的延长,抗污染能力增强.结论 dUTP/UDG反应体系的应用能有效防止PCR产物污染,但抗污染能力是有一定限度的,尚需加强实验室标准化管理,才能真正达到抗污染效果.
作者：王忠永；吴文兵；陶志华；陈晓东；戴菁 刊期： 2003年第02期
肝脏脂肪酶(HL)是涉及血浆脂蛋白尤其是高密度脂蛋白代谢的脂溶酶.主要是由肝脏合成.肝细胞合成分泌后,HL结合到肝血窦内皮细胞的表面.HL由476个氨基酸组成的蛋白质,基因位于染色体 15q21位,35 kb,9个外显子.已有很多证据表明HL启动子区域基因突变与HL活性和HDL-C浓度有关.是注射肝素后血管床释放的主要脂肪酶之一.HL能水解磷脂和甘油三脂,是脂酶超家族(包括脂蛋白脂肪酶和胰脂肪酶)成员之一.HL基因转录起始位点上游T514碱基突变与血浆HDL-C浓度升高有关.HL缺乏者HDL-C明显升高,而HDL-C与动脉粥样硬化(AS)的发病呈负相关,研究HL对于阐述AS发病机理有重要意义[1].
作者：丁庆；黄锡全；邵启祥；许化溪；李良菊；孙惠华；傅翠梅 刊期： 2003年第02期
目的评价检测CEAmRNA,CEA蛋白对良恶性胸腹水鉴别诊断的价值.方法采用RT-PCR方法对37例胸水和31例腹水CEAmRNA进行检测;CEA蛋白用时间分辨免疫荧光分析法测定.结果恶性胸水组中CEAmRNA,CEA蛋白阳性率明显高于良性胸水组(P<0.01).CEAmRNA,CEA蛋白检测胸水的敏感性分别是78.9%,68.4%,特异性都是94.4%.恶性腹水组中CEAmRNA阳性率是35.7%,与良性组间无显著差异.结论胸水中CEAmRNA,CEA蛋白测定可作为鉴别诊断恶性胸水的重要方法,但在腹水中无良好鉴别作用.
作者：陈杰；张雪华；张行；潘锵荣 刊期： 2003年第02期
目的建立一种稳定的人血清假性胆碱酯酶速率测定方法.方法测定反应的初速度,对反应体系的佳pH、离子强度、底物用量进行选择,并对所建立方法的性能,包括试剂的稳定性进行评价.结果采用双试剂连续监测法测定假性胆碱酯酶的活性,试剂I的适组成:含0.25mmol/L DNTB的磷酸盐缓冲液(80 mmol/L,pH 7.7);试剂II的适组成为:含60mmol/L碘化正丁酰硫代胆碱水溶液.液体试剂于4℃储存至少可以稳定一年.本法测定线性可达12000U/L,批内和天间变异小于2.5 %,和Roche公司出品的假性胆碱酯酶测定试剂所测参考值和对患者测定结果有很好的一致性.结论本法操作简便,试剂配制容易而且稳定性好,推荐作为常规测定的方法.
作者：杨宏云；徐国兵；夏铁安 刊期： 2003年第02期
目的建立胶体金免疫层析(GICA)同步检测血清中的甲、戊型肝炎病毒的IgM抗体的方法.方法采用胶体金标记鼠抗人IgM单克隆抗体,制成免疫层析测试条.血清中甲、戊型肝炎的特异性抗体与测试条上金标抗体结合后沿着硝酸纤维素膜移动与膜上固相包被的抗原(HAAg、HEAg)、抗体(羊抗鼠IgM)结合形成肉眼可见的红色线条.结果自制的GICA试条与EIA对比检测血清标本188份,各单项指标IgM-抗HAV、IgM-抗HEV两法总符合率依次为97.9%、98.4%,检测灵敏度可达2 ng/ml.结论用于同步检测血清中的甲、戊型肝炎病毒特异性抗体的GICA 试条的制备条件已基本建立;其检测结果特异性强、灵敏度高、操作方法简便快捷且无需特殊仪器设备.
作者：曲萌；毕胜利；董志恒 刊期： 2003年第02期
目的探讨肿瘤坏死因子(TNFα)和可溶性肿瘤坏死因子受体(sTNFR)对系统性红斑狼疮(SLE)疾病活动的价值. 方法分别采用狼疮活动标准记分(LACC)和SLE疾病活动指数(SLEDAI)判断狼疮活动和活动程度,采用双抗夹心ELISA法分别检测35例活动、25例稳定SLE和20例对照血浆TNFα、sTNFR1和sTNFR2水平. 结果 SLE患者血浆sTNFR水平显著高于正常对照组.狼疮活动、稳定及对照sTNFR水平差异显著;SLE活动期sTNFR1、sTNFR2升高者显著多于稳定期.sTNFR2水平与SLEDAI显著正相关(r=0.40,P<0.01);sTNFR1与sTNFR2显著正相关(r=0.62,P<0.001). 结论 SLE患者血浆sTNFR1与sTNFR1显著正相关(r=0.62,P<0.001).结论 SLE患者血浆sTNFR1、sTNFR2均升高,狼疮活动时sTNFR1、sTNFR2升高的患者明显增多,可作为判断狼疮活动的指标.
作者：汪国生；李向培；厉小梅；单曙光；钱龙；王玮；张宏 刊期： 2003年第02期
形肺炎是临床上较为常见的疾病之一,诊断有一定困难,影像学上与肺癌表现相似,易造成误诊,本文收集了15例,现报告如下.
作者：辛颖波；黄成 刊期： 2003年第02期
正常人精液刚射出时呈稠厚的胶冻状,在前列腺分泌的液化因子作用下精液液化,终形成一种粘稠液体.精液不液化或液化后粘度过高均可影响精子活力和存活率,导致不育.目前精液粘度的检测主要是形态学法和毛细管法,尚无理想的、公认的定量方法[1].旋转式粘度仪已广泛应用于血液粘度的测定,国内尚未见其用于精液粘度的定量.我们用旋转式粘度仪测定30例生育男性、60例不育男性患者精液粘度,并与精液其他参数进行分析,兹报道如下.
作者：郑晓群；杨军军；朱宏国 刊期： 2003年第02期
外科临床上经常遇到一些急性剧烈腹痛的病人,有时难以即时确诊,从而给治疗带来困难.为进一步提高外科对急性剧烈腹痛病人的诊断和治疗水平,我们将近期在临床上遇到的三例急性剧烈腹痛病历加以分析,以帮助外科医生增加对急性腹痛病人的了解,增加经验,提高临床治疗水平.
作者：宋燕；宋文哲；谭岩 刊期： 2003年第02期
目的探讨脑内小脓肿的诊断和佳治疗方法.方法收集近5年来诊治的52例脑内直径2.0 cm以下小脓肿资料,对病史特征、CT及MRI表现和治疗结果进行回顾性分析.结果 41例无感染史,45例以癫痫发作起病并为主要症状,通常没有局部神经受损体征.单纯抗菌疗法治愈50例,手术治疗2例,其中1例术后留有轻度神经功能障碍.结论脑内小脓肿的主要临床特征是癫痫发作,CT和MRI是诊断的关键手段,治疗上应首选非手术疗法,仅个别对抗菌疗法不敏感者才可考虑手术治疗.
作者：李秀臣；赵丛海；姜丽 刊期： 2003年第02期
目的观察死胎胸腺组织中HBVDNA表达的情况,探讨通过产妇传播到死胎胸腺组织中的HBV是否存在复制.方法采集40例乙型肝炎产妇产下的死胎,常规尸检,取胸腺组织.采用原位分子杂交法,检测其中的HBVDNA;回访产妇产前静脉血HBVM的检测结果.结果死胎胸腺组织中HBVDNA的检出率为27/40(68%)例.产妇产前静脉血HBV呈高、低和无复制状态时,胸腺组织中HB VDNA的检出率分别为2/4(50%)例、11/20(55%)例和14/16(88%)例;高、低、无复制者之间相互比较,差异不显著(P>0.05).HBVDNA颗粒分布在胸腺细胞浆内、细胞间和毛细血管内,少数分布在胸腺细胞核上.结论死胎胸腺组织中有HBV 复制;死胎胸腺组织中HBVDNA表达与产妇血清中HBV复制状态无关.
作者：赵伟；刘伟；罗婵；刘兰侠；王兰 刊期： 2003年第02期
壶腹周围癌是一组起源于瓦特氏壶腹,胰头部胰管上皮,胰头部胆总管以及覆盖于胆总管乳头上十二指肠黏膜或其腺体的肿瘤,其中前三者较常见.本文着重讨论前三种肿瘤,因其有相似的临床症状且解剖部位毗邻,鉴别时困难,螺旋CT双期增强扫描可清晰地显示各种肿瘤特征性CT表现,大大提高了术前诊断的准确率.
作者：毛淑华；张丽蓉；赵素岗 刊期： 2003年第02期
目的探讨烧伤病房感染菌分布及耐药状况,揭示医院感染的原因,提出防治措施. 方法对烧伤病房7年来660例医院感染阳性标本进行分析. 结果 660例阳性标本共检出感染菌762株,其中G-菌442株,占58 .0%,G+菌276株,占36.2%,真菌44株,占5.8%.金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌位居感染菌的前3位,分别占感染菌的20.9%、15.4%、9.1%.药敏分析显示,多种感染菌对常用抗生素呈现显著耐药. 结论金黄色葡萄球菌为烧伤感染的主要感染菌.烧伤患者皮肤粘膜损伤、抵抗力下降是造成烧伤感染的主要原因,而环境等因素为医院感染创造了条件.多数感染菌耐药情况严重.
作者：苏维奇；乔刚；陈华波；王照艳 刊期： 2003年第02期
在冠心病急性心肌梗死患者早期可出现血糖增高,其中一部分为急性心肌梗死合并糖尿病,另一部分则为应激性血糖升高.如何对二者进行区分,目前尚无明确的标准.但由于糖尿病是影响冠心病急性心肌梗死预后的重要因素之一,故区分上述两种情况对治疗及判定预后尤为重要.故我们对62例血糖升高的急性心肌梗死患者进行糖化血红蛋白测定,以求找到一种区分急性心肌梗死患者血糖升高的原因.
作者：张勇；娄冬梅 刊期： 2003年第02期
目的建立毛细管电泳定量检测血清中维生素K1和K2的方法.方法利用固相萃取方法提纯血清中维生素K,将20 mmol/L的四硼酸钠、10 mmol/L的SDS加入到含有80%甲醇、10%去离子水、10%乙腈的溶液中配置成缓冲液,在254 nm波长条件下对样本进行分离.结果利用这种方法对血清中维生素K1和K2进行了有效的分离,该方法的线性低于病理状态下血清中维生素K的浓度,回收率为97%～103%,日内精密度(CVs)和日间精密度分别为7.16%～8.03%和10.08%～11.3%.结论毛细管电泳方法测定血清中维生素K1和K2,具有快速、灵敏、定量检测等优点,可能成为测定人类血清中维生素K状态的有效检测方法.
作者：梁红艳；温洁；姜晓峰 刊期： 2003年第02期
目的探讨NO与癫痫的关系.方法选用SD大鼠56只,采用硫代氨基脲腹腔注射制作癫痫模型,分别取大脑皮层、海马、纹状体三个脑区的脑组织制成1:10(重量体积比)的组织匀浆.采用比色法及硫代巴比妥法检测上述各脑组织匀浆不同时点的亚硝酸根(NO2 )及丙二醛(MDA)的含量.结果癫痫初发、再发组中各脑区组织匀浆NO2 含量明显高于对照组(P＜0.01);而癫痫致死组中NO2 含量降至正常水平 (P＞0.05);在癫痫初发组中MDA含量与对照组比较无差异(P＞0.05),而癫痫再发、致死组中MDA含量显著升高(P＜0.05,P＜0.01);NG位硝基左旋精氨酸(L-NNA)干预组NO2 及MDA含量与对照组比较下降明显(P＜0.05),与相对应时点比较含量显著下降(P＜0.01) 结论 NO参与了癫痫发作的起动、传播和继发性脑损害的过程.
作者：吴浪龙；李祖荣 刊期： 2003年第02期
梗阻性黄疸的临床定位、定性诊断在其临床治疗中起着决定性作用,超声以其简便、经济、无创的优势为其他手段所不能替代并成为首选检查方法.本文对30例恶性梗阻性黄疸的超声声像图特征回顾分析并报告如下.
作者：杨冬艳；孙志霞；王辉；伊莲花；周金丹 刊期： 2003年第02期
目的探讨溶剂类型和pH选择对动物体液中苯二氮(艹卓)类药物提取回收率的影响.方法将大鼠连续2d每日注射苯二氮卓类药物2mg/kg, 2d后每日采其血液和尿液,选择不同的试剂,缓冲溶液和pH用UV法测定其体液中药物浓度和计算回收率.结果实验一组和二组、三组大鼠体液中安定、利眠宁和硝基安定以乙醚溶剂和用pH8为缓冲溶液的提取回收率高.结论动物体液中苯二氮卓类药物提取回收率决定于提取溶剂的类型和提取时缓冲溶液的pH的选择.
作者：卢英强；宣兆艳；崔佰君；徐晶华；刘莉；祁柏宇；胥耘荆 刊期： 2003年第02期
目的应用心肌细胞膜流动性评价间断冷晶体灌注、持续微温血灌注及微温不停跳直视手术技术的心肌保护效果.方法将我科30例先心病患者,随机分成持续微温血灌注组(CT组)、微温心不停跳组(OB组)、间断冷晶体灌注组(IC组),于开放升主动脉前取心肌标本,对照组(C组) 取自前三组中随机10例转流前心肌标本. 测每组的心肌细胞膜流动性, 将测得结果进行统计学方差分析.结果冷晶体组细胞膜流动性明显低于其他三组(P值均小于0.001);温血组与不停跳组无差别(P＞0.05);温血组与对照组无差别(P＞0.05);不停跳组低于对照组(P＜0.05).结论持续微温血灌注组的心肌细胞膜保护效果为满意,微温不停跳组次之,二者均明显优于冷晶体技术.
作者：林柏松；赵洪序；张秀和；陈立波；张柏民；姜亦忠 刊期： 2003年第02期
目的研究大鼠同种带瓣主动脉内皮细胞活性与60Co γ照射剂量之间的关系.方法分别采用300、600、900和1200 Gy四种剂量对大鼠同种带瓣主动脉进行照射及在液氮中深低温保存三个月,观察不同剂量照射后同种带瓣主动脉的病理变化和内皮细胞活性.结果大鼠同种带瓣主动脉内皮细胞活动度与照射剂量有关.在接受300和600Gy照射时内皮细胞活动度分别为(85.67±2.58)% 和(83.55±2.75)%,但它们与对照组相比无显著性差异(P>0.05);在接受900和1 200Gy照射时内皮细胞活动度分别为(72.29±1.96)% 和(32.57±3.48)%,它们与对照组相比有显著性差异(P<0.01).结论大鼠同种带瓣主动脉内皮细胞活动度与60Co γ照射剂量有关,600Gy可作为参考剂量用于降低同种带瓣主动脉免疫原性的研究.
作者：袁茂昆；赵洪序；张秀和 刊期： 2003年第02期
中国实验诊断学杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：吉林大学中日联谊医院 上海交通大学医学院附属瑞金医院
