张俊青；吴芹；龚其海；张锋；金凤；聂晶；石京山
目的 研究六味五灵片对四氯化碳(CCl4)所致大鼠肝纤维化的保护作用.方法 用CCl4-植物油溶液腹腔注射造模,将造模成功的大鼠随机分为5组,每组12只,分别为模型组、复方鳖甲软肝片组、六味五灵片低剂量组(4 g·kg-1)、六味五灵片中剂量组(8 g·kg-1)、六味五灵片高剂量组(16 g·kg-1).以血清中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)及羟脯氨酸(HyP)和肝组织中还原型谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)为评价指标,以肝组织Masson染色追踪其肝纤维化程度.结果 六味五灵片能明显降低CCl4所致的大鼠血清中ALT、AST、HA、LN和HyP的含量(P<0.05),降低肝组织中的MDA含量(P<0.05),明显升高肝组织中的GSH和SOD含量(P<0.05),肝组织纤维化变性明显减轻,肝组织结构比较完好.结论 六味五灵片对四氯化碳所致大鼠肝纤维化具有保护作用.
作者：赵松峰；阚全程 刊期： 2011年第06期
雪莲是菊科凤毛菊属雪莲亚属的草本植物,有除寒壮阳、调经止血的功效.近年国内有资料[1-2]表明雪莲有抗脂质过氧化和抗炎作用,而血脂异常和动脉炎性反应是动脉粥样硬化形成的始动因素.本研究探讨雪莲对动脉粥样硬化大鼠血脂和C反应蛋白的影响.
作者：王一凡；柳茵；刘维军；李琳 刊期： 2011年第06期
目的 探讨榄香烯(elemene,ELE)对人肝癌HepG-2细胞增殖、凋亡以及DNA拓扑异构酶Ⅰ和Ⅱ(TOPOⅠ、TOPOⅡ)表达的影响.方法 采用倒置显微镜观察ELE对HepG-2细胞形态学的影响;采用噻唑蓝还原法(MTT)观察ELE对HepG-2细胞增殖的影响;采用AnnexinV/PI双染色法检测细胞凋亡;采用RT-PCR法检测ELE对HepG-2细胞TOPOⅠ和TOPOⅡmRNA表达的影响;采用Western blot法检测ELE对HepG-2细胞TOPOⅠ和TOPOⅡ蛋白表达的影响.结果 ELE抑制HepG-2细胞增殖,诱导细胞凋亡,呈时间和剂量依赖性；下调TOPOⅠ、TOPOⅡmRNA及蛋白的表达,呈剂量依赖性.结论 ELE能抑制人肝癌HepG2细胞增殖,诱导细胞凋亡,下调TOPOⅠ、TOPOⅡ表达可能是其机制之一.
作者：龚敏；梁鑫淼；崔晓楠 刊期： 2011年第06期
目的 研究PI3K-Akt-mTOR信号通路对Foxp3基因表达的影响.方法 将SPF级昆明系小鼠60只随机分为对照组(A)和实验组(B、C、D),B、C、D 三组分别灌胃雷帕霉素0.2、0.4、0.6 mg·d-1,A组每天予以无菌水灌胃,共3周.3周后,无菌条件下心脏采血,EDTA抗凝,分离脾脏,制备单细胞悬液,采用流式细胞仪检测小鼠外周血和脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞水平(CD4+CD25+Treg细胞占CD4+ T细胞的百分比),RT-PCR检测小鼠脾细胞Foxp3mRNA的表达,免疫组织化学SP法染色观察小鼠脾脏中p-mTOR蛋白表达的变化,并利用计算机图像分析技术测量各实验组及对照组中p-mTOR蛋白表达的平均光密度.结果 Foxp3mRNA在实验组(B、C、D)小鼠脾脏中表达的程度分别为(0.4853±0.0574、0.7886±0.1085、0.9639±0.2015),明显高于对照组A(0.1345±0.0271)(P<0.05);实验组(B、C、D)小鼠脾脏中p-mTOR蛋白表达的平均光密度分别为(0.2326±0.0431、0.1156±0.0223、0.0556±0.0041),明显低于对照组A(0.4223±0.0534)(P<0.05);两指标经pearson相关分析,小鼠脾脏中Foxp3mRNA的表达与p-mTOR蛋白表达呈负相关.结论 抑制PI3K-Akt-mTOR信号通路会促使Foxp3的表达增强;PI3K-Akt-mTOR信号通路的激活程度与Foxp3的表达程度呈负相关.
作者：葛圣林；彭磊磊；张成鑫 刊期： 2011年第06期
目的 探讨乙型肝炎病毒(HBV)HBx蛋白(Hepatitis B virus X protein)对α干扰素(IFN-α)诱导的抗病毒蛋白的影响及相关机制.方法 以表达HBx蛋白的重组质粒FL1-145HBx转染人肝胚瘤细胞株HepG2细胞,经IFN-α处理后,RT-PCR法分析细胞内抗病毒蛋白MxA和JAK-STAT信号转导途径分子STAT1 mRNA表达水平,同时运用免疫印迹检测细胞内HBx、p-ERK、p-STAT1和t-STAT1等蛋白的表达.结果 转染细胞内MxA、STAT1的mRNA和p-STAT1、t-STAT1的蛋白表达水平明显减少(P＜0.05);而ERK抑制剂PD98059预处理后,转染细胞内MxA、STAT1 mRNA水平能够恢复至转染前的表达水平.结论 HBx蛋白很可能通过影响IFN-α JAK-STAT信号转导途径分子而抑制抗病毒蛋白MxA的表达;ERK信号转导途径的活化可能参与这一抑制过程.
作者：管世鹤；潘颖；杨凯；沈继龙；杨东亮 刊期： 2011年第06期
目的 分别观察神经分化培养液和视黄酸对人类胚胎干细胞分化的作用.方法 采用无滋养层细胞方法培养H9细胞,用化学成分确定的神经分化培养液诱导H9细胞神经分化,检测神经细胞特征蛋白表达;用视黄酸(RA)培养液诱导H9细胞分化,检测分化过程中内质网应激蛋白BIP蛋白表达变化.结果 神经分化培养液诱导H9细胞分化成神经细胞;RA诱导的H9细胞分化过程中,BIP的表达随分化上调.结论 人类胚胎干细胞分化提供了衍生神经细胞的潜在细胞来源和发育研究的平台.
作者：刘超；刘丽华；方圣云 刊期： 2011年第06期
随着化学用品、化学药物在人类生活中的广泛应用, 其安全问题已经引起世界各国的高度重视.据文献[1]报道,几乎所有的化学药物在对母体产生毒性的同时就引起胎儿发育减慢、畸形(四肢缺损、中枢神经系统缺损、无肾等)、甚至死亡.据不完全统计,因化学药物导致胎儿畸形发生率在国外占20%~30%,国内占14.8%[2].本文以Wistar孕鼠为对象,就环磷酰胺对胎鼠脑发育的影响进行了实验研究,以期为环磷酰胺的临床应用提供参考依据.
作者：谢明仁；郑高键；高国富；张璐；连秀珍；张琛 刊期： 2011年第06期
癫痫是一种由于大脑神经元异常同步放电引起的脑功能障碍综合征,发病机制迄今尚未完全阐明.近年来越来越多的实验与临床研究显示,星形胶质细胞在癫痫的病理过程中起到了重要作用,有可能成为药物干预癫痫的新靶点.该文综述了星形胶质细胞由于功能以及与神经元之间信号调控异常从而诱发癫痫的分子机制的研究进展.
作者：雷慧；李海涛 刊期： 2011年第06期
哺乳类动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)是调控蛋白质翻译起始阶段的一种蛋白激酶.mTOR在脑信号转导通路中的重要作用决定了mTOR可调控脑突触可塑性改变和长时记忆形成.该文就mTOR的结构、组成及近年来mTOR在脑记忆功能中的作用作了阐述和总结.
作者：随力；任杰 刊期： 2011年第06期
药物成瘾被认为是一种异常的学习记忆,主要特征表现为强迫性用药和易复发;其中高复吸率一直是药物成瘾研究和治疗的难题,消退性学习可以明显增加成瘾动物的戒断时间.因此,深入研究消退性学习的机制成为神经科学家关注的重点,消退性学习被认为是形成了一种新的抑制性记忆.该文主要就消退性学习可能涉及的核团以及谷氨酸受体和表观遗传学机制在消退学习研究中的主要发现作了简单的综述;另外还对以消退性学习为原理的暴露疗法在临床治疗中的应用进行了综述,并对未来的研究工作进行了展望.
作者：刘文涛；王维胜；何玲；刘景根 刊期： 2011年第06期
目的 研究蛇毒半胱氨酸蛋白酶抑制剂(sv-cystatin)基因转染对小鼠黑素瘤细胞B16F1的蛋白表达谱的影响,探讨其抗肿瘤机制.方法 采用双向电泳-质谱的蛋白质组学研究策略,分析稳定表达sv-cystatin的B16F1细胞系B16F1/cystatin与转染空载体的对照细胞B16F1/pcDNA3.1的蛋白表达谱的差别,筛选鉴定差异表达蛋白;用实时定量PCR和Western blot进一步确定实验结果;对蛋白组数据和前期基因组数据进行比较分析.结果 B16F1/cystatin和B16F1/pcDNA3.1细胞总蛋白的双向电泳图谱上共有匹配蛋白点(412±20)个,其中有11个蛋白的表达差异在2倍以上,5个上调,6个下调.这11个蛋白和1个仅在B16F1/cystatin中表达的蛋白经MALDI-TOF-MS分析,其中10个蛋白得到了鉴定,它们分属于代谢酶系、小G蛋白Ran调控分子、真核翻译因子、核苷酸激酶等.Western blot显示NM23和RhoGDI-beta的蛋白表达分别上调了(2.23±0.34)倍和(1.57±0.11)倍;实时定量PCR结果显示NM23、RhoGDI-beta、RANBP1的mRNA表达上调,eIF5A、eEF1-beta2、MDH1表达下调;与蛋白质组学研究结果一致.基于Gene Ontology的分析提示sv-cystatin作用的靶分子主要定位于细胞外周、质膜和细胞核,与转录、半胱氨酸蛋白酶活性、细胞凋亡等过程有关.结论 sv-cystatin可能通过调控抑癌基因NM23、RhoGDI等蛋白质发挥其抗肿瘤作用.sv-cystatin的主要靶分子可能是转录因子、分泌蛋白和质膜受体.
作者：齐元麟；纪明开；谢群；黄清玲；林建银 刊期： 2011年第06期
糖尿病心肌病(diabetic cardiomyopathy,DCM)指由糖尿病引起心脏微血管病变、心肌代谢紊乱和心肌纤维化等所致的心肌广泛结构异常的一种疾病状态[1].近年来的研究发现,血管紧张素(Ang-Ⅱ)增多、游离脂肪酸(IFFA)在DCM的发病中起着重要的作用.
作者：郭秋平；肖百全；杨威；雷夏凌；黄远铿；张寒冰 刊期： 2011年第06期
目的 研究匹诺塞林(PNCB)对海兔神经元共培养体系(SN/L7)的电生理效应,探讨可能的作用机制.方法 体外共培养海兔(aplysia)的感觉神经元(SN)和运动神经元(L7),使其互相接触形成突触连接.细胞培养至d 5,给予不同浓度的PNCB刺激,考察药物对SN/L7兴奋性突触后电位(EPSP)的影响,随后撤去药物,观察EPSP的恢复情况.另取细胞,在PNCB孵育后加入0.005 mmol·L-15-羟色胺(5-HT),观察SN/L7对5-HT的反应性的变化.结果 PNCB作用5 min,使SN/L7的EPSP幅值降低.药物浓度低于0.1 mmol·L-1时,作用强度与药物剂量呈负线性关系(r>0.995),在0.1~0.4 mmol·L-1的浓度范围内,作用强度与药物剂量呈正线性关系(r>0.998);撤去药物后,SN/L7的 EPSP幅值可恢复至初始值.PNCB使SN/L7对5-HT的反应性消失,撤去药物后,该反应性得以恢复.结论 PNCB可逆地抑制体外共培养的海兔SN/L7神经元突触的兴奋性传导,并可逆地抑制SN/L7对5-HT的反应性.这一效应可能与突触后膜的谷氨酸受体有关.
作者：应剑；胡江原；陈阳；Samuel Schacher；杜冠华 刊期： 2011年第06期
目的 研究缺氧/复氧对原代培养的小胶质细胞TLR4受体及其通路中MyD88、NF-κBp65、p-ERK1/2、p-IκBα和p38的影响和不同浓度栀子苷的干预作用,以揭示栀子苷治疗脑缺血的分子生物学机制.方法 原代培养小胶质细胞,采用缺氧/复氧的方式制备模型,用栀子苷125、250和500 μmol·L-1 3个浓度梯度进行干预,用逆转录聚合酶链反应检测小胶质细胞TLR4 mRNA的表达,Western blot检测TLR4、p-IκBα、p38、p-ERK1/2蛋白,免疫荧光双染观察MyD88和NF-κB;结果 缺氧/复氧激活了TLR4通路,并通过MyD88依赖途径激活了下游蛋白MyD88、NF-κBp65、p-ERK1/2、p-IκBα和p38;栀子苷250和500 μmol·L-1组抑制了通路蛋白的活性;结论 缺氧/复氧使TLR4通路蛋白磷酸化激活.栀子苷通过对TLR4通路蛋白的抑制发挥抗炎效应,促进脑缺血的恢复.
作者：侯金才；张鹏；刘建勋；韩笑；李丹；王秀辉 刊期： 2011年第06期
目的 观察金钗石斛生物总碱对外源性内毒素脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)激活大鼠大脑皮层星形胶质细胞 (astrocyte) 及诱导其产生和释放炎症介质的影响,探讨石斛生物总碱对星形胶质细胞的抗炎作用.方法 通过MTS检测细胞存活率,ELISA法检测TNF-α炎性因子蛋白的表达,实时定量多聚酶链反应 (real time RT-PCR) 检测炎症相关基因TNF-α、IL-6 mRNA的表达.结果 ① LPS刺激星形胶质细胞后,MTS检测吸光度明显升高,与正常组比较差异有显著性;② 金钗石斛生物总碱能够降低LPS所致的TNF-α蛋白的高表达(P<0.05);③ 金钗石斛生物总碱能够降低LPS诱导的星形胶质细胞吸光度的升高,同时明显抑制LPS所致的TNF-α、IL-6 mRNA的高表达.结论 金钗石斛生物总碱能够拮抗LPS所引起的炎症反应,其作用与抑制星形胶质细胞的激活及其炎症因子的释放密切相关.
作者：张俊青；吴芹；龚其海；张锋；金凤；聂晶；石京山 刊期： 2011年第06期
目的 建立离体和在体心肌细胞凋亡模型.方法 离体模型:原代培养大鼠心肌细胞进行饥饿处理24 h后,培养液换成Hank′s平衡液,同时进行缺氧处理,30 min后恢复到正常氧状态再培养2 h,固定,TUNEL染色,计数凋亡细胞;细胞总DNA抽提,agrose凝胶电泳,观察DNA ladder的产生.在体模型:150 g左右的WKY大鼠麻醉,固定,气管插管,开胸,冠状动脉左前降支结扎30 min,再灌注2 h后,心脏取出,冰冻切片,进行TUNEL染色,观察危险区细胞凋亡.结果 原代培养大鼠心肌细胞缺氧/复氧处理引起大量心肌细胞凋亡,TUNEL染色阳性,DNA电泳有明显梯状条带,在体大鼠心脏冠状动脉左前降支结扎/再灌注造成心肌梗死,梗死周边危险区有大量凋亡细胞产生.结论 离体细胞缺氧/复氧处理和在体大鼠心脏冠状动脉左前降支结扎/再灌注都能导致心肌细胞发生凋亡,这两种凋亡模型具有操作简单、成功率高等特点,可以用于心肌梗死机制的研究以及保护心肌药物的筛选.
作者：姚玲玲；黄晓伟；朱依纯 刊期： 2011年第06期
动脉粥样硬化 ( atherosclerosis,AS ) 是血管内皮损伤导致的慢性炎症反应性血管疾病,该文就AS炎性信号通路相关因子,如细胞间黏附分子-1 ( ICAM-1 )、血管细胞黏附分子-1 ( VCAM-1 )、核因子-κB ( NF-κB ) 和过氧化物酶体增殖物激活受体γ ( PPARγ ),以及中医药在抗AS中调节这些炎性信号通路方面研究进展做一综述.
作者：马悦颖；刘建勋 刊期： 2011年第06期
目的 探讨喹诺酮酰腙类化合物诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的作用.方法 用不同浓度的对甲氧基肉桂醛左氧氟酰腙(FQ-10)与SMMC-7721细胞体外培养.MTT法检测FQ-10对SMMC-7721细胞的增殖抑制作用; Hoechst 33258/PI双染荧光染色法、TUNEL法及琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡变化;高内涵活细胞成像系统测定细胞线粒体膜电位(△ψm)变化;Western blot方法测定caspase-9、caspase-8、caspase-3、p53、Bcl-2、Bax 蛋白表达.结果 FQ-10在0.625～10.00 μmol·L-1的浓度范围能抑制细胞增殖,呈时间、浓度依赖性;作用于细胞24 h的IC50值是4.40 μmol·L-1;各组FQ-10作用24 h后,细胞凋亡率高于对照组(P<0.05);琼脂糖凝胶电泳可见凋亡细胞典型的梯状DNA条带,并伴有线粒体膜电位降低.荧光染色观察细胞形态学变化,显示凋亡细胞染色质凝集,细胞核碎裂成碎片等典型细胞凋亡特征性变化,晚期凋亡细胞可见特异性PI染色.与对照组比较,FQ-10作用后p53、Bax、caspase-9、caspase-3蛋白表达量增加,其中caspase-9、caspase-3活性裂解片段明显增加,caspase-8无变化,而Bcl-2蛋白表达水平下降.结论 对甲氧基肉桂醛左氧氟酰腙能够激活线粒体凋亡通路,诱导人肝癌细胞凋亡.
作者：付建民；王德辉；孙金平；康玉华；皇甫超申；胡国强；刘彬 刊期： 2011年第06期
抗抑郁作用经典古方小补心汤由代赭石、旋复花、竹叶和淡豆豉4味中药组成,含有大量的黄酮类化合物.张有志等[1-2]研究结果表明,小补心汤乙醇提取物总黄酮(BX-2)具有良好的抗抑郁活性,且BX-2抗抑郁作用的效价强度比小补心汤明显提高,由于BX-2所含成分多,含量低,目前动物体内物质基础研究无法开展,为了研究其体内效应物质基础,本实验尝试用大鼠原位肠肝循环灌流模型对BX-2的体内效应物质基础进行初步研究.
作者：王素军；阮金秀；张振清；张有志；于能江；王桂香；莫李立 刊期： 2011年第06期
目的 研究白花丹素(plumbagin)对肝细胞的抑制作用及改构型酸性成纤维细胞生长因子(MaFGF)是否对白花丹素引起的肝细胞损伤有保护作用.方法 将原代培养的肝细胞接种于96孔培养板:① 72 h后加入一系列浓度的白花丹素,实验组在白花丹素作用24 h后加入不同浓度MaFGF,再培养24 h后用MTT法检测细胞存活率.②以白花丹素建立损伤模型,并在加药后24 h加入一定量的MaFGF,观察MaFGF对白花丹素诱导的肝细胞损伤保护作用.③ 采用倒置相差显微镜对细胞进行连续的观察并照相,记录对照组、致伤组、细胞生长因子组细胞形态的变化.结果 ① 成功建立白花丹素致肝细胞损伤的模型:白花丹素能明显抑制肝细胞的增殖,抑制效应与白花丹素的浓度相关.② 白花丹素+不同浓度的MaFGF对肝细胞的抑制率随MaFGF浓度的增大而减小;IC50随着MaFGF浓度的增大而明显增高,并呈现比较明显的剂量-效应特点.③ 白花丹素组与对照组比较,各生化和酶学指标差异均有显著性(P<0.01或P<0.05);白花丹素+MaFGF组与白花丹素组比较,SOD 活性升高、NO、MDA、LDH、GPT、GOT下降,差异有显著性(P<0.01或P<0.05).而白花丹素+MaFGF组与对照组比较,各生化和酶学指标活性或含量均未回落至正常水平,差异仍有统计学意义(P<0.01或P<0.05).结论 白花丹素对肝细胞有毒性作用;MaFGF 对白花丹素损伤的原代培养肝细胞有一定的保护作用.
作者：徐雅玲；黄巨恩；刘华钢 刊期： 2011年第06期
中国药理学通报杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国药理学会
