王玲;刘世坤;周于禄;裴奇
目的 探讨FLT3靶向RNA干扰对HL-60细胞增殖、凋亡及cyclin D1、cyclin A表达的影响.方法 体外构建FLT3靶向短发夹状干扰RNA(FLT3-shRNA),转染HL-60细胞,RT-PCR、流式细胞术(FCM)鉴定FLT3的表达;CCK-8法检测细胞增殖活力;FCM检测细胞周期;Annexin V染色法检测凋亡;RT-PCR及Western blot检测cyclin D1,cyclin A在mRNA、蛋白水平的表达.结果 FLT3-shRNA转染可下调FLT3的表达,它对FLT3 mRNA和蛋白的抑制率分别达(81.66±10.25)%,(76.76±11.23)%.FLT3表达下降后细胞增殖活力受到抑制,转染48 h抑制率达(31.66±2.97)%,72 h达(33.10±3.43)%;细胞生长曲线低平,缺乏指数增殖特征.与对照组比,转染48 h细胞周期重新分布,G0/G1期(58.48±6.17)%的明显上升,S期(27.72±5.10)%下降;细胞早期凋亡率(8.95±0.88)%上升;细胞内cyclin D1的mRNA、蛋白表达下降,cyclin A的表达无明显改变.结论 FLT3靶向RNA干扰通过下凋cyclin D1表达有效地抑制细胞增殖,具有潜在的临床应用价值.
作者:卢洁;盛光耀;岳保红;邹湘;徐学聚;赵晓明;白松婷;许培荣 刊期: 2007年第05期
目的 观察移动抑制因子(MIF)在实验性结肠炎的肠壁神经组织中的表达,探讨肠神经系统对结肠炎中MIF活性的调控作用.方法 以半抗原二硝基氯苯(DNCB)给经过致敏的大鼠和小鼠灌肠诱发结肠炎,用二苯基四氮唑溴盐(MTT)法测定肠系膜淋巴细胞中MIF活性、用免疫荧光双染方法测定肠神经元中MIF蛋白的表达,观察ip 6-羟基多巴(6-OHDA)和体外去甲肾上腺素(NE)培养对结肠炎时MIF活性的影响.结果 结肠炎大鼠肠壁神经元MIF蛋白的表达随DNCB灌肠剂量的增大而增强;6-OHDA(38~150mg·kg-1体重)能够进一步刺激结肠炎小鼠MIF活性的升高(ip 6-OHDA组与ip溶剂的结肠炎组相比,P<0.01);NE(1.0 nmol·L-1~1.0 mmol·L-1)体外可使结肠炎组的MIF活性升高,其反应幅度和敏感性大于对照组(两组相比,P<0.01).结论 DNCB引起的实验性结肠炎中MIF活性升高;正常的交感活动能够抑制结肠炎时的MIF活性.
作者:林萍;吴星宇;潘慧;胡胜娣;梅林 刊期: 2007年第05期
目的 研究2,3-吲哚醌(2,3-dioxoindoline,ISA)对人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y凋亡和端粒酶表达的影响.方法 体外培养人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y细胞,将SHSY5Y细胞随机分为对照组和ISA不同浓度(0、100、200、400μmol·L-1)处理组,采用Hochest 33258荧光染色和琼脂糖凝胶电泳分析细胞凋亡;采用Western blot检测凋亡抑制基因bcl-2、凋亡基因bax蛋白表达的变化;采用RT-PCR检测加药后SH-SY5Y bcl-2,bax及端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA表达水平的变化.结果 100、200、400 μmol·L-1ISA处理SH-SY5Y细胞48 h后,荧光染色可观察到明显的细胞凋亡的核浓缩、核碎裂形态;bcl-2 mRNA及蛋白表达逐渐减少(P<0.05),各组间比较差别有统计学意义;bax mR-NA及蛋白表达水平未见变化(P>0.05);hTERT mRNA表达水平降低(P<0.05),各组间差异比较有统计学意义;200、400μmol·L-1 ISA处理SH-SY5Y细胞48 h,琼脂糖凝胶电泳可见DNA梯带.结论 2,3-吲哚醌可能通过下调bcl-2和hTERT表达诱导SH-SY5Y细胞凋亡,并在一定浓度范围内呈浓度依赖关系.
作者:王娜;侯琳;祝兆怡;张金玉;鞠传霞;葛银林;岳旺 刊期: 2007年第05期
目的 研究中药露蜂房纯化蛋白(nidus vespae proteinⅡ,NVP-Ⅱ)对急性髓系白血病(AML)患者骨髓单个核细胞(BMMNC)的作用并探讨其机制.方法 采用NVP-Ⅱ在体外作用于AML患者BMMNC,经光镜、电镜、Hochest33258染色法、TdT缺口末端标记(TUNEL)技术等方法检测NVP-Ⅱ对AML患者BMMNC的影响.结果 不同浓度NVP-Ⅱ对AML患者BMMNC有不同程度的生长抑制和诱导凋亡作用.①光镜下观察到,与生理盐水对照组比较,NVP-Ⅱ处理组AML患者BMMNC数量明显减少,胞质内颗粒增多,并有较多的细胞碎片.②透射电镜下发现,NVP-Ⅱ处理组AML患者BMMNC细胞核染色质浓缩、碎裂,靠核膜边集呈块状,并形成凋亡小体;线粒体基质深染,呈现空泡样变及髓样变.③Hochest33258染色法显示,NVP-Ⅱ处理组AML患者BMMNC核染色质高度凝聚,致密浓染,或裂解呈碎块状,边缘光滑清晰.④TUNEL检测见阳性细胞核深染,NVP-Ⅱ处理组与生理盐水处理组比较,凋亡细胞明显增多(P<0.05).结论 NVP-Ⅱ可抑制AML患者BMMNC生长并诱导其凋亡.
作者:时彦;张圣明;张雪莉;吴洪娟;李峰杰 刊期: 2007年第05期
目的 研究鞘内注射(it)米诺环素(minocycline,M)对大鼠完全氟氏佐剂(complete Freunds adjunvant,CFA)性关节炎性痛觉过敏的作用.方法 蛛网膜下腔置管成功的♂SD大鼠,在右踝关节外侧皮下注射50 μl CFA前30 min分别it生理盐水(NS)或12.5、25、50 μg的米诺环素,it每天1次,持续7 d,观察热刺激回缩潜伏期(paw withdrawal thermal latency,PWTL)14 d.CFA致炎后2 d、6 d,it米诺环素50μg,观察24 h的PWTL变化;右踝关节外侧皮下注射50 μlNS前30 min it米诺环素50 μg、NS 20 μl,观察24 h的PWTL变化.结果 米诺环素it不改变无炎症大鼠的PWTL;CFA致炎后PWTL缩短,米诺环素抑制致炎后PWTL的减少似呈剂量依赖性;预先及CFA致炎后2 d米诺环素it可抑制PWTL的减少,d 6则无明显影响.结论 米诺环素it可减轻炎性痛觉过敏;对已存在的痛觉过敏,早期it作用较强,后期it则无明显作用.
作者:成浩;杨建平;张艳兵;王丽娜;张慧娟 刊期: 2007年第05期
目的 研究阿魏酸钠(sodium ferulate,SF)诱导药理性预适应对离体大鼠心脏的保护作用及其机制.方法 将大鼠离体心脏随机分5组:正常组(Control组,富氧液灌注100min);缺氧/复氧损伤组(I/R组,稳定灌流30 min,缺血停灌40 min后复灌30 min);缺血预适应组(IP组,行3次停灌5min、复灌5 min刺激后,停灌40 min、复灌30 min);SF组(用含有1.69 mmol·L-1 SF的灌流液灌流15 min后改用正常灌流液灌流15 min,后行停灌40 min、复灌30 min);格列本脲组(Gli组,用格列本脲30 μmol·L-1和SF 1.69 mmol·L-1合用灌流心脏15 min后改用正常灌流液灌流15 min,后行停灌40 min、复灌30 min).结果 与I/R组相比1.69mmol·L-1SF能明显改善心功能、减少心律失常发生率及严重程度、降低心肌组织钙超载、保护心肌Na+,K+-ATP酶、Ca2+ATP酶活性.30 μmol·L-1格列本脲与SF合并使用后,上述心肌保护作用则部分取消.结论 SF预处理能改善心功能,抗心律失常、抗钙超负荷,其作用机制至少部分与KATP通道开放有关.
作者:刘季春;万力;邵立建;何明 刊期: 2007年第05期
目的 观察卡介菌多糖核酸(BCG-PSN)对小鼠哮喘胸腺活化调节趋化因子(thymus and activation regulated chemokine,TARC)及mRNA表达的影响.方法 以卵清白蛋白(OVA)致敏和激发建立小鼠哮喘模型.30只清洁级♂Balb/c小鼠随机分为3组,每组10只:正常对照组、哮喘组、BCG-PSN治疗组.末次激发24 h后留取支气管肺泡灌洗液(BALF)及肺组织.BALF行细胞计数及分类;应用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定BALF中TARC、IL-4和IFN-γ蛋白的浓度;光镜观察肺组织病理变化;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定肺组织中TARC mRNA的表达;采用免疫组织化学法测定肺组织中TARC蛋白的表达.结果 与正常对照组相比,哮喘组BALF中细胞总数、嗜酸粒细胞(EOS)绝对值及百分比、TARC和IL-4浓度、肺组织中TARC蛋白及mRNA的表达均增高,BALF中IFN-γ浓度低于正常对照组.经BCG-PSN干预后,BALF中细胞总数、EOS绝对数及百分比,TARC、IL-4浓度较哮喘组均下降,肺组织中TARC蛋白及mRNA的表达较哮喘组均下调,BALF中IFN-γ浓度较哮喘组增高.免疫组化显示TARC蛋白主要表达于支气管上皮细胞.BALF中TARC浓度与EOS绝对值、IL-4浓度呈正相关.结论 卡介菌多糖核酸可降低TARC在肺组织中的表达,降低气道炎症.
作者:郑吉善;李昌崇;陈庆武;苏苗赏;张维溪;张海邻;董琳;陈小芳;罗运春;张正霞 刊期: 2007年第05期
目的 研究丹皮酚(paeonol,Pae)在体内外对人食管癌细胞Eca-109的抑瘤作用及其对细胞凋亡的影响.方法 采用噻唑蓝(MTF)体外试验法和灌胃给药体内抗肿瘤试验.光镜及电镜观察各组的肿瘤组织的形态学变化.应用末端脱氧核苷酸转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法测定细胞凋亡指数.结果 丹皮酚在体外对Eca-109细胞有明显的细胞毒作用,半数抑制浓度(IC50)为0.342 mmol·L-1;体内灌胃给予丹皮酚25、50、100和200 mg·kg-1对裸鼠移植人食管癌Eca-109的抑制率分别为10.67%、23.54%、27.91%和34.46%;顺铂5 mg·kg-1组抑瘤率为58.71%;丹皮酚在100 mg·kg-1剂量下与顺铂5 mg·kg-1联合用药抑制率为77.91%.光镜下用药组可见较多凋亡的肿瘤细胞.透射电镜下可见肿瘤细胞核染色质浓缩边聚、胞质浓缩、核碎裂以及凋亡小体形成等典型的凋亡表现.用药组凋亡指数较对照组明显增加.结论 丹皮酚在体内外具有抑制人食管癌Eca-109细胞增殖及诱导其凋亡作用.
作者:杨震;孙国平;徐淑萍;宛新安;桂双英 刊期: 2007年第05期
目的 研究穿心莲二萜类化合物(DAP)对B16细胞致敏小鼠脾脏CTL杀伤活性的影响.方法 将♂ BALB/c小鼠分为对照组、致敏组、50 mg·kg-1及150 mg·kg-1DAP给药组,制备小鼠脾脏淋巴细胞悬液,流式细胞术分析T淋巴细胞亚群,乳酸脱氢酶(LDH)法和DiO/PI双染色法分别测定CTL杀伤活性.结果 50 mg·kg-1及150 mg·kg-1DAP口服给药可以增加B16细胞致敏小鼠脾脏淋巴细胞中T细胞及CD8+T细胞比例,降低T细胞中CD4+/CD8+比值并增强CTL对B16细胞的杀伤活性.结论 DAP可增加B16细胞致敏小鼠脾脏T细胞比例及提高CTL杀伤活性.
作者:李满妹;徐炎;程燕;张坤;吕艳青;姚新生;栗原博 刊期: 2007年第05期
蛋白激酶CK2是一种在真核细胞中普遍存在的信使非依赖性丝/苏氨酸蛋白激酶,可横向介导多条信号途径,以级联和垂直的方式发挥作用,调节细胞的生长和凋亡.其精细调控一旦失衡,可诱发肿瘤;而其特异性抑制剂和以其为靶向的基因治疗可抑制肿瘤.以CK2调节为中心的致瘤机制研究和以CK2为靶点的肿瘤药物开发具有重要的临床应用价值.
作者:阮杰;刘新光;梁念慈 刊期: 2007年第05期
目的 探讨虎杖苷对缺血缺氧作用下心肌细胞蛋白激酶C(PKC)活性的影响及其抗休克的机制.方法 取大鼠乳鼠心室肌培养心肌细胞,用Koyama方法复制心肌细胞缺血缺氧模型.用γ-闪烁计数仪测定PKC的活性.结果 正常状态下心肌细胞胞质PKC经虎杖苷(PD)刺激后活性下降(vs正常组P<0.05),但胞膜的PKC活性上升(vs 正常组P<0.05).缺血缺氧后胞质和胞膜PKC的活性均下降(vs正常组P<0.05),再经PD处理后胞质胞膜的PKC活性均上升(vs缺血缺氧组P<0.05,vs正常组P>0.05).结论 PD对缺血缺氧作用下的心肌有保护作用,可能是通过调节PKC的活性来发挥作用的,这可能是PD抗休克的分子机制之一.
作者:王月刚;金春华;吴平生 刊期: 2007年第05期
血管紧张素(1-7)是RAAS重要的生物活性物质之一,具有扩血管、抗增殖和抗凝血等效应,能拮抗血管紧张素Ⅱ等物质的生物活性.它可经血管紧张素Ⅰ、Ⅱ转化而来.血管紧张素转换酶2是Ang(1-7)的限速酶.Ang(1-7)主要通过其G-蛋白偶联受体Mas产生作用.
作者:杜军;陈长勋 刊期: 2007年第05期
糖尿病人的低生活质量及高死亡率大都与血管并发症有关.晚期糖基化终产物(AGEs)在糖尿病血管并发症中具有重要作用,其导致的血管内皮细胞功能紊乱是许多血管病变的起因,从而成为引发各种糖尿病并发症的原因之一.研究显示,AGEs抑制剂与裂解剂能够预防或逆转各种糖尿病并发症,这两种药物的研究及应用将为糖尿病血管并发症的治疗提供新的选择.
作者:张冰;程罡;王莉莉;李松 刊期: 2007年第05期
目的 研究RGD(精氨酸-甘氨酸-天门冬氨酸)肽衍生物-AoGDW(ω-氨基辛酸-甘氨酸-天门冬氨酸-色氨酸)抑制血小板聚集的作用机制.方法 采用双色荧光标记以及流式细胞技术检测AoGDW肽对CD41抗体与血小板GPⅡb/Ⅲa受体结合的抑制作用以及对血小板膜上P-选择素表达的影响.结果 随着AoGDW肽浓度的增加,CD41抗体与活化血小板GPⅡb/Ⅲa受体结合率呈现下降趋势,相对于阴性对照组,P<0.01.但CD41抗体与静止血小板GPⅡb/Ⅲa受体的结合率以及CD62p抗体与静止血小板P选择素的结合率与阴性对照组相比,P>0.05.结论 AoGDW肽是通过占据血小板上纤维蛋白原的结合位点即活化的GPⅡb/Ⅲa受体而发挥抑制血小板聚集的作用,并且不具有活化血小板的作用,是一种选择性的GPⅡb/Ⅲa受体拮抗剂.
作者:王晓霞;李晓钟;刘红林;解军;张悦红;王惠珍;牛勃 刊期: 2007年第05期
目的 探讨淫羊藿苷对异丙肾上腺素(ISO)致大鼠急性心肌缺血的作用.方法 淫羊藿苷(12、6、3 mg·kg-1)静脉注射给药5 d,采用ISO(30 mg·kg-1,每日1次,连续2 d)sc诱导大鼠急性心肌缺血模型,观察大鼠心电图的变化,测定血清中乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)的含量,测定心脏指数(HW/BW和LVW/BW)和心肌梗死面积(IS/V%).结果 和模型组相比,淫羊藿苷(12、6、3 mg·kg-1)均能有效对抗心电图T波和J点的变化,降低血清中LDH、SOD、MDA和NO的含量(P<0.01或P<0.05),降低心脏指数(P<0.01或P<0.05)和心肌梗死面积(P<0.01).结论 淫羊藿苷对ISO所致大鼠急性心肌缺血有一定的保护作用.
作者:潘志伟;王秋娟;杨涓;孔令义;王蓓 刊期: 2007年第05期
目的 观察多巴胺(dopamine,DA)及其DA受体拮抗剂氟哌利多对急性吗啡成瘾大鼠尾核中痛兴奋神经元(PEN)电活动的影响.方法 腹腔注射递增剂量的盐酸吗啡使Wistar大鼠形成吗啡依赖. 实验以电脉冲刺激大鼠坐骨神经作为伤害性痛刺激,用玻璃微电极记录尾核中PEN的放电变化.结果 DA可使吗啡成瘾大鼠PEN的兴奋性降低.氟哌利多可以逆转DA对吗啡成瘾大鼠PEN的作用.结论 DA对吗啡成瘾大鼠尾核中PEN有抑制作用.这种作用可以被DA受体拮抗剂阻断.
作者:张颖;苏洁;徐满英 刊期: 2007年第05期
细胞粘附分子是一类重要的膜表面蛋白,参与机体多种生理功能.该文从粘附分子与肿瘤转移的过程,较全面的阐述了粘附分子与肿瘤转移的关系,为深入研究粘附分子在肿瘤转移过程的作用,开发肿瘤治疗新思路提供理论依据.
作者:李璘;朱荃;陆茵 刊期: 2007年第05期
目的 研究氨己烯酸对自发性癫痫大鼠的小发作和大发作的作用.方法 通过在自发性癫痫大鼠大脑海马和皮质部位安插电极,观察口服氨己烯酸后对自发性癫痫大鼠的脑电图的影响.结果 口服氨己烯酸(100 mg·kg-1)后3、4、5 h癫痫小发作的出现频率分别下降到给药前的(54±5)%、(41±9)%和(34±4)%(P<0.01).氨己烯酸使大发作的出现频率分别下降到给药前的(68±13)%、(39±13)%和(21±6)%(P<0.01).氨己烯酸的抑制效应能被GABAA受体特异性拮抗剂荷包牡丹碱拮抗.结论 氨己烯酸具有明显的对抗自发性癫痫大鼠的小发作和大发作的作用,对癫痫大发作的抑制效应是通过GABAA受体发挥作用的.
作者:聂宏光;蔡际群;姚维范 刊期: 2007年第05期
目的 研究内洋地黄素特异性拮抗剂地高辛抗血清对大鼠心肌缺氧复氧损伤心功能的影响及其作用机制.方法 制备离体大鼠心肌缺氧复氧损伤模型,60只SD大鼠随机分为6组,每组10只.对照组,缺氧复氧组,维拉帕米组,小剂量、中剂量、高剂量地高辛抗血清组.连续纪录各组ECG、HR、LVDP、±dp/dtmax.各组于复氧结束后测定心肌组织中内洋地黄素水平、线粒体内Ca2+含量和冠脉流出液中NO含量.电镜观察心肌线粒体及血管内皮细胞结构的变化.结果 缺氧复氧组心肌组织内洋地黄素水平升高,线粒体内Ca2+含量升高,NO含量降低,心肌线粒体及内皮细胞明显损伤,心功能明显受抑制.中、高剂量地高辛抗血清能降低心肌组织内洋地黄素水平和线粒体内Ca2+含量,升高NO含量,减轻缺氧复氧所致的心肌线粒体及内皮细胞的损伤,改善心肌收缩和舒张功能.结论 地高辛抗血清抑制心肌缺氧复氧损伤所致的心功能减弱,其机制可能与拮抗内洋地黄素,减轻线粒体内Ca2+超载,升高NO浓度,保护了线粒体及内皮细胞功能有关.
作者:汪和贵;柯永胜;王德国;杨尚印 刊期: 2007年第05期
目的 探讨士的宁(strychnine,Stry)敏感的甘氨酸受体(strychnine-sensitive glycine receptor,GlyR)与吸入麻醉药异氟烷、恩氟烷、七氟烷和乙醚催眠、镇痛作用的关系.方法 建立小鼠腹腔注射吸入麻醉药催眠、镇痛模型,在催醒和热板实验中分别观察侧脑室(intracerebroventricular,icv)或鞘内(intrathecal,it)注射不同剂量士的宁对小鼠睡眠时间(sleeping time,ST)和热板疼痛指数(pain index in hot-plate test,HPPI)的影响.结果 催醒实验中,士的宁1、2、4 μg icv对上述4种吸入麻醉药的ST均无影响(P>0.05);热板实验中,士的宁0.1、0.2、0.4 μg it能够剂量依赖性地减少吸入麻醉药恩氟烷、七氟烷和乙醚镇痛小鼠的HPPI(P<0.05,P<0.01);士的宁0.1 μg it对异氟烷镇痛小鼠的HPPI没有影响(P>0.05),0.2、0.4 μg it可减少异氟烷镇痛小鼠的HPPI(P<0.05,P<0.01).结论 士的宁敏感的甘氨酸受体是吸入麻醉药异氟烷、恩氟烷、七氟烷和乙醚镇痛作用的重要靶位,但与其催眠作用关系不大.
作者:陈龚;李惠萍;戴体俊;曾因明 刊期: 2007年第05期