王晶；路毅；邢秀荣；秦俭；王蓉；盛树力
目的 观察异丙酚对离体大鼠心肌缺血/再灌注损伤的影响并从氧化应激和线粒体介导的凋亡方面探讨其作用机制.方法 应用langendorff离体心脏灌注系统建立心肌缺血/再灌注损伤模型.40只SD大鼠随机分为正常对照组、缺血/再灌注模型(I/R)组、异丙酚15、30、60 μmol·L-1组.除正常对照外,各组分别平衡灌注20 min后,常温全心停灌25 min,再灌注30 min.Powerlab/8s仪记录各组平衡末、缺血前及再灌30 min时的各项心功能指标并测定冠脉流出液中乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸肌酸激酶(CK)活性;检测心肌线粒体活力、膜肿胀度、锰超氧化物岐化酶活性(MnSOD)和丙二醛(MDA)含量;原位末端转移酶标记法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡;流式细胞术检测Bcl-2和Bax的表达,免疫组化法测定天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-3,9,8蛋白的表达.结果 与I/R组相比,异丙酚30、60 μmol·L-1能明显改善缺血/再灌后的心功能,减弱冠脉流出液中LDH、CK的活性(P＜0.05);心肌线粒体活力有所恢复,膜肿胀度减轻,升高Mn-SOD活性,MDA生成明显减少(P＜0.05),心肌细胞凋亡明显减少,Bcl-2表达上调,Bax表达下调,Caspase-3,9阳性表达细胞数明显减少(P＜0.05).结论 异丙酚明显减轻缺血/再灌所致的心肌线粒体的过氧化损伤,抑制线粒体途径的凋亡,可能是其心肌保护作用机制之一.
作者：解丽君；张建新；李兰芳 刊期： 2007年第05期
目的 探索分叉双歧杆菌的完整肽聚糖(WPG)对大鼠腹腔巨噬细胞ERK1/2的调控作用.方法 以WPG刺激大鼠腹腔巨噬细胞或以PKC抑制剂Chelerythrine预先孵育巨噬细胞,再用WPG刺激巨噬细胞,后用Western blot检测巨噬细胞ERK1/2的表达水平.结果 未受WPG刺激的正常大鼠腹腔巨噬细胞ERK1/2处于低活性状态,给予WPG刺激巨噬细胞,其磷酸化ERK1/2的蛋白表达水平明显高于对照组(P＜0.01).但经Chelerythrine预先孵育巨噬细胞后,其磷酸化ERK1/2的蛋白表达水平明显低于WPG刺激组(P＜0.01).结论 分叉双歧杆菌的WPG可通过PKC激活巨噬细胞的ERK1/2.
作者：王立生；杨林；李迎雪；朱忠生；荀安营；朱惠明 刊期： 2007年第05期
目的 探讨FLT3靶向RNA干扰对HL-60细胞增殖、凋亡及cyclin D1、cyclin A表达的影响.方法 体外构建FLT3靶向短发夹状干扰RNA(FLT3-shRNA),转染HL-60细胞,RT-PCR、流式细胞术(FCM)鉴定FLT3的表达;CCK-8法检测细胞增殖活力;FCM检测细胞周期;Annexin V染色法检测凋亡;RT-PCR及Western blot检测cyclin D1,cyclin A在mRNA、蛋白水平的表达.结果 FLT3-shRNA转染可下调FLT3的表达,它对FLT3 mRNA和蛋白的抑制率分别达(81.66±10.25)%,(76.76±11.23)%.FLT3表达下降后细胞增殖活力受到抑制,转染48 h抑制率达(31.66±2.97)%,72 h达(33.10±3.43)%;细胞生长曲线低平,缺乏指数增殖特征.与对照组比,转染48 h细胞周期重新分布,G0/G1期(58.48±6.17)%的明显上升,S期(27.72±5.10)%下降;细胞早期凋亡率(8.95±0.88)%上升;细胞内cyclin D1的mRNA、蛋白表达下降,cyclin A的表达无明显改变.结论 FLT3靶向RNA干扰通过下凋cyclin D1表达有效地抑制细胞增殖,具有潜在的临床应用价值.
作者：卢洁；盛光耀；岳保红；邹湘；徐学聚；赵晓明；白松婷；许培荣 刊期： 2007年第05期
目的 探讨灯盏花素对培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)胞内Ca2+水平([Ca2+]i)的调控作用.方法 采用新一代Ca2+荧光探针Fluo-3/AM标记培养的HUVECs,激光共聚焦显微镜检测细胞胞内钙荧光信号,观察灯盏花素对培养的HUVECs胞内Ca2+水平的调控作用.结果 在胞外有Ca2+或无Ca2+的情况下,灯盏花素均可引起[Ca2+]i的短暂性升高;灯盏花素的Ca2+释放作用与钙泵抑制剂CPA存在着交迭;灯盏花素能够抑制由KCl所引起的[Ca2+]i的升高;灯盏花素对胞内Ca2+池耗竭后胞外复Ca2+所引起的钙内流无明显阻断作用.结论 灯盏花素可引起胞内Ca2+池的Ca2+释放,其释放的Ca2+来自CPA敏感的Ca2+池.灯盏花素也可抑制经电压依赖性Ca2+通道的Ca2+内流,对Ca2+池耗竭后引起的Ca2+内流通道无明显阻断作用.
作者：潘雪刁；朱邦豪；马丽；刘捷 刊期： 2007年第05期
肝纤维化是指由多种慢性疾病引起的肝脏持续的创伤修复反应而导致的细胞外基质(ECM)过度沉积和肝脏功能的受损.激活的肝星状细胞(HSC)是促进ECM过度沉积的主要细胞.转化生长因子β(TGFβ)可激活HSC和调节ECM的合成和沉积,被认为是肝纤维化中关键的因素.介导TGFβ信号进入细胞核内的主要途径是Smad转导通路,而越来越多的证据表明,非Smad途径也参与了TGFβ的信号转导.TGFβ信号通路对维持内环境的稳态非常重要并涉及多种病理状态.这种具有多重生物活性的细胞因子对正常健康的维持同样非常重要,所以在TGFβ信号转导中通过阻断对纤维化的形成具有特异性作用的下游通路且不影响其他的生物活性而治疗肝纤维化具有重要的挑战性.
作者：刘浩；魏伟 刊期： 2007年第05期
目的 研究中药露蜂房纯化蛋白(nidus vespae proteinⅡ,NVP-Ⅱ)对急性髓系白血病(AML)患者骨髓单个核细胞(BMMNC)的作用并探讨其机制.方法 采用NVP-Ⅱ在体外作用于AML患者BMMNC,经光镜、电镜、Hochest33258染色法、TdT缺口末端标记(TUNEL)技术等方法检测NVP-Ⅱ对AML患者BMMNC的影响.结果 不同浓度NVP-Ⅱ对AML患者BMMNC有不同程度的生长抑制和诱导凋亡作用.①光镜下观察到,与生理盐水对照组比较,NVP-Ⅱ处理组AML患者BMMNC数量明显减少,胞质内颗粒增多,并有较多的细胞碎片.②透射电镜下发现,NVP-Ⅱ处理组AML患者BMMNC细胞核染色质浓缩、碎裂,靠核膜边集呈块状,并形成凋亡小体;线粒体基质深染,呈现空泡样变及髓样变.③Hochest33258染色法显示,NVP-Ⅱ处理组AML患者BMMNC核染色质高度凝聚,致密浓染,或裂解呈碎块状,边缘光滑清晰.④TUNEL检测见阳性细胞核深染,NVP-Ⅱ处理组与生理盐水处理组比较,凋亡细胞明显增多(P＜0.05).结论 NVP-Ⅱ可抑制AML患者BMMNC生长并诱导其凋亡.
作者：时彦；张圣明；张雪莉；吴洪娟；李峰杰 刊期： 2007年第05期
目的 比较15-脂氧酶的两种同工酶:15-lipoxygenase-1(15-LO-1), 15-lipoxygenase-2(15-LO-2)在正常对照组和慢性缺氧组中肺动脉表达的差异,从而探讨两种同工酶在缺氧性肺血管收缩中的作用.方法 18只SD大鼠随机分为两组(n=9),正常对照组和缺氧组.通过动物乏氧箱建立大鼠慢性缺氧模型.分别用免疫组化法、原位杂交法、Western blot法比较两种同工酶在两组中表达的差异.结果 ①15-LO-1在正常对照组肺动脉有蛋白质的表达,而15-LO-2在正常对照组蛋白质水平不表达.②缺氧时15-LO-1蛋白质表达明显强于在正常对照中的表达(P＜0.01).③缺氧时15-LO-2在蛋白质水平表达,但15-LO-1蛋白质水平表达强于15-LO-2.④15-LO-1,15-LO-2在正常对照组和慢性缺氧组均有mRNA水平的表达,而且在缺氧组中的表达高于对照组.结论 缺氧同时诱导15-LO-1,15-LO-2在肺动脉中表达增加,从而使二者在缺氧性肺血管收缩中发挥一定作用.
作者：刘晔；韩维娜；郭守利；吕昌莲；朱大岭 刊期： 2007年第05期
目的 以耐阿霉素人乳腺癌细胞系MCF-7/ADM为对象,验证华蟾素(cinobufacine,Cino)能否逆转其对阿霉素(ADM)的耐药性.方法 采用MTT法检测药物细胞毒性作用及耐药细胞逆转倍数,高效液相色谱法检测细胞内ADM的浓度,流式细胞术测定P-糖蛋白(permeability glycoprotein,P-gp)的表达.结果 Cino 15 mg·L-1能增加MCF-7/ADM细胞对ADM的敏感性,使ADM的半数抑制浓度(IC50)由38.14 mg·L-1降至12.93 mg·L-1;能提高ADM在MCF-7/ADM细胞内的浓度,降低MCF-7/ADM细胞P-gp的表达.结论 研究表明Cino能部分逆转MCF-7/ADM细胞的MDR,其机制与抑制P-gp的功能与表达,增加细胞内ADM的含量有关.
作者：王玲；刘世坤；周于禄；裴奇 刊期： 2007年第05期
目的 研究RGD(精氨酸-甘氨酸-天门冬氨酸)肽衍生物-AoGDW(ω-氨基辛酸-甘氨酸-天门冬氨酸-色氨酸)抑制血小板聚集的作用机制.方法 采用双色荧光标记以及流式细胞技术检测AoGDW肽对CD41抗体与血小板GPⅡb/Ⅲa受体结合的抑制作用以及对血小板膜上P-选择素表达的影响.结果 随着AoGDW肽浓度的增加,CD41抗体与活化血小板GPⅡb/Ⅲa受体结合率呈现下降趋势,相对于阴性对照组,P＜0.01.但CD41抗体与静止血小板GPⅡb/Ⅲa受体的结合率以及CD62p抗体与静止血小板P选择素的结合率与阴性对照组相比,P＞0.05.结论 AoGDW肽是通过占据血小板上纤维蛋白原的结合位点即活化的GPⅡb/Ⅲa受体而发挥抑制血小板聚集的作用,并且不具有活化血小板的作用,是一种选择性的GPⅡb/Ⅲa受体拮抗剂.
作者：王晓霞；李晓钟；刘红林；解军；张悦红；王惠珍；牛勃 刊期： 2007年第05期
目的 研究内洋地黄素特异性拮抗剂地高辛抗血清对大鼠心肌缺氧复氧损伤心功能的影响及其作用机制.方法 制备离体大鼠心肌缺氧复氧损伤模型,60只SD大鼠随机分为6组,每组10只.对照组,缺氧复氧组,维拉帕米组,小剂量、中剂量、高剂量地高辛抗血清组.连续纪录各组ECG、HR、LVDP、±dp/dtmax.各组于复氧结束后测定心肌组织中内洋地黄素水平、线粒体内Ca2+含量和冠脉流出液中NO含量.电镜观察心肌线粒体及血管内皮细胞结构的变化.结果 缺氧复氧组心肌组织内洋地黄素水平升高,线粒体内Ca2+含量升高,NO含量降低,心肌线粒体及内皮细胞明显损伤,心功能明显受抑制.中、高剂量地高辛抗血清能降低心肌组织内洋地黄素水平和线粒体内Ca2+含量,升高NO含量,减轻缺氧复氧所致的心肌线粒体及内皮细胞的损伤,改善心肌收缩和舒张功能.结论 地高辛抗血清抑制心肌缺氧复氧损伤所致的心功能减弱,其机制可能与拮抗内洋地黄素,减轻线粒体内Ca2+超载,升高NO浓度,保护了线粒体及内皮细胞功能有关.
作者：汪和贵；柯永胜；王德国；杨尚印 刊期： 2007年第05期
目的 研究阿魏酸钠(sodium ferulate,SF)诱导药理性预适应对离体大鼠心脏的保护作用及其机制.方法 将大鼠离体心脏随机分5组:正常组(Control组,富氧液灌注100min);缺氧/复氧损伤组(I/R组,稳定灌流30 min,缺血停灌40 min后复灌30 min);缺血预适应组(IP组,行3次停灌5min、复灌5 min刺激后,停灌40 min、复灌30 min);SF组(用含有1.69 mmol·L-1 SF的灌流液灌流15 min后改用正常灌流液灌流15 min,后行停灌40 min、复灌30 min);格列本脲组(Gli组,用格列本脲30 μmol·L-1和SF 1.69 mmol·L-1合用灌流心脏15 min后改用正常灌流液灌流15 min,后行停灌40 min、复灌30 min).结果 与I/R组相比1.69mmol·L-1SF能明显改善心功能、减少心律失常发生率及严重程度、降低心肌组织钙超载、保护心肌Na+,K+-ATP酶、Ca2+ATP酶活性.30 μmol·L-1格列本脲与SF合并使用后,上述心肌保护作用则部分取消.结论 SF预处理能改善心功能,抗心律失常、抗钙超负荷,其作用机制至少部分与KATP通道开放有关.
作者：刘季春；万力；邵立建；何明 刊期： 2007年第05期
目的 探讨士的宁(strychnine,Stry)敏感的甘氨酸受体(strychnine-sensitive glycine receptor,GlyR)与吸入麻醉药异氟烷、恩氟烷、七氟烷和乙醚催眠、镇痛作用的关系.方法 建立小鼠腹腔注射吸入麻醉药催眠、镇痛模型,在催醒和热板实验中分别观察侧脑室(intracerebroventricular,icv)或鞘内(intrathecal,it)注射不同剂量士的宁对小鼠睡眠时间(sleeping time,ST)和热板疼痛指数(pain index in hot-plate test,HPPI)的影响.结果 催醒实验中,士的宁1、2、4 μg icv对上述4种吸入麻醉药的ST均无影响(P＞0.05);热板实验中,士的宁0.1、0.2、0.4 μg it能够剂量依赖性地减少吸入麻醉药恩氟烷、七氟烷和乙醚镇痛小鼠的HPPI(P＜0.05,P＜0.01);士的宁0.1 μg it对异氟烷镇痛小鼠的HPPI没有影响(P＞0.05),0.2、0.4 μg it可减少异氟烷镇痛小鼠的HPPI(P＜0.05,P＜0.01).结论 士的宁敏感的甘氨酸受体是吸入麻醉药异氟烷、恩氟烷、七氟烷和乙醚镇痛作用的重要靶位,但与其催眠作用关系不大.
作者：陈龚；李惠萍；戴体俊；曾因明 刊期： 2007年第05期
目的 观察多巴胺(dopamine,DA)及其DA受体拮抗剂氟哌利多对急性吗啡成瘾大鼠尾核中痛兴奋神经元(PEN)电活动的影响.方法 腹腔注射递增剂量的盐酸吗啡使Wistar大鼠形成吗啡依赖. 实验以电脉冲刺激大鼠坐骨神经作为伤害性痛刺激,用玻璃微电极记录尾核中PEN的放电变化.结果 DA可使吗啡成瘾大鼠PEN的兴奋性降低.氟哌利多可以逆转DA对吗啡成瘾大鼠PEN的作用.结论 DA对吗啡成瘾大鼠尾核中PEN有抑制作用.这种作用可以被DA受体拮抗剂阻断.
作者：张颖；苏洁；徐满英 刊期： 2007年第05期
目的 探讨虎杖苷对缺血缺氧作用下心肌细胞蛋白激酶C(PKC)活性的影响及其抗休克的机制.方法 取大鼠乳鼠心室肌培养心肌细胞,用Koyama方法复制心肌细胞缺血缺氧模型.用γ-闪烁计数仪测定PKC的活性.结果 正常状态下心肌细胞胞质PKC经虎杖苷(PD)刺激后活性下降(vs正常组P＜0.05),但胞膜的PKC活性上升(vs 正常组P＜0.05).缺血缺氧后胞质和胞膜PKC的活性均下降(vs正常组P＜0.05),再经PD处理后胞质胞膜的PKC活性均上升(vs缺血缺氧组P＜0.05,vs正常组P＞0.05).结论 PD对缺血缺氧作用下的心肌有保护作用,可能是通过调节PKC的活性来发挥作用的,这可能是PD抗休克的分子机制之一.
作者：王月刚；金春华；吴平生 刊期： 2007年第05期
目的 观察卡介菌多糖核酸(BCG-PSN)对小鼠哮喘胸腺活化调节趋化因子(thymus and activation regulated chemokine,TARC)及mRNA表达的影响.方法 以卵清白蛋白(OVA)致敏和激发建立小鼠哮喘模型.30只清洁级♂Balb/c小鼠随机分为3组,每组10只:正常对照组、哮喘组、BCG-PSN治疗组.末次激发24 h后留取支气管肺泡灌洗液(BALF)及肺组织.BALF行细胞计数及分类;应用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定BALF中TARC、IL-4和IFN-γ蛋白的浓度;光镜观察肺组织病理变化;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定肺组织中TARC mRNA的表达;采用免疫组织化学法测定肺组织中TARC蛋白的表达.结果 与正常对照组相比,哮喘组BALF中细胞总数、嗜酸粒细胞(EOS)绝对值及百分比、TARC和IL-4浓度、肺组织中TARC蛋白及mRNA的表达均增高,BALF中IFN-γ浓度低于正常对照组.经BCG-PSN干预后,BALF中细胞总数、EOS绝对数及百分比,TARC、IL-4浓度较哮喘组均下降,肺组织中TARC蛋白及mRNA的表达较哮喘组均下调,BALF中IFN-γ浓度较哮喘组增高.免疫组化显示TARC蛋白主要表达于支气管上皮细胞.BALF中TARC浓度与EOS绝对值、IL-4浓度呈正相关.结论 卡介菌多糖核酸可降低TARC在肺组织中的表达,降低气道炎症.
作者：郑吉善；李昌崇；陈庆武；苏苗赏；张维溪；张海邻；董琳；陈小芳；罗运春；张正霞 刊期： 2007年第05期
目的 观察移动抑制因子(MIF)在实验性结肠炎的肠壁神经组织中的表达,探讨肠神经系统对结肠炎中MIF活性的调控作用.方法 以半抗原二硝基氯苯(DNCB)给经过致敏的大鼠和小鼠灌肠诱发结肠炎,用二苯基四氮唑溴盐(MTT)法测定肠系膜淋巴细胞中MIF活性、用免疫荧光双染方法测定肠神经元中MIF蛋白的表达,观察ip 6-羟基多巴(6-OHDA)和体外去甲肾上腺素(NE)培养对结肠炎时MIF活性的影响.结果 结肠炎大鼠肠壁神经元MIF蛋白的表达随DNCB灌肠剂量的增大而增强;6-OHDA(38～150mg·kg-1体重)能够进一步刺激结肠炎小鼠MIF活性的升高(ip 6-OHDA组与ip溶剂的结肠炎组相比,P＜0.01);NE(1.0 nmol·L-1～1.0 mmol·L-1)体外可使结肠炎组的MIF活性升高,其反应幅度和敏感性大于对照组(两组相比,P＜0.01).结论 DNCB引起的实验性结肠炎中MIF活性升高;正常的交感活动能够抑制结肠炎时的MIF活性.
作者：林萍；吴星宇；潘慧；胡胜娣；梅林 刊期： 2007年第05期
蛋白激酶CK2是一种在真核细胞中普遍存在的信使非依赖性丝/苏氨酸蛋白激酶,可横向介导多条信号途径,以级联和垂直的方式发挥作用,调节细胞的生长和凋亡.其精细调控一旦失衡,可诱发肿瘤;而其特异性抑制剂和以其为靶向的基因治疗可抑制肿瘤.以CK2调节为中心的致瘤机制研究和以CK2为靶点的肿瘤药物开发具有重要的临床应用价值.
作者：阮杰；刘新光；梁念慈 刊期： 2007年第05期
细胞粘附分子是一类重要的膜表面蛋白,参与机体多种生理功能.该文从粘附分子与肿瘤转移的过程,较全面的阐述了粘附分子与肿瘤转移的关系,为深入研究粘附分子在肿瘤转移过程的作用,开发肿瘤治疗新思路提供理论依据.
作者：李璘；朱荃；陆茵 刊期： 2007年第05期
目的 探讨碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)对人脐带静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)内游离镁离子浓度([Mg2+]i)的调节机制及Mg2+与新生血管形成间相关性.方法 我们采用荧光指示剂mag-fura-2,运用PTi阳离子测定系统动态测HUVECs的[Mg2+]i.新鲜脐带内灌注胶原酶消化,获得内皮细胞,用含体积分数为0.2胎牛血清的M199液进行培养,当细胞外Mg2+浓度分别为0,1和2 mmol·L-1时,观察了bFGF促进HUVECs血管形成的能力.结果 bFGF诱导的[Mg2+]i增加与细胞外Mg2+存在无关,在细胞外无Mg2+时,bFGF能剂量依赖性地增加[Mg2+]i.bFGF诱导的[Mg2+]i增加与细胞外Na+浓度和细胞内Ca2+浓度无关,经bFGF的受体(KDR)阻断剂SU1498预处理,能明显阻断bFGF诱导的[Mg2+]i增加.当细胞外Mg2+为0mmol·L-1时,HUVECs形成血管作用受到明显抑制,bFGF也不刺激血管形成,但当细胞外Mg2+为1或2 mmol·L-1时,bFGF可促进HUVECs形成血管.当细胞外Mg2+为1mmol·L-1时,KDR阻断剂SU1498可明显抑制bFGF促进HUVECs形成血管的作用.结论 bFGF通过KDR信号传递途径使细胞内的Mg2+库释放Mg2+,从而增加HUVECs的[Mg2+]i,并对促进血管形成起重要作用.
作者：洪炳哲；李胜范；王江宁；刘学田；赵容杰；霍丽华；朴海南；曲直立 刊期： 2007年第05期
目的 探讨重组人谷氧还蛋白1(rhGrx1)对小鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤的保护作用及机制.方法 线栓法制备小鼠脑缺血/再灌注模型,病理形态学方法证实模型建立成功.小鼠尾静脉注射rhGrx1(5 mg·kg-1和10 mg·kg-1)后,观察脑组织中乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)及蛋白质羰基含量的变化,Western blot检测小鼠脑组织中p38MAPK表达水平的变化.结果 HE染色证实模型建立成功且提示rhGrx1可改善缺血/再灌注损伤所致的小鼠脑组织病理形态学变化;rhGrx1能增加小鼠脑组织LDH、SOD活性、降低蛋白质羰基的含量.与假手术组小鼠相比,缺血和再灌注时脑组织p38MAPK蛋白表达量明显增加,注射rhGrx1后p38MAPK蛋白表达被抑制.结论 rhGrx1对局灶性脑缺血/再灌注损伤小鼠有一定保护作用,其机制可能与抑制p38MAPK蛋白表达相关.
作者：吴莉芳；刘莹莹；房绍红；周宏博；邹朝霞；杨歌德；任亚坤 刊期： 2007年第05期
中国药理学通报杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国药理学会
