杨芳艳；蒲小平
目的建立一种新的小鼠气道上皮杯状细胞增生和粘液高分泌模型.方法用卵白蛋白加氢氧化铝凝胶皮下注射致敏小鼠,d 10腹腔注射重复致敏1次,然后从第1次致敏后d 15～21每天用卵白蛋白雾化吸入攻击1次.检测AB-PAS染色的支气管上皮杯状细胞数目,HE染色的肺组织嗜酸性粒细胞浸润和支气管灌洗液中的炎症细胞数目,并用已知有效药物和未知受试药物验证此模型.结果卵白蛋白致敏和攻击的小鼠呈现明显的支气管上皮杯状细胞增生,管腔内黏液增多,肺组织嗜酸性粒细胞浸润和支气管灌洗液中的炎症细胞数目增加,这些病理改变可被地塞米松和小鼠IL-12质粒抑制.结论这一模型有助于筛选抗黏膜高分泌的新药和研究气道黏膜高分泌的病理机制.
作者：王莹；王华英；谢强敏；邵传森；陈季强 刊期： 2006年第02期
目的探讨高糖状态下肾小球系膜细胞中信号转导和转录活化因子1、3的改变以及血管紧张素受体1拮抗剂(AT1Ra)缬沙坦的影响.方法体外培养大鼠肾小球系膜细胞,分别给予高糖和缬沙坦干预,采用Western印迹检测信号转导和转录活化因子1、3(STAT1、STAT3)及其磷酸化蛋白(p-STAT1、p-STAT3)的表达,酶联免疫吸附实验(ELISA)和放免法测定细胞上清液中TGF-β1、纤维连接蛋白(Fibronectin,FN)和IV型胶原的含量,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测TGF-β1 mRNA的表达.结果与低糖对照组相比,高糖组系膜细胞p-STAT1和p-STAT3表达明显上调,TGF-β1、FN和IV型胶原含量增加,TGF-β1 mRNA的表达增加.缬沙坦组p-STAT1和p-STAT3的表达明显下调, TGF-β1、FN和IV型胶原的含量减少,同时TGF-β1 mRNA的表达降低.结论高糖状态下p-STAT1和p-STAT3表达明显升高,缬沙坦抑制肾小球系膜细胞TGF-β1和细胞外基质的分泌可能部分是通过影响STAT1和STAT3的激活而实现.
作者：史永红；段惠军；王丽晖；任韫卓；高峰 刊期： 2006年第02期
目的探讨类叶升麻苷对鱼藤酮致多巴胺能神经元SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用及其机制.方法采用MTT法检测细胞存活率,以荧光染料Hoechst33342染色分析细胞核的形态学变化,用流式细胞仪定量分析细胞凋亡峰,以2′,7′-二氢二氯荧光黄双乙酸钠 (DCFH-DA)为标记探针检测细胞内活性氧的产生.结果①0.5 μmol·L-1的鱼藤酮处理SH-SY5Y细胞48 h能引起细胞存活率的显著下降;诱导细胞发生凋亡,凋亡率达47.39%;大部分细胞胞体皱缩,突起缩短消失或断裂;染色质皱缩、浓缩、断裂及形成凋亡小体;细胞内活性氧水平上升.②预先用盐生肉苁蓉提取物类叶升麻苷(10,20或40 mg·L-1)处理细胞6 h,可提高细胞存活率;明显改善鱼藤酮引起的细胞形态学变化;流式细胞仪检测凋亡率分别降低到25.87%, 23.97%, 10.45%;以DCFH-DA为标记探针检测到20 mg·L-1类叶升麻苷可明显抑制鱼藤酮引起的细胞内活性氧产生. 结论类叶升麻苷能抑制鱼藤酮诱导的多巴胺能神经元SH-SY5Y细胞凋亡,其神经细胞保护作用可能与降低细胞内活性氧水平有关.
作者：杨芳艳；蒲小平 刊期： 2006年第02期
目的人类β2肾上腺素受体通过内源性儿茶酚胺从而调控机体脂解作用、糖代谢以及心血管功能.本研究旨在分析β2肾上腺素受体Arg16Gly和Gln27Glu遗传多态性在高血压人群中的分布特征以及他们与肥胖发生的相关性.方法分别采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性和等位基因特异性聚合酶链式反应的方法对受试者进行基因型分析.应用单因素方差分析和卡方检验进行统计学分析.结果对225名中国汉族原发性高血压患者以及125名健康对照者进行了β2肾上腺素受体Arg16Gly和Gln27Glu基因分型,发现其等位基因的发生频率符合Hardy-Weinberg平衡.在高血压合并肥胖组中,27 Glu等位基因的频率为0.069,明显高于单纯性高血压组和健康对照组(P<0.05), 进一步分析发现Gln27Glu多态性与肥胖的这种相关性仅存在于男性高血压患者,而女性受试者缺乏这种联系.单倍型研究发现在男性受试者中,β2肾上腺素受体单倍型与肥胖无相关性.结论结果显示β2肾上腺素受体Gln27Glu遗传多态性可能是导致男性高血压人群对肥胖易感的主要因素之一.
作者：莫玮；刘洁；周宏灏；刘昭前 刊期： 2006年第02期
目的观察丙泊酚在vlPAG对大鼠伤害性感受的影响及GABAA受体在其中可能的作用.方法 Sprague-Dawley (SD)♀大鼠随机分组,丙泊酚(Propofol,Pro)和荷包牡丹碱(Bicuculline,Bic)采用中脑导水管周围灰质腹外侧区(ventrolateral portion of the PAG,vlPAG)注射.行为学实验采用热板法和福尔马林实验,分别以舔后爪潜伏时间(Hot-plate latency,HPL)和疼痛(累计)评分为指标.免疫组化方法观察丙泊酚在vlPAG对福尔马林单侧足底皮下注射诱发的脊髓背角Fos蛋白表达的影响.结果行为学部分:两种疼痛模型中丙泊酚(10 g·L-1)vlPAG注射引起痛敏(P<0.01).热板法实验中,丙泊酚vlPAG微量注射的痛敏作用可被相同部位预先注射25 mg·L-1 Bic在10和20 min时间点分别拮抗70%和71%(均P<0.01),在30和40 min完全拮抗.在福尔马林实验中,丙泊酚vlPAG微量注射使福尔马林疼痛评分增加,此作用可被Bic(25 mg·L-1)在60 min拮抗57%(P<0.05).免疫组化部分中,丙泊酚vlPAG微量注射使福尔马林引起的脊髓背角各层FLI阳性细胞数明显增多(P<0.01), Bic vlPAG微量注射(25 mg·L-1)可部分拮抗丙泊酚vlPAG微量注射的作用(P<0.01).结论在大鼠vlPAG微量注射丙泊酚能产生痛敏作用;GABAA受体部分介导了丙泊酚的以上作用.
作者：王擒云；杨建平；戴体俊；张慧娟 刊期： 2006年第02期
目的应用高胰岛素诱导培养HepG2细胞,建立胰岛素抵抗的细胞模型.并探讨吡格列酮对该模型胰岛素敏感性和糖代谢的影响.方法将HepG2细胞置于5×10-7 mol·L-1胰岛素培养液中16 h,采用3H-D-葡萄糖参入试验观察高胰岛素对HepG2细胞葡萄糖摄取率的影响.模型建立后,培养液中加入吡格列酮共同孵育,观察吡格列酮对胰岛素抵抗细胞模型葡萄糖摄取率和葡萄糖消耗量的影响.结果高胰岛素诱导培养的HepG2细胞葡萄糖参入率明显低于未用高胰岛素诱导的HepG2细胞(对照细胞).将高胰岛素诱导培养的HepG2细胞置于不含胰岛素的培养液中60 h,其细胞葡萄糖摄取率仍明显低于对照细胞.含有吡格列酮(浓度为1×10-6～1×10-4 mol·L-1)的胰岛素抵抗HepG2细胞的葡萄糖参入率与葡萄糖消耗量明显高于不含吡格列酮的胰岛素抵抗HepG2细胞(P<0.01).结论将HepG2置于5×10-7 mol·L-1胰岛素环境中16 h,该细胞对胰岛素的生物学效应产生抵抗,其胰岛素抵抗状态可维持60 h.该方法较为简便、易行、重复性好、成功率高,可广泛用于胰岛素抵抗的研究.吡格列酮能增加胰岛素抵抗模型细胞的胰岛素敏感性,并能明显改善糖代谢.
作者：陈秋；夏永鹏；邱宗荫 刊期： 2006年第02期
目的人TRAIL基因胞外区片段(114-281氨基酸残基,sTRAIL)的克隆、表达、纯化及对人肺腺癌A549细胞的抗肿瘤活性研究.方法采用PCR技术从人胎盘和肺cDNA文库中扩增出全长人TRAIL基因,克隆到pUC19质粒载体上进行测序.然后再采用PCR技术,以全长人TRAIL基因为模板,扩增出sTRAIL基因片段并定向克隆到pET-11a表达载体中,转化大肠杆菌BL21进行表达.表达后的产物经变性、复性和分离纯化,纯化后的sTRAIL用结晶紫染色法和流式细胞仪法测定其对人肺癌细胞A549的细胞毒性作用.结果从人胎盘和肺cDNA文库中都能扩增出全长人TRAIL 基因,经测序表明与已发表的人TRAIL基因序列一致.扩增出的人sTRAIL基因克隆到表达质粒载体pET-11a,经IPTG诱导表达,表达量占细菌全菌蛋白的50%,纯化后的sTRAIL纯度大于98%,结晶紫法测定对人A549肺癌细胞的细胞毒性作用的IC50为(24±5.2) μg·L-1, 流式细胞仪法测定对人A549肺癌细胞的细胞毒性具有明显的效应-时间依赖关系.结论本实验成功地克隆了人sTRAIL基因并实现其高表达,摸索出包涵体sTRAIL的变性、复性及其纯化方法,纯化后的sTRAIL蛋白对人A549肺癌细胞具有明显的细胞毒性作用,为进一步研究其功能与临床应用奠定了基础.
作者：范清林；魏伟；邹文艺；宋礼华 刊期： 2006年第02期
目的探讨罗汉果皂苷提取物对四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的调节作用及其作用机制.方法分别以50,100,300,500 mg·kg-1 bw剂量的罗汉果皂苷提取物连续30 d灌胃四氧嘧啶糖尿病小鼠,末次给药后眼眶取血测定血糖、血脂指标;分离肝组织测定抗氧化指标.
作者：张俐勤；戚向阳；陈维军；宋云飞 刊期： 2006年第02期
自噬是一种在正常细胞和病态细胞中普遍存在的生理机制.某些肿瘤细胞中自噬活动低下与肿瘤的发生有一定的关系.抗肿瘤药物可以诱导细胞产生自噬,并参与了自噬的分子调控,同时它也可能导致细胞凋亡.自噬在抗肿瘤药物中作用与给药浓度及细胞的类型等因素有关.抗肿瘤药物引起的细胞自噬对肿瘤细胞产生正负两方面的影响,将自噬途径作为抗肿瘤药物的靶点有着广阔的前景.
作者：虞燕霞；顾振纶；秦正红；梁中琴 刊期： 2006年第02期
目的应用siRNA表达载体介导的RNAi技术,特异地抑制端粒保护蛋白POT1基因在HeLa细胞中的表达,并观察其对细胞Caspase-3活化的影响.方法利用作者课题组先前构建的含hPOT1基因特异性序列(hsDNA)的3种重组siRNA表达质粒(pmU6-shRNA1、pmU6-shRNA2和pmU6-shRNA3),由脂质体介导转染HeLa细胞,以RT-PCR和EMSA法检测转染细胞中的hPOT1基因的表达抑制效果,并通过RT-PCR、Western blot和Caspase-3检测试剂盒分析Caspase-3表达和活化.结果 3种pmU6-shRNA重组质粒转染HeLa细胞48 h后,细胞中hPOT1基因mRNA和蛋白质表达水平均降低,Caspase-3 mRNA表达水平基本无变化,Caspase-3 酶原水平降低,而Caspase-3 酶活性增高.结论 siRNA表达载体介导的RNAi能有效地抑制HeLa细胞中hPOT1基因表达,hPOT1基因表达的抑制导致细胞Caspase-3活化.
作者：侯敢；黄迪南；姜英华；梁爱玲 刊期： 2006年第02期
作者：黄河胜 刊期： 2006年第02期
作者：黄河胜 刊期： 2006年第02期
目的研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古菌素A(trichostatin A, TSA)抑制HL-60细胞端粒酶活性及亚单位hTERT的表达并诱导凋亡的机制.方法采用MTT法和倒置相差显微镜观察不同浓度曲古菌素A对HL-60细胞的抑制作用,流式细胞仪检测600 nmol·L-1 TSA作用后的细胞凋亡情况,TRAP-ELISA法检测端粒酶活性变化,RT-PCR分析端粒酶三个亚单位的mRNA表达情况.结果曲古菌素A对HL-60细胞的抑制作用具有时间和剂量依赖性,AnnexinV/PI双染色体法检测凋亡显示,600 nmol·L-1 TSA作用48h后,细胞凋亡率为42.6%.600 nmol·L-1曲古菌素A作用12、24和48 h后,端粒酶活性分别下降为1.95±0.25、 1.73±0.12和1.52±0.09.RT-PCR显示，端粒酶逆转录酶[HT]hTERT表达下降,而端粒酶RNA模板(hTR)和端粒酶相关蛋白(hTP1)表达无明显改变.结论曲古菌素A(trichostatin, TSA)抑制HL-60细胞端粒酶活性下降,并诱导凋亡,其机制可能与曲古菌素A下调hTERT转录水平有关.
作者：周咏明；薛克营；陈艳红；刘隽；HUANG Shiang；黄士昂 刊期： 2006年第02期
目的探讨心脏上的阿片受体是否介导了瑞芬太尼预适应对缺血后心脏保护作用.方法麻醉开胸大鼠心脏缺血再灌注模型.分为对照组(CON),缺血预适应组(IPC)和瑞芬太尼预适应组(RPC); 瑞芬太尼预适应的方法:在缺血再灌注前分别静注瑞芬太尼5 min,停止5 min共3个循环.三种阿片受体阻断剂Naltrindole (NTD,δ受体阻断剂,5 mg·kg-1)、nor-Binaltorphimine (nor-BNI,к受体阻断剂,5 mg·kg-1)、 CTOP (μ受体阻断剂,1 mg·kg-1),分别在RPC(NTD+RPC,BNI+RPC和CTOP+RPC组)和IPC(NTD+IPC,BNI+IPC和CTOP+IPC组)前静脉注射.观察指标包括:平均动脉压(MBP),心率(HR),记算收缩压心率乘积(RPP);缺血危险区(AAR),梗死区(IS)的体积,心肌梗死面积以 IS/AAR来表示.结果在IS/AAR方面:NTD+RPC与CTOP+RPC与CON组之间无差别,与RPC有差别;nor-BNI+RPC与RPC及CON组之间都有差别;NTD+IPC和no-BNI+IPC与IPC组之间有差别,并且nor-BNI与CON组之间也有差别.结论μ,δ和κ-阿片受体介导了RPC对大鼠缺血后心脏的保护作用,μ-阿片受体的作用可能来至心脏之外的组织或器官.
作者：张野；顾尔伟；张健；陈志武 刊期： 2006年第02期
目的研究20(S)-人参皂苷Rg3对脑缺血所致大鼠脑线粒体损伤的保护作用,探讨20(S)-人参皂苷Rg3抗缺血性脑中风的机制.方法用栓线法制作大鼠大脑中动脉缺血(MCAO)模型,测定线粒体肿胀度、膜流动性、膜磷脂含量、呼吸功能、线粒体呼吸酶、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、Ca2+等.结果大鼠MCAO后24 h,脑线粒体损伤明显,表现为肿胀、膜流动性降低,膜磷脂降解、呼吸功能衰减,呼吸酶、SOD活性降低,Ca2+、MDA含量升高;静脉注射20(S)-人参皂苷Rg3(5,10 mg*kg-1)能明显抑制缺血脑线粒体膜流动性的降低,膜磷脂降解,减少脑缺血引起的线粒体肿胀,抑制NADH脱氢酶、琥珀酸脱氢酶和细胞色素C氧化酶活性的降低,改善线粒体呼吸功能;同时20(S)-人参皂苷Rg3能明显降低脑缺血大鼠脑神经细胞线粒体MDA含量、升高SOD活性、抑制Ca2+过多摄入. 结论 20(S)-人参皂苷Rg3对缺血脑神经细胞线粒体的损伤有明显的保护作用,该作用可能与清除氧自由基、抑制脂质过氧化、拮抗Ca2+有关.
作者：田京伟；傅风华；杨建雄 刊期： 2006年第02期
目的探讨茅莓总皂苷对缺血性脑损伤的神经保护机制.方法采用大鼠大脑中动脉阻塞造成局灶性脑缺血2 h,再灌注24 h模型,以HE染色,TUNEL标记和免疫组化的方法观察茅莓总皂苷5、10、20 mg*kg-1对凋亡细胞数目及相关蛋白Bcl-2,Bax表达的变化.结果 3个剂量的茅莓总皂苷治疗组显示神经元形态病理改变明显减轻,降低残存细胞中TUNEL阳性细胞的百分率.增加Bcl-2阳性细胞的表达,降低Bax阳性细胞的表达,Bcl-2/Bax的表达比例增加.结论茅莓总皂苷有明显的抗凋亡作用,其机制可能与增加Bcl-2阳性细胞的表达,降低Bax阳性细胞的表达,提高Bcl-2/Bax有关.
作者：王继生；邱宗荫；夏永鹏；李惠芝；任凌燕 刊期： 2006年第02期
目的观察西洛他唑对糖尿病大鼠主动脉血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)、核因子(NF)-κB及过氧化物酶增殖体激活受体(PPARs)的影响,探讨西洛他唑影响VCAM-1表达的上游信号通路.方法腹腔注射链脲佐菌素(65 mg·kg-1)制备糖尿病模型,正常对照组大鼠腹腔注射柠檬酸钠缓冲液(NC,n= 8).随机将成模的32只糖尿病大鼠分为糖尿病模型组( DM, n=12)、高剂量西洛他唑组(GX, 27 mg·kg-1·d-1, n=10)与低剂量西洛他唑组( DX, 9 mg·kg-1·d-1, n=10).
作者：王芙蓉；高聆；于建中；张捷；张岫美；完强；刘毅；黄传奎；赵家军 刊期： 2006年第02期
目的研究海马内M1和M2受体对学习记忆功能的影响及其可能机制.方法 SD大鼠分为3组,分别海马内注射等体积的M1-ASODN(M1-AS组)、M2-ASODN(M2-AS组)和生理盐水(对照组),以被动逃避反应的步入潜伏期作为衡量学习记忆功能的指标,以CZE-LIFD法检测杏仁核内游离谷氨酸的浓度.结果 M1-ASODN缩短步入潜伏期,为对照组的25%(P<0.01),M2-ASODN使步入潜伏期较对照组增加了75%(P<0.05).双侧海马内注射ASODN后与对照组相比,M2-AS组杏仁核内谷氨酸的含量增加164%(P<0.01),而M1-AS组无变化(P>0.05).结论海马内M受体参与恐惧性记忆的调节,M2受体抑制学习记忆,M1受体促进学习记忆.海马内M2受体可能通过调节杏仁核内谷氨酸含量的变化介导被动逃避反应的记忆过程.
作者：王向兵；ZENG Yinming；曾因明；段世明；杨国栋；顾钧；周文华；张亚海 刊期： 2006年第02期
目的探讨腺苷A1受体阻断对大鼠海马BDNF蛋白表达及内质网功能的影响.方法采用免疫组化技术观察腺苷A1受体特异性阻断剂8-环戊-1,3-二丙基黄嘌呤(DPCPX)对大鼠海马颗粒细胞BDNF蛋白表达的影响;采用透射电镜技术观察DPCPX对大鼠海马神经元内质网数量的影响.结果 DPCPX(0.1 mg*kg-1,ip,15 d)可增加海马颗粒细胞BDNF蛋白表达阳性细胞的数目.DPCPX(0.5 mg*kg-1,ip,15 d)能增加BDNF蛋白在海马颗粒细胞的表达,使阳性细胞数目明显增加、染色加深;同时增加大鼠海马神经元中内质网的数量,使内质网密度增加.结论 DPCPX可促进大鼠海马颗粒细胞内BDNF蛋白表达和诱导海马神经元内质网功能增强.
作者：张丹参；任雷鸣；张力 刊期： 2006年第02期
目的研究大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑组织中天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(Caspase-1、Caspase-3、Caspase-8)蛋白表达的变化,以及三七总皂苷(PNS)对其表达的影响.方法采用线栓法建立大鼠大脑中动脉栓塞局灶性脑缺血再灌注模型.实验动物随机分为假手术组、模型组、三七总皂苷组和尼莫地平对照组,于缺血前5 min、缺血后12、24、36 h给药,共给药4次.缺血2 h再灌注46 h后,采用免疫组织化学方法检测脑组织中Caspase-1、Caspase-3、Caspase-8蛋白表达的变化.结果缺血2 h再灌注46 h后,可诱导脑组织Caspase-1、Caspase-3表达增强,PNS能下调Caspase-1、Caspase-3蛋白的表达;但对Caspase-8的表达无影响.结论 PNS能抑制脑缺血再灌注后Caspase-1、Caspase-3蛋白的表达,这可能是其促进脑缺血后神经元存活及损伤后修复的机制之一.
作者：李花；邓常清；陈北阳；陈瑞芬；张淑萍；梁燕 刊期： 2006年第02期
中国药理学通报杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国药理学会
