学术投稿

基于Fas/FasL途径的金匮肾气丸对肾阳虚模型睾丸细胞凋亡的影响

朱庆均;肖丽;杨军;侯林;张丹

关键词:肾阳虚, 睾丸组织, 细胞凋亡, 金匮肾气丸, Fas/FasL途径
摘要:目的 以“劳倦过度、房室不节”肾阳虚小鼠为模型,从Fas/FasL途径探讨肾阳虚小鼠睾丸组织细胞凋亡发生机制及金匮肾气丸的治疗作用.方法 以Colldege效应诱导雄性小鼠房室不节,用强迫小鼠游泳法造成劳倦过度,建立肾阳虚小鼠模型.4周后,分别用普通光学显微镜和电子显微镜进行睾丸组织的形态学观察,TUNEL法测定小鼠睾丸生殖细胞的凋亡率,利用RT-PCR检测小鼠睾丸组织Fas/FasL mRNA表达,用免疫组织化学分析Fas、FasL蛋白表达差异.结果 ①模型组小鼠睾丸组织曲细精管内支持细胞及各级生精细胞层次不清,结构破坏明显,金匮肾气丸组和睾酮组小鼠睾丸生殖细胞较模型组有一定程度改善.②在透射电镜下,模型组小鼠睾丸细胞中,可以观察到处于凋亡不同阶段的初级精母细胞,凋亡小体.③模型组TUNEL阳性细胞较正常组显著增加,主要为精原细胞和初级精母细胞,并可见精子细胞凋亡.金匮肾气丸治疗组睾丸细胞凋亡率明显低于模型组,但高于正常组,凋亡细胞类型以精原细胞和初级精母细胞为主.④模型组与正常组相比,Fas/FasL的mRNA表达量明显增高,金匮肾气丸组和睾酮组Fas、FasL mRNA表达较正常组稍高,但与模型组比较,明显降低.⑤模型组Fas在支持细胞和精原细胞及初级精母细胞高表达增多,精子细胞高表达增加明显;模型组FasL高表达细胞明显增多,在支持细胞、各级生精细胞及精子细胞、精子中均有分布,无明显定位特异性;金匮肾气丸组和甲基睾酮对肾阳虚模型小鼠的Fas/FasL均有明显的抑制作用.结论 房劳-倦劳所致肾阳虚小鼠的睾丸内生殖细胞凋亡率上升,通过Fas、FasL的外源性死亡通路引起生殖细胞凋亡.金匮肾气丸可以通过调节Fas/FasL表达,降低小鼠睾丸生殖细胞凋亡.
时珍国医国药杂志相关文献
  • 糖尿病肾病大鼠模型肾小管间质纤维化与瘀血阻络的相关性分析

    目的 探讨糖尿病肾病大鼠模型肾小管间质纤维化与瘀血阻络的相关性.方法 30只SD大鼠随机平分为三组-瘀血阻络型组(A组)、非瘀血阻络型组(B组)、正常组(C组),均予高糖高脂饲料喂养,A组与B组采用一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导建立糖尿病肾病模型,观察大鼠行为,分别测定随机血糖、24h尿微量白蛋白含量;取大鼠的肾皮质,病理切片染色观察肾小管间质的变化;也采用western blot检测各组大鼠肾组织TGF-β1的表达情况.结果 A组与B组的不同时间点的血糖明显高于C组(P<0.05),A组与B组的组间对比无明显差异(P>0.05).A组与B组的24h尿微量白蛋白定量分别为(24.20 ±4.10) mg/24h和(24.29±3.89) mg/24h,都明显高于C组的(5.93±2.14) mg/24h(P<0.05).A组与B组的TGF-β1表达量明显高于C组(P<0.05),同时A组的TGF-β1表达量也高于B组(P<0.05).形态学观察显示相对于B组,A组的肾小球体积增大,基底膜增厚,系膜基质增多.结论 糖尿病肾病大鼠模型中瘀血阻络型的TGF-β1表达量相对比较高,伴随有肾小管间质纤维化,可导致大鼠病情恶化,也确认了糖尿病肾病瘀血阻络型的存在.

    作者:潘永梅;陈志强;贾蕊;马赟;郭倩 刊期: 2017年第02期

  • 清湿化瘀法对子宫腺肌病小鼠雌激素效应因子PTEN、P-P65的时空变化影响

    目的 在以清湿化瘀为治法的内异康复片被广泛应用于治疗子宫腺肌病(AM)和前期实验研究的基础上,运用同种异体垂体植入子宫的方法建立AM实验模型,采用免疫组化的技术检测PTEN、P-P65在AM治疗前后各组小鼠在位及异位子宫内膜上的表达差异,探究AM的发病机制.方法 采用异体垂体移植法造模,随机设内异康复片低、中、高剂量组,孕三烯酮组,丹莪妇康煎膏组,模型组.饲养3月后分别灌胃3月治疗,免疫组化法观察治疗前后在位、异位子宫内膜上PTEN、P-P65差异.结果 不同方法治疗后PTEN表达均增高,显著高于模型组(P<0.001),内异康复片高剂量组优于其他各治疗组(P<0.001);P-P65表达均下降,显著低于模型组(P <0.001),内异康复片高剂量组优于其他各治疗组(P<0.001).结论 内异康复片可上调PTEN,下调P-P65的表达,从而达到控制和治疗子宫腺肌病及其临床症状的目的.

    作者:屈丽媛;魏绍斌;冯婷婷;王烨;范小雪 刊期: 2017年第02期

  • 药食两用野菜扁竹芽中微量元素的含量测定

    目的 测定野菜扁竹芽中Ca、Fe、Zn、Cu、Mn微量元素.方法 分别用灰化法和消化法对样品进行处理,采用电感耦合等离子体原子发射光谱法测定微量元素.结果 此方法的相对标准偏差在1.2% ~ 3.6%,回收率在91.3%~101.3%之间.结论 方法简便准确,湿法和干法预处理试样测定结果基本一致,适用于野菜扁竹芽中金属元素测定.

    作者:陈晓红;徐玲 刊期: 2017年第02期

  • 探讨中医心理临床工具之成长回顾报告

    该研究源于提纲式作业,在临床实践过程中基于双相情感障碍等案例引发探索构思成长回顾报告雏形,并尝试探索发展水平报告,后确定并从定义、内容、意义等方面阐述成长回顾报告,为构成和完善中医心理临床工具系统提供新思路.

    作者:李世通;汪卫东;王米渠 刊期: 2017年第02期

  • 《回回药方》研究概述

    《回回药方》(残卷)是我国目前仅存的一部古代回医药典籍.文章通过综述近年来对《回回药方》基础理论研究、方剂研究、剂型研究、回药研究、特色疗法研究、临床研究、实验研究、语言研究、论著等方面的研究概况,认为《回回药方》(残卷)的研究任重而道远,有待更进一步深入研究.

    作者:杨丽娟;何婷;徐静;高如宏 刊期: 2017年第02期

  • 慈菇消脂胶囊对非酒精性脂肪性肝病大鼠GSH-PX2、SREBP-1cmRNA表达的影响

    目的 研究慈菇消脂胶囊对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠谷胱甘肽过氧化酶2(GSH-PX2)、固醇元件结合蛋白-1c(SREBP-1 c mRNA)基因表达的影响,探讨其作用机制.方法 用高脂饲料喂食的方法复制非酒精性脂肪肝模型.随机分为正常组、模型组、慈菇消脂胶囊高剂量组、慈菇消脂胶囊中剂量组、慈菇消脂胶囊低剂量组、吡格列酮药物阳性对照组.慈菇消脂胶囊对模型大鼠治疗6周后,观察模型大鼠肝组织病理形态学变化;血清血脂(TC、TG、SF)、碱性磷酸酶(AKP)、脂蛋白脂酶(LPL)、肝脂酶(HL)变化以及GSH-PX2和SREBP-1c mRNA表达.结果 模型组大鼠肝小叶内出现大量脂肪变性,汇管区伴有炎细胞浸润以及部分点状肝细胞坏死,治疗前与正常组比较,模型组大鼠TC、TG、SF均升高,GSH-PX2表达减少、SREBP-1 c mRNA增多.治疗后与模型组比较,慈菇消脂胶囊各剂量组,肝脏脂肪变性和炎症均有不同程度的减轻.慈菇消脂胶囊能降低模型大鼠TC、TG、SF含量,降低AKP、提升HL、LPL水平(P<0.05);对GSH-PX2、SREBP-1c mRNA表达有较好调节作用(P <0.05-0.01).结论 慈菇消脂胶囊具有改善肝功能,调节肝脂代谢,调节GSH-PX2、SREBP-1 c mRNA表达,减轻肝细胞脂肪变性,从而起到对非酒精性脂肪性肝病的治疗作用.

    作者:杨少军;马燕花;白洲霞;王晋阳 刊期: 2017年第02期

  • 刮痧对腰椎间盘突出症模型大鼠背根神经节炎性细胞因子和血清疼痛物质的影响

    目的 观察刮痧对腰椎间盘突出症(LDH)模型大鼠背根神经节(DRG)中炎性细胞因子和血清疼痛物质的影响,探讨刮痧治疗LDH的作用机制.方法 30只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、刮痧组.采用自体髓核移植法建立LDH大鼠模型.刮痧组于造模后第5天开始刮痧治疗,假手术组及模型组不予干预措施.干预三个疗程后处死取材.应用免疫组化法检测大鼠背根神经节中炎性细胞因子磷脂酶A2(PLA2)和前列腺素E2(PGE2)的含量.应用酶联免疫法(ELISA)检测大鼠血清中疼痛物质P物质(SP)和神经肽Y(NPY)的含量.结果 与假手术组比较,模型组背根神经节中PLA2、PGE2及血清SP、NPY含量均明显升高,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,刮痧组背根神经节中PLA2、PGE2及血清SP、NPY含量均明显降低,差异有统计学意义(P<0.01).结论 刮痧可有效抑制LDH模型大鼠背根神经节中炎症因子PLA2、PGE2和血清疼痛物质SP、NPY的表达,发挥抗炎和神经调节的作用.

    作者:张鸿嫣;杨敏;岳容兆;石秦川;张沁;陈丽虹;徐桂华 刊期: 2017年第02期

  • 复方黑面神软膏基质配比研究

    目的 优选以聚乙二醇4000、聚乙二醇400、聚山梨酯80、丙三醇、羟苯乙酯制备复方黑面神软膏的佳基质配比.方法 以软膏的外观性状、延展性、稳定性常数和PH等为评价指标,采用L9(34)正交试验法对基质比例进行优选.结果筛选出来的复方黑面神软膏基质的佳配比为聚乙二醇4000∶聚乙二醇400∶聚山梨酯80∶丙三醇=(6∶1∶0.1∶0.5).结论 优选工艺制备的复方黑面神软膏外观细腻均匀,性状稳定,此佳基质配比可制备质量较佳的复方黑面神软膏.

    作者:萧俊祺;彭伟文;董旺凤;李圣鹏 刊期: 2017年第02期

  • 《温病条辨》诸“窍”论治探析

    通过对《温病条辨》中关于“窍”的论述分析,从“窍”的名称、病机、治法等方面进行归纳,发现《温病条辨》重视“开窍”,其开窍法并不仅指开通心包机窍或心窍,而且还包括毛窍、清窍、浊窍等在内的广义之窍.并探析《温病条辨》对于开窍机理的认识,即外窍为气机升降出入之门,内窍为气机升降出入之主,外邪侵袭机体易致诸窍郁闭,当须岌岌开窍.而开窍诸法的运用,因邪之性质、窍之部位、正之虚实、病之缓急不同而各异.这些论述揭示了不可囿于传统上开窍即是开心窍的狭义开窍法认识,并启示从开窍机理来把握温病传变及其证治规律.

    作者:郭永胜;张思超 刊期: 2017年第02期

  • 血塞通对家兔皮瓣移植术后并发症(静脉危象)家兔血清EGF、IL-1β及TGF-β1的影响

    目的 研究血塞通注射液对家兔皮瓣移植术后并发症早期影响,并观察其对血清EGF、IL-1β及TGF-β1表达的影响.方法 选用健康新西兰兔32只随机分为血塞通组、甘露醇组、生理盐水组、假手术组,造腹部皮瓣移植术模型,取皮瓣近、中、远端标本,并检测术后第1小时、第24小时、第7天共3个时相标本MDA、NO含量,ELISA法检测血清EGF、IL-1β及TGF-β1表达情况.结果 血塞通组术后血清EGF、IL-1β及TGF-β1值均高于生理盐水组,具有显著统计学意义(P<0.01).术后1h、24h、7d三个不同时相,检测皮瓣组织中MDA、NO的含量,发现血塞通组标本MDA值和NO值与模型组比较,具有显著统计学意义(P<0.01).结论 血塞通注射液能减轻皮瓣移植术后水肿,改善静脉淤血,降低皮瓣移植术后早期并发症.

    作者:宋渊;刘涛;何志军;蒋振兴;李森 刊期: 2017年第02期

  • 张士舜名老中医治疗肿瘤用药经验

    张士舜名老中医是全国从事中医肿瘤研究的中医肿瘤学专家,他所从事肿瘤的研究五十四年,为研究、发展中医肿瘤学积累了丰富的宝贵的临床和科研实验经验,在中医肿瘤领域做出了许多开创性的工作.笔者跟随张老工作十余年,现将其治疗肿瘤常用中药做如下总结,以期进一步推广名老中医的临床经验,初步形成传承名老中医学术思想、临床经验的方法,丰富和推动中医肿瘤学的前进发展.

    作者:王永欣;袁素;李雪松;张士舜 刊期: 2017年第02期

  • 酸枣仁炮制前后与茯苓配比对酸枣仁皂苷A、斯皮诺素含量变化的影响

    目的 测定不同配比的酸枣仁、茯苓的酸枣仁皂苷A及斯皮诺素含量.方法 采用《中国药典》规定的HPLC法对酸枣仁皂苷A及斯皮诺素进行测定.结果 生枣仁组生枣仁茯苓比3∶1,炒枣仁组配比为1∶1,生炒各半组配比为3∶1有效成分含量在相应各组中高.结论 生枣仁组配比为3∶1,炒枣仁组配比为1∶1,生炒各半组配比为3∶1,此3个配比在相应组别中配比为佳.

    作者:许玲;党凯茹;韩笑;匡宇;胡黄婉茵;彭腾;秦旭华 刊期: 2017年第02期

  • 产地加工炮制一体化新工艺对半夏生物碱类成分的影响

    目的 建立同时测定半夏各炮制品中鸟苷、尿苷及腺苷含量的方法,比较产地加工炮制一体化新工艺及传统炮制对有效成分含量的影响.方法 色谱柱:SymmetryShield RP18 (4.6mm×250mm,5μm),流动相:甲醇:水=15:85,流速:0.6m1·min-1,检测波长:260 nm,柱温:25℃,进样量:10μl.结果 鸟苷在4.19×10-3~ 83.8×10-3 μg范围内、尿苷在5.79×10-3 ~ 115.8×10-3 μg范围内、腺苷在1.92×10-3 ~38.4×10-3μg范围内线性关系良好.半夏炮制后鸟苷、尿苷和腺苷的含量均降低,产地加工炮制一体化新工艺保留有效成分.结论 半夏炮制对鸟苷、尿苷和腺苷的含量有不同程度的影响,清半夏和姜半夏下降明显,可能与浸泡溶水以及加入白矾有关.

    作者:梁君;王桁杰;张振凌 刊期: 2017年第02期

  • Nrf2/ARE途径在紫草素诱导U937细胞分化中的作用

    目的 研究紫草素诱导U937细胞分化及其相关机制.方法 通过网络药理学分析紫草素潜在靶点相互作用.紫草素处理U937细胞,进行细胞活力、形态观察、NBT还原能力、Nrf2分化相关基因及Nrf2途径相关分子mRNA表达和核蛋白含量检测.结果 紫草素靶点影响Nrf2途径,并且Nrf2能通过蛋白质互作影响分化.紫草素显著抑制U937细胞增殖,升高NBT还原能力、CD11b和CD14mRNA表达、Nrf2核蛋白含量、Nrf2及其下游基因mRNA的表达量.上调细胞Nrf2/ARE途径,增加CD11b和CD14mRNA表达,反之则降低其表达.结论 紫草素上调Nrf2/ARE途径增强诱导人急性髓系白血病U937细胞分化.

    作者:马晓茹;周维维;张闪闪;王晓琴;张波 刊期: 2017年第02期

  • CBL教学方法在中医内科学中的运用与研究

    目的 CBL(Case Based Learning)教学方法在中医内科学中的应用效果.方法 研究对象为我校本科中医学专业2013级学生,共400人,按“随机数字表”随机分成实验组和对照组各200人.实验组采用CBL教学法,对照组采用LBL(Lecture based learning)教学法,比较两组教学效果.结果 CBL教学方法在掌握理论知识和临床思辨方面,以及在创新性、实用性、难易程度、满意度及接受程度方面均高于LBL组.结论 CBL教学法通过进行病例分析,使学生养成良好的中医临床思维方法,学会理论联系实际,提高分析问题、解决问题的能力.该教学法值得进一步推广.

    作者:莫春梅;陈羽娜;荣震 刊期: 2017年第02期

  • 亚健康状态中阳虚质与阴虚质患者血清蛋白质谱诊断模型的建立与评价

    目的 应用蛋白质组学技术和生物信息学方法建立并评价亚健康状态中阳虚质与阴虚质患者血清蛋白质谱诊断模型.方法 采用弱阳离子交换蛋白芯片CM10和SELDI-TOF-MS技术检测63例血清标本(其中健康对照20例,亚健康阳虚质患者22例、阴虚质患者21例),结合CiphergenProteinChip 3.1、Biomarker Wizard 3.2和SPSS 17.0等软件筛选出有显著差异的蛋白质谱峰;采用BiomarkerPatterns 5.0对差异蛋白质谱峰分组和建立诊断模型,并选择敏感性、特异性、误诊率、漏诊率、ROC曲线作为指标对该模型进行评价.结果 获得317个可识别的血清蛋白差异质谱峰,含量差异具有显著性(P<0.01)的蛋白有23个,从中筛选出1370.09、1051.31、1164.23、1195.28、1088.50、1117.98、1094.24七个血清蛋白质谱峰建立亚健康状态阳虚质、阴虚质疾病诊断模型,该模型对阳虚质的敏感性为86.36%、特异性为85.37%、ROC曲线下面积为0.969,对阴虚质的敏感性为90.48%、特异性为83.33%、ROC曲线下面积为0.955.结论 与健康对照比较,亚健康状态阳虚质和阴虚质患者血清中存在多种异常表达的蛋白质;由1370.09、1051.31、1164.23、1195.28、1088.50、1117.98、1094.24七个血清蛋白质谱峰构建的诊断模型可以较好地诊断亚健康状态阳虚质和阴虚质,具有较高的敏感性与特异性.

    作者:卓少元;李俊萱;运晨霞;陶平安;黄娜;刘燕平;李丽帆 刊期: 2017年第02期

  • 贵州药食两用同源植物资源与应用探析

    目的 探讨贵州药食同源植物资源及其应用现状,分析其在开发应用中存在的问题,并提出了相关解决对策.方法 通过踏查、资料考证和文献整理对贵州地区药食同源植物资源及居民应用情况进行实地调查.结果 贵州药食同源植物资源丰富,但部分应用广而少的药食同源植物缺乏保护;部分居民存在食用石蒜、商陆有毒植物,不宜作为食物.结论 必须对贵州药食同源植物以建立良种培育基地和GAP种植基地保护资源;加强向居民宣传药食同源植物的毒副作用及适宜体质类型,确保人们正确地辨认并安全地食用植物.

    作者:夏卉芳;王毓;冉从简;张文刚 刊期: 2017年第02期

  • HPLC法测定不同胁迫条件下川芎根中阿魏酸的含量

    目的 测定不同胁迫条件下川芎根中阿魏酸的含量.方法 HPLC法,依利特Hypersil ODS2 (4.6mm×200mm,5μm),流动相0.1%的磷酸-甲醇(66:34)等度洗脱,流速1mL/min,检测波长为323nm,柱温30℃.结果 阿魏酸进样量在0.3~2.0μg时线性关系良好,r=0.9995,平均回收率为98.3%,RSD为2.1%.对不同胁迫条件下川芎根中阿魏酸的含量测定结果表明,川芎盐胁迫组中的阿魏酸含量高,干旱胁迫组次之,低温胁迫组少,但均高于空白组.结论 盐、干旱、低温三种胁迫方式均能使川芎根中阿魏酸蓄积.

    作者:朱建全;向缅;孙梦杰;许洁云;廖海;周嘉裕 刊期: 2017年第02期

  • “失荅剌知丸”对大鼠脑缺血再灌注后Notch/Delta信号通路相关因子表达的影响

    目的 探讨失荅刺知丸对大鼠脑缺血再灌注后脑组织损伤血管修复及Notch/Delta信号通路相关蛋白Notch1、Notch4、Delta样配体4表达的影响.方法 将102只SD大鼠随机分为17组,每组6只,分别为:空白组、假手术组、模型组、尼莫地平组、失荅剌知丸低剂量组、失荅剌知丸中剂量组、失荅剌知丸高剂量组,其中模型组和给药组又根据再灌注时间分为1d、3d、7d组.以上各组除空白、假手术组外,均采用线栓法制备局灶性脑缺血再灌注模型(MCAO).各组在观察饲养相应天数后取材;电镜观察大鼠因脑缺血受损血管的恢复情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),测定缺血再灌注损伤大鼠脑组织中Notch1、Notch4、Delta样配体4蛋白与基因的相对表达量.结果 Western blot、PCR结果显示,失荅剌知丸各组Notch1、Notch4、Delta样配体4蛋白和基因表达显著升高,表达量与给药剂量和治疗时间成正相关(P<0.01).结论 团队既往研究得出失荅剌知丸对大鼠脑缺血再灌注后血管损伤修复有促进作用;该修复作用可能与激活了Notch/Delta信号通路有关.

    作者:李占涛;贾孟辉;苏丹;左艳丽;于凌志;黑晓英;李宏伟 刊期: 2017年第02期

  • “芝”类药材HPLC图谱及化学分类学研究

    目的 基于HPLC图谱与化学成分分析对不同“芝”类药材进行聚类分析和化学分类学研究.方法 采用HPLC法对12个“芝”类药材的三萜类和甾醇类化学成分进行分析,并测定其中的灵芝酸A、麦角甾醇含量.以每个样品的HPLC图谱中各色谱峰的峰面积为变量,对“芝”类药材进行聚类分析.结果 各“芝”类药材均含有麦角甾醇,灵芝酸A仅在灵芝属药材中存在,栽培灵芝中灵芝酸A的含量较野生灵芝低.聚类分析表明,12个样品可聚为5类,来源于灵芝科的样品除鹿角芝外均聚为一类,来源于灵芝科的鹿角芝和多孔菌科的另三个“芝”类药材各成一类.结论 采用化学成分聚类分析的结果与传统“芝”类药材分类方法具有一致性,HPLC图谱可用于“芝”类药材的分类和鉴别研究,该研究可为“芝”类药材的进一步开发利用提供参考.

    作者:乐巍;吴玉兰;朱苗花;邱蓉丽 刊期: 2017年第02期

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