学术投稿

长链非编码RNA核仁小分子RNA宿主基因12在肝细胞癌的表达及作用机制

仝伟兵;刘志苏

关键词:癌, 肝细胞, 核仁小分子RNA宿主基因12, 生长, 侵袭
摘要:目的 探讨核仁小分子RNA宿主基因12(SNHG12)在肝细胞癌组织的表达及其影响肝癌细胞生长、侵袭的分子机制.方法 收集50例肝细胞癌组织和对应的癌旁组织标本,实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测SNHG12的表达,分析SNHG12表达与患者临床病理特征的关系,细胞水平利用小干扰RNA(siRNA)抑制SNHG12表达,Transwell实验、噻唑蓝(MTT)实验分别观察肝癌细胞侵袭、生长能力的变化.Western blot实验检测干扰SNHG12/转化生长因子(TGF)-β/Smad通路关键分子的改变.结果 肝癌组织中SNHG12表达水平(2.943±0.881)较癌旁组织(1.613±0.533)明显上调(P=0.007).肿瘤直径>5cm的肝癌患者SNHG12表达水平(4.024±0.281)明显高于肿瘤直径≤5cm的肝癌患者SNHG12表达水平(2.591±0.394,P=0.002).肝癌患者Edmondson-Steiner分级越高,SNHG12表达水平越高(P=0.001).SNHG12表达与肿瘤直径(P=0.000)、Edmonson-Steiner分级(P=0.003)、转移(P=0.031)密切相关,高表达SNHG12肝癌患者5年生存率明显低于SNHG12低表达患者(P=0.009),高表达SNHG12肝癌患者5年复发率显著高于SNHG12低表达患者(P=0.001).SNHG12通过TGF-β/Smad通路促进肝癌细胞的生长和侵袭.结论 SNHG12在肝细胞癌组织表达明显上调,参与了肝癌的发生、发展过程.
中华实验外科杂志相关文献
  • 3D打印个体化髋臼填充技术在复杂髋关节翻修中的应用

    目的 探讨3D打印技术在髋臼侧严重骨缺损的髋关节翻修术的临床疗效.方法 应用3D打印技术于PaproskyⅣ型髋臼骨缺损的复杂髋关节翻修手术11例.采集患者影像学数据并通过工作站重建CAD数据模型,转化并输出数据于3D打印机打印髋臼骨缺损模型模拟手术,同时通过髋关节翻修手术将打印的活性钛填充块修补缺损髋臼,达到髋关节的旋转中心解剖重建和髋关节假体植入.术后随访观察影像学资料和患髋Harris评分.结果 术前11例患髋Harris评分(46.6±10.7)分,影像学显示髋臼侧均有严重骨缺损,人工髋臼失稳移位.术后影像学显示髋臼侧骨缺损被打印的填充块修补,旋转中心解剖重建,翻修关节位置良好,术后6个月患髋Harris评分(85.2±4.5)分,近期临床疗效满意.结论 3D打印技术应用于髋臼侧PaproskyⅣ型骨缺损的髋关节翻修术,能够成功直观完成术前模拟手术,打印骨缺损髋臼填充块解剖修复髋臼,提高手术疗效和成功率.

    作者:刘珂;刘晓潭;侯毅;刘云可;陈骁;郑稼 刊期: 2017年第03期

  • 非受体型蛋白酪氨酸磷酸酶-11通过低氧诱导因子-1α调控破骨细胞分泌和骨吸收

    目的 探讨人破骨细胞中非受体型蛋白酪氨酸磷酸酶11(PTPN11)的表达及其作用机制.方法 收集不同年龄组健康志愿者(青年组28例:20~45岁;中年组33例:46~60岁;老年组31例:61~80岁)外周血单个核细胞,诱导成破骨细胞.将细胞分为对照组、空白组、Adv-PTPN11转染组.利用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测PTPN11、低氧诱导因子-1α(HIF-1α) mRNA的表达,利用Western blot检测PTPN11、HIF-1α蛋白的表达,噻唑蓝(MTT)法测定细胞存活,利用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定基质细胞衍生因子-1(SDF-1)、白细胞介素(IL)-6、巨噬细胞炎性蛋白-1α(MIP-1α)、B细胞激活因子(BAFF)分泌量,同时检测骨吸收.结果 与青年组(mRNA:4.468±1.441,蛋白:1.000±0.055)和中年组(mRNA:4.673±1.469,蛋白:1.021±0.076)比较,老年组破骨细胞中PTPN11 mRNA(7.510±1.941)和蛋白(1.556±0.123)表达明显上升.破骨细胞转染Adv-PTPN11后24、48、72h存活率比较差异无统计学意义.Adv-PTPN11转染组HIF-1α mRNA和蛋白的表达量明显高于对照组和空白组.Adv-PTPN11转染组SDF-1[(94.2±10.3)ng/ml]、IL-6[(25.1±3.2)ng/ml]、MIP-1α[(31.2±3.9)ng/ml]、BAFF[(39.8±3.7)ng/ml]表达量增高,同时骨陷窝数量和面积也增加.HIF-1α抑制剂YC-1处理则抑制破骨细胞中SDF-1[(73.8±7.5)ng/ml]、IL-6[(17.9±2.5)ng/ml]、MIP-1α[(19.8±1.6)ng/ml]、BAFF[(23.5±2.7)ng/ml]表达及骨吸收.结论 PTPN11可通过HIF-1α影响破骨细胞细胞因子表达和骨吸收.

    作者:刘鸣;王丹;潘军伟 刊期: 2017年第03期

  • 肝脏自然杀伤细胞对梗阻性黄疸小鼠模型肝纤维化的影响

    目的 观察肝脏自然杀伤(NK)细胞对梗阻性黄疸小鼠模型肝纤维化的影响.方法将小鼠随机分为A组:手术+聚肌胞苷酸(Poly I∶C)组;B组:手术组+磷酸盐缓冲液(PBS)组;C组:假手术+Poly I∶C组;D组:假手术+PBS组,每组20只.手术组行胆总管双重结扎术构建梗阻性黄疸模型,假手术组仅游离胆总管.A组、C组每48h腹腔注射1次Poly I∶C,B组、D组注射等量PBS,于第14天处死小鼠,比较各组小鼠血清肝功能指标变化,对肝脏组织行苏木素-伊红(HE)染色、Masson三染色、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)免疫染色,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测肝脏组织NK细胞表面特异性标志NK1.1、α-SMA及肿瘤坏死因子(TNF)-α mRNA相对表达量.结果 手术组血清肝功能指标高于假手术组,血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平A组[(829.78±79.33)、(752.00±67.90)U/L]较B组[(508.69±102.46)、(486.20±126.80)U/L]升高(P=0.032,P=0.030);肝脏组织HE染色、Masson三染色结果表明,A组肝纤维化程度较B组重,α-SMA免疫染色结果根据阳性细胞数及阳性强度评分A组(+++)、B组(++)、C组(+)、D组(+);NK1.1、α-SMA、肿瘤坏死因子-α(TNF-α) mRNA相对表达量手术组(A组:181.79±13.68、239.67±12.09、12.39±0.87;B组:168.69±12.90、179.96±20.95、7.44±0.66)高于假手术组(C组:91.86±5.95、1.21±0.31、1.51±0.03),NK1.1 mRNA表达量均较D组升高(P=0.029,P=0.031,P=0.027).结论 Poly I∶C 诱导肝脏NK细胞活化并肝内聚集,加重了梗阻性黄疸小鼠模型肝纤维化,梗阻性黄疸减弱了肝脏NK细胞的抗肝纤维化的作用.

    作者:刘传江;周文婧;许先玲;秦涛;陈琳;付强;胡明星;王玉柱 刊期: 2017年第03期

  • 胰腺星状细胞在胰腺癌化疗耐药中的作用

    目的 探讨胰腺星状细胞(PSCs)在胰腺癌化疗耐药现象中的作用.方法 应用人胰腺癌细胞株与PSCs共培养,将抑制率和半数抑制剂量(IC50)的变化作为评价化疗耐药的指标.在共培养前后,通过反转录-聚合酶链反应(PT-PCR)和Western blot测定Hes 1蛋白的表达,以及加用Notch信号通路阻断剂前后进行对比.结果 PANC-1和 BxPC-3细胞以吉西他滨治疗(100ng/ml)后的生长抑制率分别是(52.3±12.1)%和(65.1±16.8)%.与PSCs共培养后,两种胰腺癌细胞的生长抑制率降低至(38.5±11.6)%(PANC-1)和(51.2±10.9)%(BxPC-3).与PSCs共培养后,胰腺癌细胞的IC50值明显升高,PANC-1:(78.2±4.8)ng/ml升至(206.5±8.2)ng/ml;BxPC-3:(65.4±6.5)ng/ml升至(189.6±8.1)ng/ml.胰腺癌细胞中Hes 1的表达均明显升高.在使用Notch信号通路阻断剂(L1790)和Hes 1 siRNA转染后,胰腺癌细胞的IC50值分别降为:(89.5±16.4)ng/ml(PANC-1,L1790)和(61.6±12.9)ng/ml(BxPC-3,L1790),(94.5±20.4)ng/ml(PANC-1,L1790)和(67.5±11.3)ng/ml(BxPC-3,L1790).结论 PSCs能够导致胰腺癌细胞对吉西他滨化疗的耐药,Notch信号通路在其中起重要作用.

    作者:李嘉;泽多;曹锋;刘爽;孙海晨;崔叶青;李非 刊期: 2017年第03期

  • 前外侧入路侧前方减压在胸腰段爆裂骨折中的临床应用

    目的 探讨前外侧入路行减压植骨融合内固定术治疗胸腰段爆裂骨折伴有神经损伤患者的手术效果.方法 采用前外侧入路减压植骨融合内固定术治疗胸腰段(T11~L2)爆裂骨折伴有神经症状的患者22例.根据影像学资料,比较患者术前、术后及末次随访的Cobb角(°)、椎体前缘高度压缩百分比(%)、椎管占位率(%).根据临床表现,比较患者术前、术后的美国脊髓损伤协会(ASIS)脊髓损伤水平评分,术后及末次随访的日本矫形外科学会(JOA)下腰痛评分改善率.结果 22例均获得(18.0±7.2)个月随访,Cobb角:术前(20.532±4.045)°、术后(5.936±1.081)°、末次随访(6.564±0.984)°,术后与术前比较差异有统计学意义(t=14.822,P=0.000),末次随访与术前比较差异有统计意义(t=16.134,P=0.000),末次随访与术后比较差异无统计学意义(t=-1.834,P=0.081);椎体前缘压缩百分比:术前(51.182±7.670)%、术后(91.773±2.308)%、末次随访(90.545±4.284)%,术后与术前比较差异有统计学意义(t=-21.509,P=0.000),末次随访与术前比较差异有统计学意义(t=-18.990,P=0.000),末次随访与术后比较差异无统计学意义(t=1.528,P=0.141);椎管占位率:术前(34.818±5.142)%、术后(3.155±0.578)%、末次随访(3.300±0.478)%,术后与术前比较差异有统计学意义(t=29.136,P=0.000),末次随访与术前比较差异有统计学意义(t=28.304,P=0.000),末次随访与术后比较差异无统计学意义(t=-1.560,P=0.134).ASIS评分比较上2例完全性损伤患者无提高,12例患者获得1级提高,8例患者获得2级提高.JOA评分改善率上术后优良患者14例,末次随访优良患者19例,末次随访优良率(86.363%)与术后优良率(63.645%)比较明显提高.结论 通过前外侧入路进行侧前方减压植骨融合内固定术治疗伴有神经症状的胸腰段爆裂骨折能有效纠正后凸畸形,恢复并维持椎体前缘高度,椎管减压充分,患者神经功能恢复满意,生活质量提高,可作为胸腰段爆裂骨折伴神经症状的有效手术方式.

    作者:张官锋;侯庆先;杨文玖;刘成;王志杰 刊期: 2017年第03期

  • 微管不稳定蛋白和CD133在骨肉瘤组织的表达及其临床意义

    目的 探讨骨肉瘤组织中微管不稳定蛋白(Stathmin)和CD133的表达及其与骨肉瘤临床病理特征的关系.方法 收集22例骨软骨瘤患者和70例骨肉瘤患者手术切除组织,采用免疫组织化学法检测Stathmin和CD133在组织中表达水平.结果 Stathmin在骨肉瘤组织中表达率明显高于骨软骨瘤组织(64.29%比13.64%;x2=17.210, P=0.000),Stathmin表达水平与骨肉瘤Eneeking分期、软组织浸润、肺转移明显相关(x2=5.233, P=0.022;x2=5.223, P=0.022;x2=4.183,P=0.041);CD133在骨肉瘤组织中表达率明显高于骨软骨瘤组织(57.14%比22.73%;x2=7.934,P=0.005),CD133表达水平均与骨肉瘤Eneeking分期、肺转移明显相关(x2=5.973,P=0.015;x2=5.647,P=0.018).结论 Stathmin和CD133可能在骨肉瘤的发生发展过程中发挥一定作用.

    作者:洪峰;袁高乐;张辉洁;刘康;成少昂;彭晓霞;顾智荣 刊期: 2017年第03期

  • 岛状颞浅筋膜瓣移植预构颈部扩张轴型皮瓣修复面部大面积瘢痕畸形

    2013年1月至2016年6月,我们采用岛状颞浅筋膜瓣移植预构颈部扩张轴型血管皮瓣,修复面部烧伤大面积瘢痕切除后的缺损并重建面部轮廓,现报告如下.一、资料与方法1.一般资料:本组16例面部烧伤后瘢痕畸形,男11例,女5例,平均年龄30.8岁.病因包括火焰烧伤10例,化学烧伤2例,热液烫伤2例.其中12例瘢痕位于一侧面部累及2个以上美学分区(左5例,右7例),4例累及全面部.

    作者:王付勇;李华强 刊期: 2017年第03期

  • 兔VX2胰腺癌模型冷冻消融治疗的研究

    目的 探讨合适的兔VX2胰腺癌模型以及佳的冷冻消融方法.方法 采用VX2肿瘤组织接种兔胰腺建立VX2胰腺癌模型.实验兔采用随机区组法随机分为4组:治疗组A:术中冷冻范围包括胰腺肿瘤和癌旁组织;治疗组B:术中冰球直径与肿瘤直径一致;治疗组C:术中冰球直径小于肿瘤直径;对照组:只行开腹手术.监测各组实验兔冷冻前后血清特异性烯醇化酶(NSE)、C反应蛋白(CRP)和淀粉酶(AMY)水平变化以及记录生存期寻求佳冷冻消融方法.结果 成功建立兔VX2胰腺癌模型,造模成功后28d血清中NSE水平增加至(88.43±15.25)ng/ml.冷冻后1d治疗组A、B 和C中NSE分别增加至(27.31±4.28)、(23.64±6.82)和(19.49±2.49)ng/ml,术后3d均逐渐降低,术后7d降至正常水平.对照组和治疗组A、B、C的中位生存期分别为29、40、52和35d,与对照组比较,治疗组A和C的生存期差异无统计学意义(P=0.080),治疗组B生存期显著长于其他组(P=0.040、0.030、0.010).结论 成功建立以NSE为肿瘤标志物的兔VX2胰腺癌模型,胰腺癌开腹冷冻消融法的佳选择为术中冰球直径与肿瘤直径一致.

    作者:陶慧敏;刘桂凤;曾健滢;方刚;梁冰;周亮;牛立志;徐克成 刊期: 2017年第03期

  • 体外循环心内直视手术对患者心肌内质网应激的影响

    目的 探讨心内直视手术对内质网应激(ERS)的影响以及不停跳心脏手术能否减轻ERS诱导的心肌炎性反应,具有更好的心肌保护效果.方法 择期行二尖瓣置换术(MVR)的风湿性心脏病40例患者,随机分为心脏不停跳组(不停跳组)和心脏停跳组(停跳组)两组,分别于体外循环(CPB)开始和CPB结束时取两组病例右心耳组织标本,检测标本葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、核因子-κB(NF-κB)p65 mRNA表达及蛋白相对含量.结果 两组组病例在CPB开始时GRP78、NF-κBp65 mRNA表达及蛋白相对量比较,差异无统计学意义(P=0.223,0.383;P=0.760、0.736);CPB结束时,对照组GRP78 mRNA及蛋白表达分别为2.31±0.44、0.096±0.024,实验组为1.56±0.29、0.061±0.021,对照组NF-κBp65 mRNA及蛋白表达分别为2.89±0.93、0.129±0.034,实验组为1.73±0.48、0.085±0.025,和CPB开始比较,两组GRP78、NF-κBp65 mRNA表达及蛋白量均明显升高(P=0.000,0.001;P=0.000,0.003;P=0.000,0.000;P=0.000,0.001),但不停跳组升高幅度较小(P=0.001,0.002;P=0.001,0.001).结论 心内直视手术能激活ERS,诱发心肌局部炎性反应;不停跳心脏手术能减轻ERS,减轻心肌的炎性反应.

    作者:谢晓勇;郑宝石;何巍;罗程;黎玉贵;冯旭 刊期: 2017年第03期

  • 关节松解术联合中药熏洗治疗外伤性近指间关节僵硬

    指骨骨折、关节脱位及肌腱、关节周围软组织损伤均可导致指间关节僵硬,单纯采用物理治疗或手术松解很难取得满意的效果[1].我科于2014年2月至2016年9月采用关节松解术联合中药熏洗治疗外伤性近指间关节僵硬,取得满意疗效.

    作者:余湘;邢丹谋;冯伟 刊期: 2017年第03期

  • 11~19赖氨酸富集白血病基因2对前列腺癌细胞C4-2增殖的影响

    目的 观察11~19赖氨酸富集白血病基因2(ELL2) 在人前列腺癌组织中表达水平及其对人前列腺癌细胞株C4-2增殖的影响.方法 免疫组织化学方法观察ELL2在人前列腺癌组织中的表达,探讨ELL2与前列腺癌恶性程度的关系;用人工合成雄激素R1881刺激人前列腺癌细胞株C4-2,在不同时间点检测其对雄激素的反应性;分别对C4-2细胞株转染ELL2特异性干扰RNA(ELL2-siRNA)及过表达ELL2质粒,噻唑蓝(MTT)实验评估干预细胞ELL2表达后细胞增殖能力的变化,溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)掺入实验评估细胞DNA合成能力的变化.结果 ELL2在人前列腺癌组织中表达水平明显降低,且随着前列腺癌恶性程度的增加进一步降低;对ELL2及前列腺癌的Gleason评分进行相关分析显示,两者呈负相关(r=0.836,P=0.000).R1881可在48h内促进ELL2的蛋白表达,在24h及48h的蛋白表达量分别增加(38.27±10.11)%(t=7.573,P=0.005)、(58.34±13.70)%(t=8.519,P=0.003).C4-2细胞转染ELL2特异性干扰RNA后,ELL2在蛋白水平明显降低,两条干扰RNA组的细胞ELL2蛋白表达分别下降(56.38±11.26)%(t=10.01,P=0.002)、(65.27±12.10)%(t=10.790,P=0.002);转染过表达ELL2质粒后,ELL2在蛋白水平明显升高,过表达组的细胞ELL2蛋白增加(80.23±20.94)%(t=7.662,P=0.005).转染ELL2特异性干扰RNA使C4-2细胞增殖能力明显升高,两条干扰RNA组的细胞增殖能力分别升高(39.28±8.52)%(t=11.300,P=0.000)、(48.20±7.87)%(t=15.000,P=0.000);转染过表达ELL2质粒使细胞增殖能力降低,过表达组的细胞增殖能力降低(42.74±10.38)%(t=10.090,P=0.000).转染ELL2特异性干扰RNA使细胞DNA合成能力增加,而转染过表达ELL2组的DNA合成能力降低.结论 ELL2在人前列腺癌组织中低表达,且与其恶性程度呈负相关,ELL2可在一定程度上抑制前列腺癌细胞的增殖能力.

    作者:杨铁军;王道元;马永康;乔保平;何朝宏 刊期: 2017年第03期

  • DOC2/DAB2结合蛋白在胃癌组织的表达及临床意义

    目的 探讨DOC2/DAB2结合蛋白(DAB2IP)基因在胃癌组织的表达及其临床意义.方法 应用免疫组织化学方法检测122例胃癌组织、正常胃黏膜以及淋巴结组织中的DAB2IP蛋白表达水平.结果 DAB2IP的表达在正常黏膜组织(高表达95例)中明显高于胃癌组织(高表达33例,P=0.000)和转移淋巴结组织(高表达20例,P=0.000),其表达水平与肿瘤大小(肿瘤大小≥3cm 比<3cm低表达:66例/23例,P=0.017)、淋巴结转移(有/无淋巴结转移低表达:57例/32例,P=0.006)、肿瘤部位(远/近端胃癌低表达:59例/30例,P=0.034)、远处转移(无/有远处转移低表达:63例/26例,P=0.022)、临床分期(早/进展期胃癌低表达:9例/80例,P=0.018)以及生存时间(高/低表达平均生存时间:59.6个月/47.8个月,P=0.001)等均明显相关.结论 DAB2IP表达水平下调可能促进胃癌的发生、发展及转移并影响预后.

    作者:王向阳;蔡威;王辉 刊期: 2017年第03期

  • 转录因子T-bet在射频消融激活的抗肿瘤免疫应答中的作用

    目的 观察转录因子T-bet在射频消融(RFA) 激发的抗肿瘤免疫应答中的作用.方法 建立C57BL/6小鼠B16黑色素瘤双侧背部移植瘤模型,当肿瘤体积达500mm3时对右侧肿瘤进行RFA治疗,3d后流式细胞术分析左侧肿瘤浸润淋巴细胞亚群数量以及T-bet 在T细胞与自然杀伤(NK)细胞中的表达;实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测细胞因子的信使核糖核苷酸(mRNA)表达水平;建立敲T-bet基因(T-bet-/-)小鼠RFA治疗模型,分析左侧肿瘤浸润淋巴细胞亚群数量,记录小鼠左侧肿瘤生长曲线与小鼠生存时间.结果 RFA治疗能抑制对侧肿瘤生长,延长小鼠生存时间,两组的生存时间分别为[(29.0±1.4)d]与[(21.0±0.7)d],差异有统计学意义(P=0.000);对照组小鼠左侧肿瘤浸润CD45+、CD3+、CD4+叉状头/翅膀状螺旋转录因子(FoxP3)-、CD8+、NK(NK1.1+)细胞计数(106个/g肿瘤)分别为1.40±0.32、0.46±0.08、0.14±0.11、0.20±0.03与0.05±0.02,消融组分别6.22±0.80、2.06±0.11、0.53±0.20、0.68±0.10与0.17±0.03,差异有统计学意义(P=0.000),两组调节性T细胞(Treg:CD4+FoxP3+)计数分别0.06±0.01与0.07±0.02、差异无统计学意义(P=0.978);消融组Th1型细胞因子IFN-γ、TNF-α和IL-2的mRNA表达水平相对于对照组分别为6.50±0.51、5.02±0.48与4.12±0.31倍,差异有统计学意义(P=0.000);对照组左侧肿瘤浸润CD4+T、CD8+T、NK细胞中T-bet表达率分别为(22.30±0.60)%、(28.40±2.20)%与(9.10±0.20)%,消融组分别(42.60±3.10)%、(48.30±2.50)%与(19.10±1.30)%,差异有统计学意义(P=0.000);T-bet-/-小鼠模型中,RFA治疗组与对照组小鼠生存时间分别(21.00±1.20)d与(21.00±0.56)d,差异无统计学意义(P=0.981).对照组左侧肿瘤CD45+、CD3+、CD4+FoxP3-、CD4+FoxP3+、CD8+与NK1.1+细胞计数(106个/g肿瘤)分别为1.46±0.59、0.43±0.04、0.20±0.03、0.09±0.01、0.15±0.03与0.04±0.02,消融组分别1.55±0.21、0.45±0.10、0.22±0.04、0.11±0.01、0.13±0.09与0.04±0.01,差异均无统计学意义(P值分别为0.454、0.982、0.800、0.987、0.462、0.278).结论 转录因子T-bet在RFA治疗激发的Th1型抗肿瘤免疫应答中发挥重要作用.

    作者:孙明芬;石亮荣;戴夕超;陈陆俊;徐斌;朱一蓓;蒋敬庭;吴昌平 刊期: 2017年第03期

  • 脾切除联合贲门周围血管离断术对肝硬化门脉高压症模型大鼠免疫功能及肝纤维化指标的影响

    目的 观察脾切除联合贲门周围血管离断术对肝硬化门脉高压症模型大鼠免疫功能及肝纤维化指标的影响.方法 24只健康雄性SD大鼠建立肝硬化门脉高压症(PHT)模型,随机分为假手术组、脾全切术和脾切除联合贲门周围血管离断术组(联合组)各12只,另选取12只健康雄性SD大鼠作为空白对照组.比较3组大鼠肝脏指数、T淋巴细胞亚群、肝纤维化指标.结果 假手术组大鼠体重明显低于空白对照组,肝重、肝脏指数明显高于空白对照组(t=6.185、10.900、16.445,P=0.000,P=0.000),CD4+、CD4/CD8明显低于空白对照组,CD8+含量明显高于空白对照组(t=4.665、5.428、4.608,P=0.000),透明质酸酶(HA)、层黏蛋白(LN)、血清Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)含量均明显高于空白组(t=23.834、12.700、9.832、20.734,P=0.000,P=0.000);联合组体重明显高于假手术组,肝重、肝脏指数明显低于假手术组(t=2.126、3.039、5.442,P=0.000),CD4+、CD4/CD8明显高于假手术组,CD8+明显低于假手术组(t=2.378、4.360、3.460,P=0.000),HA、PC-Ⅲ、Ⅳ-C、LN含量均明显低于假手术组(t=5.420、10.303、5.197、10.903,P=0.000,P=0.000).结论 脾切除联合贲门周围血管离断术有助于改善肝硬化门脉高压症大鼠免疫功能,缓解肝纤维化的严重程度.

    作者:李仁锋;赵龙栓;叶健文;翟文龙;薛建锋 刊期: 2017年第03期

  • 细胞核增殖抗原、角蛋白7和角蛋白20在膀胱癌组织的表达及临床意义

    目的 探讨细胞核增殖抗原(Ki-67)、角蛋白7(CK7)和角蛋白20(CK20)在膀胱癌组织的表达及预后意义.方法 应用免疫组织化学链菌素抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)法检测138例膀胱癌组织石蜡切片中Ki-67、CK7和CK20的表达,并结合临床随访资料进行分析.结果 Ki-67、CK7和CK20在膀胱癌组织中均高表达,阳性率分别为82.6%、88.4%和78.3%.Ki-67在膀胱癌中的表达与分级(P=0.001)、分期(P=0.007)、肿瘤复发(P=0.044)和转移(P=0.037)显著相关;CK7在膀胱癌中的表达与分级(P=0.002)、分期(P=0.043)、转移(P=0.012)、组织学分型(P=0.020)显著相关;CK20在膀胱癌中的表达与患者性别(P=0.001)、分级(P=0.012)、分期(P=0.021)、肿瘤大小(P=0.034)及肿瘤复发(P=0.035)显著相关.Spearman等级分析表明Ki-67与CK20之间(P=0.026)及CK20与CK7之间(P=0.010)呈正相关,而Ki-67与CK7之间无明显相关(P=0.319).Ki-67阳性及阴性患者的中位无进展生存期分别为10、21个月,Kaplan-Meier生存分析表明两者差异有统计学意义(P=0.000);CK7阳性及阴性患者的中位无进展生存期分别为13、9个月,Kaplan-Meier生存分析表明两者差异无统计学意义(P=0.074);CK20阳性及阴性患者的中位无进展生存期分别为9、18个月,Kaplan-Meier生存分析表明两者差异有统计学意义(P=0.000).结论 Ki-67及CK20在膀胱癌组织中的表达随着肿瘤分级分期的增高而升高,CK7的表达随肿瘤分级分期的增高而降低,三者共同参与到膀胱癌的发生发展中.

    作者:田向永;顾朝辉;贾占奎;段文静;李松超;王军;金志波;杨锦建 刊期: 2017年第03期

  • 骨髓间充质干细胞联合白细胞介素-6单克隆抗体诱导大鼠心脏移植免疫耐受的研究

    目的 探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)和白细胞介素-6单克隆抗体(IL-6 mAb)对大鼠心脏移植免疫耐受的影响及机制.方法 供体SD大鼠和受体Wistar大鼠各20只随机分成4组:Ⅰ组:SD大鼠到Wistar大鼠同种异位腹腔心脏移植;Ⅱ组:受体术前连续5d和术后连续3d经颈静脉输注生理盐水,每天0.2ml;Ⅲ组:受体术前连续5d和术后连续3d经颈静脉输注MSCs,每天0.2ml(MSCs:1.0×106/0.2ml);Ⅳ组:受体术前连续5d和术后连续3d经颈静脉输注MSCs和IL-6 mAb[100μg/(kg·d)].检测供心存活时间、供体心脏病理改变,受体调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)比例,叉状头/翅膀状螺旋转录因子(FoxP3)蛋白表达率,辅助性T细胞17(Th17)比例和外周血中转化生长因子-β1(TGF-β1)、白细胞介素(IL)-10、IL-2、IL-6、IL-17的变化.结果 Ⅳ组平均存活时间[(40.800±8.815)d]较其他组[Ⅰ:(7.600±1.140)d;Ⅱ:(8.600 ±1.817)d;Ⅲ:(21.800 ±1.304)d]明显延长;CD4+CD25+Treg细胞比例[Ⅰ:(4.70±0.15)%;Ⅱ:(4.90±0.40)%;Ⅲ:(11.22±0.28)%;Ⅳ:(21.40±0.62)%]、FoxP3蛋白表达率[Ⅰ:(71.21±1.05)%;Ⅱ:(71.07±1.41)%;Ⅲ:(72.69±3.84)%;Ⅳ:(96.24±1.42)%]、IL-10[Ⅰ:(29.03±1.05)pg/ml;Ⅱ:(30.40±1.63)pg/ml;Ⅲ:(88.65±1.84)pg/ml;Ⅳ:(136.14±2.32))pg/ml]、TGF-β1[Ⅰ:(165.52±8.68)pg/ml;Ⅱ:(169.73±3.45)pg/ml;Ⅲ:(339.38±13.40)pg/ml;Ⅳ:(475.79±10.11)pg/ml]检测结果Ⅲ、Ⅳ组高于Ⅰ、Ⅱ组,Ⅳ组高于Ⅲ组;Th17细胞比例[Ⅰ:(7.18±0.48)%;Ⅱ:(6.98±0.61)%;Ⅲ:(4.16±0.23)%;Ⅳ:(1.28±0.19)%]、IL-6[Ⅰ:(70.96±1.20)pg/ml;Ⅱ:(70.06±2.10)pg/ml;Ⅲ:(42.94±2.14)pg/ml;Ⅳ:(16.57±1.05)pg/ml]、IL-2[Ⅰ:(112.94±3.52)pg/ml;Ⅱ:(111.48±2.71)pg/ml;Ⅲ:(66.96±1.04)pg/ml;Ⅳ:(33.31±1.41)pg/ml]、IL-17[Ⅰ:(96.86±1.15)pg/ml;Ⅱ:(92.72±4.91)pg/ml;Ⅲ:(49.49±1.63)pg/ml;Ⅳ:(21.22±0.82)pg/ml]检测结果:Ⅳ组和Ⅲ组明显低于Ⅰ组、Ⅱ组,Ⅳ组低于Ⅲ组.结论 MSCs联合IL-6 mAb可显著提高受体CD4+CD25+FoxP3+Treg细胞的比例、降低Th17细胞比例,下调IL-2、IL-17,上调IL-10、TGF-β1等免疫抑制因子的表达,从而达到显著延长大鼠同种心脏移植物的存活时间.

    作者:章传凯;沈振亚;滕晓梅;张有斌;余云生 刊期: 2017年第03期

  • 非浸润性膀胱癌中p16及死亡相关蛋白激酶基因的甲基化

    目的 探讨p16及死亡相关蛋白激酶(DAPK)启动子在非浸润性膀胱癌患者血清中的甲基化及意义.方法 应用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测非浸润性膀胱癌患者(实验组,25例)及健康志愿者(对照组,25例)的血清游离DNA中p16及DAPK基因启动子甲基化,分析其临床意义.结果 实验组血清中的p16基因启动子甲基化率为52%(13/25),高于对照组的24%(6/25),两者比较差异有统计学意义(x2=4.160,P=0.041);实验组血清中的DAPK基因启动子甲基化率为60%(15/25),高于对照组的32%(8/25),两者比较差异有统计学意义(x2=3.945,P=0.047).p16及DAPK基因启动子甲基化与吸烟史(x2=0.187,P=0.665;x2=0.109,P=0.741)、年龄(x2=0.000,P=0.991;x2=0.038,P=0.845)、性别(x2=0.746,P=0.382;x2=1.288,P=0.256)及肿瘤级别(P=1.000;P=1.000)无明显相关.结论 p16和DAPK基因启动子甲基化与非浸润性膀胱癌关系密切.

    作者:陈炳;姜应传;邬嘉波;吴海如;俞加法;张小荣 刊期: 2017年第03期

  • 下调长链非编码RNA TUG1表达对骨肉瘤细胞迁移和侵袭的影响

    目的 观察下调非编码RNA TUG1表达对骨肉瘤细胞迁移侵袭力的影响.方法 骨肉瘤Saos-2细胞分为3组:TUG1小干扰RNA(siRNA)组(TUG1 siRNA)、阴性对照小干扰RNA组(Con-B)和空白对照组(Con-A).其中,骨肉瘤Saos-2细胞siRNA组以TUG1 siRNA转染处理.采用荧光实时定量聚合酶链反应(PCR)检测3组细胞中TUG1水平,采用划痕试验检测细胞迁移能力,以Transwell方法检测细胞的侵袭能力.结果 与Con-A和Con-B组比较,siRNA组癌细胞TUG1mRNA 水平降低.迁移试验结果显示,Con-A、Con-B组和siRNA组痕间间距分别为(326±11)、(335±15)、(588±11)μm(F=22.761,P=0.000);Transwell结果显示,Con-A、Con-B和siRNA组穿膜细胞数分别为(125.0±2.2)、(118.0±1.8)和(56.0±1.8)个(F=173.000,P=0.000).结论 TUG1在骨肉瘤细胞中高表达,且与骨肉瘤细胞迁移侵袭相关.

    作者:谢军;邹晨;范钰 刊期: 2017年第03期

  • 胰岛素对食管鳞癌离体细胞的化疗增敏作用

    本研究旨在食管鳞癌离体细胞中验证胰岛素的化疗增敏作用.一、材料与方法1.标本及处理:10例标本取自于我科行手术且术前未行放化疗的食管鳞癌患者.机械法剪碎结合胰酶消化法获取原代肿瘤细胞.2.噻唑蓝(MTT)比色分析法:检测胰岛素及顺铂分别作用于肿瘤细胞的浓度IC10和 IC30,以及胰岛素在顺铂对肿瘤细胞增殖中的作用.

    作者:李峰;杨洋;吴恺;赵松 刊期: 2017年第03期

  • 微小RNA-105在脑胶质瘤中的表达及其对肿瘤生物学行为的影响

    目的 观察脑胶质瘤中微小RNA(miRNA,miR)-105的表达,探讨其对肿瘤细胞增殖、迁移等生物学行为的影响.方法 收集不同病理级别的标本,采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测脑胶质瘤及癌旁组织中miR-105的表达.细胞计数试剂盒(CCK-8)实验检测细胞增殖.Transwell实验检测细胞迁移能力.结果 与癌旁组织比较,miR-105在脑胶质瘤和癌旁组织中的表达量分别为6.043±0.427与5.216±0.418,脑胶质瘤组织中miR-105的表达明显下调为癌旁组织中miR-105表达量的56.37%,差异有统计学意义(P=0.000),miR-105在脑胶质瘤组织中的表达水平显著低于正常组织,且与病理分级呈负相关(P=0.001).CCK-8实验中miR-105 mimic 转染后细胞增殖速度较未处理组下降0.365±0.033(50.65%,P=0.002),抑制miR-105后,增殖速度较未处理组升高(2.434±0.030,54.76%,P=0.021),差异有统计学意义.Transwell 实验中,miR-105转染后细胞迁移能力明显降低 (P=0.009).结论 miR-105在脑胶质瘤中呈低水平表达,且与胶质瘤级别的升高呈负相关,还可以抑制脑胶质瘤的增殖、迁移等生物学行为.

    作者:赵培超;冯轲昕;张智峰;刘献志;安吉洋;周金桥 刊期: 2017年第03期

中华实验外科杂志

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主管:中国科学技术协会

主办:中华医学会