学术投稿

shRNA腺病毒介导的JNK1RNAi抑制U87MG人胶质瘤细胞的增殖

董林;葛瑞民;祁楠;沈丽

关键词:c-Jun氨基末端激酶, RNA干扰, 小发夹RNA, 细胞增殖, 神经肿瘤
摘要:目的 研究腺病毒介导的shRNA对U87MG人胶质瘤细胞JNK1基因表达的抑制作用,以及对细胞增殖的影响.方法 设计合成针对JNK1基因以及无义对照的shRNA序列,通过腺病毒介导shRNA的表达来下调JNK1的表达;Q-PCR和Western blot验证病毒效果;用BrdU掺入的方法 来检测细胞的增殖情况.结果 限制性酶切及DNA测序结果 证实shRNA插入片段完全正确;Q-PCR和Western blot结果 表明JNK1的表达与对照组相比明显下降;BrdU掺入结果 表明Ad-shJNK1处理组细胞增殖显著降低.结论 重组的JNK1 shRNA腺病毒构建成功,JNK1的下调明显抑制了细胞的增殖,为深入研究JNK信号通路在神经肿瘤中的作用奠定基础.
肿瘤防治研究杂志相关文献
  • DcR3对乳腺癌细胞凋亡的影响及其在乳腺癌血清中的表达

    目的 研究诱捕受体3(DcR3)单克隆中和性抗体对乳腺癌细胞生长和凋亡的影响,以及DcR3在乳腺癌患者血清中的表达及临床意义.方法 将DcR3单克隆中和性抗体作用于体外培养的人乳腺癌细胞系MCF-7,检测细胞增殖情况及Caspase 3/7活性变化,应用Hoechst 33342及碘化丙啶双重染色荧光显微镜下观察细胞凋亡形态及计算凋亡率.应用ELISA检测乳腺癌患者血清中DcR3的表达.结果 DcR3中和性抗体可抑制MCF-7细胞生长并可诱导细胞凋亡(P<0.05).乳腺癌患者血清DcR3水平明显高于健康对照组(P<0.01);DcR3表达水平与肿瘤大小及临床TNM分期有关(P<0.05).结论 DcR3对人乳腺癌细胞增殖具有抑制作用,其机制与诱导肿瘤细胞凋亡有关.DcR3与乳腺癌的发生及恶性进展有关,检测DcR3血清表达有助于乳腺癌诊断及预后判断.

    作者:杨梅松竹;陈罡;党裔武;罗殿中 刊期: 2011年第07期

  • 全内脏反位合并胃癌2例报告并文献复习

    全内脏反位(all internal organs reverse)合并胃癌罕见.现结合国内文献将我院2010年5月-7月收治的2例经病理确诊的全内脏反位合并胃腺癌并行根治性远端胃大部切除术患者的情况报告如下.

    作者:马友龙;胡大为;祁海艳;张学诚 刊期: 2011年第07期

  • MAP4K4在肝细胞癌中的表达及意义

    目的 探讨MAP4K4蛋白在肝细胞癌中的表达及临床病理学意义.方法 用400例肝细胞癌蜡块标本构建肝细胞癌组织芯片,采用免疫组织化学技术检测MAP4K4蛋白在含400例配对肝细胞癌及癌旁组织的表达,并分析不同临床病理参数中MAP4K4蛋白表达水平的差异.结果 在正常肝、肝炎和肝硬化组织中MAP4K4呈一致阴性或弱阳性表达,周围结缔组织、血管和胆管无MAP4K4阳性着色,Kuffer细胞和淋巴细胞生发中心可见阳性染色;异型增生结节的肝细胞中MAP4K4的表达明显强于正常肝、肝炎和肝硬化组织,肝细胞癌组织中MAP4K4表达显著增强,其中过度表达194例(48.5%),灶性阳性或阴性206例(51.5%);HBsAg阳性患者MAP4K4阳性率51.5%(157/305)显著高于阴性患者的38.8% (37/95)(P=0.033),肿瘤直径≤2 cm的MAP4K4阳性率为31.6%(18/57)显著低于肿瘤直径>2cm的51.3%(176/343) (P=0.006),MAP4K4在不同组织学分级中的阳性率差异有统计学意义(P<0.001),肝内转移病例的MAP4K4阳性率为55.5%(152/274)显著高于未转移者的33.3% (42/126) (P=0.002),MAP4K4表达在患者年龄、血清甲胎蛋白浓度、肝硬化、包膜浸润方面差异无统计学意义.结论 MAP4K4在肝细胞癌组织中高表达,并且其表达水平与HBV感染状态、肿瘤大小、组织学分级及转移情况可能有一定关系.

    作者:胡蓉环;刘安文;蔡婧;张树辉 刊期: 2011年第07期

  • 小RNA干扰降低COX-2表达对乳腺癌细胞趋化和侵袭能力的影响

    目的 探讨利用小RNA干扰技术降低COX-2表达对高度恶性乳腺癌MDA-MB-231细胞趋化和侵袭能力的影响.方法 应用合成的小RNA干扰质粒转染MDA-MB-231细胞株,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测COX-2 mRNA的表达.通过趋化运动实验检测细胞的运动能力;体外侵袭实验检测细胞的侵袭能力.结果 限制性内切酶的酶切结果 和DNA测序结果 显示成功构建了干扰质粒pSUPER- siCOX-2,转染后的细胞株分别命名为MDA-MB-231/pSUPER-basic(对照组)和MDA-MB-231/pSUPER-siCOOX-2(实验组).转染后48 h,与MDA-MB-231/pSUPER-basic细胞相比,MDA-MB-231/pSUPER- siCOX-2细胞的COX-2 mRNA表达水平下降(P<0.01);COX-2减低的乳腺癌细胞的趋化运动能力比对照组细胞降低(P<0.01);COX-2减低的乳腺癌细胞侵袭并穿透Matrivgel膜基质的细胞数量比对照组细胞少(P<0.01).结论 利用siRNA干扰技术降低COX-2表达对乳腺癌MDA-MB-231细胞株的趋化和侵袭能力具有明显的抑制作用.

    作者:赵云;李媛媛;张宝刚;刘秀静;徐滨;赵一诺;刘雨清;王琳 刊期: 2011年第07期

  • 胃癌根治术后淋巴结转移率与患者预后的关系

    目的 探讨淋巴结转移率对胃癌患者预后预测的意义.方法 回顾性分析我院238例胃癌根治术患者的术后病理资料,分析胃癌患者预后和UICC/AJCC N分期及淋巴结转移率的关系.结果 患者术后5年累计生存率为42.0%,UICC/AJCC N分期和淋巴结转移率均是胃癌患者的预后预测因素.根据UICC/AJCC N分期系统,获得淋巴结总数大于15枚和少于15枚的同一N分期患者术后5年生存率存在显著差异.但根据淋巴结转移率分期系统,淋巴结总数大于15枚和少于15枚的同一淋巴结转移率分期患者预后无显著差异.结论 淋巴结转移率是胃癌患者的简单、可靠的预后预测因素,可以防止获得淋巴结总数不足导致的N分期降低.

    作者:查勇;寸英丽;马春笋;陈真;杨步荣;黄云超 刊期: 2011年第07期

  • PTEN在正常脑组织及脑胶质瘤中的表达与细胞凋亡的关系

    胶质瘤是中枢神经系统中常见的恶性肿瘤,在国内胶质瘤的发病率居颅内肿瘤之首,虽然脑肿瘤的手术技巧以及放疗和化疗等综合治疗已经取得了很大的进展,但恶性胶质瘤患者的预后仍然很差.随着分子生物学和分子遗传学的发展,人类对胶质瘤的产生和发展的认识逐步加深.我们采用免疫组织化学、Western blot和RT-PCR法通过对脑胶质瘤中PTEN的表达水平进行基础研究以及TUNEL法检测胶质瘤中细胞凋亡情况,以期揭示胶质瘤中PTEN与细胞凋亡的关系,为胶质瘤的治疗寻找新的途径.

    作者:郑克彬;何心;田伟;焦保华 刊期: 2011年第07期

  • 乳腺肿瘤EMT的分子机制及与干细胞相互关系的研究进展

    上皮细胞-间质转化( Epithelial-mesenchymaltransition,EMT)是指上皮细胞在正常生理和特定病理情况下向间充质细胞转化的现象.研究表明,乳腺恶性肿瘤细胞借助EMT方式增强癌细胞迁移和运动能力,促进乳腺癌的侵袭与转移,其发生机制与多种调控因素有关.本文就影响乳腺肿瘤EMT的一些调控因素及EMT与乳腺癌干细胞的相互关系作一综述.

    作者:包俊杰;吴诚义 刊期: 2011年第07期

  • 伊利替康联合顺铂二线治疗晚期胃癌

    目的 观察伊利替康(CPT-11)联合顺铂(DDP)二线治疗晚期胃癌的疗效和不良反应.方法 28例经组织学及影像学证实的晚期胃癌患者,二线按CPT-11/DDP方案化疗.具体:CPT-11 70 mg/m2d1,81h静脉输注;DDP70 mg/m2 d1 2 h静脉输注,3周为1周期.每化疗2周期后按RECIST标准评价疗效,每1周期后根据CTCAE3.0进行不良反应分级.所有患者随访30月,结果 采用Kaplan-Meier 进行生存分析.结果 28例患者均可评价疗效,完全缓解(CR)1例(3.6%),部分缓解(PR)11例(39.3%),疾病稳定(SD)6例(21.4%),疾病进展(PD) 10例(35.7%),有效率(CR+ PR)42.9%.中位至疾病进展时间(TTP)5月(95%[CI],3.0~24月),中位总生存时间(OS)8月(95%[CI],5.0~30.0月).3~4级血液学毒性:白细胞减少、血小板减少及贫血分别为35.7%、25%及14.3%.3~4级非血液学毒性发生率高的是消化道反应:恶心呕吐发生率为35.7%;腹泻发生率为17.8%.本研究中无治疗相关性死亡.结论 伊利替康联合顺铂二线治疗晚期胃癌疗效显著,耐受性好.

    作者:王居峰;张艳玲;刘文静;侯新芳;李克;徐淑宁 刊期: 2011年第07期

  • 63例贲门癌胸腔纵隔淋巴结转移特点分析

    目的 研究贲门癌胸腔内纵隔淋巴结转移特点.方法 采用前瞻性分析2008年6月-2009年10月随机选择63例贲门癌患者进行胸腔内纵隔淋巴结清扫并分析其转移特点.结果 63例贲门癌患者腹腔淋巴结转移度、转移率分别为38.39%、66.67%.胸腔淋巴结转移度、转移率分别为10.60%、20.63%.胸腔纵隔淋巴结转移与肿瘤长度、病理分级、浸润深度、肿瘤是否累及食管下段、腹腔淋巴结有关,Logistic回归多因素分析则显示肿瘤是否累及食管下段是主要影响因素.结论 贲门癌主要向腹腔、胸腔淋巴结转移,贲门癌淋巴结清扫范围应包括胸腔内纵隔淋巴结与腹腔淋巴结.

    作者:宋平平;张为迪;孙雪梅;郭洪波;刘曙光;张百江 刊期: 2011年第07期

  • 转录因子Foxp3与恶性肿瘤的研究进展

    0引言 转录因子Foxp3(Forkhead box protein 3,Foxp3)是forkhead/winged-helix转录因子家族中的一员.2001年Brunkow等[1]首次报道Foxp3.同年,Wildin和Bennett提出人类Foxp3基因与Scurfy小鼠Foxp3基因具有同源性.近研究表明Foxp3在人类调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)上特异性表达(主要在CD4+ CD25+ Treg细胞上表达,CD8+ CD25+Treg细胞少量表达)[2-5].因此,Foxp3是CD4+CD25+ Treg细胞发育和功能的决定因素,是CD4+CD25+ Treg细胞的特异性标志.的发生发展.

    作者:郭净;王菊勇;郑展;王青 刊期: 2011年第07期

  • 肋骨造釉细胞瘤1例报道及文献复习

    长骨造釉细胞瘤是一类临床罕见、生成缓慢、低度恶性的骨肿瘤.由于其发病率极低,缺乏认识,往往会导致误诊,不能予以彻底地手术和正确的治疗.现将我院收治的1例原发性肋骨造釉细胞瘤的资料报道如下.

    作者:陆志斌;蔡强 刊期: 2011年第07期

  • shRNA腺病毒介导的JNK1RNAi抑制U87MG人胶质瘤细胞的增殖

    目的 研究腺病毒介导的shRNA对U87MG人胶质瘤细胞JNK1基因表达的抑制作用,以及对细胞增殖的影响.方法 设计合成针对JNK1基因以及无义对照的shRNA序列,通过腺病毒介导shRNA的表达来下调JNK1的表达;Q-PCR和Western blot验证病毒效果;用BrdU掺入的方法 来检测细胞的增殖情况.结果 限制性酶切及DNA测序结果 证实shRNA插入片段完全正确;Q-PCR和Western blot结果 表明JNK1的表达与对照组相比明显下降;BrdU掺入结果 表明Ad-shJNK1处理组细胞增殖显著降低.结论 重组的JNK1 shRNA腺病毒构建成功,JNK1的下调明显抑制了细胞的增殖,为深入研究JNK信号通路在神经肿瘤中的作用奠定基础.

    作者:董林;葛瑞民;祁楠;沈丽 刊期: 2011年第07期

  • 机械吻合和手工吻合在国人食管癌术后吻合口瘘发生率的Meta分析

    目的 对比机械吻合与手工吻合对食管癌术后吻合口瘘发生的概率,为临床选择吻合方式提供参考依据.方法 运用Meta分析方法,综合定量分析国内公开发表的有关食管癌患者采用机械吻合与手工吻合对预防食管癌术后吻合口瘘的12篇文献资料.结果 采用手工吻合食管癌术后吻合口瘘的发生率高于机械吻合,合并OR值为0.53(>0,95%CI:0.40~0.71,P<0.01).结论 对于降低食管癌手术后吻合口瘘方面,机械吻合优于手工吻合.

    作者:吴正国;龚家权 刊期: 2011年第07期

  • 益气健脾汤联合FOLFOX4方案治疗结直肠癌术后患者的临床疗效

    目的 观察益气健脾汤联合FOLFOX4化疗方案治疗结肠癌术后患者的临床疗效.方法 采用随机研究方法,将85例患者分为两组,治疗组(41例)用中药加化疗治疗,对照组(44例)单用化疗治疗,两组疗程相同均为6月.对两组疗效进行比较分析.结果 治疗组在提高生活质量、症候改善及减少相关不良反应方面明显优于对照组(P<0.05).结论 益气健脾汤联合FOLFOX4化疗方案治疗结肠癌术后脾虚证患者是有一定效果的,值得临床推广.

    作者:曹波 刊期: 2011年第07期

  • 热休克诱导结直肠癌细胞外泌体的免疫效应

    目的 探讨热休克影响结直肠癌细胞外泌体诱导树突状细胞肿瘤相关蛋白因子的释放和细胞毒效应.方法 临床经病理学确诊的结直肠管状腺癌细胞分离培养,43℃热休克1h,四步离心获得细胞上清外泌体.诱导树突状细胞刺激细胞毒反应.酶联免疫测定树突状细胞释放TNF-α、MIP-1α、RANTES,MTT法测定对结直肠癌细胞的杀伤作用.结果 结直肠癌细胞热休克获得的外泌体刺激DC分泌TNF-α、MIP-1α、RANTES,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).热休克促进外泌体诱导的结直肠癌细胞杀伤活性,与未经热休克培养获得的外泌体诱导组比较差异有统计学意义(P<0.05),与结直肠癌细胞裂解物诱导组比较差异具有统计学意义(P<0.01),未经热休克培养获得的外泌体诱导组与癌细胞裂解物诱导组比较差异有统计学意义(P<0.05).100 μg/ml剂量诱导效应强于50μg/ml组.结论 热休克培养可以通过促进效应细胞肿瘤相关蛋白因子释放,增强对结直肠癌细胞的杀伤活性,有剂量依赖性,为开拓高效无细胞疫苗来源提供了实验基础.

    作者:张义平;郑美蓉;殷嫦嫦;吴萍;周许峰;吴建芳;周小鸥 刊期: 2011年第07期

  • Cyclin B1、CDK1在结直肠癌中的表达及其临床意义

    目的 探讨细胞周期蛋白Cyclin B1及细胞周期蛋白依赖性激酶CDK1在不同结直肠癌组织中的异常表达及其临床意义.方法 采用免疫组织化学法检测Cyclin B1、CDK1在11例正常结直肠组织、28例结直肠癌组织和27例癌旁组织中的表达.结果 Cyclin B1、CDK1在结直肠正常黏膜中表达阳性率为9.1%(1/11)和18.2%(2/11),在结直肠癌组织中表达阳性率为89.3%(25/28)和92.9%(26/28),在癌旁组织中表达阳性率为25.9%(7/27)和33.3%(9/27),各组之间相比差异有统计学意义(P<0.05).不同分化程度结直肠癌之间Cyclin B1、CDK1的阳性表达率差异无统计学意义(P>0.05).结论 Cyclin B1、CDK1在不同分化程度的结直肠癌中均存在过表达现象,在癌旁组织中也有明显表达,可能在结直肠癌发生发展过程中起重要的调节作用.

    作者:姜雪鹏;李晓林;邹小明 刊期: 2011年第07期

  • 局部晚期非小细胞肺癌三维适形放疗加培美曲塞卡铂同期化疗的疗效分析

    局部晚期非小细胞肺癌( locallyadvanced non-small cell lung cancer,LANSCLC)[1],ⅢA期患者5年生存率15%~23%,ⅢB期仅为6%~7%,这组患者在多学科治疗中为复杂、治疗方案具争议[2].同步放化疗已成为LANSCLC标准治疗手段,但其中位生存期仍只有16~17月[3],有必要探索新的同步放化疗方案来提高疗效,同时降低不良反应,为此我们开展了三维适形放疗联合培美曲塞/卡铂同步放化疗治疗LANSCLC的Ⅱ期临床试验.

    作者:许涛;景红霞;曹风军;李林均;邓守恒;雷金华;俞远东;陈萍 刊期: 2011年第07期

  • 叶酸偶联率对叶酸-壳聚糖纳米粒靶向抗瘤性的影响

    目的 研究在不同叶酸偶联率下,叶酸-壳聚糖纳米粒对宫颈癌细胞系HeLa凋亡的影响.方法 还原胺法合成不同叶酸偶联率的叶酸-壳聚糖复合物,紫外分光光度仪测定叶酸偶联率.将复合物包裹绿色荧光蛋白表达基因,电子显微镜观察纳米粒形态及大小.转染HeLa细胞7d后流式细胞仪测定转染效率及凋亡率.结果 通过改变叶酸及壳聚糖不同的反应比,共合成四种不同偶联率的叶酸-壳聚糖复合物,偶联率依次是3%、7.5%、11.2%和17%.透射电子显微镜显示叶酸-壳聚糖-DNA纳米粒为近似球型,表面光滑、均质的纳米粒.上述纳米粒粒径分别为(289.6±0.7)nm、(78.1±0.3)nm、(186.6±0.6)nm和(212.2±0.5)nm.转染7d后叶酸偶联率为7.5%的纳米粒转染效率高,与未偶联纳米粒相比,差异具有统计学意义(P<0.01).凋亡率与未偶联纳米粒相比,差异具有统计学意义(P<0.01).结论 经叶酸偶联后,可以提高叶酸-壳聚糖纳米粒的HeLa细胞摄取量,增强其促肿瘤细胞凋亡作用,叶酸偶联率对纳米粒粒径、转染效率及细胞凋亡有一定影响.

    作者:杨琰;赵颖;张凤兰;黄颢;张团英;张红菱 刊期: 2011年第07期

  • 灵芝孢子油对人胃腺癌细胞BGC823的抑制作用

    目的 观察灵芝孢子油(GSSO)对BGC823细胞增殖、凋亡、迁移的影响,探讨其对胃腺癌细胞的影响.方法 GSSO干预BGC823后,CCK-8检测细胞增殖的变化,流式检测细胞凋亡的变化,Transwell实验检测细胞迁移的变化.结果 与对照组(溶剂DMSO)相比,GSSO剂量依赖性地抑制BGC823细胞的增殖(P<0.05);体积分数>0.005%时,即可促进细胞凋亡(P<0.001).与对照组相比较,灵芝孢子油体积分数达到0.005%,即可显著性抑制BGC823细胞迁移(P<0.001).结论 孢子油能显著抑制BGC823细胞增殖和迁移,促进BGC823细胞凋亡.

    作者:何伶芳;高倩颖;侯亚义 刊期: 2011年第07期

  • 直肠肛管癌选择经括约肌间切除术的多因素分析

    目的 探讨影响超低位直肠/直肠肛管癌经括约肌间切除术( Intersphincteric resection,ISR)选择的临床病理因素.方法 回顾性分析由同一组专业医师共同完成的超低位直肠癌(肿瘤距肛缘≤5cm或距齿状线≤3cm)切除术患者156例.纳入指标包括:年龄、性别、肿瘤分化程度、肿瘤距肛缘距离、病理TNM分期、术前CS分期和新辅助治疗.结果 共有63例患者接受ISR,93例患者未接受此术式.单因素分析表明肿瘤病理T分期(P=0.038)、N分期(P=0.044)和术前CS分期(P<0.001)与ISR选择有关.多因素分期显示肿瘤病理T分期、N分期和CS分期是影响直肠肛管癌ISR选择的独立因素.结论 超低位直肠癌患者是否可行经括约肌间切除术与肿瘤局部浸润程度、淋巴结受累情况有关,而与肿瘤距肛缘距离、肿瘤分化程度及新辅助化疗无关.直肠指检仍是决定是否可行经括约肌间切除术的有效方法.

    作者:欧阳书睿;陈华;邓磊;吕东昊;陈小龙;肖凌;曾天芳;汪晓东;李立 刊期: 2011年第07期

肿瘤防治研究杂志

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主管:中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会

主办:湖北省卫生厅;中国抗癌协会;湖北省肿瘤医院