学术投稿

三七总皂苷在骨髓间质干细胞分化为神经元样细胞中的调解作用研究

杨捷;王东

关键词:三七总皂苷, 骨髓间质干细胞, 神经元样细胞, 分化
摘要:目的:探讨三七总皂苷在骨髓间质干细胞( MSCs)分化为神经元样细胞中的调解作用.方法:①实验材料:成年健康Wister大鼠(雌雄不限),SRF级,体质量(150±30)g;②实验方法:无菌的条件下从大鼠的股骨中分离并继代培养MSCs细胞,当传至第5代时,先用完全培养液[含10μg/L碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)]进行预诱导,再更换无血清培养液(含三七总皂苷0.25g/L)进行诱导,采用免疫组织化学SABC法检测神经丝蛋白(NF-M)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、巢蛋白(nestin)、微管联合蛋白-2(MAP -2)、生长相关蛋白43( GAP-43)以及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表述.结果:①采用三七总皂苷诱导后,大多数MSCs呈神经元样细胞分化.经免疫组织化学鉴定,上述细胞表现为NSE、MAP-2和NF染色阳性,呈棕黄色,而GFAP染色阴性.②采用三七总皂苷进行诱导时,MSCs的胞体逐渐增大,并伸出细长的突起,在突起的末端出现分支,有些相邻细胞的突起还成网状连接,③三七总皂苷诱导MSCs转变为类似于神经元样的形态,经免疫组织化学鉴定,大多数细胞表现为NF -M、NSE、neslin、MAP -2和GAP -43染色阳性,并在胞质和突起中有棕黄色的物质,而GFAP染色均为阴性.SABC法显示NSE和MAP -2阳性细胞数分别为(72.64±2.04)%和(73.5±2.17)%.结论:三七总皂苷在体外能使MSCs向神经元样细胞转化,且具有神经元样细胞的特性,这为MSCs治疗相关疾病提供了理论基础.
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  • 中药特色之一地道药材研究进展

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    目的:研究白塞氏综合征(BD)患者治疗前后负性情绪和生活质量的变化及清补活血法的干预作用,进一步评价清补活血法对BD的临床疗效.方法:将符合入选标准的108例BD患者,随机分为清补活血汤组(治疗组)54例,泼尼松组(对照组)54例.采用焦虑自评量表(SAS)、抑郁自评量表(SDS)、SF - 36生存质量测定表进行问卷调查,采用半定量症状分级法对BD患者相关临床症状积分统计,进行前后对比治疗研究.结果:BD患者焦虑抑郁指数(SAS+ SDS积分)较健康人明显升高(P<0.05);BD患者生活质量(生理功能、生理职能、躯体疼痛、总体健康、活力、社会功能、情感职能和精神健康)有不同程度的下降,与健康人比较有显著性差异(P <0.05或P<0.01);经治疗后两组患者上述各观察指标有不同的升落,与治疗前比较有显著性差异(P<0.05或P<0.01),治疗后治疗组与对照组比较,差异有显著性(P<0.05或P<0.01).结论:BD患者处于轻中度精神抑郁状态,生活质量有一定程度的下降,清补活血法可改善BD患者的负性情绪,提高生活质量.

    作者:史彦章;李桂;贾凤新;高向红;云雅卿;王永辉 刊期: 2012年第04期

  • 221例复发性流产患者中医证候分布规律研究

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    作者:傅萍;周菲菲;盛晓园 刊期: 2012年第04期

  • 均匀设计优选白芥子微波炮制工艺

    目的:优选白芥子微波炮制的佳工艺.方法:以微波火力和加热时间为变量,采用均匀实验设计,以外观性状、水溶性浸出物、醇溶性浸出物、脂肪油和芥子碱硫氰酸盐含量5个方面为考察指标.结果:白芥子微波炮制的佳工艺为微波大火力,加热3min.结论:微波法炮制白芥子合理、稳定、可行.

    作者:李慧 刊期: 2012年第04期

  • β-榄香烯联合高温对肺腺癌A549细胞作用的实验研究

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    作者:吴稚冰;马胜林;陈雪琴;姜志明 刊期: 2012年第04期

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    目的:探讨芹菜素对新生大鼠缺血缺氧脑损伤后早期认知功能的影响.方法:根据改良Rice模型建立新生大鼠缺血缺氧脑损伤模型,随机分为假手术组( Sham - operated,SH)、模型组(Model,M)、芹菜素干预组( Apigenin,A)和神经节苷脂GMI有效对照组(Ganglioside - GM1,GM1).各组按后期测试的日龄不同又分为21日龄组和31日龄组,分别在Morris水迷宫中进行测试,测试结束后处死留取脑组织标本观察大鼠脑组织结构改变.结果:1.脑组织病理观察,(1)肉眼观:29只缺血缺氧脑损伤大鼠脑组织呈现明显的脑萎缩改变,药占51.8%( 29/56).假手术组大鼠无脑组织萎缩.(2)光镜观察:SH组的神经元细胞丰富且排列整齐有序,间质均匀;M组可见明显的胶质细胞增生,神经元排列不规则;A组和GM1组神经元细胞排列欠规则,较多见胶质细胞.(3)尼氏小体定量-神经细胞活力分析:M组、A组GM1组较相应SH组活力下降,有显著性差异(P<0.01或P<0.05);31日龄组较21日龄组升高,各组均有显著性差异(P<0.01).(4)海马组织电镜观察:SH组神经细胞结构正常,突触前膜内少见线粒体,其余各组神经细胞有不同程度核固缩表现及内质网扩张等,海马突触内见较多线粒体.2.Morris水迷宫实验,(1)空间定位(平均逃避潜伏期):M21组潜伏期较SH21组明显延长,空间定位学习能力差(P<0.01);A21组潜伏期较M21组缩短(P<0.05);GM1组潜伏期与M组比较差异无统计学意义(P>0.05);31日龄组潜伏期较相应21日龄组缩短,差异有统计学意义(P <0.01或P<0.05).(2)空间记忆:平均穿台次数:A21组较GM1 - 21组多,有显著性差异(P<0.05);GM1 - 31组较GM1 - 21多,有显著性差异(P<0.05).平均台周Ⅰ区时间:A31组较A21组长(P<0.05).平均台周Ⅰ区路程:GM1 - 31组较GM1 -21组长(P<0.01)、A31组较A21组长(P<0.05).结论 芹菜素可改善新生期缺血缺氧脑损伤后21日龄大鼠的空间定位学习能力.

    作者:林晓燕;梁艳苓;陈翔;涂丰霞;刘婵;张泷 刊期: 2012年第04期

  • 痄腮溯源及古代文献梳析

    痄腮是常见的中医肺系疫病之一,现代医学称为流行性腮腺炎.通过对痄腮病名溯源及清代以前中医著作有关文献的梳析,进一步明确痄腮的病名源流、致病病因、发病条件、病机特点、证治方论及预防,以便提供有价值的临床思路和启迪.

    作者:吴兆利;王庆其 刊期: 2012年第04期

  • 中药辨证施治干预脑卒中后抑郁的临床研究

    目的:观察中药辨证施治对脑卒中患者的抑郁发生情况.方法:运用临床群体研究的方法,连续登记2008年1月-2010年8月入院、发病48h内的缺血性脑卒中患者.入组病例随机分为对照组和干预组,对照组根据《中国脑血管病防治指南(试行版)》常规脑卒中治疗4周,干预组在《中国脑血管病防治指南(试行版)》常规脑卒中治疗基础上通过辨证论治加用中药干预4周,4用、12用、24周时分别进行HAMD评分.结果:干预组在4周、12周、24周时脑卒中抑郁率及HAMD评分显著低于对照组,P<0.05.结论:急性期加用中药辨证施治可以减少脑卒中后抑郁的发生.

    作者:张叶青;陈眉 刊期: 2012年第04期

  • 肺癌相关指标与中医证型的相关性

    某些指标的表达,如免疫因子,黏附分子以及VEGF及EGFR,与中医的证型有着密切的联系,客观地说明了中医辨证论治的科学性,有助于中医治疗的规范化和个体化,利于提高中医的诊疗水平及疗效.

    作者:周晓英;舒琦瑾 刊期: 2012年第04期

  • 洋金花提取物对肠缺血再灌注大鼠的作用研究

    目的:研究洋金花提取物对大鼠缺血再灌注期间肠黏膜的保护作用及机制.方法:采用大鼠肠缺血再灌注模型,大鼠分为假手术组、模型组、阳性对照组、给药组.用Chiu氏评分法观察肠黏膜的损伤程度并检测肠黏膜中肿瘤坏死因子(TNF-α)和白细胞介素(IL -6).结果:与假手术组比较,模型组可见明显的肠黏膜损伤,TNF -α和IL -6水平明显升高;与模型组比较,给药组肠黏膜病理损伤程度明显减轻,且TNF -α和IL -6水平明显降低.结论:洋金花提取物对大鼠肠缺血再灌注后的肠道具有较好的保护作用,且该作用与TNF -α和IL-6的减少有关.

    作者:林斌;张扬;吴人杰;章建民 刊期: 2012年第04期

  • 长期小剂量鼻渊舒胶囊治疗慢性鼻-鼻窦炎疗效分析

    目的:观察分析长期小剂量中成药鼻渊舒胶囊治疗慢性鼻-鼻窦炎(CRS)的疗效.方法:将不伴息肉的CRS患者依就诊时间顺序随机分为鼻渊舒组和对照组.鼻渊舒组24例患者口服鼻渊舒胶囊0.9g(0.3g/粒),1次/天(前2周3次/天;接下来的2周2次/天),使用12周;对照组24例患者口服克拉霉素片0.25g,1次/天(前2周为2次/天),使用12周.治疗前后采用视觉模拟量表(visual analogres scale,VAS)和Lund - Mackey 鼻窦CT评分对患者疗效进行主、客观评估.结果:鼻渊舒组治疗后VAS、鼻窦CT平均得分为4.42±1.53和5.68±2.43,显著低于治疗前7.42±1.09和8.92±2.64,治疗前后比较差异均有统计学意义(P<0.01);克拉霉素组治疗后VAS、鼻窦CT平均得分为3.54±1.84和3.75±2.59,显著低于治疗前7.42±1.09和8.92±2.64,差异均有统计学意义(P<0.01).治疗后鼻渊舒组与克拉霉素组比较,两组VAS评分差异无统计学意义(t=1.789,P>0.05),而两组鼻窦CT评分差异有统计学意义(t=2.527,P<0.05).结论:12周小剂量的中成药鼻渊舒胶囊治疗CRS有效,但该药在鼻窦CT影像学评估的改善程度上不及小剂量大环内酯类药物克拉霉素.

    作者:刘巨波;李献华;张君忠;谭益;鲁翔;刘丽亚;黎强;扬小霞;冯志坚;洪奕纯 刊期: 2012年第04期

  • 楮树皮中生物碱对α-糖苷酶和小肠糖吸收抑制作用研究

    目的:从中药材楮树皮中筛选出抑制α-糖苷酶的物质,并考察其对糖分吸收的抑制作用.方法:建立α-糖苷酶抑制剂的体外筛选模型,对多种楮树皮提取物中的α-糖苷酶抑制物质进行筛选;建立大鼠小肠外翻囊体外模型,探讨所筛出的抑制物质对蔗糖吸收的抑制作用.结果:从楮树皮乙酸乙酯提取物中筛选出了两个有抑制作用的生物碱Broussonetinine B( B1)和Broussonetine( B2),它们对蔗糖吸收的半数抑制浓度(IC50)分别为0.530 mg·mL-1、0.445 mg·mL-1.结论:本筛选模型简便可靠,为开发中药楮树皮的新用途奠定了理论基础.

    作者:刘新颖;富晓楠;鲍玲;王明奎;喻凯 刊期: 2012年第04期

  • 轻度认知障碍中医证素分布规律的文献研究

    目的:探讨轻度认知障碍中医证候的临床分布规律,在此基础上提取证候要素,总结其分布规律.方法:查阅近10年来辨证治疗轻度认知障碍的中医文献资料,将符合选择标准的文献(45篇)录入到Excel表格,转化为SPSS16.0数据库后,统计证候及证候要素出现的频次、频率.结果:20个证候类型中出现频次排在前3位的证候是:肾精亏虚证、痰迷心窍证、痰浊血瘀证.得到证候要素15个,其中病位类证候要素(5个)出现频次排在前3位的是:肾、心、脾;病性证候要素(10个)出现的频次排在前3位的是:血瘀、痰浊、精亏.结论:轻度认知障碍以肾精亏虚证为主要病机,以血瘀、痰浊等病理因素为主,其间常相互联合,相互为因,使病机变的复杂,而证候要素则能简洁、灵活地反映疾病本质.

    作者:赵明星;李亚明 刊期: 2012年第04期

  • 电针督脉和膀胱经对实验性抑郁症大鼠行为学及海马NSE表达的影响

    目的:观察电针督脉经穴(百会、神庭)加膀胱经穴(心俞、肝俞)对实验性抑郁症大鼠行为学和海马NSE阳性细胞表达数量的影响.方法:采用慢性应激结合孤笼饲养制作大鼠抑郁症模型,用旷场法进行行为学测定以及计算大鼠糖水消耗量,并运用免疫荧光双标技术观察对抑郁症大鼠海马NSE阳性细胞表达数量的影响.结果:电针督脉加膀胱经穴可显著改善抑郁症大鼠的体重增加迟缓,糖水消耗增多,行为学评分升高,使抑郁症大鼠海马CA1、CA3区及齿状回(DG)神经元数目显著增加.结论:针刺督脉加膀胱经穴可以使抑郁大鼠活动增多、快感增加、体重增加,减轻海马神经元的损伤,从而促进大鼠抑郁的改善.

    作者:卓缘圆;皮敏 刊期: 2012年第04期

  • 三七总皂苷在骨髓间质干细胞分化为神经元样细胞中的调解作用研究

    目的:探讨三七总皂苷在骨髓间质干细胞( MSCs)分化为神经元样细胞中的调解作用.方法:①实验材料:成年健康Wister大鼠(雌雄不限),SRF级,体质量(150±30)g;②实验方法:无菌的条件下从大鼠的股骨中分离并继代培养MSCs细胞,当传至第5代时,先用完全培养液[含10μg/L碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)]进行预诱导,再更换无血清培养液(含三七总皂苷0.25g/L)进行诱导,采用免疫组织化学SABC法检测神经丝蛋白(NF-M)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、巢蛋白(nestin)、微管联合蛋白-2(MAP -2)、生长相关蛋白43( GAP-43)以及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表述.结果:①采用三七总皂苷诱导后,大多数MSCs呈神经元样细胞分化.经免疫组织化学鉴定,上述细胞表现为NSE、MAP-2和NF染色阳性,呈棕黄色,而GFAP染色阴性.②采用三七总皂苷进行诱导时,MSCs的胞体逐渐增大,并伸出细长的突起,在突起的末端出现分支,有些相邻细胞的突起还成网状连接,③三七总皂苷诱导MSCs转变为类似于神经元样的形态,经免疫组织化学鉴定,大多数细胞表现为NF -M、NSE、neslin、MAP -2和GAP -43染色阳性,并在胞质和突起中有棕黄色的物质,而GFAP染色均为阴性.SABC法显示NSE和MAP -2阳性细胞数分别为(72.64±2.04)%和(73.5±2.17)%.结论:三七总皂苷在体外能使MSCs向神经元样细胞转化,且具有神经元样细胞的特性,这为MSCs治疗相关疾病提供了理论基础.

    作者:杨捷;王东 刊期: 2012年第04期

  • 血塞通对痛风炎症因子ICAM-1表达的影响

    目的:血塞通的主要成分为三七总皂苷(PNS),本实验将PNS对以尿酸钠(MSU) 100μg/mL诱导体外急性炎症模型,采用细胞活力以及炎症因子的表达高低来观察血塞通对体外急性炎症模型的影响.方法:细胞分为空白组、刺激祖、给药组和阳性药对照组,采用MTT法测量细胞活性、实时定量PCR检测ICAM -1的基因表达.结果:血塞通2.5μg/mL能显著抑制ICAM -1的表达.结论:三七总皂苷显著抑制炎症因子的表达.

    作者:杨妍华;张福康;陆再华 刊期: 2012年第04期

  • 乔松素在大鼠体内外代谢产物的UPLC-MS/MS鉴定

    目的:以超高效液相质谱联用法鉴定了乔松素在大鼠体内外的代谢产物.方法:分析乔松素经大鼠肝微粒体体外代谢和大鼠口服给药后的胆汁、尿液、粪便中的代谢产物,以超高效液相质谱联用法分离鉴定代谢产物.结果:在大鼠肝微粒体和胆汁、尿液、粪便中共检测到5个代谢产物,根据裂解规律及与标准品对照,鉴定了其中3个代谢产物的结构,推测了另外2个代谢产物的结构.结论:通过大鼠体内外代谢产物的比较,发现乔松素的代谢途径主要是羟基化和葡萄糖醛酸化.其原型和柚皮素是在体内的主要作用形式,在胃肠道及肝脏中的葡萄糖醛酸化是其代谢失活的主要途径.

    作者:李元圆;赵婷;徐冲;王峥涛 刊期: 2012年第04期

  • 《内经》厥病考释

    《内经》中厥病的相关资料内容丰富,虽都以厥为病名,但其中许多厥病并非今天中医内科所说的厥,所以在教学及临证中常造成困扰.参考现代医学相关理论及古代医著中厥的相关论述,从疾病症状特点、病机特点两方面,对《内经》中常见的厥病的疾病实质进行分析讨论,以欲明确其疾病内涵.

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  • 土牛膝多糖抗炎镇痛作用的研究

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    作者:李伟平;何良艳;马哲龙;蒋福升;丁志山;范永升 刊期: 2012年第04期

中华中医药学刊杂志

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主管:中华人民共和国国家中医药管理局

主办:中华中医药学会 ,辽宁中医药大学