张红;郑欣;宋庆涛;蔡剑英;王大明;曾劲峰;叶贤林;熊文
目的 探讨白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子(TNF-α)在人外周血单个核细胞(PBMCs)体外感染卡介苗(BCG)中的表达及相互作用.方法 PBMCs体外感染BCG后,分别于3、6、8、24 h收集细胞应用荧光定量PCR法检测细胞内IL-10和TNF-α的mRNA含量;此外,分别于8、20、32、48 h加入anti-IL-10的抗体孵育,收集细胞培养上清,用ELISA法检测上清中IL-10和TNF-α的蛋白含量.结果 PBMCs体外感染BCG后,相对于空白对照组,IL-10和TNF-α在mRNA和蛋白水平的表达量均增高,差异具有统计学意义(P<0.05),两者表达量呈现负相关趋势;当加入anti-IL-10的抗体后,TNF-α的蛋白表达量要高于未加抗体组,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 IL-10和TNF-α在人PBMCs体外感染卡介苗中的表达量增加,IL-10对TNF-α的表达可能具有抑制作用.
作者:刘佳;彭福华;朱灿胜;李敏;黎洁洁;胡学强 刊期: 2012年第02期
目的 检测心肌特异的miR-1、miR-16和miR-208前体在乳小鼠、乳大鼠心肌细胞及心肌成纤维细胞中的表达.方法 利用出生1~3 d的Sprague-Dawley (SD)大鼠和C57BL/6小鼠,采用2.5%胰酶消牝和差速贴壁法分离心肌细胞和心肌成纤维细胞.提取原代的乳小鼠、乳大鼠心肌细胞及P1代的心肌成纤维细胞总RNA,以β-actin为内参照,逆转录酶-聚合酶链式反应(RT-PCR)分别检测miR-1、miR-16和miR-208的前体表达水平.用FluorChem8900软件分析琼脂糖凝胶电泳后PCR产物条带的灰度值,计算出表达的目的miRNA前体与β-actin的比值.结果 有效分离并培养了乳C57BL/6小鼠、乳SD大鼠心肌细胞及心肌成纤维细胞.RT-PCR结果显示,在乳SD大鼠心肌细胞及心肌成纤维细胞中miR-1和miR-16均有相近水平的表达;心肌细胞中miR-208的表达显著低于miR-208b(P<0.01),miR-208b在心肌细胞中的表达显著高于其在心肌成纤维细胞中的表达(P<0.05).乳C57BL/6小鼠心肌细胞中miR-1a-1的表达显著低于miR-1a-2(P<0.01),而miR-1a-2在心肌细胞和心肌成纤维细胞中的表达水平一致;miR-16-1在心肌细胞和心肌成纤维细胞中表达水平相近,而miR-16-2在两种细胞中均不表达;心肌细胞中miR-208a和miR-208b表达水平差别不明显,心肌成纤维细胞中只有miR-208a表达,并且在水平上低于其在心肌细胞中的表达(P<0.05).结论 miR-1、miR-16和miR-208前体在乳小鼠、乳大鼠心肌细胞及心肌成纤维细胞中呈细胞特异性的表达.
作者:黄帅;朱杰宁;林秋雄;符永恒;郭林林;余细勇;单志新 刊期: 2012年第02期
目的 探讨血清嗜酸粒细胞趋化因子(eotaxin)、干扰素-γ(IFN-γ)和内皮素1(ET-1)在支气管哮喘中的临床价值.方法 将120例支气管哮喘患者分为哮喘发作期83例、缓解期37例,另选35名健康者作为对照.并将83例哮喘发作期患者按病情程度分为轻度(20例)、中度(47例)和重度(16例).应用ELISA法对发作期、缓解期哮喘患者以及健康对照者进行血清eotaxin、INF-γ和ET-1水平测定.结果 哮喘发作组血清中eotaxin和ET-1高于哮喘缓解组及健康对照组(P<0.05,P<0.01),缓解期血清eotaxin和ET-1水平与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),而血清水平INF-γ在发作期组低于哮喘缓解组及健康对照组(P<0.01).随着哮喘严重程度增加,哮喘患者的血清中eotaxin和ET-1浓度升高,INF-γ水平出现明显降低.重度哮喘与中、轻度哮喘比较,eotaxin、ET-1和INF-γ浓度差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01).结论 eotaxin、IFN-γ和ET-1参与了哮喘的发病过程,并与疾病的严重程度密切相关.
作者:王鹏;李星晶;王丽华 刊期: 2012年第02期
目的 评价韶关市消除碘缺乏病目标防制措施效果.方法 依据《实现消除碘缺乏病目标县级考核评估方案》开展评估工作.现场考核抽查8~10岁学生尿碘中位数、甲状腺肿大率、居民合格碘盐食用率.资料考核根据《综合指标考评计分表》查阅组织领导、碘盐管理、监测防治和健康教育按百分制计算.结果 各县(市、区)8~10岁学生尿碘含量中位数为204.74 μg/L,<50 μg/L的比例为4.70%,校正的甲肿率为3.4%,碘盐覆盖率为99.83%,居民合格碘盐食用率为98.87%.1 604名5年级学生的健康教育知识知晓率为92.16%.管理指标与技术指标综合得分95.43分.结论 韶关市碘缺乏病防治效果巩固,如期实现了消除碘缺乏病目标.
作者:倪秀锋;卢志坚;邓俊兴;苏少芳;卢学会 刊期: 2012年第02期
目的 探讨脑脊液蛋白定性适用的石炭酸浓度.方法 配制5%、8%和过饱和浓度的石炭酸溶液,与71例病人脑脊液标本进行潘氏试验,配制不同浓度的总蛋白和球蛋白标准液,与不同浓度的石炭酸进行蛋白定性试验.比较不同浓度的石炭酸对脑脊液蛋白定性的影响.结果 同一级别的潘氏试验结果,5%浓度的石炭酸对应脑脊液总蛋白含量高于8%和过饱和浓度的石炭酸;5%和6%浓度的石炭酸与各种浓度的总蛋白标准液定性均为阴性(-),8%、饱和和过饱和浓度的石炭酸与各种浓度的总蛋白标准液均出现极弱阳性(±)以上结果,过饱和浓度石炭酸结果阳性值较前两者强;5%浓度石炭酸与低浓度(≤1 200 mg/L)球蛋白标准液定性结果均为阴性(-),7%、8%和10%浓度的石炭酸与球蛋白标准液蛋白定性较一致,均在1 200 mg/L时出现阳性(+)结果,过饱和浓度的石炭酸在150 mg/L时出现极弱阳性(±)结果.结论 不同浓度的石炭酸潘氏试验有显著差异,8%以上浓度的石炭酸潘氏试验较灵敏,以过饱和浓度的石炭酸灵敏度高,适合脑脊液潘氏试验.
作者:池沛冬;罗耀凌;邝妙欢;钟义富 刊期: 2012年第02期
目的 建立丙型副伤寒沙门菌和猪霍乱沙门菌的实时荧光PCR快速检测方法,用于沙门菌属内的分型鉴定.方法 根据GenBank公布的丙型副伤寒沙门菌和猪霍乱沙门菌的保守序列,设计引物和改良分子信标探针,建立实时PCR检测方法.结果 检测体系灵敏度高,纯DNA和菌液的低检出限分别可达10fg和20 CFU/反应体系;特异性好,对71株细菌的检测符合率达100%.20株沙门菌采取盲号模拟血培养标本进行血培养检测及鉴定,检出5株丙型副伤寒沙门菌和4株猪霍乱沙门菌,与试验的菌株相符.70份食品中用实时荧光PCR同时检测丙型副伤寒沙门菌和猪霍乱沙门菌均为阴性,而用传统方法分离培养未检出.结论 建立的实时PCR检测方法可以快速、特异、灵敏地检测出丙型副伤寒沙门菌和猪霍乱沙门菌.
作者:林一曼;石晓路;朱玉梅;邱亚群;李迎慧;吕东月;扈庆华 刊期: 2012年第02期
目的 初步了解深圳地区引起临床婴幼儿急性腹泻中常见病毒的病原分布情况,为临床防治提供依据.方法 采用多重RT-PCR方法检测婴幼儿急性腹泻常见病毒:轮状病毒(RV)、星状病毒(AstV)、诺如病毒(NV),采用单重PCR法筛查临床腹泻标本肠道腺病毒(EAdV).结果 在440份标本中,共检出197例至少感染一种腹泻病毒,总阳性率为44.77% (197/440),其中183例为一种病毒感染,14例(3.18%)为混合感染.4种腹泻病毒以RV感染为主,阳性率为28.64%(126/440);其次是EAdV,阳性率为8.86% (39/440);NV阳性率为5.45%(24/440);AstV阳性率为1.82%(8/440).混合感染以RV合并其他病毒感染为主,占92.86%.结论 RV、EAdV和NV是引起深圳地区婴幼儿急性腹泻的主要病毒致病原,混合感染以RV联合其他病毒感染为主,临床上应根据所感染病原体制定有针对性的诊治措施.
作者:徐丹;罗历;谭文;班博;沈化清;陆学东 刊期: 2012年第02期
猪囊尾蚴病是一种严重危害人类健康的人兽共患寄生虫病,主要流行于中非、南非、拉丁美洲、东亚和南亚等地区.我国主要流行于黑龙江、吉林、云南、河南、河北、山东和广西等31个省市自治区.采用疫苗防治该病是当前研究的热点.本文对60 kDa的重组抗原、酸性核糖体磷蛋白、Ts11蛋白、T24蛋白、小热休克蛋白、Ts8B1/Ts8B2蛋白、M13h蛋白、Ts1蛋白、Cy1蛋白、TSO10/CE10蛋白、半胱氨酸蛋白酶、谷胱甘肽-S-转移酶、腺苷酸激酶、乳酸脱氢酶、TSO31蛋白和钙网蛋白等抗原方面的研究现状进行了综述.
作者:李文桂;陈雅棠 刊期: 2012年第02期
目的 观察脂多糖(LPS)诱导的髓源抑制性细胞(MDSCs)在小鼠脾脏中的募集情况,以探讨诱导MDSCs募集的新方法.方法 采用LPS反复腹腔注射的方法使小鼠产生内毒素耐受.流式细胞术检测正常小鼠和LPS注射小鼠第5、10天脾脏中CD11b+Gr-1+双阳性细胞,即MDSCs的比例.结果 经LPS处理后第5、10天脾脏MDSCs的比例分别为( 17.99±1.66)%和(27.37±6.62)%,较正常小鼠(4.53±3.00)%显著增高,差异有统计学意义(P<0.05).结论 LPS可在短期内诱导大量MDSCs在小鼠脾脏中聚集.
作者:郑燕妮;于化鹏;陈新;龚雨新 刊期: 2012年第02期
目的 比较妊娠及分娩后妇女和正常妇女的盆底肌力,了解妊娠及分娩对盆底肌力的短期影响.方法 将183例在本院就诊的孕产妇分为顺产组和剖宫产组,使用盆底肌电生理仪分别检测其产前及产后盆底肌肌力,并与166例正常妇女进行评估及比较.结果 妊娠组盆底肌力与正常组比较明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);妊娠组和正常组中的Ⅰ类与Ⅱ类肌纤维肌力均降低,但差异无统计学意义(P>0.05);产后6~8周顺产组盆底肌力较剖宫产组肌力明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);产后12~14周顺产组盆底肌力与剖宫产组盆底肌力均降低,差异无统计学意义(P>0.05).结论 顺产及选择性剖宫产对盆底肌肌力的影响在产后3个月无明显差异.
作者:刘芬;陈敦金 刊期: 2012年第02期
目的 分析广州市近年来登革热疫情特点及流行规律,为制定预防控制措施提供依据.方法 收集广州市2001-2010年登革热疫情资料,用描述性流行病学方法分析其流行特征和流行因素.结果 2001-2010年广州市共报告登革热病例2 458例,每年均有本地感染病例和输入病例的报告,其中本地感染病例2 366例,输入性病例92例.年发病率在0/10万~20.14/10万之间.疫情涉及12个区县,主要集中在荔湾区(26.24%)、越秀区(25.65%)、天河区(14.41)、白云区(12.00%)和番禺区(8.77%).4-12月均有病例报告,其中5月份前为输入性为主的散发病例,6-12月为流行期,8-10月病例数占总病例数的88.12%,为发病高峰期.男女性别比为1.06∶1.各年龄组均有发病,但发病率以中壮年和老年人群居高.职业分布以家务及待业、工人和学生为主.病例输入地主要以印尼、越南、泰国等东南亚地区为主.暴发的疫情主要由登革病毒Ⅰ型引起.结论 广州市登革热仍为输入或输入引起本地传播的传染病,至今仍无证据表明已成为地方性疾病.
作者:宋韶芳;罗雷;景钦隆;杨智聪 刊期: 2012年第02期
目的 对育龄妇女产前TORCH筛查,并对结果进行回顾性分析.方法 采用ELISA法,对2009年1月至2011年5月在暨南大学附属第一医院做产前筛查的3 640名育龄妇女进行孕妇致畸八项(TORCH-IgM及IgG抗体)或优生四项(TORCH-IgM抗体)的检测.结果 孕妇致畸八项中TORCH-IgM阳性率为2.29%,优生四项中TORCH-IgM阳性率为1.59%,TORCH-IgM总阳性率为2.03%.孕妇致畸八项中Tox-IgG、RV-IgG、CMV-IgG及HSV-Ⅱ-IgG分别为3.49%、69.60%、83.30%和71.00%.结论 广州地区育龄妇女TORCH-IgG阳性率较低,而相应的IgM水平也较文献报道低,表明产妇TORCH既往感染和当前感染率均较低,可能与当前卫生条件的改善有关.
作者:李珉珉;曾正坤;朱勤爱;朱穗兰 刊期: 2012年第02期
目的 探索广州农村登革热旧疫点白纹伊蚊密度特点及消长规律.方法 在农村设立监测点对自然环境中白纹伊蚊幼虫及成蚊密度进行长期连续监测.结果 农村中白纹伊蚊幼虫孳生地以室外环境为主,全年皆可在积水容器中检出幼虫,白纹伊蚊幼虫和成蚊密度消长与季节密切相关.结论 以室外孳生地为主的农村地区白纹伊蚊种群易受气候因素影响,幼虫密度高峰与成蚊密度高峰之间存在一定的时间差,其规律性有待于进一步研究.
作者:江毅民;严子锵;胡志刚;李成玲 刊期: 2012年第02期
目的 通过对一起小学生群发性腮腺炎癔症进行调查,总结经验,为预防和处理癔症提供科学依据.方法 采用现场流行病学调查方法,结合临床表现进行诊断分析.结果 发病23人,罹患率为5.96%.发病的23名学生中有21人45 d前接种过腮腺炎疫苗,接种率为91.30%,2名未接种疫苗的学生中有1人确诊为腮腺炎,其余学生无阳性体征.结论 对小学生应该加强基础免疫,积极进行查漏补种;同时加强心理健康教育,提高其心理素质和适应能力.
作者:张安柱;郑维斌;张腾;刘丙正;段生朝;林冬梅 刊期: 2012年第02期
目的 分析聚乙二醇干扰素α(Peg-IFN-α)与干扰素α(IFN-α)治疗慢性乙型肝炎(CHB)引起骨髓抑制的特点和差别、对抗病毒疗效的影响和两类干预药物的效果.方法 252例CHB患者分别给予Peg-IFN-α或IFN-α治疗48周,比较IFN应用过程中Peg-IFN-α治疗组和IFN-α治疗组白细胞(WBC)、中性粒细胞(Neu)和血小板(PLT)的变化及差异;以IFN治疗24周内血细胞计数低值将患者再分组,比较各亚组干扰素的疗效;比较口服升白细胞药物和重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)对干扰素所致Neu减少的疗效.结果 Peg-IFN-α治疗组引起骨髓抑制较IFN-α治疗组常见,两组WBC、PLT减少比率、Neu≤0.75×109/L比率差异有统计学意义(P<0.05);3.6× 109/L>WBC≥2.5×109/L亚组较WBC≥3.6×109/L亚组有更高的HBeAg和HBV DNA阴转率(P<0.05),1.5× 109/L>Neu≥0.75×109/L亚组较Neu≥1.5×109/L亚组有较高的HBeAg阴转率(P<0.05);与口服升白细胞药物相比,rhG-CSF对IFN引起的Neu减少疗效快速而短暂,二者升白细胞治疗1周和1月时的Neu计数及有效率差异均有统计学意义(P<0.05).结论 Peg-IFN-α引起骨髓抑制较IFN-α更为常见,白细胞下降幅度可一定程度预测IFN的疗效,rhG-CSF用于IFN治疗CHB引起的骨髓抑制的临床价值值得进一步探讨.
作者:周斌;周锐;李威;王俊洁;张健;张浩;杨淑玲;姜荣龙;周元平 刊期: 2012年第02期
目的 探索一种基于16S rRNA基因的快速鉴定细菌方法,为临床诊断治疗及耐药菌的分子遗传分析提供科学依据.方法 对卫生部室间质评菌株和临床病人标本分离培养纯菌落,用双蒸水稀释菌落,然后直接以菌液为模板优化反应体系PCR扩增16S rRNA基因片段,再测序扩增片段.将测序结果在细菌Ribosomal数据库中进行同源性比对,根据序列同源性鉴定病原细菌.结果 本实验鉴定的卫生部质评菌株结果与卫生部报告结果一致.本实验能够一次性鉴定出临床病人标本分离的菌株.结论 本研究优化了一种免纯化细菌核酸直接PCR鉴定细菌16S rRNA基因的方法.本研究建立的基于病原细菌16S rRNA基因鉴定方法可用于细菌的快速诊断.
作者:王佃鹏;董瑞玲;张艳芳;易娟;汤海燕;邓丽丹;罗斌;李培茂;张志敏;童向东 刊期: 2012年第02期
目的 了解广东清远部分地区鼠类路氏锥虫自然感染情况.方法 2009-2010年在连州、佛冈和清新的居民区(自然村)内外环境捕捉鼠形动物,取鼠血液涂片染色镜检.结果 共检查鼠形动物238只,路氏锥虫总感染率为13.87%.连州、佛冈和清新的路氏锥虫感染率分别为18.18%、7.04%、14.71%.共捕获褐家鼠(85.71%)、黄胸鼠(3.78%)、黄毛鼠(7.98%)、板齿鼠(0.84%)、臭鼩鼱(1.68%)5种鼠形动物,褐家鼠的自然感染率为12.75%.不同地区、不同鼠种、不同生态环境的鼠数路氏锥虫感染率差异均无统计学意义(X2=4.352、0.916、3.356,P均>0.05).结论 清远地区鼠类路氏锥虫自然感染较普遍,褐家鼠是带虫优势鼠种,人群中是否存在可疑病例或隐性感染情况有待进一步探讨.
作者:邝西金;李初升;孙小康;卢文涛;黄伟芳;谭绍安 刊期: 2012年第02期
目的 建立一种快速简便、灵敏度高、特异性好的痰结核分枝杆菌L型的涂片染色检测方法.方法 对常规的抗酸染色法进行方法学改良,以特异性基因扩增诊断法为标准,分析评价改良方法的灵敏度、特异性和总有效检出率等统计学指标;分别采用本改良抗酸染色法(以下简称本改良法)、常规抗酸染色法和改良IK抗酸染色法检测468例临床标本,对三种方法的阳性检出率进行统计学比较.结果 本改良法阳性检出率与特异性基因扩增诊断法、改良IK抗酸染色法比较均无明显差异(x2=0.25,P=0.6171;U=0.155,P=0.4404),但明显高于常规抗酸染色法(U=3.713,P<0.0010);本改良法灵敏度、特异性和总有效检出率与改良IK抗酸染色法相似,但高于常规抗酸染色法.同时,本改良法所需时间少于改良IK抗酸染色法(5 min vs 24 h).结论 成功建立了一种快速简便、灵敏度高、特异性好的痰结核分支杆菌L型的涂片染色检测方法,适合临床推广应用.
作者:赵丹;陈倩瑜;江雄飞;张兴树;殷玲丽;郭春江;杨小猛 刊期: 2012年第02期
目的 研究和评估乙型肝炎病毒(HBV)DNA G1896A点突变的实时荧光PCR检测方法.方法 收集经测序验证HBV DNA G1896A未突变的野生型样本150例和已发生突变的突变型样本58例,在突变区域设计分子信标探针,点突变处进行锁核酸处理,利用荧光PCR方法检测HBV前C区G1896A点突变;再从临床标本中随机抽取18例、8例和19例荧光PCR结果分别显示为G1896A突变的标本、杂合的标本以及野生型的标本的PCR产物进行序列测定.结果 突变型质粒和野生型质粒的检测灵敏度均可以达到100 copies/ml;突变型探针检测高浓度的野生型质粒时无检测信号,野生型探针检测高浓度突变型质粒时无检测信号;突变型模板在总杂合模板中的比例达到5%时则都可以将突变型检测出来;序列测定的8例G1896A突变标本、6例杂合标本和19例野生型标本的PCR产物结果和荧光PCR检测结果完全吻合.结论 实时荧光PCR检测方法可以快速、简便、准确地检测HBV DNA G1896A点突变,是检测点突变的重要方法,具有重要的临床应用价值.
作者:张红;郑欣;宋庆涛;蔡剑英;王大明;曾劲峰;叶贤林;熊文 刊期: 2012年第02期
幼虫移行是多数医学线虫生活史过程的必经阶段,也是线虫致病的重要阶段.不同种类的线虫幼虫在移行过程中有其恒定的路线,或者具有趋向性.这种趋向性移行与线虫的头感器、酶、趋化因子、分子、遗传与免疫等因素相关.本文从上述方面对线虫的移行机制研究进行综述.
作者:张鑫;李华 刊期: 2012年第02期