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汉坦病毒H8205株IL-2/G1融合基因在Vero细胞中的稳定表达

胡洪波;张泽华;黄汉菊;贾珉;刘广

关键词:汉坦病毒, Vero细胞, 融合蛋白, 稳定表达
摘要:目的探讨外源性 IL- 2/G1融合基因在非洲绿猴肾细胞( Vero)获得稳定表达的可行性,为汉坦病毒基因工程疫苗的研制提供一定的实验基础.方法将汉坦病毒 H8205株 G1的 cDNA重组人源 IL- 2基因后克隆到真核表达载体 pcDNA3.1/His,形成重组真核表达质粒 pcDNA3.1/His- IL- 2- G1,在脂质体介导下,将其导入 Vero细胞,通过 G418筛选获得阳性克隆,并继续培养 6周,然后通过间接免疫荧光、 ELSIA、 SDS- PAGE电泳等方法检测 IL- 2- G1基因在 Vero细胞中的稳定表达情况.结果成功构建重组质粒 pcDNA3.1/His - IL- 2- G1,其片段插入方向正确.经间接免疫荧光和 SDS- PAGE电泳证实,转染了真核表达质粒 pcDNA3.1/His- IL- 2- G1后在 Vero细胞培养上清和胞浆中有融合蛋白的表达,其相对分子量为 78 000 u,与预期的相符合.经人 IL- 2 ELISA检测试剂盒检测证实在培养上清和细胞裂解物所表达的融合蛋白有 IL- 2特性. 结论在脂质体介导下,外源性 IL- 2/G1融合基因能够成功导入 Vero细胞并获得稳定表达.
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    作者:许兵红;董卫华 刊期: 2005年第02期

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  • 冠状位MRI扫描在小儿气管异物中的应用

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  • 肠梗阻急诊手术84例临床分析

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    作者:张畅生;魏孟奇 刊期: 2005年第02期

  • 河源市7336名小学生视力状况及保护情况分析

    目的了解河源市区小学生视力现状,以科学有效地保护视力.方法视力保护采用自然保护法,并对 7336名小学生视力检查资料进行描述性分析和比较.结果 7336名小学生中正常视力 6364名,占 86.75%,视力低下患病率为 13.25%,五、六年级女生患病率高于男生.结论采取有效措施保护视力取得一定成效,但积极有效地预防和保护视力是一项长期而责任重大的工作.

    作者:李志美 刊期: 2005年第02期

  • 重组SARS冠状病毒N蛋白纯化与鉴定

    目的分析重组 SARS- CoV N蛋白的表达,并予以纯化.方法 SDS- PAGE分析 N蛋白的表达,于自动蛋白层析系统上,用 His· BindTM柱亲和层析纯化.结果重组表达的 N蛋白存在于裂解细菌上清中,分子量大小约 49 000 u, N蛋白经亲和层析获得纯化,纯化蛋白能与病人血清反应.结论表明自动层析获得了纯化良好抗原性的 N蛋白.

    作者:陈泽辉;吴少庭;秦莉;袁仕善;张仁利;高世同;黄达娜 刊期: 2005年第02期

  • 胆道扩张和液电碎石在复杂性肝内胆管结石治疗中的应用

    目的总结胆道镜胆道扩张技术和液电碎石对合并有肝内胆管狭窄、胆道嵌顿结石、巨大结石复杂性肝内胆管结石的治疗效果.方法回顾 41例肝内胆管嵌顿结石和巨大结石合并有肝内胆管狭窄病例,术中或术后应用胆道镜扩张技术和液电碎石进行治疗. 结果 41例中 37例狭窄完全解除,结石完全取净, 3例胆道狭窄在胆道镜下无法解除,结石无法取净, 1例狭窄解除但结石未能取净.总治愈率为 90.24%.结论应用胆道镜胆道扩张技术和液电碎石可有效治疗难治的复杂性肝内胆管石.

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  • 药物与物理治疗宫颈糜烂的临床疗效比较

    目的比较微波与康妇特栓治疗宫颈糜烂的效果. 方法宫颈糜烂患者 80例,单用康妇特栓组 40例,单用微波治疗组 40例,比较二种方法治疗效果.结果两种方法治疗轻度宫颈糜烂疗效无明显的统计学差异, 治疗中、重度宫颈糜烂好转率无明显的统计学差异,痊愈率有统计学差异,无 1例出现严重的不良反应.结论微波与康妇特栓治疗宫颈糜烂安全有效,但对重度宫颈糜烂微波疗效优于康妇特栓治疗效果.

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  • 云南省曼氏裂头蚴病流行概况

    目的了解曼氏裂头蚴病在云南省的流行情况.方法通过现有病例与过去文献报告的病例进行归纳. 结果至今云南已报告的裂头蚴病共 10例,其中皮下裂头蚴病 5例,眼裂头蚴病 2例,内脏裂头蚴病 3例.其中 2例为男性,其余 8例均为女性;年龄小的 4岁,大的 46岁;地区分布在昆明、玉溪、曲靖、昭通、思茅及西双版纳等 6个地州市;感染的方式和途径可能是误食受感染的剑水蚤,或者是原尾蚴直接经皮肤和粘膜侵入.结论云南省局部地区有曼氏裂头蚴病的流行.

    作者:周本江;王文林;雷霖 刊期: 2005年第02期

  • 孕期妇女TORCH感染对妊娠结局的影响

    目的探讨孕期妇女 TORCH感染对妊娠结局的影响.方法应用酶联免疫吸附法( ELISA法)对 3 427例不同孕周的孕妇进行 TORCH IgM特异性抗体检测,并对阳性孕妇的妊娠结局和转归进行分析. 结果 3 427例病例检出阳性例数 273例.阳性率 RV 1 3%、 CMV 3 7%、 TOX 3 2%; TORCH IgM阳性孕妇流产、死胎、胎儿畸形、新生儿黄疸发生率分别为 28 2%、 11%、 5 3%、 12 8%. 结论孕期妇女 TORCH感染可影响妊娠结局.孕前及孕早期筛查非常重要,阳性者可给予及时临床干预.

    作者:李萍;周沫;江悦华;宾利;胡小平;韩凤珍 刊期: 2005年第02期

  • 低蛋白血症对药物性肝功能损害的影响

    目的探讨低蛋白血症对药物性肝功能损害的影响.方法对 2001年 9月至 2003年 5月在本院住院治疗的初治肺结核患者 258例.根据其年龄、性别和乙肝两对半情况,进行 1∶ 1配对的病例-对照研究.结果 258例肺结核患者中出现肝功能损害 54例( 20 9%),病例组出现药物性肝功能损害 34例( 26 4%),对照组 20例( 15 5%, P=0 032).低蛋白血症与抗结核治疗中出现肝功能损害有关联,其优势比( OR)为 2 0,但是在药物性肝功能损害的发生时间和损害程度上均无明显差异.结论在临床上,对合并低蛋白血症结核病患者治疗时,应注意监测其肝功能变化以及注意改善其低蛋白血症的状态,减少药物性肝功能损害的发生.

    作者:谭守勇;林兆原;关玉华;李嫣红;潘爱华;黎燕琼;粱敏青 刊期: 2005年第02期

  • 曲马多复合异丙酚静脉麻醉用于宫腔镜电切术

    目的探讨曲马多复合异丙酚静脉麻醉用于宫腔镜电切术的可行性和安全性. 方法 ASAⅠ~Ⅱ级宫腔镜电切术患者 40例,随机分为对照组 (P组 )和观察组 (PT组 ),每组各 20例, P组单用异丙酚 2mg· kg- 1诱导, PT组采用曲马多 2mg kg- 1+异丙酚 2mg kg- 1诱导,术中维持每次追加异丙酚 0.5~ 1.0mg· kg- 1,观察麻醉前后 MAP、 HR、 RR和 SPO2的变化,注射痛和术后宫缩痛的发生情况,记录患者睁眼时间、定向力恢复时间、手术时间、异丙酚用药量以及不良反应.结果麻醉后两组 MAP、 HR、 RR和 SPO2均有所下降,但下降幅度均在正常范围内. PT组注射痛和术后宫缩痛的发生率明显低于 P组 (P< 0.01),异丙酚用量明显少于 P组 (P< 0.01).术后患者无恶心、呕吐发生.结论曲马多复合异丙酚静脉麻醉用于宫腔镜电切术较单用大剂量异丙酚具有麻醉效果好,能有效减少异丙酚用量,明显减轻异丙酚的注射痛和术后宫缩痛等优点,值得临床推广应用.

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    作者:胡洪波;张泽华;黄汉菊;贾珉;刘广 刊期: 2005年第02期

  • 广州地区1999~2003年鲍曼不动杆菌的耐药性调查

    目的了解广州地区 1999~ 2003年鲍曼不动杆菌耐药性及变化趋势,以指导临床合理用药.方法严格按照 NCCLS的标准,用 K- B法对从广州地区 13家医院收集的鲍曼不动杆菌进行药物敏感性实验.用 WHONET 5软件进行资料统计, SPSS统计软件卡方检验进行统计学统计.结果 1999~ 2003年不动杆菌对 12种受试抗生素的耐药率分别是亚胺培南( IMP) 7.3%~ 10.7% ,阿米卡星( Amk) 21 8%~ 34 1%,头孢匹美( FEP) 21 4%~ 42 0%,头孢他啶( CAZ) 26.2%~ 40.9%,左氧氟沙星( LEV) 21.2%~ 43.0%,环丙沙星 (CIP)36.0%~ 47.1% ,庆大霉素( GEN) 42.3%~ 48.9% ,复方新诺明( SXT) 39.0%~ 57.1% ,哌拉西林( PIP) 55.3%~ 67.0%,四环素( TEY) 66.0%~ 81.0%,头孢噻肟( CTX) 88.3%~ 90.8%及氨曲南( ATM) 89.3%~ 97.1%.鲍曼不动杆菌对 AMK、 LEV、 FEP、 CIP、 SXT、 TEY、 ATM的耐药性在 1999~ 2003年间有差异( P< 0.05), 而对 IMP、 CAZ、 GEN、 PIP、 CTX的耐药性无显著差异即无多大的变化( P >0.05).结论 IMP是广州地区治疗不动杆菌感染的有效的抗生素.临床常用的各抗生素之间存在严重的交叉耐药,部分抗生素耐药性有上升趋势,临床应加强合理用药.

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