江艺鑫；李香兰
目的：研究长链非编码RNA SNHG5在胃癌中的表达、功能及机制。方法：实时荧光定量 PCR检测SNHG5在胃癌和癌旁组织中的表达差异；在人胃癌细胞中研究过表达或敲低SNHG5对细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响；建立裸鼠皮下及转移瘤模型，研究SNHG5在体内对肿瘤发生发展及转移的影响；利用RNA－pulldown联合质谱的策略寻找SNHG5的相互结合蛋白，再通过RIP进行验证。结果：发现SNHG5在胃癌组织中表达异常增高，其表达水平与肿瘤的TNM分期和癌栓的形成显著相关。 SNHG5可以抑制胃癌细胞在体内外的增殖和转移。此外还发现，SNHG5主要通过阻止其结合蛋白MTA2从细胞质到细胞核的易位而发挥功能。过表达SNHG5能够促进组蛋白H3和p53的乙酰化水平，这也提示SNHG5可能通过捕获细胞质中的MTA2，从而干扰核小体的重塑和组蛋白去乙酰化酶复合物的形成，进而调节其功能。结论：SNHG5是一个影响胃癌细胞增殖和转移的关键分子，可能成为胃癌的预防、诊断和治疗的新靶标分子。
作者：史娟 刊期： 2015年第10期
目的：比较观察siRNA沉默IL－13Rα2基因前后人肺成纤维细胞（ HFL） IL－13Rα1、IL－13Rα2和TGF－β的表达情况，探讨IL－13Rα2与TGF－β和纤维化之间的关系。方法：不同浓度的IL－13外源性刺激HFL细胞，real－time PCR检测siRNA瞬时转染沉默IL－13Rα2基因前后IL－13Rα1、IL－13Rα2和TGF－β的mRNA表达量的变化；细胞免疫荧光标记观察IL－13Rα2和TGF－β的荧光蛋白的表达水平。结果：IL－13外源性刺激能增强HFL细胞IL－13Rα2的表达，其表达量随IL－13浓度的增加而增高，但IL－13Rα1和TGF－β的表达量则无明显变化；siRNA干扰后IL－13Rα2 mRNA的表达量显著下降，TGF－β的表达量明显增高（ P＜0．05）；细胞免疫荧光标记亦显示，沉默后IL－13Rα2蛋白表达显著降低，而TGF－β的表达量升高。结论： IL－13Rα2很可能通过竞争性抑制IL－13Rα1与IL－13结合，进而抑制IL－13所致的纤维化作用。
作者：余群芳；蔡震宇；朱俊；梅任美；黄永红；徐方云；熊丽霞 刊期： 2015年第10期
施加于内皮细胞的血流剪切力可调控血管平滑肌细胞的表型，对血管稳态维持和动脉粥样硬化发生有重要影响。但这一力学信号由内皮细胞向平滑肌细胞的传递机制待阐明。前期工作中我们发现microRNA可作为信号分子介导内皮细胞与平滑肌细胞的交互作用。我们推测：作用于内皮细胞的流体剪切力通过诱导流场特异性的microRNA分泌，调控平滑肌基因表达和表型转换以及血管功能。利用体外流体剪应力加载模型、共培养合并流体加载模型、小鼠血流扰流模型等研究系统，我们发现保护血管的层流和损伤血管的扰流可差异性地调控miR－126、miR－143／－145、miR－155等microRNA的分泌；层流抑制miR－126的分泌，扰流则促进其分泌，其机理涉及剪切力对分泌相关蛋白的表达和细胞内转位的调控；内皮细胞分泌的miR－126可促进平滑肌细胞增殖和去分化表型、促进小鼠颈总动脉新生内膜增厚。研究结果确认了胞外microRNA在血管病理生理过程中的作用，增进了对动脉硬化发生机制的了解。
作者：朱娟娟；Yi-shuan LI；钱煦；周菁 刊期： 2015年第10期
目的：探讨亚甲蓝（ MB）对大鼠百草枯中毒诱导的急性损伤肝脏的保护作用并对保护机制进行研究。方法：24只清洁级雄性成年SD大鼠随机分为正常组、MB组、百草枯（ PQ）组和PQ＋MB组，每组6只。腹腔注射PQ 35 mg／kg建立大鼠中毒模型，PQ＋MB组大鼠于造模2 h后腹腔注射给予MB 2 mg／kg，正常组大鼠给予等量无菌生理盐水。治疗后48 h收集大鼠血清检测ALT、AST和ALP，肝脏组织用于病理学分析、血红素加氧酶1（ HO－1）免疫组化、MPO活性、MDA含量、SOD活性和ATP含量试剂盒检测。另取40只大鼠，按照上述分组方法评估72 h内死亡时间和死亡率。结果：与正常组和MB组比较，PQ组ALT和ALP活性增高，MPO活性增强，MDA含量增加，HO－1表达增加，SOD活性降低和ATP含量降低（ P＜0．05）；MB治疗后能够改变上述生化指标，减轻肝脏病理形态学变化，与PQ组相比，PQ＋MB组HO－1表达量增高，同时大鼠生存时间延长，差异均具有统计学意义（ P＜0．05）。结论：MB能够减轻氧化损伤和抑制炎症反应，对PQ诱导的急性肝损伤大鼠肝脏发挥保护作用。
作者：陈俊良；戴利；张鹏；翁平；柴高尚；庞庆丰 刊期： 2015年第10期
目的：研究铁超载对大鼠肝星状细胞增殖和凋亡的影响以初步证实铁超载对肝纤维化的促进作用。方法：大鼠肝星状细胞HSC－T6给予硫酸亚铁2μmol／L负载24 h，正常对照组给予DMSO 2μmol／L。免疫荧光染色法观察铁在HSC－T6中的分布面积，流式细胞术检测HSC－T6增殖， TUNEL法检测HSC－T6凋亡，Western blot检测HSC－T6基质金属蛋白酶1（MMP－1）和金属蛋白酶组织抑制剂1（TIMP－1）蛋白表达水平。结果：与正常对照组相比，铁超载组HSC－T6内铁染色阳性的平均面积为39．02％±2．03％，平均增殖率为61．02％±2．21％，平均凋亡率为13．01％±0．95％，MMP－1和TIMP－1的蛋白平均表达水平分别增加了38．82％±7．62％和179．88％±17．52％。结论：铁超载导致肝星状细胞的增殖率大于其凋亡率，并且肝星状细胞基质金属蛋白酶抑制剂的表达水平高于其基质金属蛋白酶的水平，因此推断铁超载促进了肝星状细胞的活性，从而促进了肝纤维化的进程。
作者：张颖 刊期： 2015年第10期
目的：探讨不同分化程度的人食管鳞癌细胞（ ESCC）上清对未成熟树突状细胞（ iDC）内皮样分化的影响及其机制。方法：收集KYSE450（高分化）和KYSE70（低分化）细胞上清，并诱导iDC；镜下观察诱导后iDC形态的变化；免疫荧光检测内皮细胞标志物vWF、CD144以及JAK、STAT3磷酸化水平的变化；Q－PCR在mRNA水平上检测内皮细胞标志物vWF和CD144的变化，以及JAK、STAT3、VEGF－A和IL－6表达水平的变化；DiI－Ac－LDL摄取实验检测诱导后iDC摄取能力的变化；用JAK的阻断剂AG490阻断JAK／STAT3通路后，检测内皮细胞标志物vWF和CD144的变化以及iDC摄取DiI－Ac－LDL能力的改变。结果：（1） KYSE450和KYSE70细胞上清诱导后，iDC高表达内皮细胞标志物vWF和CD144，同时JAK／STAT3信号转导通路被激活，且KYSE70组变化显著。（2）AG490阻断JAK／STAT3信号通路抑制了iDC内皮样分化。结论：（1）JAK／STAT3信号转导通路介导了人食管鳞癌微环境下iDC的内皮样分化。（2）与高分化组相比，低分化的人食管鳞癌细胞上清能显著促进iDC的内皮样分化。
作者：晋果果；赵继敏；杨艺；刘康栋；刘行凡；江亚南；黄幼田；路静；董子明 刊期： 2015年第10期
核糖体S6激酶（ribosomal S6 kinase，RSK）2属于Ras－MAPK下游通路的90 kD的RSK家族，该家族包含4个成员（ RSK1～4）及2个结构同系物MSK1／2。 RSK家族的成员具有高度的序列同源性（75％～80％的氨基酸序列是一致的），只有2个激酶功能域不同。尽管结构相似，它们在组织内的分布及功能却不尽相同［1］，而本文主要介绍 RSK2。RSK2的发现起始于它的基因缺陷会导致科－勒二氏综合征（ Coffin－Lowry syndrome，CLS），一种罕见的神经退行性疾病［1］。后来深入的研究发现， RSK2是ERK1／2直接的下游底物，RSK2一旦被激活就会转入到核中磷酸化多种核蛋白，从而调控细胞的多项生命活动包括细胞的增殖、周期、转化等。近几年有不少研究证实RSK2的蛋白水平在恶性肿瘤及组织中较正常细胞及组织明显偏高［2］，而研究者们一直致力于寻找高效低毒的靶向RSK2的抑制剂。由此可见，RSK2是一个很有潜力的抗癌靶标。本文主要就RSK2的结构功能、与肿瘤的关系及现有抑制剂展开介绍。
作者：陈康杏；王籽又；黄燕霞；钟承志；李凯恒；黄遵楠 刊期： 2015年第10期
目的：探讨钙激活性氯离子通道2（ calcium－activated chloride channel 2， CLCA2）在大鼠低氧性肺动脉平滑肌细胞（ pulmo－nary artery smooth muscle cells，PASMCs）中mRNA和蛋白表达的变化及其与ERK1／2信号通路的关系。方法：取14只雄性SD大鼠，使用酶消化法进行PASMCs原代培养，应用小鼠抗大鼠SM α－actin免疫荧光细胞化学法进行细胞鉴定；经培养鉴定PASMCs随机分为常氧组（N组，n＝6）、低氧组（H组，n＝6）、DMSO对照组（D组，n＝6）、U0126干预组（U组，n＝6）和stau－rosporine aglycone干预组（ SA组，n＝6）；采用免疫印迹法检测CLCA2蛋白的表达，选用RT－PCR技术测定CLCA2 mRNA水平的表达。结果：与N组比较，H组PASMCs中CLCA2 mRNA和蛋白的表达量均显著上调（均P＜0．01）；与D组比较， U组CLCA2 mRNA和蛋白的表达均明显上调（均P＜0．01），SA组mRNA的表达显著下调（P＜0．01），蛋白的表达轻微下调（但P＞0．05）。结论：低氧可上调大鼠PASMCs中CLCA2 mRNA和蛋白的表达；ERK1／2通路抑制剂U0126能上调PASMCs中CLCA2 mRNA和蛋白的表达；ERK1／2通路激活剂staurosporine aglycone可下调PASMCs中CLCA2 mRNA和蛋白的表达。
作者：黄林静；赵美平；张聪聪；郑梦晓；应磊；王万铁 刊期： 2015年第10期
目的：探讨有氧运动对自发性高血压大鼠肠系膜动脉钠尿肽敏感性的影响。方法：将自发性高血压大鼠（ SHR）和与其年龄－性别匹配的正常血压WKY大鼠分组如下：4周WKY、4周SHR、16周WKY、16周SHR、16周WKY运动组和16周SHR ＋运动组，每组10只。运动组进行游泳有氧运动训练，生物信号采集系统测定动脉血压，微血管张力系统测定肠系膜动脉舒张功能，放免分析法检测cGMP和ANP含量，酶标仪和Western blotting分别检测PDE5表达。结果：成年（16周） SHR动脉血压明显增加，有氧运动减弱动脉血压的增加；幼年（4周）或成年SHR肠系膜动脉对ANP的血管舒张反应均明显降低，血浆ANP、cGMP水平升高， PDE5蛋白和酶活性均上升；西地那非有效抑制SHR 的PDE5活性，减弱肠系膜动脉对ANP的血管舒张反应，有氧运动训练能部分恢复肠系膜动脉对ANP的血管舒张反应；有氧运动增强SHR组PDE5的活性。结论：有氧运动缓解自发性高血压大鼠肠系膜动脉钠尿肽敏感性。
作者：常盼；铁茹；张学策；王建榜；苏兴利；于军 刊期： 2015年第10期
目的：探讨银杏叶提取物Egb 761对大鼠心梗后心肌纤维化的作用和可能机制。方法：结扎冠脉左前降支复制大鼠心梗后心肌纤维化模型，Masson染色观察心肌纤维化病理改变。免疫组化法检测心肌α－平滑肌肌动蛋白和磷酸化细胞外信号调节激酶1／2（extracellular signal－regulated kinase 1／2，ERK1／2）蛋白的表达。结果：假手术组心肌纤维排列规则，界限清楚；模型组梗死心肌为大量结构紊乱的纤维组织替代，纤维化明显；Egb 761组心肌纤维化减轻。α－平滑肌肌动蛋白和p－ERK1／2蛋白在假手术组有微弱表达；在模型组表达明显增加，而Egb 761可抑制上述表达的增加。结论：银杏叶提取物可改善大鼠心梗后心肌纤维化，其机制可能与调节α－平滑肌肌动蛋白和p－ERK1／2的表达有关。
作者：李淑琴；武宇洲；朱嘉宝；邢茹 刊期： 2015年第10期
目的：我们的前期研究发现，敲除FKBP12．6基因可导致成年雄性小鼠心肌肥大。本研究旨在探讨FKBP12．6缺失导致性别差异性心肌肥大的分子机制。方法：手术摘除FKBP12．6基因敲除小鼠睾丸以观察对心肌肥大的影响；放射性免疫检测法（RIA）和ELISA法检测FKBP12．6敲除小鼠17β－estradiol （E2）、testosterone （T）、LHβ和FSHβ分泌变化情况；建立垂体神经元LβT2 FKBP12．6shRNA载体稳定干扰细胞系，采用Fluo3－AM荧光探针检测［ Ca2＋］ i；real－time PCR检测LHβ、FSHβ、calci－neurin（CaN）等mRNA表达变化；分离胞浆胞核蛋白，Western blot法检测CaN、MCIP1．4、NFAT3、Nur77、Pin1等蛋白表达和核浆分布情况。结果：摘除雄性FKBP12．6基因敲除鼠的睾丸可显著抑制心肌肥大的发生；FKBP12．6敲除小鼠心脏中可能促进心肌肥大的通路CaN和CaMKⅡ的表达和活性并未发生明显变化；血清E2、T、LHβ及FSHβ水平与WT相比显著上调，表明敲除小鼠性腺轴调控增强；LβT2 FKBP12．6干扰后［ Ca2＋］ i 显著上升；性腺轴相关基因LHβ、SF－1、Nur77和钙离子相关基因CaN、MCIP1．4、SERCA2的mRNA表达显著上调；胞浆中CaN和MCIP1．4蛋白水平上调；NFAT3、Nur77和Pin1核转位明显增加。结论：FKBP12．6缺失后垂体细胞内钙离子水平上调，激活CaN／NFAT3通路，进而促进LHβ和FSHβ转录，导致下丘脑－垂体－性腺轴激活，从而诱发性别差异性心肌肥大。
作者：肖云飞；邓柯玉；王婵娟；曾智雄；管小卉；汪玲芳；姬广聚；寿伟年；辛洪波 刊期： 2015年第10期
目的：探讨益母草水苏碱对心力衰竭大鼠心肌自噬的影响及作用机制。方法：采用胸主动脉结扎法（ TAC）诱导心衰模型。采用血流动力学检测心功能，免疫印迹法检测自噬相关蛋白、Nox2亚基、磷酸化AMPK及mTOR的表达，免疫荧光法双标记检测Nox2的活化状态，H2DCF检测胞浆ROS产生变化，GFP－RFP－LC3慢病毒转染检测自噬体及自噬溶酶体数量变化。结果：整体水平上，与假手术组相比，模型组心功能下降，自噬相关蛋白表达增加（ P＜0．05）；与模型组相比，益母草水苏碱组心功能得到改善，自噬相关蛋白表达下降（ P＜0．05）。细胞水平上，与正常组相比，模型组自噬体及自噬溶酶体数量明显增多，自噬相关蛋白、Nox2亚基表达、胞浆ROS产生、磷酸化AMPK及mTOR明显减少（ P＜0．05）；与模型组相比，益母草水苏碱组的自噬体及自噬溶酶体数量明显减少，自噬相关蛋白、Nox2亚基表达、胞浆ROS产生、磷酸化AMPK及mTOR增加（ P＜0．05）。结论：益母草水苏碱通过抑制Nox2活化和其亚基的表达，使ROS产生减少，并且经磷酸化AMPK－mTOR途径抑制自噬的过度激活，从而改善心功能。
作者：曹童童；陈会花；章忱；郭炜；卫洪昌；吕嵘 刊期： 2015年第10期
目的：探讨CD38基因缺失对小鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法：利用CD38基因敲除及野生型小鼠进行在体小鼠心脏左前降支结扎，缺血30 min后复灌24 h取心脏，1 mm切片进行TTC染色确定其梗死面积差异。利用shRNA干扰系统构建的CD38稳定干扰H9c2细胞系模拟体外缺氧复氧损伤。用CCK－8法确定佳缺氧复氧损伤时间，再利用流式细胞术对缺氧复氧后氧化应激诱导的活性氧含量进行检测，利用Hoechst 33258染色法检测损伤诱导的细胞凋亡。分离提取细胞核浆蛋白，Western blot检测缺氧复氧后FOXO3的核定位及抗氧化蛋白catalase、凋亡信号通路相关蛋白P53－Bax表达。结果：CD38基因缺失可以减少小鼠心肌缺血再灌注损伤中心肌梗死面积。细胞缺氧复氧模型中，缺4小时复氧不同时间（3 h，6 h，10 h，24 h）诱导细胞缺氧复氧损伤模型中，CD38干扰组细胞活性均明显高于对照组。损伤诱导后CD38干扰组H9c2细胞中氧自由基含量及其诱导的凋亡均明显低于对照组（P＜0．05）。 Western blot检测发现缺氧复氧诱导细胞损伤后，CD38干扰组FOXO3明显入核，其下游蛋白抗氧化蛋白catalase表达也明显增加，抗凋亡蛋白P53乙酰化及其下游促凋亡蛋白Bax明显增加。结论：CD38基因缺失可以通过FOXO3－catalase介导的抗氧化应激信号通路和P53－Bax介导的抗凋亡信号通路减轻小鼠心肌缺血再灌注损伤。
作者：管小卉；洪轩；赵宁；刘晓红；肖云飞；陈廷涛；韩小建；邓柯玉；辛洪波 刊期： 2015年第10期
作者： 刊期： 2015年第10期
目的：Bach1是一个转录抑制因子，在内皮细胞表达。但是Bach1是否调控血管新生还不清楚。本研究旨在探讨Bach1在血管新生和Wnt信号通路中的作用。方法和结果：在小鼠下肢缺血模型，Bach1基因敲除小鼠缺血肢毛细血管和小动脉密度，以及促血管新生相关因子（IL－8和VEGF）增多。 Bach1基因敲除小鼠的原代内皮细胞增殖、迁移和管腔形成能力增强。Bach1过表达抑制小鼠缺血下肢血管新生，抑制Wnt3a刺激的内皮细胞血管新生反应以及Wnt下游靶基因IL－8和VEGF的表达。 Bach1与TCF4结合抑制β－catenin与TCF4的结合。 Bach1通过减少p300／CBP和β－catenin的结合抑制β－catenin的乙酰化。 Bach1招募组氨酸去乙酰化酶，结合在IL－8启动子区的TCF4结合位点上抑制基因转录。结论：Bach1抑制缺血损伤后的血管新生，Bach1通过招募组氨酸去乙酰化酶到TCF4靶基因的启动子区域，抑制β－catenin和TCF4的结合，抑制Wnt／β－cate－nin信号通路。
作者：蒋丽；刘俊许；魏香香；牛琮；徐洁；王新红；陈思峰；孟丹 刊期： 2015年第10期
目的：探讨适应病理生理学大班教学的“案例式教学（CBL）”方法的改革及应用效果探索。方法：（1）使用标准化处理的临床病例，提前一星期将包括了“显性问题”和“隐形问题”的病例给到学生小组；（2）学生针对病例展开课下资料查找、讨论及PPT制作；（3）汇报小组课上自主病例讲解；（4）教师评价、学生自我评价、学生互评；（5）问卷调查。结果：（1）学生对此教学法接受度96．1％，满意度90．3％，参与度85．8％；（2）学生认为该方法提高学习兴趣91．5％、提高学习效率88．3％、提高临床思维92．3％、提高知识理解能力96．2％、提高知识运用能力91．6％；（3）集中问题：诊断知识理解不够、基础教师对临床知识指导不够。结论：基于大班教学的“案例式教学”在“以学生为中心，提高自学能力”的理念下，针对现行大班病理生理学教学现状，可以提高学生学习兴趣、学习效率、临床思维能力，提高知识的理解和运用能力。
作者：石磊；刘巍；徐芳；李钰伶 刊期： 2015年第10期
目的：研究FAM3A在小鼠肝脏缺血再灌注（IR）损伤中的作用及机制；探索FAM3A是否介导罗格列酮对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用。方法和结果：在IR小鼠肝脏中，PPARγ和FAM3A表达增加。利用siRNA敲减肝脏FAM3A后，行IR手术，相较于对照组，敲减FAM3A组血浆AST、ALT水平及氧化应激显著升高，肝脏坏死区域增加，炎症因子及促凋亡因子水平上调，抗凋亡因子下调。敲减FAM3A组小鼠肝脏ATP含量下降。进一步研究显示敲减肝脏FAM3A后，罗格列酮对IR损伤肝脏的保护作用丧失。体外培养肝细胞中过表达FAM3A能激活p－Akt并促使FOXO1出核降解，但被ATP受体拮抗剂PPADS和suramin阻断。罗格列酮能诱导Akt激活及FOXO1出核降解，并能被PPADS、suramin及FAM3A敲减阻断。结论：FAM3A通过增加ATP含量，激活P2R－Akt信号通路，促使FOXO1出核降解，从而在肝脏IR中发挥保护作用。 FAM3A介导了罗格列酮类药物对缺血再灌注损伤肝脏的保护作用。利用PPARγ激动剂激活FAM3A有可能成为缺血性肝损伤疾病的新干预策略。
作者：陈真真；崔庆华；杨吉春 刊期： 2015年第10期
目的：本实验旨在研究A类清道夫受体（ SR－A）在肥胖相关性高血压发生发展中的作用及其机制。方法与结果：我们分别建立了SR－A缺失的自发性肥胖小鼠模型（ SR－A－／－ob／ob）和饮食诱导的肥胖小鼠模型。检测结果显示，无论是自发性肥胖还是饮食诱导的肥胖小鼠，当SR－A表达缺失以后，其血压明显高于对照组小鼠。此外，血管舒张功能检测显示，乙酰胆碱（ ACh）介导的内皮舒张收缩功能明显受损。进一步，real－time PCR的结果显示SR－A表达缺失的肥胖小鼠其血管周围脂肪组织（ PVAT）中巨噬细胞浸润明显更加，炎症因子分泌增加，血浆ELISA检测得到同样的结果。此外，我们还检测发现SR－A表达缺失的肥胖小鼠其PVAT分泌VEGF－B明显增加，而VEGF－B可以加重脂肪酸造成的内皮细胞功能受损。结论：总而言之， ；SR－A可以保护肥胖相关性高血压的形成与发展，这一作用可以为临床防治相关疾病提供新的靶点。
作者：主流；朱旭冬；陈琪 刊期： 2015年第10期
目的：研究miRNA－630（miR－630）在乳腺癌中的表达水平及在乳腺癌发生发展中的功能。方法：采用反转录实时定量PCR方法对其在乳腺癌病人标本及乳腺癌细胞系中的表达进行检测；利用克隆形成实验、划痕实验、细胞迁移能力检测等方法对其在乳腺癌高转移细胞株MDA－MB－231及 BT549中的功能进行研究；利用慢病毒感染方法构建稳定表达miR－630的MDA－MB－231细胞株，研究其在小鼠体内转移能力；通过生物信息学分析、萤光素酶报告基因分析和Western blot方法对miR－630的靶基因进行筛选和鉴定。结果：miR－630在乳腺癌病人癌组织以及乳腺癌细胞株中的表达显著降低；在 MDA－MB－231和BT549细胞中过表达miR－630显著抑制细胞的克隆形成能力及迁移侵袭能力。在体内实验中，稳定过表达miR－630抑制MDA－MB－231细胞的肺转移能力。后， MTDH被鉴定为miR－630的靶基因，参与miR－630赋予细胞的各种功能。结论：miR－630通过靶向MTDH在乳腺癌的转移过程中发挥重要功能。
作者：周佽想；王辰龙；于安路；陈国强；赵倩 刊期： 2015年第10期
心脏干细胞移植在心肌梗死治疗中具有广泛应用，外泌体（ exosome）被认为是细胞旁分泌的重要介质。本研究拟建立心脏固有干细胞（ CPCs）的成熟分离方法，并初步探索CPCs分泌的exosome在体外保护氧化应激状态下心肌细胞的凋亡。原代分离培养鉴定Sca－1＋CPCs，离心加试剂盒分离出CPCs分泌的exosome，并进行表型鉴定和粒径分析；将心肌细胞分成对照组与CPC－exo预处理组，用H2 O2处理心肌细胞诱导其凋亡，Western blot （ WB）检测cleaved caspase－3蛋白水平。结果显示：磁珠分选出的细胞用免疫荧光检测发现Sca－1呈现阳性表达，流式细胞术提示分选前和分选后Sca－1阳性细胞的比例差异具有统计学意义（n＝3， P＜0．01）；CPCs来源的exosome， WB结果提示其CD63表达阳性；体外凋亡保护的WB结果显示，加了CPC－exo的细胞凋亡状态明显改善，且相关蛋白表达显著降低（ P＜0．05）。因此，心脏干细胞可以分泌出携带有重要信息物质的exosome，能在体外保护心肌细胞，避免其发生凋亡，为临床心梗等疾病提供全新的治疗策略。
作者：肖静；潘宇；李晓红；吴岳恒；姜霖；杨翔宇；余细勇 刊期： 2015年第10期
中国病理生理杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国病理生理学会
