刘近春
目的：本研究拟探讨SENP1、VEGF以及CARD14交互作用在预测移居汉族男性高原红细胞增多症遗传易感性的作用。方法：纳入234例移居汉族男性高原红细胞增多症（ HAPC）患者与250例移居汉族男性正常对照， PCR－高分辨率熔解曲线法判定SENP1基因rs726354、VEGF基因rs3025033及CARD14基因rs8065364等多态性位点的基因型，多因子降维软件分析基因之间的交互作用。结果：rs726354多态性位点以及rs3025033多态性位点基因型与等位基因频率在HAPC组与正常对照组的分布无差异；CARD14基因rs8065364的3种基因型在HAPC组与正常对照组的频率分布存在差异，HAPC组与正常对照组C等位基因与T等位基因频率存在差异。基因交互作用提示上述3个多态性位点的不同组合可影响移居汉族男性HAPC的易感性。结论：CARD14基因rs8065364多态性与移居汉族男性HAPC的发生存在相关性，C等位基因是汉族男性HAPC的危险因素，SENP1基因、VEGF基因以及CARD14基因的交互作用可能参与了移居汉族男性HAPC的发生。
作者：陈郁；蒋春华；罗勇军；刘福玉；高钰琪 刊期： 2015年第10期
目的：观察肺炎衣原体C．pn感染对血管新生的影响，探讨IQGAP1信号通路在C．pn感染促进血管新生中的作用及其可能机制。方法及结果：微管腔形成实验和细胞迁移实验结果显示，C．pn感染促进血管新生的作用与其增强血管内皮细胞（ VEC）的迁移能力有关。随后，我们发现，C．pn感染可能通过促使IQGAP1酪氨酸和丝氨酸磷酸化而诱导血管新生。免疫共沉淀结果表明，C．pn感染的VEC内IQGAP1与N－WASP间有相互作用。免疫荧光染色观察，C．pn感染后VEC内肌丝聚合， ；IQGAP1和N－WASP均聚集于肌丝聚合处，呈重合状态。 Western blot结果显示，C．pn感染VEC N－WASP磷酸化水平升高，而总N－WASP表达水平无明显变化。此外，N－WASP抑制剂可抑制C．pn感染诱导的血管新生，这表明N－WASP可能参与了C． pn感染诱导的血管新生。而沉默IQGAP1表达后，N－WASP磷酸化水平显著降低，且C．pn感染后N－WASP与肌丝的共定位受到抑制。结论：C．pn感染可能通过激活IQGAPQ1－N－WASP通路促进VEC迁移而诱导血管新生。
作者：王蓓蓓；张丽莙 刊期： 2015年第10期
目的：TRPV4（ transient receptor potential vanilloid subtype 4）是配体门控非选择阳离子通道，在肺泡和肾小管上皮中参与对渗透压的调节，但其在下颌下腺的生理功能尚不清楚。本研究旨在探讨TRPV4在M3R介导的唾液分泌中的作用。方法：离体小鼠下颌下腺灌流研究TRPV4抑制后对卡巴胆碱所诱导分泌的影响；Fura－2AM法测定TRPV4抑制后细胞内钙信号变化；在体唾液收集观察TRPV4抑制后对匹罗卡品诱导腺体分泌的影响。免疫荧光研究TRPV4抑制后水通道蛋白5（aquaporin 5， AQP5）在细胞内的位置变化。结果：离体灌流结果显示，TRPV4抑制剂RN1734和HC067047会抑制卡巴胆碱所诱导的腺体分泌。在腺泡细胞上，TRPV4抑制剂也可以明显地抑制卡巴胆碱所诱导的细胞内钙离子［ Ca2＋］ i 升高。 TRPV4抑制剂均可以抑制匹罗卡品诱导的腺体分泌。结论：TRPV4在M3 R介导的唾液分泌中不可或缺，其发挥作用的方式是通过介导细胞外钙离子进入细胞，影响细胞内的钙信号及下游AQP5细胞内定位。
作者：张艳；张菁；丛馨；吴立玲 刊期： 2015年第10期
目的：脓毒症时常伴有组织因子（ TF）表达增加，致凝血功能异常。血小板与白细胞相互作用可促进白细胞表达TF，增强凝血活性。以往研究表明热休克因子1（HSF1）能减轻脓毒症时组织器官的损伤并降低死亡率。本研究探讨内毒素血症时小鼠HSF1对血小板激活、血小板与白细胞相互作用和白细胞TF表达的影响。方法：采用HSF1基因敲除（ HSF1－／－）和野生型（ HSF1＋／＋）小鼠复制内毒素血症模型，应用流式细胞术检测外周血血小板与白细胞黏附和白细胞TF表达。结果：（1）与生理盐水组相比，内毒素血症小鼠血小板P－选择素表达、血小板－白细胞黏附和白细胞TF表达显著升高，出血时间明显缩短；（2）内毒素血症时，HSF1－／－小鼠血小板P－选择素表达、血小板－白细胞黏附和白细胞TF表达均显著高于HSF1＋／＋小鼠，出血时间比HSF1＋／＋小鼠显著缩短。结论：HSF1能抑制小鼠内毒素血症时血小板激活、血小板与白细胞相互作用和白细胞组织因子表达。
作者：肖子辉；冯宇鹏；肖献忠 刊期： 2015年第10期
目的：探究银杏叶提取物EGb761对人结肠癌细胞的增殖抑制、诱导凋亡及其作用机制。方法：体外培养12株人结肠癌细胞，给予不同浓度EGb761（0～600 mg／L）作用24 h，采用MTT、集落生成实验以及流式细胞术检测给药处理后结肠癌细胞的增殖和凋亡情况。通过Western blot技术检测RIP－1分子表达水平和凋亡标志物PARP的表达水平变化。利用ELISA技术检测NF－κB信号通路的活性。结果：EGb761在较低浓度（400 mg／L）可以抑制结肠癌细胞的增殖，并诱导肿瘤细胞发生凋亡。随着药物浓度的增加，EGb761诱导结直肠癌细胞凋亡率也随之增加。 EGb761作用于结肠癌细胞后可导致凋亡相关蛋白RIP－1的降解。同时 EGb761通过抑制 I－κB 磷酸化而抑制 NF－κB 信号通路促细胞增殖的作用。结论：银杏叶提取物（ EGb761）能广泛抑制人结肠癌细胞的增殖，并诱导人结肠癌细胞发生凋亡，研究结果提示凋亡发生的机制与细胞内RIP－1的降解以及NF－κB信号通路的活性降低有关。
作者：杜吉佩；承尧；姬光瑜；郑焱江；廖诗平；张霁；王玉芳 刊期： 2015年第10期
目的：早期溶栓和神经细胞保护一直是防治缺血性脑卒中的两大策略。然而，溶栓治疗常面临再灌注损伤或继发性出血等问题。因此，神经细胞保护及神经损伤的修复一直是本领域的研究热点。多年来的研究重点主要侧重于神经元的保护。本研究室发现CART能够发挥缺血再灌注损伤早期的神经保护作用和后期的神经修复作用。 CART发挥神经修复作用的机制有待进一步研究。方法：原代培养新生C57BL／6小鼠皮层神经元，体外氧糖剥夺复氧（O／R）模型，MTT生存实验及Western blot。结果：原代培养的皮层神经元O／R 4 h后给药CART，继续长时间培养，CART可以提高神经元的生存率，分子实验表明CART组GRP78蛋白水平升高，caspase 12的剪切体水平降低。结论：CART促进缺血再灌注损伤后期的神经修复，其机制可能是上调GRP78水平，抑制内质网应激和凋亡分子激活。
作者：陈曼；董瑞瑞；王璇；祝世功 刊期： 2015年第10期
目的：探讨胆固醇线粒体转运蛋白对脂肪肝细胞模型糖脂代谢、炎症反应及其胰岛素敏感性的作用及其机制。方法：1．32 mmol／L油酸＋0．66 mmol／L软脂酸共同作用小鼠原代肝细胞建立脂肪肝细胞模型，携带StAR基因的腺病毒转染细胞得到StAR高表达组。 Real－time PCR和Western blot检测糖脂代谢、炎症反应相关分子的变化；相关试剂盒检测肝细胞内甘油三酯、胆固醇及糖原水平；Western blot检测胰岛素信号转导通路上关键蛋白的表达，并用PI3K抑制剂抑制该通路后观察StAR的作用。结果：StAR过表达降低脂肪酸合成关键分子、炎症因子（ TNF－α、MCP1）及糖异生关键分子的表达，升高糖原合成关键分子的表达，且减少脂肪肝细胞模型内甘油三酯和胆固醇的水平，提高该模型的糖原合成能力及葡萄糖利用能力；StAR过表达降低细胞内二酰基甘油含量，减少PKCε的磷酸化，从而升高胰岛素受体底物1及Akt的磷酸化；PI3K被阻断后，StAR对糖脂代谢的作用消失。结论：StAR对脂肪酸引起的脂质沉积及胰岛素抵抗的肝细胞有保护作用，且该作用通过胰岛素信号转导通路介导。
作者：邱燕燕；詹永坤；李晓波；支秀玲；宁艳霞；殷莲华 刊期： 2015年第10期
目的：观察辛伐他汀（ SIM）对肾缺血再灌注损伤（ RIRI）大鼠肾脏的影响。方法：SD大鼠分为5组；假手术组（ sham）；缺血再灌注组（ I／R）；SIM 5、20、40 mg? kg－1? d－1（ Sim－L、M、H）组。给药2周后，复制RIRI动物模型，于再灌后24 h摘取双侧肾脏，观察肾损伤程度（HE染色）；检测肾组织p47phox蛋白表达（Western blot）。结果：I／R组肾小管上皮细胞混浊肿胀，管腔扩张，上皮细胞胞浆空泡样变性、坏死。 Sim－M和Sim－H组肾小管上皮细胞损伤程度明显轻于IR组。 I／R组肾皮质p47phox蛋白表达较sham组明显上调；与I／R组相比，Sim－M和Sim－H组p47phox表达均明显减少。结论：SIM可明显减轻RIRI，减少RIRI大鼠肾皮质p47phox蛋白的表达，表明SIM减轻RIRI大鼠肾组织损伤的机制可能与其减少p47phox蛋白的表达、干扰NAD（P）H氧化酶生成通路的某些环节有关。
作者：荆娇；牛丽静；王慧娟；苗智慧；夏晓红 刊期： 2015年第10期
目的：研究miRNA－630（miR－630）在乳腺癌中的表达水平及在乳腺癌发生发展中的功能。方法：采用反转录实时定量PCR方法对其在乳腺癌病人标本及乳腺癌细胞系中的表达进行检测；利用克隆形成实验、划痕实验、细胞迁移能力检测等方法对其在乳腺癌高转移细胞株MDA－MB－231及 BT549中的功能进行研究；利用慢病毒感染方法构建稳定表达miR－630的MDA－MB－231细胞株，研究其在小鼠体内转移能力；通过生物信息学分析、萤光素酶报告基因分析和Western blot方法对miR－630的靶基因进行筛选和鉴定。结果：miR－630在乳腺癌病人癌组织以及乳腺癌细胞株中的表达显著降低；在 MDA－MB－231和BT549细胞中过表达miR－630显著抑制细胞的克隆形成能力及迁移侵袭能力。在体内实验中，稳定过表达miR－630抑制MDA－MB－231细胞的肺转移能力。后， MTDH被鉴定为miR－630的靶基因，参与miR－630赋予细胞的各种功能。结论：miR－630通过靶向MTDH在乳腺癌的转移过程中发挥重要功能。
作者：周佽想；王辰龙；于安路；陈国强；赵倩 刊期： 2015年第10期
高同型半胱氨酸血症（ HHcy）是心脑血管疾病的独立危险因素，已有报道Hcy可以升高AT1受体的mRNA和蛋白表达水平。本研究主要运用了Ca2＋成像、双萤光素酶报告基因、激光共聚焦显微镜等方法。我们首先发现Hcy体外刺激小鼠血管环可引起白细胞介素6（IL－6）及单核细胞趋化蛋白1（MCP－1）的释放增加，在AT1受体敲除小鼠的血管环中被明显抑制。 Hcy可激活AT1受体经典的Gq信号通路及β－arrestin－2信号通路，并引起AT1受体内化。本文找出了Hcy在心血管系统内的受体，并发现Hcy可通过AT1受体加重血管炎症损害。
作者：李拓圯；孙金鹏；孔炜 刊期： 2015年第10期
目的：研究中药槲芪散及君药槲寄生提取物--总碱、多糖对大鼠肝癌前病变的影响。方法：实验分为：单纯肝大切组；模型组：通过Solt－Farber法建立大鼠肝癌前病变；盐水组；槲芪散组；槲寄生总碱组；槲寄生多糖组。 HE染色观察治疗前后肝癌前病变程度；组织化学检测γ－GT表达情况；免疫组织化学及Western blot法检测治疗前后GST－π表达及Hedgehog信号通路表达情况。结果：肉眼观察：单纯肝大切组肝脏表面光滑；模型组肝脏表面布满大小不一结节；治疗组结节数明显减少；HE染色结果显示：单纯肝大切组肝小叶结构清晰完整；模型组大鼠肝细胞肝索结构紊乱，有明显的细胞增生灶；治疗组大鼠异常增生灶明显减少。组织化学、免疫组织化学及Western blot结果显示：单纯肝大切组GST－π及γ－GT只有汇管区有少量表达；模型组GST－π及γ－GT阳性表达灶明显增多；治疗组阳性表达灶数量较模型组明显减少。 Wstern blot结果显示治疗后Hedgehog信号通路中Gli2和Shh下降。结论：中药槲芪散及君药槲寄生提取物--总碱、多糖可能通过Hedgehog信号通路抑制大鼠肝癌前病变，目前正在研究中。
作者：李若菲；王芸姣；王学江；江瑛 刊期： 2015年第10期
目的：研究lipocalin家族成员NGAL对慢性髓系白血病细胞伊马替尼（ imatinib）耐药性的影响及其机制。方法：构建针对NGAL的慢病毒干扰载体，建立稳定干扰NGAL的细胞系。 MTT法检测细胞活力。 Hoechst 33258染色和流式细胞术检测ima－tinib诱导的细胞凋亡。结果：NGAL的干扰载体成功降低了白血病K562／G01细胞系中NGAL的表达。 Hoechst 33258染色和流式细胞术结果表明NGAL沉默可以增强imatinib对K562／G01细胞的杀伤作用。沉默NGAL可以降低NHE1的表达，进而抑制AKT的磷酸化。结论：shRNA干扰NGAL表达可以增加K562／G01对imatinib的敏感性，其机制包括抑制NHE1的表达进而调控PI3 K信号通路。
作者：李元叶；张海瑞；王齐；许华；李庆华；庞天翔 刊期： 2015年第10期
目的：观察灯盏细辛注射液对大鼠急性缺血心肌的保护作用。方法：将30只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组和灯盏细辛组，每组各10只。每组大鼠提前给药1周，灯盏细辛组剂量为50 mg? kg－1? d－1，正常组与模型组每天以相应量的生理盐水。后采用腹腔注射异丙肾上腺素（ ISO）造模，注射剂量2 mg? kg－1? d－1，连续注射2 d。造模后取血和心肌组织，检测超氧化物歧化酶（ SOD）和丙二醛（ MDA）的量。结果：模型组大鼠血清和心肌组织中SOD活性显著低于正常对照组（ P＜0．01），MDA的含量高于正常对照组（P＜0．05）。灯盏细辛组大鼠血清和心肌组织中SOD活性高于模型组（P＜0．05），MDA的含量显著低于模型组（ P＜0．01）。结论：灯盏细辛能提高急性心肌缺血大鼠SOD的活性，降低MDA的含量，表明灯盏细辛对急性缺血心肌有保护作用。
作者：苏娟；秦燕 刊期： 2015年第10期
目的：研究孤束核ghrelin对化疗呕吐大鼠胃运动的影响，探讨下丘脑外侧区的可能调控作用。方法：腹腔注射顺铂制备化疗呕吐大鼠模型；荧光免疫组化和Western blot法检测化疗呕吐大鼠孤束核ghrelin和ghrelin受体GHSR－1a的表达变化；神经元逆行追踪结合免疫组化观察下丘脑外侧区－孤束核ghrelin能纤维联系；在体胃运动记录观察孤束核微量注射ghrelin、电刺激下丘脑外侧区对化疗呕吐大鼠胃运动的影响。结果：化疗呕吐大鼠孤束核ghrelin表达低于正常大鼠，而GHSR－1a表达高于正常大鼠，且胃运动显著减弱（ P＜0．05）；下丘脑外侧区有神经元投射至孤束核，且有部分神经元是ghrelin免疫阳性神经元；孤束核注射ghrelin和电刺激下丘脑外侧区可显著促进正常大鼠和化疗呕吐大鼠胃运动（ P＜0．05）；孤束核微量注射ghrelin受体阻断剂［ D－Lys－3］－GHRP－6对正常大鼠电刺激下丘脑外侧区胃运动效应无影响，而对化疗呕吐大鼠电刺激下丘脑外侧区胃运动效应显著减弱（ P＜0．05）。结论：孤束核ghrelin可促进化疗呕吐大鼠胃运动，并受下丘脑外侧区调控。
作者：公衍玲；徐珞；郭菲菲 刊期： 2015年第10期
血红素加氧酶1（HO－1）是否对糖尿病病变血管具有保护作用及其相关机制尚不明确。我们推测胆红素介导HO－1对糖尿病病变血管的保护作用。对糖尿病小鼠进行腹腔注射血精素（ HO－1诱导剂），分离主动脉检测血管功能、进行分子生物学研究，测定内皮细胞NO生成。血精素增强糖尿病小鼠主动脉内皮依赖性舒张，增加Akt和eNOS的磷酸化水平，这些作用能被HO－1抑制剂SnMP或HO－1敲低病毒所抑制。血精素治疗增加糖尿病小鼠血浆中胆红素含量，并且胆红素也能够改善糖尿病小鼠主动脉的内皮依赖性舒张，此作用亦可被Akt抑制剂阻断。胆绿素还原酶（胆红素生成的关键酶）沉默可抑制血精素的血管保护作用，胆红素的慢性治疗改善糖尿病小鼠主动脉内皮依赖性舒张。血精素和胆红素能改善高糖诱导内皮细胞Akt和eNOS磷酸化水平降低和NO生成减少。胆绿素还原酶沉默病毒能够阻断血精素的作用。此外，胆红素改善糖尿病病人肾动脉内皮依赖性舒张。 HO－1保护血管的作用由胆红素介导；胆红素通过增强Akt和eNOS 磷酸化，从而增加内皮细胞NO的产生，进而改善血管的舒张功能。胆红素有可能成为治疗糖尿病血管病变的新靶点。
作者：黄聿；刘建 刊期： 2015年第10期
作者： 刊期： 2015年第10期
嗅觉受体是生物体感知外界气味的第一级反应元件。本课题组之前发现铜离子参与的小鼠嗅觉受体MOR244－3的活化反应，报导了嗅觉受体是金属蛋白的假设。然而，嗅觉受体的金属效应是否在哺乳动物中具有普遍意义以及在人类中是否也存在具有金属离子效应相关的嗅觉受体，目前还尚未获得证实。本课题组利用嗅觉受体的异源表达系统筛选获得人类嗅觉受体ORXXX为叔丁基硫醇（ TBM；IUPAC：2－methyl－2－propanethiol）的特异性受体，且在ORXXX与TBM的反应体系中加入铜离子会大大地提高ORXXX对TBM的反应。接着，通过检测各含硫化合物在ORXXX上的反应，我们发现只有短链硫醇类化合物在铜离子参与的情况下可以活化ORXXX。为了进一步比较金属离子参与ORXXX与MOR244－3活化的异同，我们在MOR244－3上检测了上述短链单硫醇类化合物的反应，发现MOR244－3与ORXXX具有明显的反应图谱差异，表明由铜离子介导的气味分子活化MOR244－3与ORXXX的反应机理是截然不同的。这一研究首次证实了金属离子在人类嗅觉感知中发挥着不可或缺的作用。
作者：李生菊 刊期： 2015年第10期
目的：观察PCSK9在oxLDL诱导PC12凋亡中的作用及机制。方法：用oxLDL单独处理或PCSK9 siRNA转染后处理PC12细胞，Hoechst 33258染色和流式细胞术检测细胞凋亡，RT－PCR、Western blot分别检测PCSK9、BACE1、caspase－3、caspase－9、Bcl－2和Bax的表达，ELISA检测培养液中Aβ40和Aβ42含量。结果：75 mg／L oxLDL可诱导PC12凋亡，增加PCSK9 mRNA和蛋白表达，降低BACE1 mRNA和蛋白表达量及Aβ40、Aβ42含量。 PCSK9 siRNA抑制oxLDL诱导的PC12凋亡，降低caspase－3、caspase－9和Bax表达，增加BACE1、Bcl－2表达和Aβ40、Aβ42含量。结论：PCSK9在oxLDL诱导神经细胞凋亡中起双向调节作用。
作者：吴琪；彭娟；任重；赵雪珊；何妮娅；高亚；唐志晗；姜志胜；刘录山 刊期： 2015年第10期
目的：观察环黄芪醇对脑缺血再灌注大鼠神经元凋亡和端粒酶逆转录酶（ telomerase reverse transcriptase， TERT）表达的影响。方法：制作大鼠右侧大脑中动脉栓塞模型，缺血2 h再灌注24 h。用免疫组织化学法和蛋白印迹法检测大鼠缺血侧皮质中TERT蛋白的表达。用TUNEL染色法检测大鼠缺血侧半暗带区神经元的凋亡指数。结果：模型组较假手术组TERT的表达升高（P＜0．05）。环黄芪醇组较模型组TERT表达升高（P＜0．05）。模型组、端粒酶抑制剂组、端粒酶抑制剂＋环黄芪醇组的凋亡指数较假手术组均上升（P＜0．01）；环黄芪醇组凋亡指数较模型组明显降低（P＜0．05）；与环黄芪醇组相比，端粒酶抑制剂＋环黄芪醇组凋亡指数上升（P＜0．05）；与抑制剂组比较，抑制剂＋环黄芪醇组凋亡指数无显著差异（P＞0．05）。结论：环黄芪醇能抑制脑缺血再灌注大鼠神经元凋亡，该作用是通过促进TERT表达来实现的。
作者：高维娟 刊期： 2015年第10期
目的：RNF41是一种E3泛素连接酶，具有泛素连接酶活性，在心脏的发育过程和功能形成过程中起到关键作用。本研究旨在探讨RNF41基因多态性与中国蒙族先天性心脏病发病易感性之间的关系。方法：采用PCR结合直接测序法检测119例先天性心脏病患儿（病例组）和108例非先心病患儿（对照组）的RNF41基因位点rs116861857的基因型频率和等位基因频率。结果：病例组RNF41位点rs116861857TT和TA基因型频率分别为80．67％和19．33％，而对照组TT和TA基因型频率分别为94．44％和5．56％，两组间有显著差异（P＜0．05）。病例组患者的等位基因频率（T，90．34％；A，9．66％）与对照组（T，97．22％；A，2．78％；χ2＝4．031， P＜0．05）相比也存在显著差异（ P＜0．05）。结论：RNF41基因SNP rs116861857位点多态性与中国蒙族先天性心脏病易感性相关。
作者：张圆；韩丽莎；胡海；张坤；王艳国；刘佳；牛长存 刊期： 2015年第10期
中国病理生理杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国病理生理学会
