学术投稿

应用原位PCR和原位杂交技术检测宫颈癌及癌前病变组织中HPV DNA

李西启;徐廷香;赵秀娥;王涛;王剑波;刘彦仿

关键词:宫颈肿瘤, 乳头瘤病毒, 人, 原位杂交, 原位PCR
摘要:人乳头瘤病毒(HPV)感染与宫颈癌的关系已获公认。仍有许多学者采用原位杂交(ISH),斑点杂交和PCR技术对其进行深入研究〔1,2〕。我们采用原位PCR和ISH技术对宫颈癌及宫颈上皮内瘤变(CIN)组织中的HPVDNA进行对比检测,探讨ISPCR技术检测石蜡切片中HPV DNA的敏感性。
临床与实验病理学杂志相关文献
  • Feulgen的染色标准化

    细胞DNA含量反映细胞生长及分化状态,其含量的测定对判断肿瘤性质、预后具有重要意义〔1~5〕。1987年Van Driel-Kulker首次提出显微镜下细胞核光密度测量判断细胞DNA含量的方法〔6〕,由于此项技术具有方法简便、测量准确、费用低、应用范围广等优点,国内外很多医院、实验室已经广泛开展,但同时也出现了许多问题,有些问题甚至可能会导致判断失误,对诊断治疗产生误导〔9〕。因此,有必要对目前广泛应用的计算机辅助的细胞DNA测量提出标准化工作规程及判断标准。作者就其中的一部分--Feulgen染色的标准化问题进行探讨。

    作者:吴波;周晓军 刊期: 2001年第01期

  • 乳腺癌多药耐药机制研究进展

    乳腺癌癌细胞表现多药耐药性(muhidrug resistance,MDR)往往是导致临床化疗失败的主要原因之一。MDR有两种不同的表型,一种是对第一次化疗就产生耐药,称天然性耐药(natural resistance)或称内源性耐药(intrinsic resis-tance);另一种是在化疗过程中产生耐药,故称获得性耐药(aquired resistance)。MDR的特点是一旦对某种化疗药物产生耐药,对其他结构上无关、作用靶点和机制不同的抗癌药物产生交叉耐药。目前研究认为,肿瘤产生MDR的分子机制主要有四个方面。(1)跨膜药泵基因的扩增或过表达。这类药泵以P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)P-gp/mdrl重要。近发现的一些分子如多药耐药相关蛋白(multidrug resistance-related protein,MRP)、肺耐药相关蛋白(the lung-resistance protein,LRP)、乳腺癌耐药蛋白(breast cancer resistance protein,BCRP)〔1〕也具有药泵功能,初都不表达P-gp又具有MDR表型的肿瘤细胞发现。这些分子与P-gp同属于ATP结合膜蛋白多基因家族[ATP-binding cassette(ABC)transporterfamily]〔1〕。需要注意的是它们的底物谱有明显不同。(2)细胞内一些蛋白酶的变化引起细胞解毒功能增强,如广泛分布的谷胱甘肽-S-转移酶π亚型(glutathioneStransferase-π,GST-π)过表达或活性增加。解毒功能的还有二氢叶酸还原酶、争光霉素水解酶、金属硫因(metallothioneine)等。(3)核酶DNA拓扑异构酶Ⅱ(topoisomeraseⅡ,TOPOⅡ)含量减少或性质改变,则可使许多以TOPOⅡ为靶点的抗肿瘤药物耐药。(4)其他因素,如一些癌基因的激活表达,蛋白激酶C活性增强等。

    作者:吕正梅;王保太;吴强 刊期: 2001年第01期

  • 改良Warthin-Starry染色技术的新用途

    我们用改良Warthin-Starry(W-S)染色方法检查一些病原体取得较好效果,现将我们的工作体会介绍给同行。1材料和方法 1.1材料实验材料均取自外检组织,包括梅毒螺旋体感染的皮肤粘膜组织、鼻硬结症之鼻腔粘膜,侵袭性霉菌病之上颌窦粘膜组织、胃炎粘膜组织及淋病炎性渗出物涂片。组织均经常规处理、石蜡包埋,每份切成数张6μm厚的切片备用。涂片常规固定1 min后漂洗吹干备用。

    作者:崔云;张盛忠;卢志达 刊期: 2001年第01期

  • 分泌型乳腺癌的临床病理特征

    目的:探讨乳腺分泌型癌的临床病理特征、诊断和鉴别诊断要点。方法:分析14例分泌型乳腺癌患者的临床病理资料,进行光镜观察,部分病例进行组织化学及免疫组化染色,并复习文献。结果:分泌型乳腺癌临床及病理大体观察与其他类型乳腺癌无明显区别,主要表现为乳房内肿块,多位于乳晕区,大体观察肿物大多边界不清、质地硬,光镜下肿瘤细胞主要排列成实性、小囊性和导管性三种结构,瘤细胞有颗粒性嗜酸性胞质,瘤细胞内外有大量均质嗜伊红PAS阳性分泌物。腋下淋巴结转移较少(2/14)。无局部复发或远处转移(随访3~14年)。结论:分泌型乳腺癌为罕见且预后较好的乳腺癌,确诊必须依靠病理检查。

    作者:郎荣刚;Nu Yun;牛昀;范宇 刊期: 2001年第01期

  • 间期FISH技术在病理蜡块组织中的应用

    自从DeKKen等〔1〕报道蜡块组织可用于间期荧光原位杂(FISH)检测以来,使利用存档标本进行研究已成为可能。本实验通过比较cyclinDl基因在鼻咽癌(NPC)活检组织及其相应的蜡块组织中的扩增情况,进一步证实间期FISH技术应用于NPC的蜡块组织的检测可行性。

    作者:黄贻学;方*;赵美卿 刊期: 2001年第01期

  • 术前经动脉灌注化疗对晚期乳腺癌细胞凋亡的影响

    目的:探讨术前动脉灌注化疗诱导乳腺癌细胞凋亡发生情况及其对患者预后的影响。方法:分别采用TUNEL法检测及电镜观察术前动脉灌注化疗40例和术前未化疗的42例晚期乳腺癌细胞凋亡发生情况,计算凋亡发生率及凋亡指数,并进行对比分析。结果:术前动脉灌注化疗组与术前未化疗组凋亡发生率分别为92.5%和78.5%,凋亡指数分别为19.37±6.49和9.26±5.04(P<0.01)。凋亡指数高低与局部晚期乳腺癌的无病生存率相关(P<0.01)。结论:局部晚期乳腺癌术前动脉灌注化疗可诱导乳腺癌细胞的凋亡,提高患者无病生存率。

    作者:欧阳永娥;郑锦阳;庄建良;许荣誉;陈文斌 刊期: 2001年第01期

  • 肺泡Ⅱ型TGFβ1和PDGF基因表达及其在肺纤维化中的意义

    目的:研究转化生长因子β1(TGFβ1)和血小板源性生长因子(PDGF)在肺泡Ⅱ型细胞中的表达及其在肺纤维化过程中的意义。方法:分离培养正常成年大鼠肺泡Ⅱ型细胞,建立大鼠矽肺模型,用原位杂交和免疫组化技术检测体外培养的和矽肺病变中的肺泡Ⅱ型细胞TGFβ1和PD)GF-B mRNA和蛋白的表达。结果:(1)体外培养的肺泡Ⅱ型细胞免疫组化染色TGFβ1强阳性,PDGF-B弱阳性;原位杂交TGβ1和PDGF-BmRNA均为阳性。(2)大鼠矽肺实验组增生的肺泡Ⅱ型细胞明显表达TGFβ1和PDGF-B mRNA和蛋白;对照组仅有部分正常肺泡Ⅱ型细胞TGFβ1 mRNA呈弱阳性。结论:增生的肺泡Ⅱ型细胞有TGFβ1和PDGF-B基因表达,其在矽肺纤维化病变中可能起重要作用。

    作者:曾庆富;赵勇;钱仲*;蒋海鹰 刊期: 2001年第01期

  • p21WAF1和PCNA在乳腺癌中的表达与预后的关系

    目的:探讨P21WAF1、PCNA蛋白表达与乳腺癌预后的关系。方法:以免疫组化S-P法检测152例乳腺癌组织p21WAF1和PCNA蛋白的表达水平。结果:在152例乳腺癌组织中P21WAF1蛋白阳性61例(40.1%),其中低表达43例(70.5%),高表达18例(29.5%);69例(45%)PCNA低指数表达,83例(55%)PCNA高指数表达;P21WAF1蛋白的表达与乳腺癌组织腺管形成(γs=0.341,P<0.01)、细胞核多型(γs=0.516,P<0.01)、核分裂象计数(γs=0.351,P<0.01)和组织学分级(ys=0.415,P<0.01)呈正相关;单因素预后分析显示P21WAF1蛋白高表达组生存期低于低表达组(x2=6.92,P<0.01),PCNA高指数表达组生存期短于低指数表达组(x2=5.14,P<0.05),p21WAF1-/PCNA低指数表达组,p21wAF1+/PCNA低指数组,p21WAF1+/PCNA高指数组和P21WAF1-/PCNA高指数组生存期依次减少(x2=γ2.07,P<0.01)。结论:(1)p21wAF1/PCNA的联合检测有利于更准确地判断细胞增殖活性和预后;(2)p21WAF1在乳腺癌中的不同表达水平可能与不同的调控方向有关。

    作者:肖宁新;黄仲宏;黄华振;蒋志坚 刊期: 2001年第01期

  • 浸润性乳腺癌的细胞学分级:与临床病理指标的关系及其预测淋巴结转移的价值

    由于辅助治疗越来越多地成为乳腺癌的初治疗方法,术前的细针穿刺细胞学(FNAC)对乳腺癌进行分级就倍受关注了。该文提出了一种基于FNAC的浸润性导管癌的半定量分级系统,并与已知的预后因子进行了比较。 104例术前乳腺癌细针穿刺细胞学涂片档案材料均经术后组织病理学证实,涂片经常规巴氏染色观察。半定量打分系统由以下7项参数组成:坏死、细胞大小、核质比例、核异型性、核仁、染色质颗粒及染色质密度。1、坏死:无(0分)、有(1分)。2、细胞大小:<3个红细胞(1)、3~4个红细胞(2)、>4个红细胞(3)。3、核质比例:<50%(1)、50%~80%(2)、>80%(3)。4、核异型性:一致(1)、轻度异型(2)、明显异型(3)。5、核仁:不明显(1)、可见(2)、明显或多形(3)。6、染色质颗粒:细(1)、中等粗细(2)、粗(3)。7、染色质密度:无染色质增多(1)、染色质中度增多(2)、染色质明显增多(3)。将每一病例的7项参数分数相加,总分6~9分为Ⅰ级,10~11分为Ⅱ级,12~19分为Ⅲ级。 结果:104例浸润性导管癌中细胞学Ⅰ级32例(31.7%)、Ⅱ级39例(37.5%)、Ⅲ级33例(31.8%),与组织学分级呈正相关,与雌激素受体表达呈负相关,还与癌细胞增殖指数及淋巴结转移有关。但细胞学分级与肿瘤大小及患者年龄无关。因此,细胞学分级能在术前估测组织学分级、细胞增殖活性及淋巴结转移,无论从病理学角度还是从临床来判断肿瘤生物学行为均有意义。 (安徽医科大学病理学教研室吴强摘译)

    作者: 刊期: 2001年第01期

  • 乳腺粘膜相关型淋巴瘤临床病理观察

    目的:探讨乳腺粘膜相关型淋巴瘤(MALT-ML)的病理特征。方法:对4例乳腺MALT-ML的手术根治及(或)活检标本做常规石蜡切片、HE染色和免疫组化ABC法标记。结果:4例乳腺MALT-ML中2例为CCL细胞型,1例为CCL细胞型向母细胞样转化,另1例为单核样B细胞型。4例均显示B细胞单克隆性及滤泡克隆化和淋巴上皮病变。结论:乳腺MALT-ML有与其他部位MALT-ML相似的形态特征。

    作者:高萍宇;张智弘;徐天蓉 刊期: 2001年第01期

  • 氧化剂的量对苏木精染液质量的影响

    苏木精氧化成熟的方法有两种,一种是自然氧化,另一种是人工氧化。在人工氧化过程中,氧化剂量的选择和控制显得相当重要。笔者通过实验发现,氧化剂的量的多少对苏木精染液的质量有一定的影响。

    作者:骆新兰;林秋雄;蔡秀玲 刊期: 2001年第01期

  • 原发性甲状腺纤维肉瘤1例

    患者男,38岁,因左颈部迅速增大包块1月入院。查体:左颈部可见一15 cm×11cm×9 cm大小肿块,不易活动,表面不平,质硬。CT及彩超均提示甲状腺占位性病变。入院后行颈部包块切除术。

    作者:马树恒;赵红艳 刊期: 2001年第01期

  • 应用原位PCR和原位杂交技术检测宫颈癌及癌前病变组织中HPV DNA

    人乳头瘤病毒(HPV)感染与宫颈癌的关系已获公认。仍有许多学者采用原位杂交(ISH),斑点杂交和PCR技术对其进行深入研究〔1,2〕。我们采用原位PCR和ISH技术对宫颈癌及宫颈上皮内瘤变(CIN)组织中的HPVDNA进行对比检测,探讨ISPCR技术检测石蜡切片中HPV DNA的敏感性。

    作者:李西启;徐廷香;赵秀娥;王涛;王剑波;刘彦仿 刊期: 2001年第01期

  • 伴骨骼肌分化的小细胞神经内分泌癌--附3例报道

    向骨骼肌方向分化是一种十分少见的现象但却普遍存在于人类多种肿瘤中。作者观察了3例含有横纹肌母细胞成分的神经内分泌癌的病理特征。 3例中男性2例,分别为77岁和75岁,发生于臀部皮下组织和膀胱;女性1例,70岁,发生于左侧鼻腔内。瘤体小者为3.5 Cm皮下结节大者充满膀胱腔并侵犯周围软组织,边界不清。3例均经广泛手术切除,1例行术后放疗,1例行辅助化疗。除1例女性失访外,2例男性分别在术后2周和肿瘤初发后11个月死于肿瘤的广泛侵袭和转移。

    作者: 刊期: 2001年第01期

  • 乳腺原发性印戒细胞癌

    目的:观察乳腺原发性印戒细胞癌的形态特征。方法:通过HE及AB/PAS染色,对4例乳腺原发性印戒细胞癌进行观察。结果:4例癌细胞内印戒细胞均超过20%。HE染色呈典型印戒样细胞,AB/PAS染色胞质内阳性。导管内型及小叶型各1例,浸润性导管型及小叶型各1例。结论:乳腺原发性印戒细胞癌是一种特殊型癌,诊断时应排除转移性印戒细胞癌。

    作者:龚西* 刊期: 2001年第01期

  • 乳腺浸润性组织细胞样癌1例

    患者女,65岁,因发现左乳无痛性包块6个月伴同侧腋下淋巴结肿大入院。查体:左乳房外上象限距乳头5 cm处可触及一包块,活动差,有深压痛。包块处乳腺皮肤呈桔皮样外观,约6 cm×5 cm,累及乳头边缘。同侧腋下可触及多枚肿大淋巴结。实验室检查:未发现异常。消化道钡餐透示未发现异常。临床诊断:左乳癌。遂行左乳癌根治术。

    作者:刘旭伟;焦惠贤 刊期: 2001年第01期

  • 多囊性肾透明细胞癌的病理学诊断

    目的:探讨多囊性肾透明细胞癌的临床病理特点。方法:对1例多囊性肾透明细胞癌进行了免疫组化染色,并进行文献复习。结果:本例右肾肿物18年。大体见肿物由多发不等的囊腔组成。镜下囊内壁主要由单层立方或柱状上皮被覆,部分为多层并有乳头形成。瘤细胞胞质透亮,无明显异型性。癌细胞免疫表型cytokeratin、CEA和vimentin呈阳性表达。本例诊断为多囊性肾透明细胞癌。结论:多囊性肾透明细胞癌是一种罕见的肾癌病理类型。临床上主要采用根治切除术。本瘤的生物学行为属于低度恶性肿瘤。

    作者:韩安家;熊敏;顾莹莹 刊期: 2001年第01期

  • 乙醇诱导肝细胞凋亡与酒精性肝病

    长期大量饮酒对机体多种器官具有毒害作用,其中尤以对肝脏的损伤为严重。乙醇具有很强的细胞毒作用。以往许多研究结果显示,乙醇能够诱导T细胞、NK细胞、巨噬细胞、神经细胞、胃粘膜和颊粘膜细胞、唾液腺细胞、成骨细胞、甲状腺上皮细胞和白血病细胞等多种细胞发生凋亡〔1〕。虽然也有报道认为乙醇并不能诱导星型神经胶质细胞等某些细胞凋亡,而是直接导致其发生坏死〔2〕,但是越来越多的报道表明,乙醇是肝细胞的一种凋亡诱导剂。近年来发现肝细胞凋亡在酒精性肝病(alcoholic liver disease,ALD)的发生和发展过程中具有重要的作用。肝细胞凋亡与ALD的关系是目前ALD研究中的一个热点。

    作者:杨连君;王文亮 刊期: 2001年第01期

  • 遗传性非息肉病性结直肠癌的分子生物学研究

    目的:探索遗传性非息肉病性结直肠癌(HNPCC)基因突变规律。方法:用聚合酶链式反应和PCR-SSCP对9例HNPCC患者及其家系成员以及4例正常对照的hMSH2、hMLH1基因进行检测。结果:9例来自不同家族的患者中,7例出现电泳条带异常;4例来自上述家系的无症状成员,其中2例出现电泳条带异常。结论:聚合酶链式反应和PCR-SSCP联合应用,可用于hMSH2、hMLH1基因突变的检测。

    作者:刘硕;宫恩聪 刊期: 2001年第01期

  • 印戒细胞淋巴瘤1例

    患者女,65岁。全身浅表淋巴结肿大半年。出现咳嗽等症状近2个月,并自觉全身乏力。查体:慢性病容,双侧颈部、腋窝、腹股沟浅表淋巴结如黄豆至鸽蛋样肿大,无压痛,活动度差,质韧。B超示:脾肋下斜径15.2 cm,肋间厚度5.4 cm,肝正常大小。经抗炎治疗无效,遂行颈淋巴结活检,同时血清学检查,免疫球蛋白定量:IgG 19.30 g/L,IgA 6.73g/L,IgM 10.30 g/L,Kappa 21.20 g/L,Lambada 9.04g/L。

    作者:钱建忠;徐洪明;汪娟 刊期: 2001年第01期

临床与实验病理学杂志

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主管:

主办:安徽医科大学;中华医学会安徽分会