陈亚兰;郑伟鹏;王梓茗;钱楚芸;蔡铭升;李美丽
目的 应用BED-CEIA技术检测哨点血清,掌握江西省2011年-2013年重点人群人类免疫缺陷病毒Ⅰ型新发感染率.方法 收集全省2011年-2013年HIV哨点监测8个重点人群共131 562份血样,其中252份样本经免疫印迹法确证检测为阳性结果,该免疫印迹阳性血样应用BED-CEIA技术检测样本以区分新发感染与既往感染,利用公式I=[F×(365/W)×R]/[N+F×(365/W) ×R/2] ×100%估算该人群的HIV-1新发感染率.结果 2011年-2013年HIV哨点监测重点人群总体HIV-1感染率分别为:0.21%,0.23%,0.14%.新发感染主要发生在男男性行为人群(MSM),其新发感染率为高,2011年新发感染率为4.77%(1.46% ~ 8.07%),2012年为5.33%(2.63% ~8.03%),2013年为1.87%(0.49%~3.26%),其他人群均较低.结论 江西省男男性行为人群相对于其他人群的HIV-1新发感染率较高,该人群艾滋病流行形势相对严峻,应重新评估目前的干预策略,加大对该人群的干预力度.
作者:唐翼龙;易志强;廖清华;刘丽萍;靳廷丽;张娜 刊期: 2014年第23期
目的 建立亲水作用色谱快速测定茶氨酸含量的方法,并应用于茶叶中茶氨酸的测定,为茶叶中茶氨酸的质量控制提供方法参考.方法 茶叶样品粉碎混匀后,经水溶液加热提取过滤后,上清液采用Phenomenex Luna NH2(250 mm×4.6 mm,5μm)亲水色谱柱分离,以乙腈∶水=70∶30为流动相洗脱,流速1.0 ml/min,柱温25℃,紫外检测波长为203 nm.根据保留时间定性,外标峰面积法定量.结果 茶氨酸的浓度与峰面积呈良好的线性相关性,相关系数r=0.9999,方法检测限为0.12 μg/ml,相对标准偏差RSD为0.46%(n=9);2个浓度水平的样品加标回收率在94%~ 104%之间.结论 本方法克服了传统反相液相色谱测定中使用离子对和衍生等方法的缺点,具有分离效果好、快速简易、平衡时间短、精密度和准确性高的特点,可用于茶叶中茶氨酸的质量控制方法.
作者:孙丽华;江月仙;鲁健章;郑秋岚;王茵 刊期: 2014年第23期
目的 了解元江县人群麻疹抗体水平状况,为控制和制订消除麻疹策略提供科学依据.方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对361人检测麻疹IgG抗体.结果 麻疹抗体阳性率为96.95%,抗体平均浓度(GMC)为3 078.04 mIU/ml.不同性别人群麻疹抗体阳性率差异无统计学意义(X2=0.7,P>0.05);不同地区人群麻疹抗体阳性率及GMC差异有统计学意义(X2=10.5,P<0.05,F=15.284,P<0.05);不同年龄组麻疹抗体阳性率及GMC差异有统计学意义(X2 =36.3,P<0.05,F=2.469,P<0.05).结论 元江县健康人群麻疹抗体水平较高,虽能形成有效的免疫屏障,但应提高8月龄儿童首针接种及时率.
作者:周燕华;端海涛;潘海燕;张玫;王启英;李勇三 刊期: 2014年第23期
目的 建立固相萃取-高效液相色谱法测定食品中2-(4-甲氧基苯氧基)-丙酸钠的分析方法.方法 样品采用氨水溶液(1∶9,V/V)溶解后固相萃取净化,在Kromasil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm×5μm)上,以甲醇/磷酸溶液(1∶1,V/V,pH =3.0)为流动相进行分离,紫外224 nm波长检测,外标法定量.结果 2-(4-甲氧基苯氧基)-丙酸钠在0.50 mg/L~ 50.0 mg/L范围内具有良好的线性关系(相关系数r=0.9995),回收率为87.4% ~ 99.0%,RSD<5.0%,定量检出限为1.0 mg/kg.结论 该方法具有前处理简单、重现性好的优点,能满足实际工作的需要.
作者:马建明;龚文杰;邬晨阳;徐毅 刊期: 2014年第23期
目的 利用MS-HRM技术建立Syk(L)基因启动子甲基化定量检测的方法,并探讨其甲基化程度与喉鳞癌临床病理参数的相关性.方法 提取48份喉鳞癌组织及20份癌旁正常喉黏膜组织DNA并进行甲基化修饰.用MS-HRM技术定量检测Syk(L)基因启动子甲基化水平,并分析评价其与喉鳞癌临床病理参数的相关性.结果 MS-HRM检测Syk(L)基因启动子甲基化结果为20份癌旁正常喉黏膜组织均位于0%区域;喉鳞癌组织中6份位于0%区域,8份位于0% ~ 30%区域,20份位于30%~70%区域,14份位于70%~100%区域.Syk(L)基因启动子甲基化水平与喉鳞癌临床分型差异无统计学意义(P>0.05),但与临床T分期、病理组织学分级、颈淋巴结转移差异有统计学意义(P<0.05),且Syk(L)甲基化水平随临床T分期及病理组织学分级增高而增高.结论 MS-HRM定量检测Syk(L)基因启动子甲基化有望成为喉鳞癌进展评估分子指标检测的有效手段.
作者:李志海;蔡志毅;金巧智;陈武兵;黄栋栋 刊期: 2014年第23期
目的 研究衢州地区708例宫颈病变女性感染各亚型人乳头状瘤病毒(HPV)的概率,探讨单一感染、双重感染、多重复合感染等感染机会分布情况.方法 采用PCR体外扩增和DNA反向点杂交相结合的DNA芯片技术检测宫颈脱落细胞HPV亚型,按不同分组统计分析708例宫颈病变女性感染不同亚型人乳头状瘤病毒(HPV)的机会.结果 708例感染标本检出各亚型阳性点数为1 001次,单一亚型感染占71.13%,双重感染占24.18%以及多重复合占4.70%,其中不同亚型在各感染机会中占所有阳性点位的比例为:高危型分别占49.05%、18.88%、4.00%,低危型分别占22.08%、5.29%、0.70%.高危型和低危型HPV感染机会的差异具有统计学意义.各种感染机会在不同年龄段分布比例不同,31岁~40岁年龄段单一亚型感染比例高(47.60%),比例差异均有统计学意义(X2=256.29,P<0.005).结论 HPV感染机会具有明显的亚型和年龄分布异质性,混合感染比例不容忽视,提示使用HPV预防性疫苗应同时考虑各亚型的感染机会和年龄因素.
作者:朱庆文;杨红斌;余晓 刊期: 2014年第23期
目的 分析2013年江西省甲型H1N1流感病毒神经氨酸酶(NA)基因第275位氨基酸变异情况,掌握甲型H1N1流感病毒耐药特性,为甲型H1N1流感临床治疗和疾病控制提供参考.方法 收集江西省流感监测哨点医院采集的流感样病例的鼻咽拭子标本,采用狗肾传代细胞(MDCK)对标本进行病毒分离,对分离的31株新型甲型H1N1流感病毒进行核酸提取,采用一步法逆转录-聚合酶链反应(One-step RT-PCR)扩增病毒M基因部分片段,采用限制性内切酶片段长度多态性分析(RFLP)方法,分析扩增的部分NA基因第275位是否发生组氨酸(H)到酪氨酸(Y)的突变.结果 2013年江西省31株甲型H1 N1流感病毒NA基因第275位氨基酸均为组氨酸,未发生变异.结论 2013年31株毒株均对Osehamivir敏感,One-step RT-PCR-RFLP方法筛查新型甲型H1N1流感病毒Osehamivir耐药株简便可行.
作者:熊英;施勇;李健雄;龚甜;周珺;徐刚 刊期: 2014年第23期
目的 探讨胃幽门螺杆菌(Hp)感染情况诊断中快速尿素酶试验(RUT)检测应用的价值.方法 从本院消化内科2010年5月-2013年5月收治的住院患者中,随机选择100例进行研究,分为2组,分别予以快速尿素酶试验检测和14C尿素呼气试验(14C-UBT)检查.观察记录2组的检查结果,并进行比较.结果 经统计,100例患者中,经RUT检测Hp阳性率为86.0%,同时经14C-UBT检测Hp阳性率为60.0%.2种方法的阳性检出情况比较差异有统计学意义(X2=8.57,P<0.05,).2组在消化性溃疡和慢性胃炎、十二指肠炎阳性检出率方面差异均有统计学意义(X2=19.82,x2=21.25,均P<0.05);但在急性糜烂出血性胃炎和胃食管反流病,以及胃癌和胃息肉的阳性检出率方面差异均无统计学意义(X2=2.72,X2 =5.13,X2=5.28,X2 =4.11,均P>0.05).结论 快速尿素酶试验用于检测胃幽门螺杆菌感染情况具有较高的应用价值,且操作简单,值得临床大力推广应用.
作者:王翔军;任永强;王新花 刊期: 2014年第23期
目的 了解袋泡茶剂保健食品铅和砷的浸出率,并初步估计人群摄入量,评估其安全性.方法 将来自于商场、超市、药店等不同销售场所及厂家送检的25种袋泡茶剂,按照产品标识规定的食用方法,取1袋固体原样用80℃去离子水分2次浸提,每次80 ml浸提30 min,合并浸出液.按照GB5009.12-2010、GB/T5009.11-2003检测袋泡茶剂及其浸提液中铅和砷含量,用产品中铅、砷含量与产品标识的食用量和浸出率相乘计算铅和砷的摄入量.采用联合国粮农组织和世界卫生组织保健食品添加剂联合专家委员会推荐的,暂定每周耐受摄入量(PTWI)值评价铅摄入的安全性.结果 袋泡茶剂保健食品铅的浸出率为1.82% ~ 42.94%,平均值为11.18%;砷为6.91%~68.95%,平均值为32.41%.茶液铅对于PTWI平均贡献率为0.43%,砷为0.87%.结论 食用袋泡茶型保健食品中铅、砷的摄入量不会对人体造成危害.
作者:李春雨;赵耀;张炎;孙鑫贵;沙博郁;王正 刊期: 2014年第23期
目的 建立果蔬中多效唑的高效液相色谱(HPLC)快速检测方法.方法 对果蔬样品中的多效唑用乙腈提取,浓缩后用甲醇复溶,经QuEChERS试剂盒净化后用HPLC检测;以甲醇与水(65:35,wV)为流动相,ACCHROM UnitaryC18柱(150 mm ×4.6 mm,5μm)分离,二极管阵列检测器在222 nm波长处检测,外标法定量.结果 多效唑在0.40 μg/ml~20 μg/ml浓度范围内线性关系良好,相关系数r=0.9999;在0.08 mg/kg、0.20 mg/kg、0.50 mg/kg 3个浓度添加水平下,豆芽和草莓样本中的平均回收率分别为76.6%~ 84.5%和83.2%~ 89.2%,相对标准偏差(RSD)均≤4.95%;方法检出限为0.02 mg/kg,定量限为0.08 mg/kg.结论 利用QuEChERS试剂盒可以对果蔬样本进行有效净化,结合HPLC法可以满足果蔬中多效唑残留检测要求.该方法简便、快速、准确.
作者:谭莹;倪竹南;汤鋆;朱坚磐;姜维;王志园 刊期: 2014年第23期
目的 建立液液萃取毛细管柱气相色谱法同时测定生活饮用水中百菌清、溴氰菊酯、六氯苯等12种农药残留.方法 采用外标法定量,样品用正己烷萃取后浓缩,经HP-5毛细管色谱柱分离,电子捕获检测器检测,进样口温度为250℃,检测器温度为320℃,起始色谱柱温度为90℃(保持1 min),以30℃/min升至170℃(保持1min),再以8℃/min升至230℃,以2℃/min升至250℃,以3℃/min升至270℃(保持5 min),以5℃/min升至280℃(保持2 min).结果 12种目标化合物在0.01 μg/ml~0.4μg/ml浓度范围内线性关系良好,线性相关系数为0.9918~0.9995,方法的检出限为0.002μg/L~0.07 μg/L,低浓度和高浓度加标回收率分别为77.5%~ 93.8%及98.4%~113.4%,相对标准偏差(RSD,n=10)为6.9% ~8.4%.结论 液液萃取气相色谱法简便、灵敏、准确、稳定,能同时分析水样中多种痕量有机农药,满足了生活饮用水中农药残留检测需要.
作者:徐虹;曹文婷;易承学;宋寅生;和佳鸳 刊期: 2014年第23期
目的 目前聚氨酯(PU)合成革的生产采用溶剂型的生产系统为主,随着环保法规和人们环保意识的加强,水性PU合成革技术成为该领域的研究热点.了解2种不同性质PU树脂对作业场所空气质量影响,掌握涉及二甲基甲酰胺(DMF)企业的职业危害程度,为提出有效的防护建议提供科学依据.方法 对作业场所空气中DMF浓度进行监测比较.结果 10家企业总的合格率接近60.4%,其中水性PU树脂合格率为88.3%,溶剂型PU树脂合格率为32.5%.说明作业场所空气中DMF超标严重,以湿法涂台尤甚.结论 水性PU树脂的技术要求与工艺流程比较高,价格也比溶剂型PU树脂贵30%,建议加强工艺改革,降低成本,大限度地使用水性PU树脂替代溶剂型PU树脂.
作者:丁云龙;雷永良;应国祥;付艳岚 刊期: 2014年第23期
目的 建立保健食品中α--硫辛酸的测定方法.方法 采用高效液相色谱法(HPLC),样品用流动相超声提取20 min,色谱柱:ODS-2HYPERSIL(4.60 mm×250 mm,5μm);流动相:0.125%(磷酸氢二钾+磷酸二氢钾,用磷酸调pH=3.5)+甲醇=35 +65(V/V);流量:1.0 ml/min,检测波长:215 nm.结果 硫辛酸在40 ng~4 000 ng范围内呈现良好的线性关系,相关系数为0.999997,检出限为2 ng,精密度试验RSD为0.53%(n=6);当样品添加浓度为5.33 g/100 g~22.7 g/100 g时,回收率为98.1% ~ 102%.结论 该方法操作简便、快速、可靠、重现性好,有效排除了杂质的干扰,可作为保健食品中α-硫辛酸的质量控制监测手段.
作者:甘宾宾;刘培杰;曾永芳 刊期: 2014年第23期
目的 为了加强麻疹病毒基因型的监测,2013年北京市开展了麻疹病毒的核酸检测.方法 采用荧光PCR方法进行病毒核酸鉴定,然后对于核酸阳性标本进行RT-PCR(Reverse Transcription PCR,RT-PCR)扩增,扩增产物进行测序及序列比对分析.结果 2013年北京市西城区共采集麻疹疑似病例为41例,获得RT-PCR产物21例,经过序列分析比对,有16例为H1基因型.本研究获得的16例H1基因型的麻疹病毒基因片段序列与世界卫生组织H基因型代表株MVi/Hunan.CHN/0.93/7/H1,在基因亲缘性关系树上同属一个分支,核苷酸同源性为97.1%~ 97.6%,氨基酸同源性为95.3% ~ 98.0%.结论 2013年北京市麻疹病例明显增多,以本土基因型病例为主,进一步加强麻疹病例控制和预防,对于实现消除麻疹的计划具有重要意义.
作者:张晶波;崔京辉;王永全;李爱华;陈维新;陈萌 刊期: 2014年第23期
目的 探讨高尔基体蛋白73(GP73)与RASSF1A基因启动子区甲基化对原发性肝癌(HCC)的诊断价值.方法 选择2012年8月-2014年2月在浙江省宁波市第六医院住院的80例肝癌患者、40例肝硬化、30例健康体检者,采用酶联免疫法(ELISA)检测血清中GP73含量,甲基化特异性PCR(methylation specific PCR,MSP)检测血清中RASSF1A基因启动子区甲基化情况,ROC曲线分析GP73对HCC的佳诊断点,并对单一及组合(GP73+ RASSF1A)方式的敏感度、特异度进行比较.结果 肝癌组、肝硬化组、健康体检组血清GP73平均浓度为278.3 μg/L、187.3 μg/L、46.8 μg/L(F =6.85,P<0.05);RASSF1A基因甲基化检出率分别为65%(52/80)、20%(8/40)、3.3% (1/30)(x2=44.1,P<0.05);GP73诊断肝癌的ROC曲线下面积为0.852,P<0.05,取GP73为122.02 ug/L为佳诊断分界点;GP73诊断HCC的灵敏度高于RASSF1A基因甲基化,GP73诊断HCC的特异度低于RASSF1A基因甲基化,GP73与RASSF1A基因甲基化并联诊断HCC的敏感度与单项GP73相比,差异具有统计学意义(X2=4.12,P<0.05),两项指标并联诊断HCC的特异度与单项RASSF1A甲基化比较,差异无统计学意义(X2=0.31,P>0.05).结论 GP73并联RASSF1A基因甲基化检测对诊断HCC的敏感度较高,具有一定的筛查能力.
作者:李宇宁;汪永强 刊期: 2014年第23期
目的 为了初步了解宁波地区复治肺结核患者对4种一线抗结核药物的耐药状况及相关危险因素,并为完善本地区结核病防控策略提供相应的科学依据.方法 采用WHO/IUATLD推荐的1%药敏比例法,对332株临床分离的复治患者结核分枝杆菌进行异烟肼(INH)、利福平(RFP)、链霉素(SM)及乙胺丁醇(EMB)4种药物的耐药性测定,运用单因素及多因素logistic回归分析复治病例耐药的相关因素.结果 纳入的复治肺结核患者总耐药率、耐多药率分别为57.2%和36.1%.耐药谱以耐异烟肼为高.户籍情况是复治肺结核患者耐药的影响因素.结论 宁波地区复治肺结核患者一线抗结核药物的耐药趋势依然严峻,需进一步加强复治肺结核患者的防控工作.
作者:车洋;于梅;许国章;平国华 刊期: 2014年第23期
目的 探讨病毒癌基因HPV E6/E7联合液基薄层细胞(TCT)在宫颈病变诊断中的应用价值.方法 将2 085例患者同时进行HPV E6/E7 mRNA及TCT检测,TCT异常者再进行阴道镜下活检,以病理组织学诊断为金标准,并分析其结果.结果 TCT检测异常者171例,检出率为8.2%,且随着宫颈病变程度增加,HPV E6/E7 mRNA拷贝数也升高,按TBS报告系统分组,每相邻2组间差异有统计学意义(P<0.05).TCT(+)且HPV E6/E7 mRNA(-)组45例,病理阳性31例,符合率为68.9%;TCT(+)且HPV E6/E7 mRNA(+)组126例,病理检查结果阳性115例,阳性符合率为91.3%,2组的病理阳性符合率差异有统计学意义(P<0.01).结论 HPV E6/E7 mRNA联合TCT检测与病理检查的阳性符合率明显高于单纯TCT检测的阳性率,从而大大提高了宫颈癌前病变和宫颈癌的检出率,并更能直观反映病毒癌基因的表达活性.因此,HPV E6/E7 mRNA检测可作为高危型HPV感染的妇女进行风险评估、宫颈癌筛查及宫颈癌术后病情观察,具有重要的临床应用价值.
作者:应香岚;赵湘婉;吴晨曦;文小凤;王玲玲 刊期: 2014年第23期
目的 建立香菇中二硫代氨基甲酸盐类(DTCs)农药残留量的测定方法.方法 采用L-半胱氨酸盐酸盐和EDTA-N%混合液进行提出,0.05 mol/L碘甲烷-氯仿-正己烷溶液萃取、衍生、浓缩,氨基小柱净化,C18柱分离,高效液相色谱-紫外检测器检测.结果 3类DTCs农药线性范围为0.25 mg/L~5.0 mg/L,相关系数r>0.998,方法检出限和低检出浓度分别为:福美类(DMDs) 0.02 mg/L、0.015 mg/kg,代森类(EBDs) 0.04 mg/L、0.03 mg/kg,丙森类(PBDs)0.08 mg/L、0.06 mg/kg,平均加标回收率为77% ~98%,相对标准偏差为2.2%~9.6%.结论 本方法对3类DTCs农药衍生物分离效果好,选择性强,不易产生假阳性,测定结果准确可靠,能满足对该类农药残留限量(MRLs)的检测要求.
作者:贺东霞 刊期: 2014年第23期
目的 进行蚕丝-PLGA复合网状支架的力学强度检测及其与骨髓间充质干细胞的体外共培养.方法 采用纬编针织法制备蚕丝丝素-PLGA纤维复合网状支架,并进行力学强度测试.在网状支架上滴加Ⅰ型胶原并冷冻干燥,再用纤维连接蛋白表面修饰后,种植兔骨髓间充质干细胞进行体外共培养,观察细胞与支架复合生长情况.结果 蚕丝-PLGA网状支架宽约5 mm.支架的大载荷、抗拉强度、断点伸长率、弹性模量分别为(118.32±11.21)N、(52.90±5.03) MPa、49.79%±5.16%、(177.25±19.18) MPa.支架-MSCs复合物培养2 d的扫描电镜观察显示:MSCs细胞黏附于支架表面呈立体状生长,细胞呈梭形,增殖良好,并分泌基质.结论 蚕丝-PLGA复合网状支架具有良好的力学性能与细胞相容性,是一种较有潜力的组织工程韧带的支架材料.
作者:张科技;张文元;杨亚冬;李颖;房国坚 刊期: 2014年第23期
临床微生物检验是一门重要的检验专业课程,其内容涵盖广泛,包括细菌、病毒、支原体、衣原体、螺旋体、真菌等;涉及技术繁多,囊括分子生物学技术、免疫学技术、生化技术、光镜及电镜技术等;研究范畴全面,既有微生物的生物学性状,又有微生物的耐药机制,还涉及部分基因工程内容[1].鉴于本学科特点,单纯依靠理论讲授难以保证学习效果.为此,各医学院校均对学生设置了专业实习教学.
作者:郭小兵;马俊芬;刘红春;张世杰;沈燕;明亮 刊期: 2014年第23期