学术投稿

抑癌基因APC启动子甲基化检测及其在肺癌诊断中的应用

潘世扬;张寄南;魏源华;姚孝明;黄珮珺;戎国栋;王宏

关键词:APC基因, 抑癌基因, DNA甲基化, 非小细胞肺癌
摘要:目的建立抑癌基因APC启动子部位甲基化的检测方法,并对肺癌临床样品进行初步检测研究.方法:对肺癌组织提取的DNA及转甲基后的脐带血DNA进行化学修饰,以甲基化特异性引物进行基因扩增(methylation specific PCR,MSP)和甲基化序列分析(methlation sequencing,MS).结果:经转甲基的人脐带血DNA样品MSP检测为阳性,其序列与预期相符,未经转甲基样品为阴性.17例肺癌患者的肿瘤及其正常肺组织APC甲基化检测阳性率分别为47%(8/17)和18%(3/17),1例肺部良性肿瘤及其正常肺组织的检测结果均为阴性;对MSP检测为阴性的9例肺癌患者肿瘤及其正常肺组织进行MS检测分析,有4例APC启动子部位存在CpG甲基化.结论:利用MSP和MS两种甲基化检测分析手段,对17例临床确诊肺癌组织的检测总阳性率可达71%(12/17).MSP操作简便,价格低廉,可适合于大规模肿瘤患者样本的筛查;而对于MSP检测为阴性的临床样品,可以利用MS进行进一步的确认,为临床肺癌诊断提供更准确的信息.
临床检验杂志相关文献
  • 抑癌基因APC启动子甲基化检测及其在肺癌诊断中的应用

    目的建立抑癌基因APC启动子部位甲基化的检测方法,并对肺癌临床样品进行初步检测研究.方法:对肺癌组织提取的DNA及转甲基后的脐带血DNA进行化学修饰,以甲基化特异性引物进行基因扩增(methylation specific PCR,MSP)和甲基化序列分析(methlation sequencing,MS).结果:经转甲基的人脐带血DNA样品MSP检测为阳性,其序列与预期相符,未经转甲基样品为阴性.17例肺癌患者的肿瘤及其正常肺组织APC甲基化检测阳性率分别为47%(8/17)和18%(3/17),1例肺部良性肿瘤及其正常肺组织的检测结果均为阴性;对MSP检测为阴性的9例肺癌患者肿瘤及其正常肺组织进行MS检测分析,有4例APC启动子部位存在CpG甲基化.结论:利用MSP和MS两种甲基化检测分析手段,对17例临床确诊肺癌组织的检测总阳性率可达71%(12/17).MSP操作简便,价格低廉,可适合于大规模肿瘤患者样本的筛查;而对于MSP检测为阴性的临床样品,可以利用MS进行进一步的确认,为临床肺癌诊断提供更准确的信息.

    作者:潘世扬;张寄南;魏源华;姚孝明;黄珮珺;戎国栋;王宏 刊期: 2004年第06期

  • 63例急性白血病细胞形态学与免疫学分型

    急性白血病(AL)由于细胞起源不同,构成了白血病的异质性,因此正确分型是准确及时治疗的前提.以细胞形态学和细胞化学染色为基础的FAB分型在临床上广泛应用,但亦有其局限性.近年来免疫学分型逐步应用,使急性白血病分型准确率明显提高.免疫学分型是对形态学的补充.现将63例急性白血病形态学与免疫学分型分析如下.

    作者:刘晓红;孙培玉;刘桂娟;关向宏 刊期: 2004年第06期

  • 抗-HIV抗体检测时出现拖带污染分析

    我们在抗-HIV抗体检测工作中遇到2份抗-HIV抗体强阳性血清,污染了邻近标本,造成假阳性.有关情况报道如下.

    作者:柯苑;马成平;赵静 刊期: 2004年第06期

  • 常州市产妇乙肝、丙肝、梅毒和艾滋病等4种传染性疾病感染趋势的调查分析

    随着人们生活水平的不断提高,人们对健康的关注程度也愈来愈高.为此,我们对常州市16 873名产妇进行乙肝、丙肝、梅毒和艾滋病的血清标志物进行检测,以了解四种传染性疾病的感染情况,结果报告如下.

    作者:张一鸣;张铭;史文中;刘勇;承晓京;宋海英;潘慧筠;魏梓文;傅云峰 刊期: 2004年第06期

  • 缺血修饰性白蛋白--一种新的心肌缺血标志物

    近年来,各种心肌损伤标志物如心肌肌钙蛋白(cTn)、肌红蛋白(Mb)和肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)等广泛用于临床,辅助医生明确急性冠脉综合征(ACS)的诊断.但这些标志物只有在心肌坏死后血中浓度才升高,如何对急性胸痛患者进行早期诊断仍是临床关注的问题.心肌缺血标志物能在ACS早期可逆阶段检出,有助于对急性缺血患者进行正确诊断和及时治疗.

    作者:李志艳;徐国宾;夏铁安 刊期: 2004年第06期

  • 6577例输血前和手术前患者HBV、HCV、HIV、梅毒抗体检测结果的分析

    为了减少和避免医院感染和医疗纠纷的发生,我院对输血前和手术前患者进行HBVM,抗HCV抗体,抗HIV抗体,梅毒抗体的检测.现将6 577例检测结果报告如下.

    作者:马蔡昀;文怡;曾慧敏;蒋理 刊期: 2004年第06期

  • 地高辛标记引物酶显色法检测HBV基因多态性及应用

    目的建立地高辛标记引物酶显色法,用于DNA芯片检测HBV基因多态性,并对实验条件进行优化.方法用地高辛标记引物进行HBV DNA前C/C区和P区双重PCR,制备含地高辛标记的DNA样品目的片段,并将目的片段杂交于含HBVDNA核苷酸序列野生型及突变型探针的DNA芯片上,用抗地高辛抗体-碱性磷酸酶进行显色,并转印于尼龙膜上,后用光学扫描仪读取结果.结果通过一次杂交反应同时获取HBV DNA前C/C区(1 896、1 814)、BCP区(1 762、1 764)和P区(552)位点的信息.杂交温度与时间为42℃1 h、酶作用和显色时间分别为30 min和45 min时结果较理想,采用高盐浓度洗涤获满意杂交信号,批内CV均在15%左右,敏感度为2.0×103拷贝/ml.50例乙型肝炎患者突变率52.0%(26/50),以上各位点突变率分别为34.0%、22.0%、38.0%、38.0%、4.0%.结论地高辛标记引物酶显色法用于芯片检测HBV基因常见位点多态性,简便易行,试剂成本显著降低,不需特殊设备,易于临床推广应用.

    作者:马达;王惠民;张芹;王万相;蒋玲;郭乃洲;张冬雷;赵建龙;孙悦 刊期: 2004年第06期

  • 高脂血症和缺血型脑卒中患者血浆纤维蛋白原浓度及其与脂质的关系

    纤维蛋白原是引起血栓形成的重要因子,被作为心脑血管疾病的独立危险因子.我们测定了高脂血症和缺血性脑卒中患者的纤维蛋白原浓度,并且分析了其与各种脂质的关系,探讨其临床意义.

    作者:周凌琴;王仁裕;董庆文;黄向勇;孙励勤 刊期: 2004年第06期

  • 高脂血对不同方法测定血清高密度脂蛋白胆固醇的影响

    目的观察不同浓度血清三酰甘油(TG)对高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)测定的影响,在临床实验室内寻找可靠的HDL-C测定方法以满足临床诊治需求.方法采用全自动生化分析仪检测血清TG、TC、HDL-C以及LDL-C并与沉淀法和电泳法测定HDL-C进行分组比较.结果当血清TG<1.69mmol/L时,3种方法测定值之间无差异;当血清TG为1.69~4.0 mmol/L范围时,各方法测定HDL-C有显著差异,但相关性良好.当TG>4.0 mmol/L,各方法之间的差异程度不一致.结论对高TG标本HDL-C的测定电泳法、沉淀法和直接法之间有显著差异,有条件的实验室应尽可能采用电泳法测定高TG标本HDL-C.

    作者:张葵;王丽;张欣;罗浔阳 刊期: 2004年第06期

  • 肝硬化患者人类巨细胞病毒的急性或活动性感染状况调查

    人类巨细胞病毒(human cytomegalovirus,hCMV)在免疫损害病人中常可导致严重甚至是致命性的伤害.而肝硬化(LC)患者常表现为不同程度的细胞免疫失调,继而导致病人急性或活动性hCMV感染.

    作者:龚希平;周镇先 刊期: 2004年第06期

  • 精神分裂症与白细胞介素-6的关系

    脑内神经细胞和胶质细胞膜上分布着特异性的IL-6受体,血中的IL-6可通过脑内缺乏血脑屏障(BBB)的区域进入中枢神经系统而产生效应[1].为了进一步研究精神分裂症患者与IL-6的关系,本文对精神分裂症患者的IL-6水平进行了研究,结果报道如下.

    作者:刘兴彦;韩启富;张志辉 刊期: 2004年第06期

  • 再生障碍性贫血患者血清sFas与其他细胞因子水平分析

    血清sFas通过与Fas分子竞争结合配体FasL而阻断Fas介导的细胞凋亡被认为是凋亡抑制因子.本文通过对40例再障患者血清sFas与IL-2、TNF、TPO、EPO、GM-CSF 6种细胞因子水平综合测定,分析其与外周血象及各细胞因子间的相互关系,旨在探讨sFas等细胞因子在再障发生发展过程中的作用.

    作者:李小龙;陈晓东;王娅玲 刊期: 2004年第06期

  • 2型糖尿病患者血浆血小板活化因子和血清可溶性细胞间粘附分子-1测定的临床意义

    目的研究2型糖尿病患者血浆血小板活化因子(PAF)和血清可溶性细胞间粘附分子-1(sICAM-1)水平的变化及其临床意义.方法采用ELISA法和生物学方法分别测定55例2型糖尿病患者(其中糖尿病并发冠心病患者24例,糖尿病未并发冠心病患者31例)和32名健康人(对照组)血浆PAF和血清sICM-1水平.结果糖尿病组PAF和sICAM-1水平与对照组PAF和sICAM-1相比均显著升高(P<0.01);糖尿病并发冠心病组PAF和sICAM-1水平均显著高于糖尿病未并发冠心病组(P<0.05,P<0.01);糖尿病患者PAF与sICAM-1水平呈正相关(r=0.637,P<0.01).结论血浆PAF和血清sICAM-1在糖尿病及其并发症的发生、发展中起作用,其测定可能有助于糖尿病及其并发症的早期诊断和病情的监测.

    作者:钱晖;朱伟;赵彦平;姜润秋;严丽荣;许文荣 刊期: 2004年第06期

  • 尿微量蛋白对监测2型糖尿病早期肾功能损害的价值

    糖尿病(diabetes mellitus,DM)及其并发症严重影响患者的生活质量.20%DM患者将并发糖尿病肾病(DN),从而对患者造成不可逆的损害.肾脏穿刺组织病理学检查是诊断DN的可靠方法,但技术要求高,且具有创伤性,不易推广.目前研究较多的为反映肾小管、肾小球功能的相关检测指标.我们联合检测尿中微量白蛋白(mAlb)、α1巨球蛋白(α1-MG)、转铁蛋白(uTf)等微量蛋白,结合糖化血红蛋白,能反映早期肾脏损害及其程度,现报告如下.

    作者:汤俊明;赵进良;张小莉 刊期: 2004年第06期

  • 多重聚合酶链反应对缺失型α地中海贫血的诊断

    目的探讨一种简便、快速可同时检测东南亚缺失(-SEA)、右侧缺失(-α3.7)和左侧缺失(-α4.2)地中海贫血的多重聚合酶链反应(PCR)技术.方法采用单管四重聚合酶链反应(PCR)技术.结果正常等位基因的扩增产物为1.8kb,东南亚缺失基因(-SEA/αα)的扩增产物为1.8kb和1.3kb.右侧缺失(-α3.7/αα)扩增产物为2.0kg和1.8kb.左侧缺失(-α42/αα)扩增产物为1.8kb和1.6kb.根据出现的不同条带还可判断杂合子和纯合子及缺失型HbH病.结论本法简便、快速,可作为常规方法用于临床样品的分子筛查及产前诊断.

    作者:梁玉全;唐跃华;谢健敏;李锦荣 刊期: 2004年第06期

  • 血清胆碱酯酶和前白蛋白对肝脏合成功能监测的意义

    现有的肝脏功能测定项目中,多选择肝细胞破坏后所释放出的酶以及对胆汁代谢有关的一些项目如胆红素及总胆汁酸等;在选择肝脏合成功能的项目中,仅选择血清总蛋白(TP)及白蛋白(Alb)测定.我们观察到血清胆碱酯酶(chE)及前白蛋白(PA)测定,是判断肝脏合成功能更好的指标.

    作者:朱建一;闻平 刊期: 2004年第06期

  • 血浆凝血因子XⅢ抗原及活性的测定

    目的:建立血浆FⅧ抗原及活性定量测定的方法.方法对46例正常人及两个遗传性FⅧ缺陷症家系部分成员采用双抗体夹心法检测FⅧ抗原,生物素化戊胺测定FⅧ活性,以FⅧ标准品建立标准曲线.结果 3例患者FⅧA:Ag均为0%,FⅧB:Ag分别为正常人的78.46%、66.43%、57.29%.46例正常人血浆FⅧ活性FⅧ:C平均值为86.34%±17.98%,范围在56.5%~165.17%之间,3例患者为0%,家系中杂合子范围为29.60%~104.86%.结论: 双抗体夹心法和生物素标记法均为简捷、灵敏而且特异的FⅧ测定方法.

    作者:段宝华;王鸿利;王学锋;胡翊群;谢爽;王振义 刊期: 2004年第06期

  • 不同酶抑制剂检测金属β-内酰胺酶的比较和改进

    目的通过比较氯化铜(CuCl2)、氯化铁(FeCl3)、乙二胺四乙酸(EDTA)、巯基乙醇和2-巯基丙酸五种不同化合物对金属β-内酰胺酶(metallo-β-lactamase,MBL)的抑制作用,建立一种检测MBL的简便方法.方法用头孢他啶(CAZ)作为指示药物,在相邻的纸片上加抑制剂,评估出抑制作用强的MBL抑制剂.再对抑制剂浓度和两纸片间的距离进行条件优化.用建立的方法检测临床分离的86株耐亚胺培南的铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)MBL的产生率和对10种抗菌药物的耐药率.结果2-巯基丙酸对MBL抑制作用强,将其作1:10稀释后,2-巯基丙酸自身的抑菌环消失,与CAZ纸片相距15~20 mm时,结果易观察.86株耐亚胺培南铜绿假单胞菌中9株产MBL,无论是否产MBL,均对被检测的10种抗菌药物有极高的耐药率.结论2-巯基丙酸和头孢他啶双纸片协同试验是一种简便、敏感的检测产MBL细菌方法,耐亚胺培南的铜绿假单胞菌往往多重耐药.

    作者:王卫萍;邵海枫;李珍大;张小卫 刊期: 2004年第06期

  • 用新底物DCAP-P检测酸性磷酸酶方法的建立

    目的合成酸性磷酸酶(ACP)的底物2,6-二氯-4-乙酰基苯基磷酸(DCAP-P),并建立以DCAP-P为底物的一种新的ACP测定方法.方法在BTS-310型半自动分析仪和TBA-40FR型全自动生化分析仪上研究连续监测法,建立试验参数.结果本法测定DCAP吸收峰为326 nm;ACP的Km=0.139 mmol/L;340nm时DCAP的摩尔消光系数为14 440 L·mol-1·cm-1,缓冲液浓度0.1 mol/L,适pH5.4,底物浓度2.0 mmol/L,延滞期60 s,线性反应期15 min;线性范围为0~1 188 U/L;血红蛋白<115.62 mg/L及胆红素对测定结果无影响;本法总ACP与PAP(前列腺酸性磷酸酶)的参考值范围分别为12.58~19.42U/L和2.52~9.04U/L.结论此方法重复性好,线性反应期长,线性范围广,干扰因素少,适用于自动化分析仪.

    作者:丁晓琴;胡宗华;李英;谢克勤;李忠信 刊期: 2004年第06期

  • 1286例维吾尔族妇女阴道分泌物染色检查

    本文报告2002年1月至2003年11月,对1 286例维吾尔族妇女进行阴道分泌物的涂片染色检查的结果,并对相关技术问题作了分析讨论.

    作者:赵梅;楼良荣;谭忠平 刊期: 2004年第06期

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