李小飞；张涛；汪健；程庆书
目的制备单抗BDI-1导向的三氧化二砷免疫蛋白微球[As2O3-(BSA-NS)-BDI-1]并检测其特异性结合膀胱肿瘤细胞的活性.方法通过蛋白交联固化及N-羟基琥珀酰亚胺基-3-(2-吡基二硫)-丙酸脂(SPDP)交联的方法制备蛋白免疫微球.还原电泳、光镜和电镜的方法鉴定As2O3免疫微球的共价连接与活性.吖啶橙染色检测肿瘤细胞凋亡.结果还原电泳可见免疫微球被还原后在远端形成两条蛋白条带.光镜下可见蛋白微球在肿瘤细胞周围并随细胞移动.电镜下可见蛋白微球与肿瘤细胞紧密连接且形态完整.吖啶橙染色可见免疫微球处理的膀胱肿瘤细胞表现出凋亡特征.结论制备的As2O3-(BSA-NS)-BDI-1由共价键连接且能特异性的结合膀胱肿瘤细胞BIU-87而发挥诱导凋亡的作用.
作者：周洁；曾甫清；谢蜀生 刊期： 2005年第02期
近年来,我们在肛肠科门诊及住院患者的治疗中选择性的应用龙珠软膏外敷及换药,临床收到满意效果,现报道如下[1,2].一、资料与方法1.研究对象:本组病例300人,年龄16～69岁,平均43.56岁;门诊治疗245人,肛肠术后住院治疗55人;其中混合痔68例、炎性外痔47例、血栓性外痔36例、静脉曲张性外痔29例、肛裂42例、肛周脓肿23例、术后换药用药5例.患者症状表现为肛门肿痛、便血、坠胀:体征为肛门局部有肿物、炎性水肿、血栓,肛管部有裂损、出血,以及术后肛缘、肛管不同大小的创面等.
作者：王立柱；梅笑呤；陈甡 刊期： 2005年第02期
目的研究化疗药物阿霉素(ADM)对肿瘤细胞Fas凋亡基因的调控,并探讨其致凋亡机制.方法逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)比较经ADM处理前后肿瘤细胞胃癌ADM细胞系SGC-7901、MGC-803和肺癌细胞系A-549的Fas mRNA的表达水平,同时观察其对抗Fas抗体的敏感性,并用流式细胞术检测肿瘤细胞凋亡率.结果所有3种肿瘤细胞在ADM作用下Fas表达水平显著增强,差异有统计学意义(P<0.05),同时肿瘤细胞凋亡率明显增加(凋亡率分别为40.3%、43.6%、54.4%).ADM能增加肿瘤细胞对Fas抗体的敏感性.结论 ADM上调肿瘤细胞Fas的表达,ADM与Fas抗体联合应用将增强肿瘤细胞的凋亡率,有一定的抗肿瘤临床应用前景.
作者：郑世营；张晓膺；赵军；葛锦峰；王志刚 刊期： 2005年第02期
目的研究大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)表达脑源性神经营养因子(BDNF)和神经生长因子(NGF)以及BMSC移植对脊髓损伤的治疗作用.方法取大鼠骨髓培养BMSC并传代,进行CD44、CD45和CD71免疫细胞化学染色鉴定.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测BMSC中BDNF和NGF mRNA的表达.用NYU方法建立大鼠脊髓损伤模型,将15 000个BMSC注射到损伤脊髓中.1～5周后进行BBB运动功能评分,观察BMSC在脊髓中的迁移,进行NF、GFAP和Gal-C免疫荧光检测.结果 BMSC贴壁生长,免疫细胞染色CD44(+)、CD45(-)和CD71(+),表达BDNF和NGF mRNA.移植BMSC后脊髓损伤的大鼠运动功能改善,5周后BBB评分从对照组的(11.6±1.7)分提高到(15.4±2.2)分.BMSC在脊髓内向头、尾两侧迁移约5 mm,未检测出向神经细胞诱导转化.结论 BMSC表达神经营养因子BDNF和NGF,移植后能促进大鼠脊髓损伤的运动功能恢复.
作者：吴永超；郑启新；谢宗平；王运涛；郝杰；刘晓帆 刊期： 2005年第02期
目的研制抗痨药--磁性多孔磷酸三钙(A-MPTCP)药物释放系统(DDS).方法将MPTCP及多孔磷酸三钙 (PTCP)浸于抗痨药溶液,真空、吸附,冻干,制得A-MPTCP及A-PTCP.测定其体外及体内释放抗痨药浓度及持续时间,抑菌试验检测其抗结核分枝杆菌作用.结果 A-MPTCP体外释放异烟肼达36 d以上,而A-PTCP为24 d;A-MPTCP释放有效浓度链霉素达28 d,而A-PTCP为18 d.兔股骨中维持异烟肼达8周以上,链霉素达6周;2～8周体内取出的A-MPTCP对结核分枝杆菌有明显抑制作用.A-MPTCP体内有良好的骨传导作用.结论 A-MPTCP可望成为治疗骨结核的一种新方法.
作者：游洪波；陈安民；孙淑珍；赵家明 刊期： 2005年第02期
目的探讨断流术与分流术对门静脉高压性胃病(PHG)的影响.方法实验分对照组9例、断流术组14例和分流术组12例,采用术前及术后3个月胃镜检查,原位末端标记(TUNEL)染色测凋亡指数(AI)和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定Caspase-3 mRNA表达量.结果对照组AI值为(2.31±0.11)%,Caspase-3 mRNA表达量为0.51±0.03,其他组与对照组比较,AI值增加差异有统计学意义(P＜0.01),Caspase-3 mRNA表达量显著增加(P＜0.05).断流术后AI值由术前的(12.83±1.54)%增加到(16.24±1.68)%(P＜0.05),PHG患者2例由轻转重,PHG病变程度加重(P＜0.05);相反,分流术后AI值从术前的(12.18±1.32)%回降至(8.58±0.72)%(P＜0.05),术后PHG患者1例由重转轻,4例痊愈,PHG病变程度得到缓解(P＜0.05).Caspcse-3 mRNA表达量与AI值有类似改变两者间呈正相关(r=0.86,P＜0.05).结论 PHG胃黏膜细胞凋亡增加,断流术后凋亡加剧,PHG病变程度加重;分流术后凋亡改善,PHG病变程度缓解.
作者：段进东；练涛峰；黄华容；张育明；杨清绪 刊期： 2005年第02期
目的选择和克隆人前列腺癌(PCa)和前列腺增生(BPH)的相关基因.方法根据当前前列腺癌与前列腺增生临床常规使用的肿瘤标记物和国内外基因表达谱的研究成果,选定了7个PCa上调表达,2个PCa下调表达基因和1个内参基因,采用聚合酶链反应 (PCR)从正常人外周血DNA中扩增出上述10个基因的探针片段,并克隆至pGEM-T质粒中.重组质粒经PCR鉴定、EcoR I单酶切或PSt I和Nco I双酶切鉴定,产物电泳检测.结果检测结果表明已经成功地将10个基因的探针序列克隆入pGEM-T质粒载体中.结论前列腺癌和前列腺增生相关基因质粒构建与探针制备为临床前列腺癌的血清学诊断及与前列腺增生症的鉴别提供了实验基础.
作者：钟惟德；何慧婵；刘文华；江福能；戴奇山；李俊玲；彭志强；谢克基；魏鸿蔼；刘良式 刊期： 2005年第02期
关节软骨属于透明软骨,组织代谢活性较低,创伤和手术等所致的软骨损伤或缺损难以自我修复或以纤维软骨、纤维组织所填充替代[1].为了重建软骨表面,恢复关节功能,人们通常采用各种动物,模拟临床实际情况进行研究,并取得了一定的进展.但动物实验结果常常难以重复,或难以应用到临床.这些问题的产生是由于不同物种、不同部位间,关节软骨的厚度,细胞密度,基质成分以及力学特征不同[2].因此只有全面了解人和动物关节软骨的生物学和结构特征,才能制造出更为理想的实验模型[3].
作者：高刚；卫小春 刊期： 2005年第02期
我们以IHC方法检测肝外胆管癌(ECC)中多药耐药基因(MDR1)、多药耐药相关蛋白(MRP)、谷胱甘肽转移酶π(GST-π)、拓扑异构酶-IIa(Top-IIa)和肺癌耐药蛋白(LRP)表达情况,初步说明ECC的可能耐药机制及特点.
作者：陈筠；王银全；陈孝平 刊期： 2005年第02期
目的建立临床成人骨髓基质干细胞(MSCs)体外培养、定向诱导分化为软骨细胞的途径.方法抽取成人骨髓,Percoll密度梯度离心法进行体外培养,贴壁细胞传代,取第3代细胞在培养基中添加软骨分化诱导剂地塞米松、维生素C和不同剂量转化生长因子-β(TGF-β),培养16 d后,在倒置显微镜观察细胞形态,甲苯胺蓝染色蛋白多糖,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫细胞化学(SABC法)检测Ⅱ型胶原表达,诱导后MSCs与新型材料聚乳酸和羟基乙醇共聚物(PLGA)复合.结果 Percoll密度梯度离心法培养可获得均一的MSCs;5、10 ng TGF-β诱导分化的MSCs生长迅速,呈典型的软骨细胞形态,甲苯胺蓝染色阳性,Ⅱ型胶原表达阳性,MSCs对材料PLGA黏附力强.结论可以从成人骨髓中培养出MSCs,并可定向诱导分化为软骨细胞,5～10 ng TGF-β为佳诱导剂量,成人MSCs可用作临床自体软骨组织工程种子细胞.
作者：滕勇；胡蕴玉；王臻；李旭升；白建萍；彭磊；王军；吕荣 刊期： 2005年第02期
我们利用激光共聚焦显微镜动态观察δ氨基酮戊酸-光动疗法(ALA-PDT)作用后SW480细胞内 Ca2+浓度的变化,以期对ALA-PDT介导的信号传导机制进行探讨.
作者：郑江华；时德；陈祖林 刊期： 2005年第02期
目的探讨寰枢椎不稳定患者行寰枢椎后方经关节螺钉固定解剖学径路、手术方法与疗效.方法测量40具寰枢椎干燥标本的解剖径路;10例寰枢椎不稳定患者采用后方经关节螺钉内固定及自体颗粒样松质骨植骨治疗.结果国人枢椎椎弓根宽度为3.77～12.11 mm,仅17.5%患者不适宜应用3.50 mm直径螺钉固定.临床随访8～36个月,10例患者寰枢椎稳定性均获得恢复与骨性融合.结论寰枢椎后方经关节螺钉内固定,可提供牢固的固定,恢复寰枢椎稳定.
作者：陈庄洪；蔡贤华；黄继锋；徐峰；刘曦明；余伦红 刊期： 2005年第02期
目的研究非渗透性低温保护剂海藻糖联合应用二甲基亚砜(DMSO),用于人类皮肤的低温储存,并与皮库常规应用的二甲基亚砜(DMSO)、丙二醇(Propyleneglycol)、DMEM进行比较,以寻求更佳的皮肤冷冻保护剂.方法将新鲜成人皮肤分为5组,液氮冻存7、14 d后复温,采用病理形态学、酶组织化学、组织代谢等方法,分别对海藻糖/二甲基亚砜、二甲基亚砜/丙二醇、二甲基亚砜/无血清角质细胞培养基(KSFM)、DMEM作为冷冻保护剂保存后的皮肤活力进行比较.结果 0.5 mol/L海藻糖/二甲基亚砜作为保护剂所冷冻的皮肤,复温后其活性明显高于其他保护剂组.结论海藻糖与二甲基亚砜联合应用是较佳的冷冻保护剂,皮库在常规应用保护剂时可以在渗透性保护剂中加入海藻糖.
作者：蔡宏；贾晓明；吴志谷；姚咏明；杨毅；李绍然；陆江阳 刊期： 2005年第02期
甲状腺癌与身体其他部位癌肿相比较,其发病率并不高,约占全身恶性肿瘤的0.2%(男性)～1.0%(女性).随着普遍开展癌瘤普查以及检测手段的改善,其发现率有明显增加的趋势.在国内一些肿瘤医院中,甲状腺癌占头颈部肿瘤的首位.随着分子生物学技术及免疫学技术的迅猛发展和人类对甲状腺癌发病机制认识的不断深入,基因治疗逐渐成为肿瘤生物学治疗中的重要组成部分,在甲状腺癌的治疗中显示出良好的应用价值,并且取得了一定的效果,将日渐成为一项有前景的治疗选择.
作者：张东伟；杨维良 刊期： 2005年第02期
目的探讨提取人脾脏巨噬细胞总RNA的方法并测算其产率.方法收集5例门静脉高压症脾亢患者的手术切除脾脏,经贴壁培养法分离纯化出巨噬细胞(Mφ)后,采用TRIzol试剂一步法提取5例脾脏Mφ样本的总RNA.分光光度法和琼脂糖凝胶电泳检测总RNA的产量和质量.后计算出每108个Mφ总RNA的产率.结果 5例样本Mφ总RNA的A260 nm与A280 nm比值平均为1.83±0.13,提示总RNA纯度较高,电泳结果提示总RNA无降解.每108个Mφ平均可抽提(41.58±23.13) μg总RNA.结论采用TRIzol试剂一步法提取脾脏Mφ总RNA是可行的,收获的人脾脏Mφ总RNA纯度高、完整性好、量较多,可满足后续实验要求.
作者：闫峰；李宗芳；苏清华；马双余；曹罡；张澍 刊期： 2005年第02期
目的探讨三氧化二砷(As2O3)对大鼠肝癌肝移植后肿瘤复发的预防作用.方法选用雄性Wistar大鼠以质量分数为0.05% 2-乙酰氨基芴的颗粒饲料饲喂12周,第21周剖腹取肝脏结节进行组织学检查确认建立大鼠原发性肝癌模型,按不同的组别进行原位肝移植.结果 A组大鼠术后平均生存(19.83±2.89) d.B组大鼠术后平均生存(75.40±5.76) d.C组大鼠术后平均生存(88.00±5.60) d.B组大鼠术后生存时间和A组大鼠术后生存时间比较,差异有统计学意义(P＜0.001),C组大鼠术后生存时间和实验B组大鼠术后生存时间比较,差异有统计学意义(P＜0.001).结论大鼠原位肝移植对大鼠原发性肝癌具有治疗作用.As2O3对大鼠肝癌肝移植后减少肿瘤复发具有一定的预防作用.
作者：曾兆林；韩德恩；韩丽姝；汪鹰扬；王志东；张新宇 刊期： 2005年第02期
目的探讨凋亡相关基因bcl-2、bax、p53和c-myc在不同形成时期的增生性瘢痕中的基因转录变化.方法提取16例不同发生时期的增生性瘢痕和8例正常皮肤的总RNA后,分离mRNA,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测bcl-2、bax、p53和c-myc基因在不同组织中的表达.结果在增殖期的瘢痕中,凋亡促进基因bax、c-myc和p53的表达量分别是正常皮肤的(62.8±14.7)%、(78.0±17.0)%和(49.8±4.3)%,基因表达明显降低(P<0.05),而在成熟期的瘢痕中,这3种基因的表达量都明显高于增殖期的瘢痕,恢复到正常皮肤水平.在正常皮肤中,bcl-2基因表达水平较低,而在增殖期和成熟期的增生性瘢痕中表达量都显著升高(P<0.05).结论 bax、c-myc和p53基因表达降低,bcl-2基因表达增强可能是瘢痕中细胞凋亡减少,形成增生性瘢痕的机制之一,而bax、c-myc和p53基因表达增强可能与瘢痕达到成熟状态有关.
作者：陈伟；付小兵；王海滨；周岗；韩冰；李海红；孙同柱；盛志勇 刊期： 2005年第02期
目的建立高低不同转移特性人成骨肉瘤MG-63亚克隆细胞系,为研究成骨肉瘤转移机制提供较好的实验模型.方法通过体外培养和裸鼠体内移植,初步分离并建立了2个亚克隆细胞系A1和A2,并利用细胞电泳、细胞增殖、琼脂克隆形成、体外侵袭实验、裸鼠体内异位和原位移植对两者的生物学特性进行比较、分析和鉴定.结果 A1和A2的电泳率、琼脂克隆形成能力、体外侵袭能力、自发性肺转移率分别为(1.08±0.12) μm,(0.64±0.13)μm;21.0±2.3,9.5±2.9;186.0±16.7,84.0±12.6;100.00%,6.67%,A1均明显高于A2,两者的差异有统计学意义(P＜0.01).结论高低不同转移特性的人成骨肉瘤MG-63亚克隆细胞系的建立,能为成骨肉瘤转移机制的研究提供较理想的实验模型.
作者：石晓兵；陈安民；蔡贤华 刊期： 2005年第02期
目的观察丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)在外源性一氧化碳(CO)抗大鼠肢体缺血再灌注(IR)所致肺损伤中的作用.方法健康SD大鼠,随机分为4组(每组n=8):对照组(Control)、Control+CO、IR和IR+CO组.复制大鼠双后肢缺血及再灌注后肺损伤模型.IR+CO和Control+CO组在再灌注前1 h或相应时间点置含CO的空气中,其余两组呼吸空气.观察大鼠肺组织学、肺组织中中性粒细胞(PMN)数目、肺组织湿重和干重之比(W/D)、丙二醛(MDA)含量以及动物生存情况变化.应用Western blotting检测肺组织中三种磷化MAPKs,即细胞外信号调节激酶(ERK)、c-Jun 氨基末端激酶(JNK)和p38表达的变化.结果与Contorl组相比,IR组动物死亡率、肺组织PMN数目、W/D、MDA含量以及磷酸化ERK、JNK和p38表达均显著增高;与IR组相比,IR+CO组IR组动物死亡率、肺组织中PMN数目、W/D和MDA含量均显著降低、肺损伤减轻,p38表达显著增高,JNK表达显著降低,ERK表达无显著变化.结论 MAPKs信号通路参与了外源性CO抗大鼠肢体IR所致肺损伤作用的分子机制.
作者：周君琳；凌亦凌；鲁士宝；关立；刘清河；王志伟；黄欣莉 刊期： 2005年第02期
目的评价转染血管内皮生长因子(VEGF)基因的神经干细胞脑内移植后在宿主缺血区的神经血管保护作用.方法建立大鼠暂时性大脑中动脉梗死模型(tMCAO)并将其随机分成:(1)对照组;(2)细胞悬液磷酸盐缓冲液(PBS)移植组;(3)神经干细胞移植组;(4)转基因神经干细胞移植组,每组10例.立体定向法将BrdU标记的转基因神经干细胞移植到tMCAO大鼠的纹状体缺血半暗区.移植后2～12周进行神经损害严重程度评分(NSS)并与其他3组比较.移植后12周,免疫荧光染色观察转基因神经干细胞在脑内的分化、迁徙情况;免疫组织化学染色观察各组移植区毛细血管结构,并计每例动物以移植点为中心的一个100倍视野下内皮细胞数.结果移植后2～12周(4)组NSS评分均数分别为5.8、5.0、4.6、4.0、4.0、3.8,均低于其他3组.其中第8周显著低于(1)、(2)组(P=0.008),第12周显著低于(1)、(2)、(3)组(P=0.000).移植后12周,转基因神经干细胞在宿主脑内存活、迁徙,部分分化成神经元.转基因神经干细胞移植组移植区毛细血管结构相对完整,血管内皮细胞数显著多于其他3组.结论转染VEGF基因的神经干细胞移植后对宿主局部血管和神经结构具有保护作用.
作者：朱巍；毛颖；周良辅；汪洋；江永；朱剑虹 刊期： 2005年第02期
中华实验外科杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
