一种新的蝮蛇蛇毒磷脂酶A2同源物的分离纯化及其氨基酸序列分析

马安德；吴少瑜；张嘉杰；李志琴；徐伟；余乐；文晓芸；吴曙光

关键词：蝮蛇, 蛇毒, PLA2同源物, 氨基酸序列

摘要：采用C18反相高效液相色谱法从蛇毒粗毒中提取出一种新的PLA2同源物,其分子量为13900Da,N末端氨基酸序列分析结果为:HLLQFRKMIKKMTKK.通过GenBank的protein-protein BLAST软件进行同源性分析,结果表明,N端的15个氨基酸与已知其他蛇毒PLA2具有较高的同源性.

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中药材海金沙X射线衍射Fourier指纹图谱鉴定

目的:建立中药材海金沙新的分析鉴定方法.方法:以甲醇、氯仿、石油醚为提取溶剂,提取中药材海金沙,采用粉末X射线衍射Fourier谱鉴定法对提取物进行分析鉴定.结果:通过对三种海金沙药材的甲醇、氯仿、石油醚提取物实验,分析、比较所得出的图谱,获得了海金沙的标准X射线衍射Fourier指纹图谱及特征标记峰值.结论:实验结果表明,X射线衍射Fourier指纹图谱鉴定法可用于中药材海金沙的分析鉴定.

作者：徐海星；刘小平；瞿国义；石守鹏刊期： 2006年第02期
联用阿米洛利与氧化苦参碱预防大鼠肝纤维化的实验研究

目的:观察联用阿米洛利与氧化苦参碱预防大鼠肝纤维化的疗效.方法:建立二甲基亚硝胺大鼠肝纤维化模型,观察阿米洛利与氧化苦参碱预防后,血及肝组织生化、羟脯氨酸、透明质酸及层粘连蛋白含量变化.结果:除阿米洛利组,各预防组较模型组肝功能得到改善(P＜0.001);阿米洛利和氧化苦参碱预防组较模型组血清透明质酸、层粘连蛋白和肝组织羟脯氨酸含量降低(P＜0.05);预防组肝组织内SOD较模型组升高,而MDA低于模型组(P＜0.01);尤以合用组效果佳.结论:阿米洛利与氧化苦参碱对二甲基亚硝胺诱导的肝纤维化均有预防作用,两者合用有一定的协同作用.

作者：刘凌云；左和宁；杨伟峰刊期： 2006年第02期
咸虾花的生药学鉴定

目的:对咸虾花Vernonia patula (Dry) Merr.进行鉴定.方法:采集药材标本,对标本进行原植物鉴定、药材的性状鉴别、显微鉴别.结果:咸虾花的根、茎与叶的组织构造有一定特点,可对其进行生药鉴定,并为其制定质量标准提供参考依据.

作者：蔡毅；朱意麟；柳丹；滕建北；王进声刊期： 2006年第02期
枯草芽孢杆菌对50种中药的发酵及抗菌活性检测

用枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)对50种中药进行发酵,检测发酵产物与原料对结核分支杆菌(Mycobacterium tuberculosis)和榛色青霉(Penicillium avellaneum)的抗菌活性.结果表明:部分中药的发酵产物抗菌活性增加,而部分中药的发酵产物抗菌活性降低,部分中药的活性不变.说明微生物发酵中药的过程中,两者发生相互作用导致发酵前后中药成分发生变化,从而抗菌活性发生变化.

作者：李国红；张克勤；沈月毛刊期： 2006年第02期
金铁锁不同居群培养物生长量比较

多从金铁锁Psammosilence tunicoides W.C.Wu et C.Y.Wu 8个不同居群的组培物生长量比较,初步筛选出云南丽江云杉坪和昆明小墨雨两居群比其他居群有优势,可考虑作为优良种源.

作者：杨耀文；钱子刚；王晓佳；王世慧刊期： 2006年第02期
蝉花真菌的分离及液体发酵培养

目的:探讨蝉花真菌分离及液体发酵培养.方法:从蝉花僵虫体、子座芽、孢子分离真菌,并采用三种液体培养基考察菌丝收率.结果:分离得到的蝉花真菌经鉴定为拟青霉属的蝉拟青霉.在含蚕蛹粉、鸡蛋等动物性成分的液体培养基中培养4天,菌丝收率135 g/L.结论:从蝉花分离得到的蝉拟青霉,可用液体发酵培养.

作者：程东庆；丁志山；林美爱；潘佩蕾；陈宜涛刊期： 2006年第02期
红外光谱技术检测贮藏过程中牛膝药材稳定性的快捷方法

目的:探讨牛膝药材贮存中质量变化,并建立宏观检测的快捷简便方法.方法:采用红外光谱技术结合计算机辅助比对软件技术,对牛膝药材贮存过程中的药材质量的变化进行了比较研究,并对牛膝药材的热稳定性进行了模拟实验.结果:从红外光谱谱图上可以将变质药材与正常药材区别开来,同时热稳定性模拟实验表明,当温度升至140℃时,牛膝药材的红外光谱开始发生明显变化.结论:红外光谱技术可以作为一种宏观的药材质控方法,同时也可以为中药材的贮存和干燥等条件的确定提供可靠依据.

作者：余振喜；白雁；陈志红；贾永刊期： 2006年第02期
藏药云南兔耳草的化学成分研究(Ⅱ)

目的:提取、分离鉴定云南兔耳草的化学成分.方法:乙醇冷浸提取,氯仿、正丁醇依次萃取,硅胶柱层析分离纯化,通过理化常数和波谱分析鉴定化合物结构.结果:分离得到7个化合物,分别鉴定为artselaeroside A(1),3-羟基-5-甲氧基苯甲醇(3-hydroxy-5-methoxy-benzyl alcohol,2),对羟基苯乙醇(tyrosol,3),9′-顺-十八烯酸甘油酯(glycerin-9′-Z-octadecaenate,4),二十二酸甘油酯(glycerin-docosanate,5),二十四酸甘油酯(glycerin-tetracosanate,6),二十四烷酸(tetracosanoic acid,7).结论:以上化合物均为首次从该植物中分离得到.

作者：杨丽娟；羊晓东；赵静峰；李良刊期： 2006年第02期
口服独一味水提取物对大鼠血液凝集参数的影响

目的:研究藏药独一味水提物(HLRE)对大鼠血液凝集参数的影响.方法:大鼠HLRE高、中、低剂量口服给药7,14,21天后,颈总动脉采血,用ACL 9000全自动凝血/纤溶分析仪测定凝血酶原时间(PT),活化部分凝血活酶时间(APTT),凝血酶时间(TT),纤维蛋白原含量(FIB),考察大鼠各项血液凝集参数变化情况.结果:给药7天,与对照组比比较,HLRE高、中剂量能引起TT值显著缩短(P＜0.05),高、中、低剂量能引起FIB值显著升高(P＜0.05);PT、APTT无明显变化.给药14天,HLRE各给药组TT值有所下降,FIB值有所升高,与对照相比,HLRE高剂量组TT值显著缩短(P＜0.05),FIB值显著升高(P＜0.05);PT、APTT无明显变化.给药21天后,与对照组比,HLRE高、中剂量组TT值显著缩短(P＜0.05),高剂量组FIB值显著升高(P＜0.05).同时HLRE各剂量组的PT有显著性缩短(P＜0.05).整个实验中的TT值与FIB值之间存在明显的负线性相关(P＝0.002).结论:口服独一味水提取物能使大鼠TT缩短和FIB增加,同时高剂量长时间给药可见PT缩短,而对APTT基本无影响.独一味水提物的止血效应表现出较好的量效关系和时效关系.

作者：李茂星；贾正平；沈涛；张汝学；张华欣；李志英刊期： 2006年第02期
鲜地黄中α-半乳糖苷酶和β-葡萄糖苷酶的提取与初步纯化

目的:从鲜地黄中提取并初步纯化α-半乳糖苷酶和β-葡萄糖苷酶.方法:以总酶活为考察指标,通过正交试验确定两种酶的佳提取条件.以酶活力和蛋白质含量为考察指标,确定两步盐析法的硫酸铵饱和度.结果:提取温度和溶剂量对α-Gal的提取具有显著性影响,而提取溶剂对β-Glu的提取具有显著性影响,因此确定以3倍量(v/w)磷酸盐缓冲液,4℃提取4 h为两种酶的佳提取条件.以30%和60%为两步盐析的佳硫酸铵饱和点.结论:鲜地黄中存在α-半乳糖苷酶和β-葡萄糖苷酶,两步盐析法可以使二者得到初步纯化.

作者：赵宇；温学森；崔晶；武卫红刊期： 2006年第02期
中药金果榄资源与生态研究初报

国家药典收载的金果榄Tinospora capillipes,通过资源和生长环境调查,目前几处主产地均已面临濒危,建议加强保护并按生长环境开展人工栽培研究.

作者：史琪荣；谭策铭；周元川；张卫东刊期： 2006年第02期
沙棘叶水溶性多糖的分离纯化及体外清除自由基活性研究

通过采用热水提取、乙醇沉淀获得沙棘叶水溶性粗多糖,再经酸性乙醇分级,将沙棘叶水溶性粗多糖分为三个级分SJ1、SJ2和SJ3,将对自由基有初步清除作用的SJ2脱蛋白后经DEAE-SephdexA-25进行分离纯化得SJ22.SJ22经纸层析、醋酸纤维薄膜电泳和SephroseCL-4B柱层析纯度鉴定表明:SJ22为分子量均一的纯多糖.分子量为7万.纸层析显示SJ22单糖组成为Xy1、Ara、Glc、Gal、GalA.抗衰老活性研究结果表明,SJ22能有效清除·OH、O-2·自由基,对脂质自由基·R效果不明显.

作者：刘春兰；刘海青；邓义红；刘明亮刊期： 2006年第02期
施肥对青天葵生长的影响

青天葵施用生物有机肥、化学复合肥和农家肥等3种肥料实验结果,以生物有机肥对耐阴的青天葵生长较为有利,能提高产量,化学复合肥则对青天葵的繁殖较为有利.

作者：杜勤；王振华；徐鸿华；张文进刊期： 2006年第02期
河北道地药材北柴胡HPLC-UV指纹图谱研究

目的:建立河北道地药材北柴胡的HPLC-UV指纹图谱分析方法,并与不同产地柴胡药材指纹特征相比较,为科学评价与有效控制柴胡质量提供新方法.方法:采用HPLC-UV法测定了道地北柴胡等21个不同来源的柴胡样品.色谱条件:C18柱,乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,检测波长203 nm,流速1.0 ml/min,柱温30℃.结果:建立了北柴胡HPLC-UV指纹图谱共有模式,并对不同产地柴胡药材进行了相似度比较.结论:色谱指纹图谱分析法能简便、快速鉴别和区分不同来源的柴胡药材,为全面控制柴胡药材的质量提供了依据.

作者：肖蓉；王春英；张志斐；袁志芳；张兰桐刊期： 2006年第02期
城南细辛的化学成分研究(Ⅱ)

为研究城南细辛的活性化学成分,用乙醇冷浸提取,柱层析分离得到3个化合物.经理化方法和光谱方法(UV, IR, NMR, MS)鉴定为卡枯醇(kakuol, Ⅰ)、2-甲氧基-4,5-亚甲二氧基苯丙酮(2-methoxy-4,5-methylenedioxypropiophenone, Ⅱ)和Pluviatilol(Ⅲ).化合物Ⅱ、Ⅲ为首次从该属植物中分离得到.

作者：杨志玲；蒋梅香；李福双；徐康平；谭桂山刊期： 2006年第02期
葛根芩连微丸中黄芩苷和小檗碱的含量及其溶出度测定

目的:对葛根芩连微丸中黄芩苷和小檗碱含量及其溶出度进行了考察,为改进、提高药品质量提供依据.方法:含量测定采用HPLC法,溶出度测定以浆法操作.HPLC法测定含量,计算葛根芩连微丸中黄芩苷和小檗碱的含量及累积溶出率.结果:葛根芩连微丸中黄芩苷含量为5.53 mg/g,小檗碱含量为21.35 mg/g,黄芩苷和小檗碱溶出度在180 min时达到40%和45%就不再明显增加.

作者：谭晓梅；吴艳萍；吴昭晖刊期： 2006年第02期
蛇葡萄素的血管生成抑制作用

目的:探讨蛇葡萄素对内皮细胞及肿瘤细胞的生长及其血管生成的影响.方法:体外用MTT法对牛主动脉内皮细胞进行增殖抑制实验;用ELISA法、免疫组化染色法以及流式细胞仪观察蛇葡萄素对人肝癌细胞Bel-7402分泌VEGF、bFGF的抑制作用;体内观察蛇葡萄素对人肝癌Bel-7402裸鼠移植瘤的抑制作用.结果:蛇葡萄素对牛主动脉内皮细胞的增殖在6.4～51.2 μg/ml呈现浓度依赖性抑制作用,IC50＝22.0±4.0 μg/ml.ELISA法测定结果显示,12.8 μg/ml、25.6 μg/ml、38.4 μg/ml蛇葡萄素对肝癌Bel-7402细胞分泌VEGF的抑制率分别为14.2%、40.0%及49.6%.免疫组化染色结果显示,12.8 μg/ml以上的蛇葡萄素能使细胞体积缩小,分泌VEGF、bFGF明显减少.流式细胞仪检测VEGF、bFGF结果,25.6 μg/ml及38.4 μg/ml蛇葡萄素对VGEF的抑制率分别为32.2%及57.4%,对bFGF的抑制率分别为54.9%及62.6%.蛇葡萄素浓度为100、150、200 mg/kg时对人肝癌Bel-7402裸鼠移植瘤的抑制率分别可达24.3%、41.4%及45.7%.结论:蛇葡萄素在体外能有效抑制内皮细胞增殖及人肝癌Bel-7402细胞分泌VEGF和bFGF,具有抑制血管生成的作用;体内能有效抑制人肝癌Bel-7402裸鼠移植瘤的生长,提示蛇葡萄素也许可作为一个肿瘤血管生成抑制剂用于肿瘤防治.

作者：罗高琴；曾飒；刘德育刊期： 2006年第02期
木瓜凝乳蛋白酶多克隆抗体的制备及纯化

目的:制备并纯化木瓜凝乳蛋白酶多克隆抗体,为建立木瓜凝乳蛋白酶免疫学检测方法打下基础.方法:用自纯化的木瓜凝乳蛋白酶免疫新西兰大耳兔,亲和层析纯化多克隆抗体,并用免疫双扩和ELISA法对其进行鉴定.结果:抗血清效价为1∶ 380000,SDS-PAGE显示纯化后的抗体纯度很高.

作者：丁玉兰；杨太成；赵树进刊期： 2006年第02期
正交实验法优选牛黄清热胶囊的提取工艺

目的:正交实验法优选牛黄清热胶囊的提取工艺.方法:以干浸膏的收膏率和黄芩苷[1]的含量作为考察指标,采用L9(34)正交表进行筛选,考察了乙醇的浓度,乙醇的用量,提取的时间,提取的次数,药材的粒径等因素以确定佳的提取工艺.结果:黄柏、黄芩,虎杖等中药饮片,加70%乙醇回流提取二次,第一次加入6倍量70%乙醇,加热提取2.5 h;第二次加4倍量70%乙醇,加热回流提取1.5 h为佳的提取工艺.

作者：向梅先；苏汉文刊期： 2006年第02期
针药结合治疗失眠症疗效观察

目的:探讨提高针刺治疗失眠症临床疗效的方法.方法:将72例失眠症患者随机分成针药组和针刺组,针药组40例,针刺组32例.针刺组只给予针刺治疗;针药组除给予针刺治疗外,配合中药治疗.结果:针药组痊愈率55%,总有效率为92.5%,显著高于针刺组,经统计学处理,两组有显著性差异(P＜0.05).结论:失眠症患者在给予针刺治疗的同时,配合中药治疗,能有效延长睡眠时间,提高睡眠质量,改善伴随症状,提高临床疗效.

作者：何新芳；胥海斌刊期： 2006年第02期