王松；林子琦；林海雪；李金燕；郭丽荣
G蛋白偶联受体（ GPCR）与心血管疾病病、肿瘤、免疫和感染性疾病等重要疾病的发生、发展密切相关。同时，约50％药物都是以受体为靶点。但目前对受体精密调控机制尚不清楚。利用蛋白质组学、活细胞单分子荧光成像等方法，我们研究发现多种G蛋白偶联受体新调控机制。发现了肾上腺素受体新的调控子HIP－55（ hematopoietic progenitor kinase 1［ HPK1］－in－teracting protein of 55 kD）。 HIP－55通过蛋白质相互作用调控肾上腺素诱导转位激活、双相激活等受体激活方式。 HIP－55通过cAMP非依赖途径调控肾上腺素受体介导的p38、ERK1／2等重要信号通路。 HIP－55通过调控受体Clathrin内吞途径介导受体内吞、减敏及下游信号。此外，我们还发现另外一个生长分化因子15（growth differentiation factor－15，GDF－15）。 GDF－15通过抑制MMP途径，负调控肾上腺素诱导EGFR转位激活信号通路。基于G蛋白偶联受体信号调控机制的研究，我们也探索新的受体功能选择性药物研究开发，获得了一些候选化合物。
作者：李子健 刊期： 2015年第10期
目的：采用Urotensin II（ UII）体外诱导法建立HepG2细胞胰岛素抵抗模型，并探讨其机制。方法：采用含不同UII浓度的DMEM培养基培养HepG2细胞，后半小时与1×10－7 mol／L insulin共孵育，葡萄糖－己糖激酶法检测不同时点培养基中葡萄糖含量，以HepG2细胞蛋白进行定量，确定胰岛素抵抗佳作用浓度及时间；多功能酶标仪检测UII诱导hepG2细胞内活性氧（ ROS）变化；Western blot法检测胰岛素受体结合物IRS－1及Akt蛋白的表达。结果：hepG2细胞产生胰岛素抵抗的佳作用时间为24 h，佳UII浓度为1×10－7 mol／L。与空白对照相比，UII刺激hepG2细胞后ROS增高明显（ P＜0．05）；且UII孵育组IRS－1及Akt蛋白的表达明显降低（P＜0．05），提示UII可能通过增高hepG2细胞中ROS而使hepG2细胞产生胰岛素抵抗。结论：采用UII体外诱导的方法，UII浓度为1×10－7 mol／L，作用24 h后，可建立HepG2细胞胰岛素抵抗模型，且UII可能通过诱导HepG2细胞ROS的增高而引起胰岛素抵抗。
作者：李莹莹；禹晓童；王学江 刊期： 2015年第10期
目的：从代谢调节角度探讨高原环境对人体血浆代谢的影响及可能机制。方法：分别采集60名健康成年男性在平原和进入高原（海拔5300 m）第4天的血浆样本，高效液相色谱－质谱联用和气相色谱－质谱联用结合多变量统计分析筛选进入高原前后的差异代谢物，Metabo Analyst 3．0数据库进行代谢通路富集分析，ELISA测定代谢通路中关键调节酶。结果：进入高原后受试者血浆中50个代谢物、8条代谢通路和5种关键酶发生了显著的变化。8条代谢通路涉及炎症反应相关代谢、能量代谢、胆酸代谢和血红素代谢。 ELISA结果显示调节以上代谢通路的5种关键酶进入高原后发生显著变化。结论：人类习服高原早期血浆中代谢物组、相关代谢通路和关键调节酶发生了重要变化，研究结果对寻找促进高原习服措施具有重要意义，通过阻断或修饰相关代谢通路将有望减轻急性高原反应症状、促进高原习服。
作者：廖文婷；刘宝；陈建；崔建华；高伊星；刘福玉；徐刚；孙滨达；张二龙；袁志兵；张钢；高钰琪 刊期： 2015年第10期
目的：探究急性粒细胞白血病（AML）患者的间充质干细胞（MSC）病理生理变化和钠氢交换蛋白（NHE1）的影响及机制。方法：检测AML来源MSC中NHE1的表达量；检测在有无NHE1抑制剂情况下AML来源MSC的成脂成骨分化能力，MTT检测体外增殖能力，流式细胞术检测细胞周期，Transwell检测其迁移能力；Western blot检测NHE1、JAK、AKT等相关蛋白的表达。结果：AML患者MSC的增殖、迁移及成骨能力减弱， NHE1表达量增高，抑制NHE1活性后可以不同程度地恢复这些能力；MSC细胞S期明显延长，G2期明显缩短；p－AKT和p－JAK表达量均降低。结论：AML来源MSC存在异常， NHE1、JAK和AKT不同程度参与AML患者MSC生物学异常。
作者：许华；陈龙；李元叶；王齐；李庆华；庞天翔 刊期： 2015年第10期
目的：动脉粥样硬化（ atherosclerosis， As）进程中血管细胞自噬的改变及低剪切应力对血管内皮细胞自噬的影响。方法：高脂饮食喂饲ApoE－／－小鼠，分别于0、4、8和12周处死。 HE和油红O染色法观察As病变；免疫组织化学法和Western blot检测Beclin 1、LC3和p62蛋白表达；将HUVECs置于体外灌流系统，分别以低剪切应力（5 dyn／cm2）和正常剪切应力（15 dyn／cm2）处理1 h，Western blot检测观察剪切应力对血管内皮细胞自噬及自噬流的影响。结果：随着As病变进程的发展Beclin 1、LC3和p62含量显著增加。与正常剪切应力组相比，低剪切应力组Beclin 1和LC3－II／LC3－I的蛋白表达降低；p62表达增加；巴伐洛霉素孵育2 h后，低剪切应力组LC3－II／LC3－I无明显变化，而正常剪切应力组LC3－II／LC3－I明显增大。结论： As进程中血管细胞自噬障碍，低剪切应力抑制血管内皮细胞自噬。
作者：李小红；杨沁；李荣庆；王佐；姜志胜；危当恒 刊期： 2015年第10期
目的：探讨肠系膜动脉内皮细胞上（ MAECs）是否天然共定位TRPP2／TRPV4通道复合体，且该复合体在盐敏感高血压发展过程中的作用。方法：利用免疫沉淀技术证实MAECs形成天然TRPP2／TRPV4复合体；将盐敏感（ SS）和盐抵抗（ SR）大鼠分别喂养正常盐和高盐饲料，3周后检测血压和血浆醛固酮水平；利用血管开放式膜片钳，观察高盐饮食是否影响MAECs上TRPP2／TRPV4活性；利用分子生物学和膜片钳体外观察高盐和醛固酮对该复合体的影响。结果：TRPP2／TRPV4在MAECs上天然定位，并介导内皮细胞NO产生；在SS鼠中，高盐导致该通道活性和表达降低；体外实验证明高盐和醛固酮均抑制TR－PP2／TRPV4活性。结论：在盐敏感高血压发展过程中，MAECs上TRPP2／TRPV4通道活性和表达下降，其机制可能是由高盐和醛固酮协同介导。
作者：唐亮亮 刊期： 2015年第10期
目的：探讨亚临床甲状腺功能减退症（亚甲减）与冠心病危险因素之间的关系。方法：对排除应用抗甲状腺药、糖皮质激素和胺碘酮药物的125例冠心病患者进行病史、甲状腺功能、血生化检查及超声心动图结果分析。结果：根据甲状腺刺激激素（TSH）水平的高低分为甲状腺功能正常组（n＝43）、亚甲减组（n＝82）。与甲状腺功能正常组相比，亚甲减组中女性患病率显著增高（P＜0．05）；有吸烟史者及甲状腺过氧化物酶阳性率显著增高（P＜0．05）；且上述因素在TSH≥10．0 mU／L的重度亚甲减病人更加显著（ P＜0．05）；而空腹血糖、胆固醇、甘油三酯、B型尿钠肽水平及超声心动图检查在不同TSH水平间未见显著差别。结论：本组病例分析提示：女性、有吸烟史及甲状腺过氧化物酶阳性的冠心病患者，特别是伴TSH≥10．0 mU／L时，应同时关注甲状腺疾病。
作者：严庭智；丁瑾；常连青；苗莉；姚小梅 刊期： 2015年第10期
目的：通过测定乳腺癌组织中调节性T淋巴细胞（ regulatory T cells，Treg）的计数，探讨其与乳腺癌临床病理特征的关系，阐明在乳腺癌中Treg的分布表达与其临床预后的相关性。方法：应用免疫组织化学方法检测60例乳腺癌组织中Treg表达。结果：CD127＋染色颗粒主要定位于Treg的胞膜和／或胞浆，细胞外形呈卵圆形，主要分布在肿瘤间质。 Treg的计数随着乳腺癌组织分化程度增高而减少，且高分化组与中分化组、高分化组与低分化组、中分化组与低分化组之间的Treg计数相比具有显著差异（P＜0．05）。无淋巴结转移组Treg计数低于淋巴结转移组，两者相比具有显著差异（P＜0．05）。但Treg计数在患者年龄、绝经状况及乳腺癌的病理学分类无显著差异。 Treg计数与患者生存期的相关性分析显示乳腺癌中Treg与患者预后呈负相关（ P＜0．05）。结论：Treg的计数随着乳腺癌组织分化程度增高而减少，Treg在乳腺癌淋巴结转移组的数目高于无淋巴结转移组，其数目与乳腺癌患者生存期呈负相关。
作者：成媛 刊期： 2015年第10期
目的：从血管内皮细胞（ VEC）通透性角度探讨肺炎衣原体（ C．pn）感染促进单核细胞跨内皮迁移的机制。方法及结果：单核细胞跨内皮迁移实验和TEER结果表明，C．pn感染可促进单核细胞跨内皮迁移，且这种作用可能与C．pn感染增加VEC通透性有关；免疫荧光结果显示，C．pn感染后，细胞膜上的VE－钙黏素向胞浆转移，并使细胞间连接处出现缝隙；Western blot实验结果进一步证实C．pn感染可促使VE－钙黏素（Y658）发生酪氨酸磷酸化。液闪计数仪检测结果显示，C．pn感染可使Src激酶的活性明显增强。 Src激酶选择性抑制剂PP2可抑制C．pn感染诱导的VE－钙黏素（ Y658）酪氨酸磷酸化，减少感染引起的VE－钙黏素由胞膜向胞浆转移，并使细胞间连接处的缝隙减小，进而降低C．pn感染增加VEC通透性的作用，终削弱感染对单核细胞跨内皮迁移的促进作用。结论：C．pn感染可能通过激活Src激酶促使VE－钙黏素（ Y658）发生酪氨酸磷酸化以增加VEC通透性，进而诱导单核细胞跨内皮迁移。
作者：马路；张利军 刊期： 2015年第10期
目的：研究阿奇霉素对慢性阻塞性肺疾病（简称慢阻肺）模型大鼠的防治作用，从气道炎症及黏液高分泌角度探讨其作用机制。方法：将18只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、慢阻肺模型组、阿奇霉素治疗组，每组6只。通过烟熏及大鼠气管内注入脂多糖（ LPS）的方法建立慢性阻塞性肺疾病大鼠模型。 HE染色观察大鼠肺组织病理变化。肺功能仪检测大鼠肺通气功能。 ELISA检测各组大鼠支气管肺泡灌洗液（ BALF）中白细胞介素（IL）－8、IL－17和肿瘤坏死因子－α（TNF－α）的含量。 Western blot及real－time PCR检测支气管肺组织中MUC5ac和Toll样受体4（ TLR4）蛋白及mRNA的表达。结果：模型组大鼠支气管肺组织HE染色结果符合慢阻肺病理改变。与模型组比较，治疗组损伤程度显著减轻。模型组与对照组比较，肺功能明显下降，大鼠BALF中IL－8、IL－17、TNF－α含量明显增高（P＜0．05），肺组织中MUC5ac和TLR4蛋白及mRNA表达水平显著增高（P＜0．05）。与模型组比较，治疗组肺功能的下降减轻，大鼠BALF中IL－8、IL－17、TNF－α含量的升高受到明显抑制（ P ＜0．05），肺组织中MUC5ac和TLR4蛋白及mRNA表达水平的受到明显抑制（ P ＜0．05）。结论：阿奇霉素可降低慢阻肺模型大鼠BALF中IL－8、IL－17和TNF－α水平，抑制肺组织内MUC5ac和TLR4蛋白表达，通过减轻气道炎症及黏液高分泌来达到防治慢阻肺的作用。
作者：任薇；孙耕耘；王胜；熊玲玲；朱春冬；李春颖；周群 刊期： 2015年第10期
作者： 刊期： 2015年第10期
目的：研究单核巨噬细胞中的原肌球调节蛋白1（ tropomodulin， Tmod1）在动脉粥样硬化发生中的作用。方法：检测Tmod1在高脂喂养ApoE－／－小鼠主动脉的表达及在斑块内的定位。分析野生型和Tmod1敲除小鼠（ TOT／Tmod1－／－）中腹腔CD11b＋F4／80＋巨噬细胞、骨髓Gr1＋CD11b＋单核细胞和血液CD11b＋单核细胞含量。将野生型和TOT／Tmod1－／－小鼠的骨髓移植到LDLR－／－小鼠中并进行高脂喂养，分析其血液、血脂、斑块面积及成分。结果：Tmod1主要定位在斑块内巨噬细胞中。 TOT／Tmod1－／－小鼠的腹腔巨噬细胞含量较野生型高、骨髓和血液的单核细胞含量无区别。移植TOT／Tmod1－／－骨髓的小鼠红细胞计数低于移植野生型骨髓的小鼠，白细胞、总胆固醇和甘油三酯无差异；而流出道斑块面积显著减少，斑块内胶原面积、巨噬细胞与平滑肌的含量也均显著降低。结论：Tmod1表达在动脉粥样硬化斑块的巨噬细胞中；Tmod1的缺失加速巨噬细胞的动员；巨噬细胞中Tmod1的缺失能显著抑制斑块的形成。因此，Tmod1在动脉粥样硬化斑块的形成中发挥重要作用。
作者：姚伟娟 刊期： 2015年第10期
目的：建立小鼠流感性肺炎模型，明确呼吸道流感病毒感染过程中是否存在特异性的肠道病理损伤，并探讨了其在“肺与大肠相表里”研究中的应用。方法：BALB／c小鼠48只随机分为正常组、模型组。模型组给予25μL 50LD50病毒液滴鼻建立流感病毒感染的小鼠肺炎模型，感染后0、3、5、6 d分别取材，HE染色检测肺脏和大肠、小肠、心脏、肾脏和肝脏组织病理结果，血生化检测血清尿素氮（ BUN）、谷丙转氨酶（ ALT）和谷草转氨酶（ AST）水平。结果：流感病毒感染后，模型组小鼠肺组织出现明显的炎性病变外，随时间延长肺组织充血水肿出血加重；小肠黏膜腺体排列紊乱，绒毛粗大、部分脱落，黏膜固有层淋巴细胞大量浸润；大肠黏膜固有层、肌层大量淋巴细胞浸润，腺体结构消失、脱落；而心脏、肝脏和肾脏无明显病变；模型组小鼠血清BUN、ALT和AST较正常组相比，无显著差异。结论：小鼠流感病毒性肺炎模型中存在小肠、大肠特异性免疫病理损伤，是研究中医“肺与大肠相表里”理论及相关临床治法的理想模型。
作者：张淑静；吴莹；齐晓宇；葛东宇；李根茂；玄子男；王谦；李姝玉 刊期： 2015年第10期
目的：探讨大蒜总皂苷对小鼠常压密闭缺氧存活时间的影响。方法：BALB／c小鼠30只，体重（20±2） g，随机分为3组（n＝10）：对照组、大蒜总皂苷低剂量组（50 mg／L）和高剂量组（200 mg／L），腹腔注射给药1次，给药体积0．1 mL／10 g，对照组给予相同体积的蒸馏水，给药后1 h将小鼠放入盛有5 g钠石灰的150 mL广口瓶中，用凡士林涂抹瓶口密封，记录小鼠存活时间。按公式计算小鼠标准耐受时间（min）＝存活时间／［瓶体积（mL）－体重（g）／0．94］×100。结果：与对照组比较，高剂量组显著延长了小鼠标准耐受时间；与低剂量组相比，高剂量组显著延长了小鼠标准耐受时间；低剂量组与对照组间没有显著差异。结论：大蒜总皂苷具有耐缺氧作用。
作者：周思敏；郑善军；张钢 刊期： 2015年第10期
作者： 刊期： 2015年第10期
癌细胞中葡萄糖代谢的方式为细胞的快速增殖提供了物质和能量基础。去乙酰化酶SIRT3在癌细胞葡萄糖代谢重排和凋亡调控的过程中发挥着重要的作用，有可能成为一个有效的癌症治疗靶点。在本研究中，我们发现BH3－only模拟物S1能够抑制卵巢癌SKOV3裸鼠移植瘤的生长，同时能够上调SIRT3的表达。为了探讨S1对卵巢癌细胞糖代谢的影响及其分子机制，通过检测SKOV3细胞在S1作用下线粒体氧耗率（ OCR）、胞外泌酸率（ ECAR）以及葡萄糖摄入能力的改变，我们发现S1能够损伤线粒体呼吸链和抑制葡萄糖摄取。通过siRNA干扰SIRT3的表达，能够逆转S1对葡萄糖摄入的抑制作用，同时还能缓解S1对SKOV3细胞增殖的抑制效应。合用糖酵解抑制剂2－DG能够加剧SIRT3的活化，同时进一步促进S1对SKOV3细胞增殖的抑制作用和细胞凋亡的发生。综上所述，S1在卵巢癌细胞中抑制细胞增殖作用，可能是通过活化SIRT3以及扰乱葡萄糖代谢来实现的。
作者：项喜艳；孙连坤 刊期： 2015年第10期
探讨与医学相关的社会热点问题，如对WHO提出的各种世界“疾病日”的认识，结合多媒体展示融入病理生理学教学的意义。以认识“世界肾脏病日”、“世界COPD日”等为例，从话题提出到相关知识引入，再到体现“以学生为中心”，借助不同教学模式，如Sandwich或PBL教学对历年“疾病日”主题的深入探讨和相关知识延伸，引导学生对所学知识融会贯通。不但能激发学生的学习热情，提高探究问题的兴致和积极性，培养科学的临床思维、自主学习和创新能力，增强其自信心和社会责任感，而且使授课形式多样化，知识掌握更易形成系统，并能拓宽师生知识视野，从而提高病理生理学教学效果。
作者：赵爽；蒙山；卢露碧；高洁；朱名毅 刊期： 2015年第10期
目的：观察挤压综合征大鼠肠系膜微循环、血液流变性及血浆PGI2／TXA2并探讨其机制。方法：雄性SD大鼠24只，复制挤压综合征模型，随机分为假手术组、模型（ CS）组和模型干预组（ CS＋NS398组），每组8只。 FITC标记红细胞活体微循环技术观察肠系膜微循环，测定血液流变学指标，放免法检测血清PGI2、TXA2的稳定代谢产物6－keto－PGF1α和TXB2并计算其比值。结果：模型组肠系膜微动、静脉管径减小，血流速度明显减慢，白细胞黏附聚集、白微栓及管周出血增多，血液流变性明显异常（P＜0．05）；血浆6－keto－PGF1α和TXB2含量升高，6－keto－PGF1α／TXB2比值下降（P＜0．05）。与模型组比较，模型干预组肠系膜微循环及血液流变性异常有所改善，血浆6－keto－PGF1α和TXB2降低明显（P＜0．05），6－keto－PGF1α／TXB2下降程度缩小（ P＜0．05）。结论：挤压综合征大鼠肠系膜微循环障碍和血液流变性异常可能与血浆PGI2／TXA2下降有关。
作者：张春梅 刊期： 2015年第10期
作者： 刊期： 2015年第10期
目的：探讨omentin－1对巨噬细胞ATP结合盒转运体A1（ABCA1）表达及其介导胆固醇流出的影响。方法：用omentin－1处理THP－1源性巨噬细胞24 h后，Western blot检测ABCA1蛋白水平，HPLC检测胞内总胆固醇（ TC）游离胆固醇（ FC）及胆固醇酯（ CE）含量，液体闪烁计数仪检测胞内胆固醇流出，油红O染色观察胞内脂滴情况。结果：Omentin－1呈浓度依赖性上调巨噬细胞ABCA1的表达，促进胞内胆固醇流出，降低胞内TC、FC和CE含量，抑制胞内脂质蓄积和泡沫细胞形成。而ABCA1 siRNA与omentin－1共处理细胞后，明显抑制omentin－1促胆固醇流出的作用，胞内脂质蓄积和泡沫细胞形成明显加剧。结论：Omentin－1通过促进巨噬细胞ABCA1表达和胆固醇流出，抑制胞内脂质蓄积和泡沫细胞形成。
作者：谭玉林；张敏；吴剑锋；兰刚；李元；李靓；谢魏；唐朝克 刊期： 2015年第10期
中国病理生理杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国病理生理学会
