光损伤大鼠视网膜TNF-α的表达变化及米诺环素对其表达影响的实验研究

摘要：目的：观察光损伤大鼠视网膜肿瘤坏死因子（TNF）-α表达变化的规律，及预先使用米诺环素(Minocycline，MC)对其分泌表达的影响，探讨视网膜光损伤的损伤机制和防治措施。方法：54只SD大鼠，随机分为光照对照组、光照实验组、正常对照组，前两组再各分为光照后6h、3d、7d、14d组，每组各6只大鼠（12只眼）。光照前90min，光照实验组大鼠MC灌胃（45mg/kg），光照对照组大鼠等量PBS液灌胃。分别于预定时间点取眼球，左眼石蜡包埋、HE染色、TNF-α免疫组化染色，计算机图像分析软件（Image-ProPlus，IPP）测量视网膜外核层（outernuclearlayer,ONL）厚度。右眼球摘除后即刻完整取出视网膜，匀浆后取上清液，ELISA法测定TNF-α的吸光度（O.D）值并计算出TNF-α浓度。SPSS行统计分析。结果：1，正常对照大鼠视网膜形态正常，TNF-α未见阳性染色，ELISA定量仅含微量。2，光照对照组视网膜6h即出现病理改变，3d和7d进行性加重，14d略有减轻。视网膜TNF-a阳性表达6h开始增加，3d显著增加，7d减少，14d进一步减少，ELISA定量结果和免疫组化结果相平行。各时间点ONL厚度、TNF-a表达量和正常对照组相比，P值均<0.05。3，光照实验组各时间点视网膜病理改变均较光照对照组轻，各时间点ONL厚度两两比较P值均<0.05，和正常对照组相比(6h组除外)，P值均<0.05，而6h组P>0.05。TNF-a表达量均较光照对照组同一时间点为少，两两比较P值均P<0.05，和正常对照组比较（14d组除外）P值均<0.05，14d组P>0.05。结论：本实验首次研究了光损伤大鼠视网膜TNF-α定位和定量的表达变化，及预先使用米诺环素对TNF-α表达变化和视网膜病理损伤的影响，结论如下：1.光损伤时过度表达的TNF-α参与并加重了视网膜光损伤。2.MC能减少光损伤大鼠视网膜感光细胞的丢失，对视网膜有保护作用，该作用主要通过抑制TNF-α分泌细胞的活性、减少TNF-α的过度分泌实现。3.分泌TNF-α的小胶质细胞参与了视网膜光损伤的病理生理过程。